彗星电泳法检测H2O2对人淋巴细胞DNA损伤及其激光扫描共聚焦显微境下的观察和三维重建

目的:应用彗星电泳法于荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察人淋巴细胞经H2O2作用后的DNA损伤情况.方法:人淋巴细胞经不同浓度H2O2(0、10、20、40、80μmol/L)作用20 min,或20μmol/L H2O2作用不同时间(0、10、20、30 min)后,采用彗星电泳法,荧光显微镜下观察、照相,对尾长、总彗星长度、尾距进行测量和分析.同时采用激光共聚焦显微镜(LSCM)进行观察和三维重建;比较了不同染料(H、AO、EB、Hochest33258)的染色效果.结果:H202作用浓度为0、10、20、40、80μmol/L时,尾距(-x±s)分别为0.001±0.002、0.31±0.35、1.23±0.96、2.82±1.38、3.52±0.96(P＜0.01);作用时间为0、10、20、30min时,尾距(-x±s)分别为0.05±0.09、0.22±0.30、1.62±0.93、1.89±1.09(P＜0.01).尾长、总彗星长度也有显著性增加,经统计学检验,P＜0.01.与荧光显微镜相比,LSCM下的″彗星″轮廓十分清晰;PI和EB染色效果较好.结论:H2O2能剂量依赖性和时间依赖性地导致人外周血淋巴细胞DNA的明显断裂损伤.利用LSCM构建″彗星″的三维图像将更有利于DNA损伤的准确测量.鉴于染色效果的差异,PI和EB是比较适合的彗星电泳染料.     

“彗星” 法分析人肿瘤细胞DNA放射损伤和修复

探讨“彗星”分析法 (CA)在检测体外培养人肿瘤细胞DNA放射损伤与修复和放射敏感性的关系。方法　采用碱性CA检测鼻咽高分化鳞癌上皮细胞系 (CNE 1)、食管鳞癌上皮细胞系 (Ec 10 9)、肺腺癌细胞系 (GLC)和胃低分化腺癌细胞系 (BGC 82 3)经 6MVX射线照射后单细胞内DNA单链断裂 (SSB)程度及其与放射剂量的关系 ,以及CNE 1和GLC细胞系在分别接受了 16GyX射线照射后的自身修复情况 ,同时与相应的细胞存活曲线比较。结果　碱性CA可以检测出 4个细胞系DNA的SSB ,并与放射剂量呈良好的线性关系。 16Gy剂量下各细胞系的SSB程度依次为CNE 1>Ec 10 9>GLC >BGC 82 3。CNE 1,Ec 10 9,GLC和BGC 82 3细胞系的Do值分别为 1.2 5 ,1.2 7,1.88和 1.5 6。 16Gy诱导CNE 1和GLC细胞系的DNA损伤后 ,其半修复时间分别为 7.4,17.8min。结论　采用碱性CA能确切反映 4种人肿瘤细胞系DNA的定量损伤程度及其与放射剂量的关系 ,并能确切反映辐射损伤后自身修复能力 (CNE 1和GLC)在受测时间中的定量变化情况。自身修复能力的大小在鳞癌和腺癌细胞系间与放射敏感性的大小 (Do值 )有较好的对应关系。     

RhoC 过表达对人脐静脉内皮细胞体外迁移 及血管生成能力的影响

 目的　探讨RhoC 基因过量表达对内皮细胞体外迁移及血管生成过程的影响。方法　构建 RhoC 真核表达载体,以脂质体转染人脐静脉内皮细胞( HUVE) ,采用RT2PCR 和Western blot 检测 RhoC 的mRNA 及蛋白表达水平; 划痕实验检测细胞迁移能力; 胶原基质胶三维培养检测内皮细胞体 外血管生成能力。结果　转染RhoC 实验组与空载体对照组比较,RhoC mRNA 和蛋白表达明显增高; 细胞迁移能力和血管样结构生成能力明显增强。结论　RhoC 高表达能促进人脐静脉内皮细胞体外迁 移及血管生成。     

X射线照射对人脐静脉内皮细胞焦亡的影响

目的：探讨X射线照射对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）焦亡的影响。方法：单次10 Gy X射线照射HUVEC细胞,采用ELISA法检测照射后0~72 h HUVEC分泌细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-18的浓度,Western blot法检测照射后6~48 h HUVEC内Caspase-1的活化水平,采用透射电子显微镜检测照射后72 h HUVEC形态的变化。采用流式细胞术检测单次10 Gy以及多次小剂量（2.5 Gy/d,连续4 d）照射后HUVEC焦亡率的变化。结果：10 Gy X射线照射后0~72 h HUVEC中IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-18浓度与对照组（0 Gy组）相比均明显升高（P<0.05）。10 Gy X射线照射后6~48 h细胞内Caspase-1活化水平升高（P<0.05）,细胞呈现体积增大肿胀状态。单次10 Gy照射组和多次小剂量照射组细胞焦亡率均明显高于空白对照组（P<0.01）;此外,单次10 Gy照射组细胞焦亡率较多次小剂量照射组细胞升高约1倍（P<0.01）。结论：X射线照射可引起人脐静脉内皮细胞HUVEC焦亡;在总剂量相同情况下,单次大剂量照射引起的HUVEC焦亡水平明显高于多次小剂量照射。     

彗星试验检测间接致突变物的DNA损伤作用

目的与方法：用彗星试验检测在体外活化与不活化条例下9种间接致突变物（苯并（a）芘、7,12－二甲基苯并蒽、3－甲基胆蒽、2－氨基蒽、2－氨基芴、4－硝基喹啉－1－氧化物、乙基亚硝基胍、黄曲霉素B1和环磷酰胺）对V79细胞的DNA损伤作用。结果：在活化条件下,8种物质出现DNA损伤作用或损伤作用增强,1种物质（4－硝基喹吉林－1－氧化物）DNA损伤作用减弱。结论：加入体外活化系统,彗星试验可检测间接致突变物的DNA损伤。     

异鼠李素通过减轻氧化应激延缓D-半乳糖诱导的人脐静脉内皮细胞衰老

目的：探讨沙棘中的重要成分异鼠李素（ISO）对细胞衰老的影响及机制。方法：采用D-半乳糖（D-Gal）诱导细胞衰老模型,取20～23代的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）分为4组：对照组、D-Gal组、D-Gal+ISO组（5 μmol/L）、D-Gal+ISO组（10 μmol/L）。其中D-Gal浓度为10 g/L,干预时间为72 h。采用CCK-8试剂盒检测各组细胞活力;衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色试剂盒检测细胞衰老状态;各相关试剂盒检测细胞总活性氧（ROS）水平、丙二醛（MDA）含量、总超氧化物歧化酶（SOD）活性和过氧化氢酶（CAT）活性。Western blot法检测衰老标志蛋白p21、p27和核因子NF-E2相关因子2（Nrf2）及其下游蛋白表达水平。结果：ISO浓度≤10 μmol/L时对HUVEC无明显毒性作用;与对照组比较,D-Gal能够诱导细胞衰老指标SA-β-Gal活性增加（P<0.05）;提高p21、p27表达水平,提高细胞总ROS水平和MDA含量,降低总SOD和CAT活性,降低Nrf2及下游蛋白表达水平（P<0.05）。与D-Gal组比较,ISO能够降低细胞SA-β-Gal活性,抑制p21、p27表达,降低细胞总ROS水平和MDA含量,提高总SOD和CAT活性,增强Nrf2及下游蛋白表达（P<0.05）。结论：ISO可以通过减轻氧化应激,延缓D-Gal诱导的HUVEC细胞衰老,在此过程中激活Nrf2通路可能是其发挥抗衰老作用的重要机制。     

彗星分析技术检测辐射和化学物质诱导的DNA损伤

目的： 用彗星分析技术(comet assay)检测邻苯二胺(o-phenylenediamine, o-PDA)和60 Coγ-射线对CHL细胞DNA的损伤。 方法： CHL细胞经0、 2、 4、 6、 8 μmol / L的邻苯二胺染毒和0、 2、 4、 6、 8、 10、 15 Gy 的60 Co γ-射线照射后,进行单细胞凝胶电泳,测定彗星尾长。采用Origin 4.2软件建立两种诱变剂的剂量与CHL细胞彗星尾长的剂效关系。 结果： DNA的损伤程度(以彗星尾长为指标)随60 Coγ-射线剂量的加大和o-PDA浓度的增加而增强,CHL细胞彗星尾长(TL)与60 Coγ-射线的剂效关系符合线性平方模型：TL=20.41＋2.42D＋0.38D 2;与o-PDA浓度的剂效关系符合线性平方模型：TL=1.90＋1.46C＋0.52C 2。 结论： 60 Co γ-射线剂量和o-PDA的浓度与细胞DNA损伤程度具有剂效关系;彗星分析是一种分析环境危害因子遗传毒性的有效技术。     

彗星试验检测间接诱变剂对小鼠睾丸细胞的DNA损伤

目的：探讨组织原代细胞在检测间接诱变剂中的作用。方法：采用单细胞凝胶电泳试验（彗星试验）对３种典型的间接诱变剂（环磷酰胺、２－氨基芴和二甲基苯蒽）所致的离体小鼠睾丸细胞的ＤＮＡ损伤进行了研究。结果：在一定浓度范围内,３种受试物均可直接引起离体小鼠睾丸细胞ＤＮＡ单链断裂,出现拖尾的彗星细胞,其拖尾细胞百分率和ＤＮＡ迁移长度均随受试物浓度的增加而增加,且有明显的剂量反应关系。结论：原代小鼠睾丸细胞具有一定的代谢活化作用。可以用于彗星试验直接检测间接诱变剂所致的ＤＮＡ损伤研究。     

PM2.5中不同组分对人脐静脉内皮细胞的联合毒性作用研究

目的：探讨PM_2.5中各种组分单独以及联合暴露对于人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的毒性作用,并探讨不同组分之间是否存在交互作用。方法：以永生化的HUVECs细胞为研究对象,分别给予0、5、10、20、40、80、160 μg/mL纳米炭黑颗粒（下称炭黑）,0、2.5、5、10、20、40、80、160 μg/mL尘土颗粒（下称尘土）,0、6.25、12.5、25、50、100、200、400 μmol/L醋酸铅,0、5、10、20、40、80、160 μmol/L亚砷酸钠和氯化镉,染毒24 h,采用CCK-8法测定不同受试物对细胞存活率的影响,并计算不同受试物对HUVECs细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）。然后进行联合染毒实验,选用细胞存活率为80%时的剂量,炭黑（或尘土）分别与铅、砷、镉对HUVECs进行联合染毒24 h,用CCK-8测定细胞存活率;另外根据PM_2.5中各组分实际占比,按m_铅：m_{炭黑/尘土}=1：50,m_砷：m_{炭黑/尘土}=1：100,m_镉：m_{炭黑/尘土}=1：500的比例进行两两联合染毒,以及按m_铅：m_砷：m_镉：m_{炭黑/尘土}=10：5：1：500的比例进行四者联合染毒。染毒24 h后,用CCK-8法测定细胞存活率。结果：HUVEC细胞存活率随着炭黑、尘土、醋酸铅、亚砷酸钠、氯化镉染毒浓度的增加而下降（P<0.05）,以上各受试物对HUVECs细胞的IC₅₀分别为16 μg/mL、110 μg/mL、184 μmol/L、15 μmol/L、14 μmol/L。炭黑与醋酸铅、亚砷酸钠、氯化镉联合染毒时,细胞存活率比炭黑单独染毒时分别下降了17.8%、43.8%、41.2%;尘土与醋酸铅、亚砷酸钠、氯化镉联合染毒时,细胞存活率比尘土单独染毒时分别下降了11.6%、27.8%、28.3%。联合染毒时细胞存活率比单独染毒时明显下降（P<0.05）。炭黑与亚砷酸钠、炭黑与氯化镉之间存在交互作用（均为P<0.05）。结论：PM_2.5中不同组分均可以对血管内皮细胞产生毒性作用,单独暴露时炭黑的细胞毒性作用比尘土大;但与3种金属联合暴露时,尘土比炭黑的联合暴露细胞毒性更大。铅、砷、镉对细胞的毒性作用大小排序为氯化镉>亚砷酸钠>醋酸铅,且炭黑颗粒与亚砷酸钠、炭黑颗粒与氯化镉之间存在交互作用,表现为协同作用。     

运用彗星试验检测醋酸铅对小鼠离体、在体生殖细胞的DNA损伤作用

背景与目的探讨一定剂量的醋酸铅对离体、在体小鼠雄性生殖细胞的DNA损伤作用。材料与方法以50、100、500、1000μmol/L醋酸铅处理离体小鼠睾丸生殖细胞,阴性对照加PBS;用12.5、25、50mg/kg浓度醋酸铅腹腔连续注射5d,第6d处死取小鼠睾丸生殖细胞,应用彗星试验检测醋酸铅对细胞DNA的损伤率和细胞DNA迁移距离的影响。结果4种浓度醋酸铅均可致小鼠离体睾丸细胞DNA损伤,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),且与剂量相关(分级计数r=0.5114,尾距r=0.407)。3种浓度醋酸铅组可致小鼠体内睾丸细胞产生DNA损伤,与阴性对照组比较差异有统计学意义且呈剂量相关(分级计数r=0.4801,尾距r=0.5314)。结论醋酸铅可致小鼠睾丸生殖细胞的DNA损伤,对小鼠生殖细胞可能有遗传毒性。     

Growth Inhibition and Apoptosis Induction of HumanUmbilical Vein Endothelial Cells by Apogossypolone

Aims and Background: Prostate cancer is one of the most common malignant tumors in the male reproductivesystem, which causes the second most cancer deaths of males, and control of angiogenesis in prostate lesions is ofobvious importance. This study assessed the effect of apogossypolone (ApoG2) on proliferation and apoptosis ofhuman umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Subjects and Methods: HUVECs were treated with differentconcentrations of ApoG2. The survival rate of HUVECs were determined by MTT assay. Utrastructural changesof HUVECs were assessed with transmission electron microscopy. Apoptosis in HUVECs was analyzed by flowcytometry and cell migration by Boyden chamber assay. Matrigel assays were used to quantify the development oftube-like networks. Results: ApoG2 significantly inhibited HUVEC growth even at 24 h (P<0.05). The inhibitoryeffect of ApoG2 is more obvious as the concentration and the culture time increased (P<0.05). These resultsindicate that ApoG2 inhibits the proliferation of HUVECs in a time- and concentration-dependent manner withincrease of the apoptosis rate. Besides, ApoG2 reduced the formation of total pseudotubule length and networkbranches of HUVECs. Conclusions: The results suggest that ApoG2 inhibits angiogenesis of HUVECs by growthinhibition and apoptosis induction.     

芎芍胶囊对人脐静脉内皮细胞NO、iNOS和eNOS表达的影响

背景与目的：观察芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）一氧化氮（nitrogenmonoxidum,NO）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitricoxide synthase,iNOS）、内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitricoxide synthase,eNOS）表达的影响,探讨芎芍胶囊促血管新生的作用机制。材料与方法：不同芎芍胶囊药物浓度的含药血清（分为4．17、8．33和16．66rag／ml共3组）培养HUVEC细胞24h后,比色法检测培养液中NO、iNOS的含量,RT-PCR检测HUVEC细胞中iNOS、eNOS的表达。结果：4．17mg／ml含药血清组培养上清液中NO含量较对照组增加（P〈0．01）;4．17和8．33mg／ml含药血清组iNOS含量较对照组增加（P〈0．01）。RT-PCR结果显示,4．17mg／ml含药血清组HUVEC细胞的eNOSmRNA和iNOSmRNA的表达均增加（P均〈0．01）,8．33和16．66mg／ml组HUVEC细胞的eNOSmRNA和iNOSmRNA表达均减少（P均〈0．01）。结论：4．17mg／ml芎芍胶囊含药血清组促进血管新生可能与增加iNOS、eNOSmRNA表达,促进NO合成与分泌有关。     

胆固醇诱导内皮细胞凋亡及抑制细胞增殖的实验研究

背景与目的:探讨胆固醇(cholesterin)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)凋亡及细胞增殖的影响,同时观察CuSO4溶液在其中所起的作用.材料与方法:实验分为8组:对照组(等体积溶剂)、胆固醇低剂量组(25 mg/L)、中剂量组(50 mg/L)和高剂量组(100 mg/L);另外4组分别为以上各组加入终浓度为10 μmol/L的CuSO4溶液.应用流式细胞仪检测不同浓度胆固醇对细胞凋亡率的影响;应用四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色法(MTT试验)检测细胞的生存率.结果:不同浓度的胆固醇可不同程度地诱导HUVEC细胞发生凋亡,可明显抑制HUVEC细胞增殖,且随浓度增高,其作用均明显增强.同时发现各组加入CuSO4溶液后可使其细胞凋亡率明显增加,生存率下降.结论:胆固醇可以诱导内皮细胞凋亡及抑制细胞增殖,CuSO4溶液可促进胆固醇对HUVEC的损伤作用.     

人血管生成素-1对血管内皮细胞增殖及凋亡影响的研究

目的:探讨人血管生成素1（angiopoietin1, Ang1）对人脐静脉内皮细胞(human umbilican vein endothelia cell, HUVEC)增殖和凋亡的影响，以进一步研究其生物学作用及其在肿瘤发生中的作用机制。方法构建pcDNA3.1 V5HisCAng1真核表达载体，并瞬时转染293细胞;取新生儿脐带经胶原酶消化等方法分离培养HUVEC;分别通过MTT比色和细胞计数法，分析Ang1瞬时转染上清对HUVEC增殖的影响;通过流式细胞仪分析在血浆饥饿实验条件下，Ang1对HUVEC凋亡的影响。结果： 成功克隆了Ang1基因，构建了其正义真核表达载体，并在293细胞中瞬时表达;成功进行了HUVEC的原代分离及传代培养；MTT法检测HUVEC增殖结果：只加培养液组、加空载体转染上清组、加Ang1转染上清组HUVEC OD490值分别为0.36±0.11， 0.40±0.03，0.68±0.10(P<0.05)；细胞计数法检测结果依次为：（10.13±2.06）×104，（8.7±1.73）×104，（15.03±1.98）×104(P<0.05)。流式细胞仪检测HUVEC凋亡率依次为： 21%，19%和6%。结论： Ang1能显著促进血管内皮细胞体外增殖，抑制血浆饥饿时HUVEC的凋亡。     

杏仁对吸烟导致DNA氧化损伤的保护作用

背景与目的： 研究美国加州杏仁对吸烟诱导的DNA氧化损伤是否具有保护作用。材料与方法： 选取30个吸烟的志愿者,随机分3组（每组10人）,每天分别给予0, 84和168 g的杏仁,共28 d;试验期间各组对象膳食和吸烟量相同,在实验开始前和试验结束后分别收集新鲜尿液测定柯替宁,采静脉血做彗星实验,收集24 h尿测定8-OH-dG。结果： 彗星实验显示,168 g/d剂量组DNA损伤程度比对照组和试验前均显著降低(P<0.05);8-OH-dG 测定结果显示,84 g / d和168 g / d剂量组的8-OH-dG水平明显低于试验前和对照组(P<0.05)。结论： 食用美国加州杏仁可能具有降低吸烟人群DNA氧化损伤的作用。     

Meta-Analysis of Circulating Endothelial Cells and Circulating Endothelial Progenitor Cells as Prognostic Factors in Lung Cancer

Background: The aim of this study was to analyze the prognostic implications of pretreatment circulatingendothelial cells (CECs) and circulating endothelial progenitor cells (CEPCs) for the survival of patients withlung cancer. Materials and Methods: Relevant literature was identified using Medline and EMBASE. Patientclinical characteristics, overall survival (OS) and progression-free survival (PFS) together with CEC andCEPC positive rates before treatment were extracted. STATA 12.0 was used for our analysis and assessment ofpublication bias. Results: A total of 13 articles (8 for CEC and 5 for CEPC, n=595 and n=244) were pooled forthe global meta-analysis. The odds ratio (OR) for OS predicted by pretreatment CECs was 1.641 [0.967, 2.786],while the OR for PFS was 1.168 [0.649, 2.100]. The OR for OS predicted by pretreatment CEPCs was 12.673[5.274, 30.450], while the OR for PFS was 4.930 [0.931, 26.096]. Subgroup analyses were conducted accordingto clinical staging. Odds ratio (OR) showed the high level of pretreatment CECs only correlated with the OSof patients with advanced lung cancer (stage III-IV). Conclusions: High counts of CECs seem to be associatedonly with worse 1-year OS in patients with lung cancer, while high level of pretreatment CEPCs correlate withboth worse PFS and OS.     

Interaction between Colon Cancer Cells and Human Liver Sinusoidal Endothelial Cells Promotes Liver Metastasis of Tumor Cells

OBJECTIVE To investigate the effect of co-culture between colon cancer cells(SW1116)and human liver sinusoidal endothelial cells (HLSECs)on cancer cell metastasis, and to provide a novel model for studying the mechanism of colon cancer liver metastasis.METHODS HLSECs and SW1116 were co-cultured for 21 rounds in vitro. Transwell migration,gelatin-zymography,CCK-8 proliferation and colony formation assays were used to examine the invasion, proliferation, and colony forming ability of cancer cells.Assays were carried out to examine tumor growth ability and liver metastasis. The associated molecular change was examined by western blotting.RESULTS After 21 selection rounds, colon cancer cells SW1116P21 displayed a clear boundary. Compared with the SW1116 cells,SW1116P21 cells had a greater invasive ability, cell proliferation and colony formation in soft agar.A gelatin-zymography assay showed that the ability of SW1116P21 cells to secrete matrixmetaIloproteinase-2/9 was significantly greater than that ofSW1116 cells. Additionally, the capacity for subcutaneous tumorformation of SW1116P21 was significantly increased. It was found that mice injected with SW1116P21 cells developed significantly morevisually observable liver nodules than mice injected with SW1116cells.Western blotting showed increased vimentin expression anddecreased E-cadherin expression in the SW1116P21 cells, comparedwith the SW1116 cells.CONCLUSION The interaction between SW1116 and HLSECs maypromote tumor cell invasion, proliferation and colony formation in vitro, and tumor formation and liver metastasis in vivo. Anepithelial-mesenchymal transition occurs in SW1116P21 cells, whichcontributes to the change in the characteristics of tumor cells.     

20（S）-人参皂苷Rg3对血管内皮细胞增殖和迁移的抑制作用

 目的 探讨20（S）-人参皂苷Rg3（SPG-Rg3）抗肿瘤诱导新生血管生成的作用机制。方法 采用MTT法、PCNA免疫荧光染色和Boyden小室迁移实验,观察SPG-Rg3对B16黑色素瘤细胞条件培养液（Conditioned Medium of B16 Melanoma Cells, BMCM）诱导的人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的影响;并通过免疫细胞化学染色法观察了SPG-Rg3对B16黑色素瘤细胞血管内皮细胞生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF）及金属基质蛋白酶-9（Matrix Metalloproteinase-9, MMP-9）表达的影响。结果SPG-Rg3组BMCM的促内皮细胞增殖和迁移作用均明显弱于对照组,且SPG-Rg3浓度为5μg/ml时能够降低B16黑色素瘤细胞VEGF及MMP-9的表达。结论SPG-Rg3通过减少肿瘤细胞分泌细胞因子VEGF和MMP-9,抑制肿瘤细胞对血管内皮细胞增殖和迁移的促进作用,从而间接发挥其抗肿瘤新生血管生成的作用。     

腺病毒介导的小鼠内皮抑素治疗胃癌的研究

目的:探讨人血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)对人脐静脉内皮细胞(human umbilican vein endothelia cell,HUVEC)增殖和凋亡的影响,以进一步研究其生物学作用及其在肿瘤发生中的作用机制.方法:构建pcDNA3.1-V5-HisC-Ang-1真核表达载体,并瞬时转染293细胞;取新生儿脐带经胶原酶消化等方法分离培养HUVEC;分别通过MTT比色和细胞计数法,分析Ang-1瞬时转染上清对HUVEC增殖的影响;通过流式细胞仪分析在血浆饥饿实验条件下,Ang-1对HUVEC凋亡的影响.结果:成功克隆了Ang-1基因,构建了其正义真核表达载体,并在293细胞中瞬时表达;成功进行了HUVEC的原代分离及传代培养;MTT法检测HUVEC增殖结果:只加培养液组、加空载体转染上清组、加Ang-1转染上清组HUVEC OD490值分别为0.36±0.11,0.40±0.03,0.68±0.10(P＜0.05);细胞计数法检测结果依次为:(10.13±2.06)×104,(8.7±1.73)×104,(15.03±1.98)×104(P＜0.05).流式细胞仪检测HUVEC凋亡率依次为:21%,19%和6%.结论:Ang-1能显著促进血管内皮细胞体外增殖,抑制血浆饥饿时HUVEC的凋亡.