基于秀丽隐杆线虫模型的棉子糖抗衰老作用研究

目的 研究棉子糖抗衰老活性并探讨其作用机制。方法 棉子糖(150、200、250μmol·L^-1)加到大肠杆菌中孵育秀丽隐杆线虫后,显微镜下观察线虫身体弯曲频率、头尾摆动频率、体长,观察热应激刺激下线虫的存活时间;通过脂褐素荧光强度检测评价棉子糖对线虫抗衰老能力的影响;采用DAF-16核定位测定和超氧化物歧化酶-3(SOD-3)表达测定研究其抗衰老的相关机制。结果 与对照组比较,棉子糖3个浓度均使线虫的身体弯曲频率加快(P＜0.001);200μmol·L^-1棉子糖使线虫头尾摆动频率加快(P＜0.01);体长测试结果显示棉子糖3个浓度均对线虫生长发育无毒害作用。热应激测试中,与对照组比较,棉子糖3个浓度均显著延长线虫在热应激条件下的存活时间(P＜0.05)。脂褐素测试中,与对照组比较,棉子糖3个浓度均使线虫体内脂褐素含量显著降低(P＜0.01)。DAF-16核定位测定中,棉子糖3个浓度均促进DAF-16蛋白入核表达。SOD-3表达测定中,与对照组比较,棉子糖250μmol·L^-1浓度组的SOD-3蛋白表达水平显著上升(P＜0.05),与DAF-16核定位测定一并说明棉子糖抗衰老活性依赖ⅡS分子信号通路。结论 棉子糖能够促进线虫的活动能力,对其生长发育无毒害性,并能延缓线虫的衰老速度,促进DAF-16蛋白入核表达,提高SOD-3蛋白表达水平,其抗衰老机制依赖ⅡS分子信号通路。     

何首乌乙酸乙酯提取物对秀丽线虫的抗衰老作用研究

目的:研究何首乌乙酸乙酯提取物(EPM)对秀丽线虫(简称"线虫")寿命的影响,考察EPM抗衰老作用。方法:设立EPM低、中、高浓度组(25、37.5、50 mg/L,以生药计)和空白组(0 mg/L),考察EPM对线虫寿命的影响;设立EPM组(37.5 mg/L)和空白组(0 mg/L),分别进行线虫的生殖实验、急性热应激实验和急性氧化应激实验,考察EPM对线虫生殖能力以及压力应激的影响。结果:在寿命实验中,EPM低、中、高浓度组线虫的平均寿命较空白组均显著延长(P<0.05或P<0.01),以中浓度EPM作用最为明显;增殖实验中,EPM组线虫在第2、3天中的子代数量较空白组显著增加(P<0.05);在急性热应激实验和急性氧化应激实验中,EPM组线虫的平均生存时间较空白组明显延长(P<0.05)。结论:37.5 mg/L的EPM能延缓线虫衰老且不损害其生殖能力。     

红参-制何首乌药对对神经细胞保护作用的谱效关系

目的 建立红参-制何首乌药对不同提取工艺的超高效液相色谱（UHPLC）指纹图谱,并研究其对Aβ1-42诱导HT22细胞模型保护作用的谱效关系。方法 制备红参-制何首乌药对30%乙醇回流提取物、30%乙醇渗漉提取物、70%乙醇回流提取物、70%乙醇渗漉提取物和水提取物。采用UHPLC法进行测定并结合《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012A版）建立不同工艺提取物的UHPLC指纹图谱,并进行共有峰指认。采用Aβ1-42诱导海马神经元HT22细胞,利用MTT法评估不同工艺提取物对模型的保护,考察红参-制何首乌药对不同提取工艺对神经细胞的保护作用;采用灰色关联度分析法、偏最小二乘法（PLS）分析不同提取工艺UHPLC指纹图谱中共有峰与神经细胞保护的相关性。结果 红参-制何首乌药对不同提取工艺有19个共有峰,通过化学对照品指认13个成分。经灰色关联度分析发现,14个共有峰与神经细胞保护的关联度均大于0.6,呈相关性。经PLS分析发现10个成分对神经细胞保护作用的影响较大。结论 建立红参-制何首乌药对不同提取工艺UHPLC指纹图谱并指认了19个共有峰成分;大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄...     

长期酒精暴露对秀丽隐杆线虫生殖能力的损伤作用研究

目的应用秀丽隐杆线虫研究酒精的生殖损伤作用及其对子代线虫运动能力的影响。方法将L4期秀丽隐杆线虫暴露在含有不同浓度酒精（1％、2％、3％、4％、5％）并涂有大肠埃希菌OP50的琼脂培养基（NGM）中,在体视显微镜和荧光显微镜下统计后代数目、子宫内受精卵数日、卵母细胞数目,计算排卵速率并观察子代线虫的运动行为。结果与对照组比较,长期暴露在含酒精浓度分别为2％、3％、4％、5％的NGM培养基中的线虫的后代数目、子宫内受精卵数目、卵母细胞数目均有显著降低（P〈0．05）;含3％、4％、5％酒精的NGM培养基中的线虫排卵时间和排卵速率均有显著降低（P〈0．05）;各实验组中孵化的子代线虫的头部摆动频率和身体扭动频率均有显著降低（P〈0．05）。结论长期酒精暴露对秀丽隐杆线虫生殖能力有一定的损伤作用,而且可能对子代线虫的运动能力造成了一定影响。     

秀丽隐杆线虫-产碳青霉烯酶阴沟肠杆菌感染模型的建立及应用

目的 建立秀丽隐杆线虫-产碳青霉烯酶阴沟肠杆菌感染模型,并利用该模型筛选体内有效治疗阴沟肠杆菌感染的药物。方法 将产碳青霉烯酶的阴沟肠杆菌与线虫共培养,建立线虫-产碳青霉烯酶阴沟肠杆菌感染模型,选用7种临床常见的抗菌药物(米诺环素、多西环素、庆大霉素、氨曲南、亚胺培南、替加环素和多黏菌素B)对感染后的线虫进行治疗,观察并记录线虫的生存状态,根据线虫的存活率评价不同药物的疗效。结果 产碳青霉烯酶的阴沟肠杆菌能够感染线虫并致其死亡,通过荧光探针标记可见细菌在线虫肠道内定植生长。使用多黏菌素B、替加环素、米诺环素、多西环素治疗后,线虫的生存率与对照组相比显著提高。结论 成功建立了秀丽隐杆线虫-产碳青霉烯酶阴沟肠杆菌感染模型,并将该模型用于体内抗菌药物活性的筛选。     

白术乙醇提取物对秀丽隐杆线虫寿命的影响及其机制研究

目的:研究白术乙醇提取物(AM)对秀丽隐杆线虫(简称"N2线虫")寿命的影响,并基于转录因子SKN-1/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路探讨其作用机制.方法:将N2线虫分为空白对照组、阳性对照组(100μmol/L姜黄素,下同)和AM低、中、高剂量组(100、200、300μg/mL,下同),考察正常、氧化应激...     

基于秀丽隐杆线虫模型的去氢骆驼蓬碱衍生物1-(4-甲氧基)苯基-9-丁基-β-咔啉神经毒性效应

目的 探讨1-(4-甲氧基)苯基-9-丁基-β-咔啉(DH-004)对秀丽隐杆线虫(简称线虫)的神经毒性.方法 采用野生型线虫为模式生物,分别以DH-0040.0(溶剂对照组),12.5,25.0,50.0,100.0和200.0μmol·L-1连续培养,分别于不同时间显微镜下观察线虫的存活率、头部摆动频次、有效产卵总...