胃癌组织ras 基因突变及其与幽门螺杆菌感染的关系

 目的　初步探讨胃癌组织中 ras基因突变与幽门螺杆菌 ( Helicobacter pylori,Hp)感染的关系。方法　 43例胃癌组织新鲜标本及相应血清标本纳入研究。用 PCR- RFLP法测定 ras基因 1 2密码子的突变 ;用血清学方法检测 Hp的感染状况。结果　 43例胃癌中有 2 8例存在 ras基因1 2密码子的突变 ,突变率为 65 .1 2 % ;43例胃癌中 ,Hp阳性 30例 ,阳性率为 69.77% ,其中 Cag A阳性 2 4例 ,阳性率为 80 % ;30例 Hp阳性的胃癌中 ,有 1 9例发生 ras基因 1 2密码子的突变 ,发生率为 63.33% ,1 3例 Hp阴性的胃癌中 ,有 9例发生 ras基因 1 2密码的突变 ,发生率为 69.2 3% ,二者比较无明显差异 ( P>0 .0 5 )。结论　 ras基因 1 2密码子的突变可能与胃癌的发生有关 ,胃癌中ras基因 1 2密码子的突变与 Hp及 Cag A阳性的 Hp感染无明显相关性 ,Hp感染可能不是其改变的唯一或必须因素.     

胃癌及癌前病变中c－Ha－ras癌基因点突变的研究

采用高敏感和特异的ＰＣＲ技术及寡核苷酸探针检测ｃ－Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子的Ｇ→Ｔ突变，６６例胃粘膜组织中（包括胃癌、不典型增生、肠化生，浅表性胃炎及正常胃粘膜），点突变７例，胃癌占６例，达２８．５７％（６／２１），不典型增生１例，占５．５６％（１／１８）．初步提示ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因突变有可能发生于胃癌变的早期。应用ＰＣＲ结合斑点杂交技术检测ｃ－Ｈａ－ｒａｓ癌基因有可能与胃癌病理和临床研究相结合，提供早期诊断胃癌的分子生物学指标。     

慢性萎缩性胃炎伴肠化生与胃癌ras基因表达的比较

目的：探讨胃癌发生发展不同阶段癌基因表达特点并予以定量分析，对阐明胃癌发生发展机理及早期诊断胃癌具有重要意义。方法：应用ｒａｓ基因产物共有多肽序列单克隆抗体ＰＡＰ免疫组化对照研究了１３例慢性萎缩性胃炎伴肠化生（大肠型），３２例胃窦癌及１５例正常胃窦粘膜ｒａｓ基因表达特点。结果：慢性萎缩性胃炎伴肠化生粘膜ｒａｓ基因产物免疫反应阳性细胞形态较规则，呈卵圆形或低柱状，免疫反应强度及阳性细胞数量均较胃癌增     

ras p21及p53基因的表达与胃癌生物学行为关系的探讨

应用SP免疫组化法检测1980～1989年存档的33例胃癌及其癌旁组织石蜡包埋标本的ras p21和p53基因表达情况，并与临床、病理和随访资料进行对比分析。结果显示：胃癌标本的ras p21阳性表达7例(21．21％)，p53蛋白的阳性表达11例(33．33%)。ras p21的阳性表达与病理类型、性别、年龄、民族以及肿瘤部位无关，但肿瘤浸润深度及有无淋巴结转移与ras p21阳性表达之间显著相关。生存不足1年组的ras p21表达阳性率(50%)明显高于1～5年组(22．22％)和5年以上组，表明P21蛋白的表达与胃癌的浸润、进展和预后有关，提示ras p21的检测有可能成为胃癌预后指标，并有指导临床治疗的意义。p53蛋白的表达与患者的临床病理状况无显著相关，提示p53基因的改变可能主要发生在癌变早期，对胃癌的发生起关键作用，但并不影响胃癌细胞的生物学行为。p53蛋白的表达与ras p21蛋白表达之间无明显关系。     

p21ras在胃癌中表达的意义

目的探讨胃癌组织中p21ras的表达及其意义.方法应用免疫组化S-P法检测51例胃癌中p21ras的表达情况.结果p21ras阳性表达率为62.75%(32/51).p21ras阳性表达与胃癌的分化程度无明显关系,但与浸润深度和淋巴结转移密切相关.结论p21ras阳性表达在胃癌的发生发展中起重要作用.检测p21ras表达情况可作为判断胃癌预后的一项有用指标.     

降低S100A6基因表达对胃癌细胞生物学特性影响的研究

目的：初步探讨S100A6基因对于胃癌细胞生长、增殖状态,细胞周期,凋亡状态等生物学特性及成瘤、浸润转移能力等恶性表型的影响。方法：S100A6基因的RNAi载体通过脂质体介导法转染S100A6基因高表达SGC7901细胞,后经G418压力筛选法获得稳定转染的细胞系,经过RT—PCR法、免疫细胞化学法及Western—bloting法证实。对稳定表达株进行鉴定,而后使用流式细胞仪、生长曲线法、平板克隆形成实验法、细胞迁徙实验等方法分析稳定表达株相关生物学特性与恶性表型的变化,每种检测实验均设立RNAi载体稳定转染细胞组、IMGS00空载体稳定转染细胞组和空白SGC7901细胞组。结果：稳定的S100A6基因RNAi细胞系经过RT—PER法、免疫细胞化学法及Western—bloting法证实,mRNA抑制率可达75％左右,蛋白产物的抑制率达85％左右。与转染IMGS00空载体及空白SGC7901胃癌细胞相比转染S100A6RNAi载体的稳定表达细胞株生长减慢,各时间点细胞计数显著低于对照组（P〈0．05）;后两组之间亦无显著差异,细胞周期检测显示S100A6RNA干扰组G0—G1期比例显著高于对照组,而G2-M及S期比例显著低于对照组（P〈0．05）,其它各期细胞比例均无显著差异。平板克隆形成实验结果显示S100A6RNA干扰组克隆形成率显著低于对照组（P〈0．05）;细胞迁徙实验结果提示S100A6RNA干扰组穿膜率显著低于对照组（P〈0．05）。结论：S100A6基因可能具有促进细胞生长增殖作用,同时可影响细胞周期,增加处于分裂期细胞的比例可能具有促进细胞分裂作用,并可促进胃癌细胞侵袭转移。降低S100A6基因表达可能抑制胃癌细胞的恶性生物学行为。     

胃癌P21^ras表达与临床,病理部分相关因素的研究

对93例胃癌患者进行P21ras检测，结果显示P21ras阳性表达率为56%，而高分化腺癌阳性表达率为96%，低分化腺癌28％（P<0．01）。晚期胃癌P21ras阳性表达率为72％，而早期胃癌P21ras阳性表达率为19%（p＜0．01）、阳性表达患者一年内复发占77％，阴性表达患者一年内复发占31%（p<0．05）。随访结果表明．阳性表达患者中位生存期为10．8个月，阴性表达患者中位生存期为19．3个月。本文研究结果揭示胃癌患者出现P21ras阳性表达，尤其在高表达的出现是一种愈后不良的因素，所以对胃癌患者出现P21ras高表达患者术后应密切随访，加强术后的综合治疗。     

慢性萎缩性胃炎伴肠化生与胃癌ras基因表达的比较

目的：探讨胃癌发生发展不同阶段癌基因表达特点并予以定量分析，对阐明胃癌发生发展机理及早期诊断胃癌具有重要意义。方法：应用ras基因产物共有多肽序列单克隆抗体PAP免疫组化对照研究了13例慢性萎缩性胃炎伴肠化生（大肠型），32例胃窦癌及15例正常胃窦粘膜ras基因表达特点。结果：慢性萎缩性胃炎伴肠化生粘膜ras基因产物免疫反应阳性细胞形态较规则，呈卵圆形或低柱状，免疫反应强度及阳性细胞数量均较胃癌增强（多）（P均＜0．05）阳性细胞成片分布肠化粘膜下部及基底部，不穿越基底层；胃癌中免疫反应阳性细胞形态不规则，核分裂相明显，成团或散在分布，免疫反应强弱不等，呈异质性表达。正常胃窦粘膜可见谈棕黄色单个分布的ras产物阳性细胞。结论：ras基因在胃癌前病变慢性萎缩性胃炎伴肠化生中已激活，对ras产物精确定量分析有助于胃癌前病变的诊断。     

降低S100A6基因表达对胃癌细胞生物学特性影响的研究

目的:初步探讨S100A6基因对于胃癌细胞生长、增殖状态,细胞周期,凋亡状态等生物学特性及成瘤、浸润转移能力等恶性表型的影响.方法:S100A6基因的RNAi载体通过脂质体介导法转染S100A6基因高表达SGC7901细胞,后经G418压力筛选法获得稳定转染的细胞系,经过RT-PCR法、免疫细胞化学法及Western-bloting法证实.对稳定表达株进行鉴定,而后使用流式细胞仪、生长曲线法、平板克隆形成实验法、细胞迁徙实验等方法分析稳定表达株相关生物学特性与恶性表型的变化,每种检测实验均设立RNAi载体稳定转染细胞组、IMG800空载体稳定转染细胞组和空白SGC7901细胞组.结果:稳定的S100A6基因RNAi细胞系经过RT-PCR法、免疫细胞化学法及Western-bloting法证实,mRNA抑制率可达75%左右,蛋白产物的抑制率达85%左右.与转染IMG800空载体及空白SGC7901胃癌细胞相比转染S100A6 RNAi载体的稳定表达细胞株生长减慢,各时间点细胞计数显著低于对照组(P<0.05);后两组之间亦无显著差异,细胞周期检测显示S100A6 RNA干扰组G0-G1期比例显著高于对照组,而G2-M及S期比例显著低于对照组(P<0.05),其它各期细胞比例均无显著差异.平板克隆形成实验结果显示S100A6 RNA干扰组克隆形成率显著低于对照组(P<0.05);,细胞迁徙实验结果提示S100A6 RNA干扰组穿膜率显著低于对照组(P<0.05).结论:S100A6基因可能具有促进细胞生长增殖作用,同时可影响细胞周期,增加处于分裂期细胞的比例可能具有促进细胞分裂作用,并可促进胃癌细胞侵袭转移.降低S100A6基因表达可能抑制胃癌细胞的恶性生物学行为.     

胃癌P53基因突变和蛋白表达的研究

为了解中国人胃癌Ｐ５３基因突变情况，应用银染聚合酶链反应－单链构象多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）技术对Ｐ５３基因第５、６、７、８外显子进行检测。对来自癌组织ＤＮＡ和癌旁正常组织ＤＮＡ的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ电泳带迁移作对比分析，发现３７例胃癌中，１１例胃癌样品电泳带迁移异常，依据ＤＮＡ单链构象与分子电泳迁移的关系，研究结果表明：胃癌Ｐ５３基因５－８外显子的突变率为３０％。微波处理ＡＢＣ法检测突变型Ｐ５３蛋白表     

贲门癌组织中多药耐药基因和多药耐药相关蛋白基因表达的临床研究

目的了解多药耐药基因（ＭＤＲ１）和多药耐药相关蛋白基因（ＭＲＰ）在贲门癌组织中的表达及其临床意义。方法采用反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,检测了４６例贲门癌及癌旁组织中ＭＤＲ１和ＭＲＰ６４表达。结果癌组织中ＭＤＲ１和ＭＲＰ表达的阳性率分别６３％和５０％,均高于癌旁组织（Ｐ＜０．０５）;术前化疗的ＭＤＲ１ｍＲＮＡ和ＭＲＰｍＲＮＡ表达水平高于未化疗者（Ｐ＜０．０５）;中低分化肿瘤的ＭＤＲ１ｍＲＮＡ和ＭＲＰｍＲＮＡ表达水平高于高分化肿瘤（Ｐ＜０．０５）;结论贲门癌组织中具有内源和获得性多药耐药性;ＭＤＲ１和ＭＲＰ表达与贲门癌的ＴＮＭ分期无关,其高表达状态可预示肿瘤组织的分化不良。     

A STUDY ON THE TREATMENT OF GASTRIC CANCER BY CD GENE COMBINED WITH 5-FC IN VITRO AND IN VIVO

Gastric cancer is one of the most frequentlyoccurring carcinoma in China. The effect of currentmethods such as surgical, radiotherapeutic andchemotherapeutic treatment against middle stage and advanced gastric cancer is not satisfactory. The gene therapy started a new way to the treatment of malignant diseases. The enzyme/prodrug system that increases the drug sensitivity of tumor cells has emerged as an effective method of selective elimination of tumor cells. This kind of drug sensitive ge…     

ras p21及p53基因的表达与胃癌生物学行为关系的探讨

应用SP免疫组化法检测1980～1989年存档的33例胃癌及其癌旁组织石蜡包埋标本的ras p21和p53基因表达情况,并与临床、病理和随访资料进行对比分析。结果显示:胃癌标本的ras p21阳性表达7例(21.21％),p53蛋白的阳性表达11例(33.33％)。ras p21的阳性表达与病理类型、性别、年龄、民族以及肿瘤部位无关,但肿瘤浸润深度及有无淋巴结转移与ras p21阳性表达之间显著相关。生存不足1年组的ras p21表达阳性率(50％)明显高于1～5年组(22.22％)和5年以上组,表明P21蛋白的表达与胃癌的浸润、进展和预后有关,提示ras p21的检测有可能成为胃癌预后指标,并有指导临床治疗的意义。p53蛋白的表达与患者的临床病理状况无显著相关,提示p53基因的改变可能主要发生在癌变早期,对胃癌的发生起关键作用,但并不影响胃癌细胞的生物学行为。p~53蛋白的表达与ras p~21蛋白表达之间无明显关系。     

三氧化二砷诱导胃癌细胞凋亡及对相关基因表达的影响

目的 研究三氧化二砷（As2O3)诱导胃癌细胞的凋亡作用及对凋亡相关基因p53、c-myc、bcl-2、bcl-xl和bcl-xs表达的影响,探讨其诱导胃 癌凋亡的作用机制。方法 研究As2O3对胃癌细胞SGC－07901和MKN－45的诱导凋亡作用和对凋亡相关基因表达的影响。结果 As2O3作用于细胞可见典型的细胞凋亡。出现典型的亚二倍体“凋亡峰”。10μmol／LAs2O3的诱导胃癌细胞SGC－7901和MKN－45的凋亡率为13．8％和22．5％。细胞凋亡指数在1．42％－9．5％之间。As2O3作用后能明显下调SGC－7901细胞的bcl-2蛋白和mRNA的表达;对SGC－7901细胞的p53、c-myc、bcl-xl和bcl-xs蛋白的表达无影响。As2O3能促进MKN－45细胞的p53蛋白和mRNA的表达,对MKN－45细胞的bcl-2、c-myc、bcl-xl和bcl-xs基因表达无影响。结论 As2O3可通过不同途径诱导胃癌细胞凋亡,通过下调SGC－7901细胞的bcl-2的蛋白表达诱导其凋亡,通过上调p53表达诱导胃癌MKN－45细胞凋亡。     

CD44v6在胃癌中的表达及其临床意义

目的：探讨ＣＤ４４ｖ６在胃癌中的表达规律及其临床意义。方法：应用免疫组织化学ＬＳＡＢ方法，对６５例胃癌中ＣＤ４４ｖ６基因产手的表达进行了观察。结果：ＣＤ４４ｖ６的表达与胃癌的浸润、淋巴结转移呈正相关，与预后呈负相关。结论：ＣＤ４４ｖ６参与胃癌的发展过程，并与胃癌的部分生物学行为有关，可能成为胃癌诊断和判断预后的一个重要的分子生物学检测指标。     

乙氧硬化醇对胃癌细胞体外杀伤作用的实验研究

目的：探讨乙氧硬化醇对胃癌细胞的体外杀伤作用。方法：采用ＭＴＴ细胞毒试验分别测定乙氧硬化醇对三种不同化程度的胃癌细胞株的杀伤率。结果：乙氧硬化醇对三株胃癌细胞株均存在抑制作用,且呈浓度－抑制率相关关系。结论：乙氧硬化醇能在体外杀伤胃癌细胞。     

胃癌癌性促凝物的初步研究

用复钙时间测定１７例胃癌组织，癌旁粘膜和正常胃粘膜的促凝活性，结果显示，胃癌组织的促凝活性明显高于癌旁粘膜；癌旁粘膜高于正常胃粘膜；低分化腺癌高于高分化腺癌；癌旁粘膜伴有肠化生和或异型增生高于没有这些改变的癌旁粘膜。胃癌的促凝活性主要是ＣＰ所致，是不依赖于ＦⅦ，直接活活ＦＸ，是一种半胱氨酸蛋白酶，ＣＰ的测定有助于鉴别胃癌的良恶性病变。     

胃癌淋巴结转移规律的临床研究

目的：探讨胃癌淋巴结转移规律和胃癌根治术的淋巴结清扫范围。方法：将采集不同部位的淋巴结,依据国际TNM分期标准和组站分类法,全部数据进行统计学处理。结果：本组胃癌淋巴结转移率67．3％,早期和进展期胃癌转移率分别为14．3％和79．8％。肿瘤浸润深度T1者,淋巴结转移主要局限于N1,T2者淋巴结转移N3者5．4％,T3者淋巴结转移N3的9．5％。结论：胃癌淋巴结转移通常从原发病灶开始,通过淋巴网沿着淋巴管由近及远地向外扩散,肿瘤的大小或浸润深度不同,淋巴结转移的差异性有显著意义（P＜0．01）。