雷公藤红素通过活性氧诱导结肠癌SW620细胞凋亡

目的:探讨雷公藤红素(celestrol)诱导KRAS驱动的结肠癌SW620细胞产生凋亡的作用和机制。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和台盼蓝拒染法检测细胞增殖;免疫印迹法检测蛋白表达;流式细胞仪和荧光显微镜检测细胞凋亡、细胞周期、线粒体膜电位;荧光显微镜检测细胞内活性氧水平(reactive oxygen species,ROS)。结果:雷公藤红素明显抑制SW620细胞的增殖活性;雷公藤红素下调SW620胞内的p-Akt、NF-κB、Survivin表达,激活caspase-7、caspase-3 和PARP;雷公藤红素增加SW620细胞内的ROS、降低线粒体膜电位、阻滞细胞周期于G₂/M期和诱导凋亡。抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)抑制雷公藤红素引起的上述作用。结论:通过诱导细胞内ROS的累积导致细胞内线粒体膜电位的下降进而触发细胞发生凋亡是雷公藤红素诱导SW620细胞凋亡的作用机制之一。     

毛蕊花糖苷通过下调CD44表达抑制胶质瘤细胞上皮间质转化和侵袭

目的： 探讨毛蕊花糖苷（verbascoside,VB）对胶质瘤细胞上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）和侵袭的影响及其分子调控机制。方法： 分别使用不同浓度（0,50,100,200 μmol·L^-1）的VB处理胶质瘤U87和U251细胞24 h。使用Jet Prime转染100 μmol·L^-1VB处理的细胞：对照组（转染空载质粒）、VB组（转染空载质粒+100 μmol·L^-1的VB）、oe-CD44组（转染CD44过表达质粒）、Both组（转染CD44过表达质粒+100 μmol·L^-1VB）。CCK-8法和Transwell试验分别检测VB对U87和U251细胞增殖、侵袭能力的影响。Western blot检测各组细胞的CD44和EMT相关蛋白Snail、Vimentin、N-cadherin的表达水平。结果： VB能呈浓度依赖性抑制胶质瘤U87和U251细胞的增殖和侵袭能力,下调CD44及EMT相关蛋白Snail、Vimentin、N-cadherin的表达水平。而CD44过表达时则明显上调以上蛋白表达水平,增加细胞增殖和侵袭能力。当CD44过表达并加入100 μmol·L^-1的VB时,能减弱VB下调CD44以及EMT相关蛋白Snail、Vimentin、N-cadherin表达水平的作用,同时能明显减弱VB所抑制的细胞增殖及侵袭能力。结论： VB通过下调CD44的表达而抑制胶质瘤细胞的上皮间质转化。     

雷公藤红素升高ROS和抑制NF-κB通路抑制肺癌H460细胞生长

摘要：目的:探究雷公藤红素对人肺癌H460细胞的体外抑制作用。方法:使用MTT法检测雷公藤红素对H460细胞生长的影响;使用细胞集落实验检测雷公藤红素对H460细胞集落形成的影响;采用细胞流式仪检测雷公藤红素及雷公藤红素联用N-乙酰半胱氨酸（NAC）对活性氧（ROS）水平的影响;采用MTT法检测雷公藤红素联用NAC对H460细胞生长的影响;蛋白质印迹法检测雷公藤红素及联用NAC后对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达水平影响。同时,进一步使用蛋白质印迹法检测雷公藤红素对核因子κB（NF-κB）通路中IκBα表达水平的影响。结果:雷公藤红素浓度依赖性的抑制H460细胞的生长和集落形成（P<0.05或P<0.01）,浓度依赖性的促进细胞内ROS水平（P<0.01）,同时能够通过升高ROS水平诱导H460细胞死亡（P<0.01）,升高Bax蛋白及抑制Bcl-2蛋白的表达（P<0.05或P<0.01或P<0.001）,促进IκBα的表达（P<0.05或P<0.01）。结论:雷公藤红素表现出高效抗肺癌作用,能升高ROS水平介导凋亡相关蛋白的表达以及抑制NF-κB通路来抑制人肺癌H460细胞的生长。     

自噬介导的雷公藤甲素提高西妥昔单抗对SW480细胞治疗效果的实验研究

目的观察雷公藤甲素联合表皮生长因子受体单克隆抗体西妥昔单抗对人结直肠癌细胞SW480细胞株生物学行为的影响。方法雷公藤甲素、西妥昔单抗单独或联合作用于SW480细胞株, MTT法、细胞克隆实验检测细胞增殖抑制率;细胞划痕实验检测细胞的迁移能力;Western blot检测雷公藤甲素诱导细胞自噬性凋亡标记物p62、LC3-Ⅱ;雷公藤甲素及西妥昔单抗单独和联合作用细胞后,Western blot分析上皮间质转化(EMT)标记物E-cadherin、Vimentin以及mTOR、Snail、Twist蛋白水平。结果雷公藤甲素及西妥昔单抗对SW480细胞的增殖抑制作用均呈剂量依赖性,两药联用可明显抑制SW480细胞增殖;雷公藤甲素诱导SW480细胞p62蛋白下调,LC3-Ⅱ上调,发生自噬性凋亡;雷公藤甲素单药组、联合用药组均能明显抑制SW480细胞发生EMT,其标记分子E-cadherin蛋白上调,Vimentin蛋白下调,关键分子Snail、Twist表达下调。结论雷公藤甲素联合西妥昔单抗抑制SW480细胞增殖和转移具有明显协同作用,雷公藤甲素通过抑制mTOR通路,可以诱导细胞自噬性凋亡,自噬介导的雷公藤甲素抑制肿瘤细胞EMT可能是逆转西妥昔单抗耐药的机制。     

蛇葡萄素对人前列腺癌DU145细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨蛇葡萄素（AMP）对人前列腺癌DU145细胞增殖、迁移和侵袭的影响,研究其对转化生长因子β（TGF-β）诱导的上皮间质转化（EMT）模型的作用。方法：用不同浓度的AMP处理DU145细胞,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖情况;Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力;细胞免疫荧光实验表征不同浓度TGF-β处理后细胞内E-cadherin和Vimentin表达情况,确定EMT模型最佳诱导浓度;Western blot法进一步检测加药后EMT模型E-cadherin和Vimentin表达情况。结果：AMP对DU145细胞增殖具有显著的抑制作用,24、48、72 h的IC50分别为35.62、32.71、28.43 μg·mL-1;Transwell实验显示AMP处理后穿膜细胞数明显减少,显著抑制细胞的迁移和侵袭能力;细胞免疫荧光实验表征发现TGF-β诱导后细胞内E-cadherin表达下调,Vimentin表达上调,确定10 ng·mL-1为TGF-β诱导EMT模型的最佳浓度。Western blot法检测显示,与对照组相比,TGF-β组和TGF-β+AMP组的细胞内E-cadherin表达下调,Vimentin表达上调,此外,与TGF-β组相比,TGF-β+AMP组细胞内E-cadherin表达变化无统计学差异,但Vimentin表达降低（P<0.05）,表明AMP具有逆转EMT过程的作用。结论：AMP不仅能够抑制人前列腺癌DU145细胞的增殖,还可抑制其迁移和侵袭能力,这可能与逆转EMT过程有关。     

含酰胺结构的大黄酸衍生物4a对卵巢癌细胞的 迁移、侵袭的影响

目的探讨含酰胺结构的大黄酸衍生物4a(简称衍生物4a,derivative 4a)对卵巢癌SKOV3细胞迁移、侵袭能力的影响及可能作用机制。方法采用分子对接和Western blot检测衍生物4a对Rac1蛋白的调控作用,CCK-8、HE染色、Scratch和Transwell实验分别检测衍生物4a对SKOV3细胞增殖、形态学、迁移和侵袭能力的影响;Western blot检测衍生物4a处理细胞后EMT的标志性蛋白Vimentin、β-cantenin、E-caderin、MMP-2、MMP-9的表达情况。结果衍生物4a能有效与Rac1蛋白结合,结合能明显低于大黄酸;且能下调SKOV3细胞Rac1蛋白的表达。衍生物4a能够明显抑制SKOV3细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并诱导细胞产生大量空泡化;衍生物4a可下调MMP-2、MMP-9表达,上调EMT上皮性标志蛋白E-caderin表达及下调Vimentin、β-cantenin的表达。结论衍生物4a能抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭,其机制可能是靶向调控Rac1,抑制基质金属蛋白酶分泌,上调EMT过程关键分子E-caderin和下调Vimentin、β-cantenin的表达综合作用的结果。     

染料木黄酮抑制前列腺癌进展和转移的机制研究

目的 探讨染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其分子机制。方法 将前列腺癌细胞株LNCaP和CWR22RV1细胞分为对照组（常规培养）和实验组（50μmol/L染料木黄酮处理）。采用噻唑蓝（MTT）法分析染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖能力的影响,通过细胞划痕实验和Transwell实验分析染料木黄酮对前列腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响。Western blot检测上皮间质转化（EMT）中间质标志物E-钙黏蛋白（ECadherin）、N-钙黏蛋白（N-Cadherin）、波形蛋白（Vimentin）以及肿瘤干细胞标志物CD44和Oct4的蛋白水平。结果MTT实验结果表明,染料木黄酮具有抑制前列腺癌细胞增殖的作用。实验组LNCaP和CWR22RV1细胞划痕闭合率较对照组下调,穿过Transwell膜的细胞数量减少（P<0.05）。Western blot实验证实,染料木黄酮能够下调前列腺癌细胞中间质的标志物N-Cadherin、Vimentin和肿瘤干细胞的标志物CD44与Oct4蛋白表达,上调上皮细胞标志物ECadherin表达（P<0.01）。结论 染料木黄酮通...     

新型化合物F-2对人肺癌NCI-H520细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的：探讨新型化合物F-2对人非小细胞肺癌NCI-H520细胞增殖迁移及凋亡的影响。方法： CCK-8实验检测肺癌细胞增殖情况;采用划痕实验检测化合物对H520细胞迁移的情况;倒置显微镜观察化合物刺激对细胞形态的影响;流式细胞术实验检测化合物对细胞凋亡的影响;Western blot实验检测化合物对细胞迁移及凋亡相关蛋白表达的影响。结果：化合物对H520细胞增殖有明显的抑制作用,且与浓度和时间呈依赖性关系。划痕实验结果表明化合物能够明显抑制肿瘤细胞迁移,并且western blot 实验结果表明化合物处理H520细胞后可上调Ｅ-cadherin的表达,下调N-cadherin蛋白的表达。Annexin-V／PI双染法结果显示,化合物可诱导H520细胞发生凋亡,且随着药物浓度增加凋亡率上升,并且增加了BaX/BcL-2蛋白表达比率。结论：化合物能够明显抑制肺癌细胞的增殖、迁移及诱导细胞凋亡,可能是通过阻断肿瘤细胞EMT过程,调节细胞凋亡过程中相关基因表达从而发挥抗肿瘤作用。     

雷公藤甲素对ERα蛋白介导的人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制的影响

目的：研究雷公藤甲素对激素依赖性人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用及可能的机制。方法：MTT法检测雷公藤甲素对MCF-7细胞增殖的抑制作用,Hoechst染色法检测其对细胞凋亡的影响,Western blotting法观察雷公藤甲素对雌激素受体（ER）α蛋白表达的影响。结果：雷公藤甲素对MCF-7细胞增殖有显著的抑制作用,并且呈现良好的时效和量效关系,雷公藤甲素能有效诱导MCF-7细胞凋亡,并且对ERα具有明显的下调作用。结论：雷公藤甲素能抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖并且诱导其凋亡,其诱导MCF-7细胞凋亡的作用机制可能与其下调ERα的表达有关。     

miR-4324对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究miR-4324对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响.方法 TGCA筛选差异基因(GSE119055);q-PCR检测miR-4324在人卵巢癌细胞株SKOV3及卵巢上皮细胞株IOSE80的表达差异;CCK8检测转染后卵巢癌SKOV3细胞增殖情况,流式检测细胞凋亡和细胞周期(48h),q-PCR检测miR-4324的表达,Western blot检测PNCA、Caspase-3和P27的表达.结果 miR-4324在卵巢癌细胞较正常细胞中表达量低.miR-4324 mimic和miR-4324 inhibitor转染后人卵巢癌细胞株SKOV3,inhibitor组较mimic组显著降低.miR-4324抑制了卵巢癌细胞的增殖,改变了卵巢癌细胞的细胞周期,促进SKOV3细胞的凋亡,抑制miR-4324后PNCA表达量升高,caspase-3表达量降低,P27表达量降低.结论 miR-4324在卵巢癌细胞中低表达.抑制卵巢癌细胞的增殖,促进细胞凋亡及影响细胞周期,可能成为卵巢癌治疗的潜在靶点.     

雷公藤红素通过PI3K/AKT/mTOR信号通路对胃癌MFC细胞增殖和凋亡的影响

目的研究雷公藤红素对胃癌MFC细胞内PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响及其对胃癌MFC细胞增殖的抑制和促凋亡作用机制。方法分别设置对照组和雷公藤红素低、中、高剂量(5、10、20 mmol/L)组,采用MTT法检测雷公藤红素对胃癌MFC细胞增殖的影响;采用流式细胞技术检测雷公藤红素对胃癌MFC细胞周期的影响及MFC细胞凋亡的情况;Western blotting检测雷公藤红素对胃癌MFC细胞内凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和PI3K、AKT和mTOR蛋白表达的影响;实时定量PCR检测雷公藤红素对胃癌MFC细胞内PI3K、AKT和mTORm RNA表达的影响。结果与对照组比较,雷公藤红素能够呈剂量相关性地显著抑制胃癌MFC细胞的增殖(P0.05);与对照组比较,雷公藤红素能够呈剂量相关性地显著引起MFC细胞G2/M期阻滞(P0.05);与对照组比较,雷公藤红素能够呈剂量相关性地显著促进MFC细胞的凋亡(P0.05);与对照组比较,雷公藤红素能够呈剂量相关性地显著抑制MFC细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白和PI3K、AKT、mTOR蛋白的表达(P0.05),显著促进MFC细胞内促凋亡蛋白Bax的表达(P0.05);与对照组比较,雷公藤红素能够呈剂量相关性地显著抑制MFC细胞内PI3K、AKT和mTORm RNA的表达(P0.05)。结论雷公藤红素能够抑制胃癌MFC细胞的增殖并促进胃癌MFC细胞凋亡,其作用机制可能是通过抑制胃癌MFC细胞内PI3K/AKT/mTOR信号通路中PI3K、AKT、mTOR等蛋白的表达而抑制胃癌MFC细胞的增殖,进而促进胃癌MFC细胞内促凋亡蛋白Bax的表达,同时抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,从而促进胃癌MFC细胞凋亡。     

苦参碱抗肺癌的药理作用及其临床研究进展

苦参碱能抑制多种肺癌细胞(A549细胞、SPC-A-1细胞、NIC-H460细胞、LTEP-a-2细胞、SK-MES-1细胞、PG细胞、Lewis细胞)增殖并诱导细胞凋亡。苦参碱是通过抑制PI3K/Akt信号通路、抑制端粒酶活性和人端粒酶逆转录酶表达以及促进自噬的机制,诱导肺癌细胞凋亡。苦参碱还可通过抑制表皮生长因子受体酪氨酸蛋白激酶(EGFR-TPK)的活性,下调缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子以及基质金属蛋白酶和黏附因子CD44和CD49的表达,抑制肿瘤组织内微血管形成以及癌细胞的黏附、迁移和侵袭能力,阻滞肿瘤生长和转移。在临床上苦参碱能增强化疗药抗肺癌的临床疗效。综述苦参碱抗肺癌的药理作用及其临床研究文献资料,并对其研究进展做了分析,为临床研究和开发苦参碱治疗肺癌的新适应证提供参考。     

雷公藤红素对体外人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

目的:研究雷公藤红素对体外人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:采用CCK-8法测定2、5、10μmol/L雷公藤红素分别作用24、48、72 h后的细胞活性,并计算增殖抑制率和半数抑制浓度(IC_(50));采用流式细胞术检测2、5、10μmol/L雷公藤红素分别作用24 h后细胞的凋亡率及周期变化,并以二甲基亚砜(DMSO)为阴性对照;采用罗丹明123染色法测定2、5、10μmol/L雷公藤红素分别作用48 h后的细胞线粒体膜电位,并以DMSO为阴性对照;采用Western blot法检测5μmol/L雷公藤红素作用0、12、24、36 h后细胞中促凋亡相关基因Bax和B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)的蛋白表达。结果:2、5、10μmol/L雷公藤红素均可抑制细胞的增殖,IC_(50)为5.834μmol/L。2、5、10μmol/L雷公藤红素均可诱导细胞凋亡。5、10μmol/L雷公藤红素可阻滞细胞于G_0/G_1、S期,并可降低线粒体膜电位,较阴性对照差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且以上作用均具有浓度依赖性。5μmol/L雷公藤红素作用12、24、36 h后可上调细胞中Bax蛋白表达、下调Bcl-2蛋白表达,并呈现一定的时间依赖性,较0 h时差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:雷公藤红素可明显抑制体外人肝癌HepG2细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与增强线粒体通透性、促使凋亡诱导因子释放有关。     

丙戊酸通过GSK3β/β-catenin信号轴抑制胃癌细胞的增殖和迁移

目的探讨丙戊酸(valproic acid,VPA)对胃癌细胞增殖、迁移的影响及可能涉及的分子机制。方法以0、2、4、6和8 mmol·L^-1浓度的VPA分别处理人胃癌细胞AGS、SGC-7901、MGC-803和BGC-82324、48、72 h后,MTT法检测细胞的活性;软琼脂克隆实验检测VPA对胃癌细胞增殖的影响;划痕实验和Transwell迁移实验检测VPA对胃癌细胞迁移能力的影响;应用STITCH、STRING和Enrichr数据库预测VPA可能影响的信号通路;免疫印迹实验检测上皮间质转化和GSK3β/β-catenin信号通路等标志物的表达情况;免疫荧光实验检测上皮间质化相关标志物的表达情况。结果与对照组相比,VPA可显著抑制AGS、SGC-7901、MGC-803和BGC-823细胞的增殖,且呈浓度和时间依赖性;可抑制AGS和SGC-7901细胞的迁移能力及EMT进程(上皮标志物E-cadherin表达上调,间质标志物Vimentin、Snail表达下调);可下调p-GSK3βser9和β-catenin的蛋白表达水平。结论VPA可有效抑制胃癌细胞的增殖和迁移,其机制可能与GSK3β/β-catenin信号轴的抑制及EMT进程的逆转有关。     

肌球蛋白Ⅱ对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 研究肌球蛋白Ⅱ(MyosinⅡ)对人卵巢癌细胞株增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法 分别采用real-time PCR和Western blot法检测卵巢癌中MyosinⅡ的m RNA及蛋白表达;在卵巢癌细胞中转染si-MyosinⅡ和Myosin,分别下调和过表达MyosinⅡ后,采用CCK-8法检测细胞的增殖,Matrigel小室法和Transwell小室法检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot检测Cyclin D1和MMP9蛋白的表达水平。结果 MyosinⅡ在卵巢癌组织中的表达显著高于正常卵巢组织,且与卵巢癌的临床分期有关(P<0.05)。在卵巢癌细胞株SKOV3和Hey中分别过表达和下调MyosinⅡ后,细胞的Cydin D1和MMP-9蛋白的表达也分别出现上调和下调,且细胞的增殖、迁移和侵袭能力均相应地增加或降低,与对照组比较差异显著(P<0.05)。结论 MyosinⅡ在卵巢癌中呈显著高表达,并可促进卵巢癌细胞的增殖、迁移及侵袭。     

AZD8055抑制胆管癌细胞HuCCT1的迁移及EMT进程的机制研究

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)双重抑制剂AZD8055在抑制人胆管癌细胞HuCCT1的迁移及EMT进程中的作用及分子机制。方法 MTT法与平板克隆形成实验检测AZD8055对胆管癌细胞增殖的影响;划痕愈合实验和Transwell小室迁移实验检测AZD8055对HuCCT1细胞迁移能力的影响;Western blot法检测EMT标志相关蛋白、Akt/mTOR信号通路蛋白及DEK蛋白的表达;利用STITCH、GeneMANIA数据库,分析AZD8055、DEK、Akt信号通路相互作用关系;在DEK基因沉默后,检测胆管癌细胞增殖活力、迁移能力及Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达水平的变化。结果 AZD8055可抑制胆管癌细胞的增殖及迁移能力,同时抑制Akt/mTOR信号通路相关蛋白、DEK蛋白表达及EMT的进程;沉默DEK基因可明显抑制胆管癌细胞增殖及迁移能力,并降低Akt、S6、4EBP1蛋白的磷酸化水平。结论 AZD8055抑制HuCCT1细胞的迁移及EMT进程,其机制与下调DEK,抑制Akt/mTOR信号通路有关。     

NVP-BEZ235抑制肝癌细胞HepG2的增殖和迁移及机制研究

目的探究NVP-BEZ235对肝癌细胞Hep G2增殖和迁移的影响及其机制。方法 NVP-BEZ235 (0、25、50、100、250、500 nmol·L-1)处理Hep G2细胞48 h后,采用MTT法检测细胞的活性;通过形态学观察和Hoechst 33342染色法,检测NVP-BEZ235对Hep G2细胞增殖、凋亡的影响;采用划痕实验、Transwell迁移实验,检测NVP-BEZ235对Hep G2细胞迁移能力的影响;免疫印迹法检测PI3K/Akt/m TOR信号通路、上皮-间质转化(EMT)以及Six1/Ezrin信号轴等标志物的表达情况;采用免疫荧光实验检测EMT相关标志物的表达情况。结果 NVP-BEZ235可明显抑制HepG2细胞的增殖,且呈浓度依赖性;NVP-BEZ235可诱导HepG2细胞发生凋亡;NVP-BEZ235可抑制HepG2细胞的迁移能力。在NVP-BEZ235的作用下,p-Akt~(Ser473)、p-S6~(Thr389)、p-4E-BP1~(Thr37/46)的表达下调,上皮标志物E-cacdherin表达上调,间质标志物Vimentin、Snail表达下调,Six1和p-Ezrin~(Tyr353)表达下调。结论NVP-BEZ235可有效抑制HepG2细胞的增殖和迁移,其机制可能与NVP-BEZ235降低p-Akt~(Ser473)、p-S6~(Thr389)、p-4EBP1~(Thr37/46)的表达,抑制Six1/Ezrin信号轴及逆转EMT的进程有关。     

去氧鬼臼毒素抑制肺癌 NCI-H358 细胞增殖和 体外迁移的研究

摘要： 目的 探讨去氧鬼臼毒素对人肺癌 NCI-H358 细胞增殖和体外迁移的影响, 并初步探讨其作用机制。方 法 应用 CCK-8 法、 流式细胞术、 细胞划痕实验和 DCFH-D 法分别检测去氧鬼臼毒素对 NCI-H358 细胞增殖、 周期 分布、 凋亡、 体外迁移能力和细胞内活性氧（ROS）的影响, 并通过 Western blot 检测去氧鬼臼毒素对细胞周期蛋白 （Cyclin） B1、 细胞分裂周期蛋白 25 同源蛋白 （Cdc25c）、 细胞周期蛋白依赖性激酶 （CDK） 1、 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 （Caspase） -3、 p53 肿瘤蛋白、 B 淋巴细胞瘤 （Bcl） -2 和基质金属蛋白酶 （MMP） 9 的表达水平, 以及细胞外信号调节激 酶（ERK） 1/2、 p38 分裂原激活蛋白激酶（MAPK）和 c-Jun 氨基末端激酶（JNK）的磷酸化水平的影响。结果 去氧鬼 臼毒素能明显抑制肺癌 NCI-H358 细胞的生长, 流式细胞结果显示其能诱导细胞停滞在 G2/M 和 S 期, 诱导细胞凋 亡和细胞 ROS 产生, 同时细胞体外迁移能力也明显下调。Western blot 结果显示, 去氧鬼臼毒素能使 Cyclin B1、 Cdc25c、 CDK1、 Bcl-2 和 MMP9 的蛋白表达明显下调, 而 Caspase-3 和 p53 的表达明显上调, 且 ERK1/2、 p38MAPK 和 JNK 的磷酸化水平明显受到抑制。结论 去氧鬼臼毒素可抑制肺癌 NCI-H358 细胞的增殖和体外迁移, 是一种潜在 的抗肿瘤药物     

雷公藤红素诱导弥漫大B淋巴瘤OCI-LY-19细胞增殖和凋亡的研究

目的 探讨雷公藤红素对弥漫大B细胞淋巴瘤OCI-LY-19细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用不同浓度的雷公藤红素处理弥漫大B细胞淋巴瘤OCI-LY-19细胞,MTT法检测细胞增殖活力;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blotting实验分析不同浓度的雷公藤红素诱导细胞凋亡过程中YAP1蛋白水平.结果 雷公藤红素作用OCI-LY-19细胞后,细胞的活力明显抑制,24h的IC50为0.56μM,并呈浓度和时间依赖性(P<0.05).随着药物作用浓度升高,凋亡细胞逐渐增多(P<0.05),YAP1蛋白水平下降(P<0.05).结论 雷公藤红素能抑制人弥漫大B细胞淋巴瘤OCI-LY-19细胞增殖,诱导其凋亡,其机制可能与抑制YAP1蛋白表达有关.     

Ca2+/calpain信号调控纤连蛋白诱导的MCF-10A乳腺上皮细胞-间质转化的作用

目的：观察Ca²⁺/calpain信号通路在纤连蛋白（FN）诱导MCF-10A乳腺上皮细胞-间质转化（EMT）中的作用。方法：以正常培养MCF-10A乳腺上皮细胞为实验对象。采用比色法检测细胞内Ca²⁺浓度;采用荧光分光光度法检测钙蛋白酶-2（calpain-2）活性;Western blot法检测calpain-2、波形蛋白（vimentin）、E-钙黏着蛋白（E-cadherin）的表达;采用划痕修复实验检测细胞迁移能力;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。结果：FN诱导MCF-10A细胞中Ca²⁺浓度、calpain-2活性表达明显升高,上调vimentin、calpain-2蛋白表达,下调E-cadherin蛋白水平;FN诱导MCF-10A细胞迁移和侵袭能力显著增强。钙离子螯合剂（BAPTA-AM）和氨氯地平（amlodipine）均能显著抑制FN诱导的细胞Ca²⁺浓度、calpain-2活性及表达升高;抑制vimentin蛋白表达上调及E-cadherin蛋白表达下调;抑制FN诱导MCF-10A细胞迁移和侵袭能力增强。结论：BAPTA-AM和Amlodipine均能够抑制FN诱导的上皮间质转化。FN能够诱导MCF-10A乳腺上皮细胞发生EMT,可能与Ca²⁺/calpain信号通路激活有关。