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1.
异基因外周血干细胞移植,具有造血重建快,粒细胞缺乏和血小板减少期缩短,增加了移植期的安全性,由于输入T淋巴细胞数量较多,可能增加移植物抗宿主病(graftversushostdisease,GVHD)的发病率,特别是慢性GVHD[1]。在小鼠不相合的骨髓移植实验研究,提前使用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员供者骨髓,移植后降低了重症GVHD的发生,提高了生存率[2]。在自体骨髓移植中,加用少量外周血干细胞,可加速造血重建[3]。本文在HLA相合的异基因骨髓移植中,提前给供者使用(G-CSF)…  相似文献   

2.
目的 :为观察使用 G- CSF提前动员供者的异基因骨髓移植方法对造血重建及 GVHD发生的影响。 方法 :用HL A相合 ,混合淋巴细胞培养阴性的供者 ,行异基因骨髓移植 ,在预处理方案 ,GVHD的预防及支持治疗方法相同 ,比较 A组5例病人供者接受 G- CSF2 5 0 μg/d连用 7d后采髓和 B组 4例病人常规采髓的异基因骨髓移植对造血重建和 GVHD发生的作用。 结果 :在类同采髓量中 ,A组所获单个核细胞、CD34 细胞数和 CFU- GM集落数明显多于 B组 (P<0 .0 1) ,A组白细胞大于 1.0× 10 9/L和血小板大于 2 0× 10 9/L的时间分别是 (13.0± 2 .0 ) d和 (14.0± 2 .1) ,比对照组快 8.8d和 10 .3d。 GVHDII~ III度发生率是 A组为 0 ,B组 2例 ,输入的 T淋巴细胞总数无明显改变 ,但 CD4细胞明显减少 ,CD8细胞增多 (P<0 .0 1)。结论 :HL A相合的异基因骨髓移植 ,提前使用 G- CSF动员供者 ,造血重建加快。供者使用 G- CSF可能降低 GVHD发生率 ,这一作用与骨髓内 T淋巴细胞亚群变化有关。  相似文献   

3.
目的 观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)大剂量单次给药对非清髓骨髓移植小鼠造血恢复的影响,为rhG-CSF的临床应用提供新的实验依据.方法 雄性C57BL/6J小鼠,经60Co γ射线6 Gy全身照射.于受照后0.5h给予rhG-CSF处理,通过检测接受不同骨髓移植时间(未移植组和照后0.5、6、24和48 h移植组)和rhG-CSF不同给药剂量(0、0.25、0.5和l mg/kg组)照射小鼠外周血象变化,摸索最佳接受骨髓移植时间和rhG-CSF最佳给药剂量.建立绿色荧光蛋白(GFP)小鼠非清髓骨髓移植小鼠模型,通过流式细胞仪检测受体小鼠外周血中GFP+白细胞占有核细胞总数的百分数,探究rhG-CSF大剂量单次给药对外源性干祖细胞植入的影响.结果 rhG-CSF大剂量单次给药对照后0.5~48 h内接受非清髓骨髓移植小鼠的造血恢复均有不同程度的促进作用,其中对照后24 h移植组小鼠的白细胞、红细胞和血小板的恢复最佳(F=17.76、14.75、8.66,P <0.05);0.25~1.0 mg/kg rhG-CSF单次给药可不同程度地促进非清髓骨髓移植小鼠的多系造血恢复,尤以大剂量rhG-CSF(1.0 mg/kg)给药时效果更为显著(F=5.34、8.92、16.54,P<0.05);此外,照射小鼠接受GFP小鼠骨髓细胞移植后,在照后9~21 d,rhG-CSF组小鼠外周血白细胞数均明显高于移植对照组(F =35.61,P<0.05),但GFP+细胞比例在给药组与移植对照组之间差异无统计学意义.结论 rhG-CSF大剂量单次给药可显著促进非清髓骨髓移植小鼠多系造血功能恢复,但对输入的外源造血干细胞植入率没有明显影响.  相似文献   

4.
李文静  崔连奇 《人民军医》2012,(11):1121-1122,1131
我国脑血管病高发。随着人口老龄化进程,全国每年新发病例约250万,死于脑血管病者超过150万,幸存者中残疾率高达75%[1],给患者家庭和社会带来沉重负担。急性期治疗的有效性对于患者生存质量至关重要。目前,脑梗死急性期的治疗除超早期溶栓治  相似文献   

5.
目的 观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对急性辐射损伤小鼠中枢及外周血淋巴细胞亚群重建的影响.方法 雌性BALB/c小鼠60只经6 Gy照射后随机分为照射组、G-CSF+照射组.G-CSF+照射组小鼠给与重组人G-CSF 100μg·kg-1·d-1皮下注射,连续14 d,照射组小鼠给与等体积磷酸盐缓冲液(PBS)皮下注射,连续14 d,另设空白对照组小鼠20只.照后7、14、21和28d颈部脱臼处死小鼠,取出胸腺制成单个核细胞悬液,使用流式细胞仪检测胸腺CD4+CD8+、CD4+CD8-、CD4-CD8+、CD4-CD8-细胞亚群的比例.使用全血细胞计数仪进行外周血白细胞计数及淋巴细胞绝对值测定,流式细胞仪检测照后14、28、60 d外周血淋巴细胞亚群比例,CCK-8法检测脂多糖(LPS)、刀豆蛋白A(ConA)刺激后脾脏淋巴细胞增殖指数.结果 照后7 d胸腺CD4+CD8+细胞比例降至最低,14 d出现反弹,21 d再次下降,以后逐渐恢复.照后28 d G-CSF+照射组CD4+CD8+细胞比例恢复正常并高于照射组(t=12.22,P<0.05).照后21 d G-CSF+照射组CD4-CD8+细胞比例亦明显高于照射组(t=3.77,P<0.05).照后7 d外周血白细胞及淋巴细胞绝对值降至最低,照后14和60 d,G-CSF+照射组CD3+CD8+T细胞比例明显高于照射组(t=4.31,5.78,P<0.05),但两组间CD3+CD4+T细胞比例在各时间点无明显差异.G-CSF+照射组B淋巴细胞比例在照后14 d明显低于照射组(t=7.3,P<0.05),但很快恢复,照后28和60 d两组B淋巴细胞比例差异无统计学意义.照后14 d,G-CSF+照射组脾脏淋巴细胞对LPS、ConA刺激的增殖指数分别为照射组的4.37和2.98倍.结论 G-CSF可促进照后胸腺细胞亚群的恢复,提高外周血淋巴细胞数量,调节外周血淋巴细胞亚群比例,提高淋巴细胞增殖功能,促进急性辐射损伤后中枢及外周免疫重建.
Abstract:
Objective To investigate the effects of recombinant human granulocyte colonystimulating factor(G-CSF) on central and peripheral lymphocyte subset reconstitution after a sublethal dose of irradiation. Methods Sixty female BALB/c mice were given a 6.0 Gy γ-ray total body irradiation (TBI) and randomly divided into 2 equal groups. The mice in G-CSF + TBI group were injected subcutaneously with recombinant human G-CSF 100 μg·kg-1·d-1 for 14 d and the mice in TBI group were injected subcutaneously with the same volume of phosphate buffered solution (PBS) once daily for 14 d. 7,14,21, and 28 d later the mice were killed and their thymus were taken out to prepare of the mononuclear cell suspension to analysis the percentage of thymic CD4 + CD8 + double positive, CD4 +CD8 - single positive, CD4 - CD8 + single positive and CD4 - CD8 - double negtive cells by flow cytometry. Peripheral blood samples were collected from the caudal vein twice a week, and the white blood cell(WBC) counts and absolute number of lymphocytes were assessed by automatic hemocyte analyzer. 14,28, and 60 d later blood samples were collected from angular vein to examine the peripheral lymphocyte subsets by flow cytometry. Cell counting kit-8 was used to detect lipopolysaccharide (LPS) or concanavalin A (ConA) stimulated splenic lymphocyte proliferation. Results The percentage of thymic CD4 + CD8 +double positive cells decreased 7 d after irradiation, rebounded at 14 d, decreased again at 21 d, and then got a permanent recovery. 28 d after irradiation the percentage of thymic CD4 + CD8 + double positive cells in the G-CSF + TBI group recovered to normal and was significantly higher than that of the TBI group (t =12. 22, P < 0. 05). 21d after irradiation the percentage of thymic CD4-CD8 + single positive cells of the G-CSF + TBI group was significantly higher than that of the TBI group (t = 3.77, P < 0. 05). The peripheral WBCs and lymphocytes decreased to the lowest levels 7 d after irradiation and then gradually increased, however, WBCs and lymphoeytes of the G-CSF + TBI group began to recover earlier and faster than the TBI group. The proportion of CD3 + CD8 + T cells of the G-CSF + TBI group was significantly higher than that of the TBI group 14 and 60 d after irradiation (t =4. 31,5.78, P <0.05). But there was no significant difference in the proportion of CD3 + CD4 + T cells between the two groups. The proportion of B lymphoeytes of the G-CSF + TBI group was significantly lower than that of the TBI group 14 d after irradiation(t =7.30, P <0.05), but it recovered quickly, and there were no significant differences in the proportion of B lymphoeytes between the two groups 28 and 60 d after irradiation. The proliferation indexes of splenic lymphocytes in response to LPS and ConA in the G-CSF + TBI group were 4. 37 and 2.98 times higher than those in the TBI group 14 d after irradiation. Conclusions G-CSF could accelerate the recovery of central and peripheral lymphocyte subsets, raise the absolute number of lymphocytes, and enhance their proliferative function, which contributes to the central and peripheral immune reconstitution after acute irradiation.  相似文献   

6.
目的观察重组人造血增效因子(rhHSF)对外周血造血干/祖细胞的快速动员作用。方法4只正常成年雄性猕猴连续4天皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子(rhGCSF)10μg/(kg·d)后,第5天用rhHSF250μg/kg一次皮下注射。另4只正常成年雄性猕猴仅皮下注射rhHSF500μg/kg一次。观察两组外周血造血干细胞的动员效果。结果一次皮下注射rhHSF后45min、1h和3h,外周血CD34+细胞、CFUGM和中性粒细胞数明显升高并达高峰,其幅度分别为药前值的1.8、3.3和24.9倍。单独应用rhGCSF后4天,对外周血CD34+细胞、CFUGM和中性粒细胞数分别为基值的34.8、4.2和2.7倍;联合应用rhHSF和rhGCSF的动员作用更加明显,CD34+细胞、CFUGM数和中性粒细胞数分别增至基值的41.3、8.3和4.9倍。结论rhHSF能快速动员造血干/祖细胞和中性粒细胞至外周血,并与rhGCSF有明显的协同作用。  相似文献   

7.
8.
粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是一种能在体内调节粒系祖细胞存活、增殖、分化及增强成熟粒细胞功能的细胞生长因子,G-CSF ELISA试剂盒主要是用于测定人血清及体液中G-CSF水平,对诊断有无细菌感染,指导临床治疗有较大意义。利用此试剂盒我们测定了52例足月儿脐血清和65例4~5月胎儿胎肝悬液中G-CSF含量,现报道如下。  相似文献   

9.
目的 研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员自体干细胞对放射性肺损伤的防治作用。方法 75只C57 BL/6实验小鼠采用随机数表法分为健康对照组、单纯照射组及治疗组。采用胸部单次照射剂量14 Gy建立放射性肺损伤模型,治疗组照前以重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF,250 μg·kg-1·d-1,连续5 d)行自体骨髓干细胞动员,照射后逐日动态观测小鼠一般状况、死亡率,主要于3、4个月时相点通过组织学结合图像分析等方法,比较研究肺损伤及防治效应。结果 胸部局部照射14 Gy是造成小鼠放射性肺纤维化的适宜剂量。单纯照射组小鼠死亡率为37.5%,死亡时间主要在照后11周。治疗组及健康对照组全程无动物死亡。照射后3个月肺系数(肺/体重)单纯照射组(10.8±1.49)和治疗组(8.53±1.55)较健康对照组(5.83±0.45)明显升高(F=23.20,P<0.05),但治疗组较单纯照射组减小(P<0.05)。病理组织学变化3个月时主要为肺组织的变性、坏死及炎细胞浸润伴成纤维细胞及局灶性纤维增生;4个月时肺泡及间质炎减轻,而纤维增生及胶原沉积则愈加明显,但治疗组的病理变化均较单纯照射组为轻。组织学评分肺泡炎在3个月时单纯照射组、治疗组均与健康对照组存在差异(F=11.93,P<0.05),纤维化评分在3、4个月时相点单纯照射组、治疗组均较健康对照组升高(F=28.73、16.85,P<0.05),但治疗组较单纯照射组降低,4个月时存在差异(P<0.05),天狼猩红染色结合图像分析测定胶原含量(IOD值)4个月较3个月升高,3、4个月单纯照射组各为4 653±1 018、11 174±1 999,治疗组为2 380±314、6 687±661,较健康对照组的251±54、2 001±264明显升高(F=17.70、17.79,P<0.05),但治疗组升高程度较单纯照射组明显降低(P<0.05)。结论 采用照射前G-CSF行自体干细胞动员可减轻放射性肺损伤,降低死亡率,提示其对放射性肺损伤的防治具有正向作用。  相似文献   

10.
重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGMCSF)是通过基因工程方法产生的药物,因其治疗白细胞减少的有效性和安全性而得以广泛使用。因进口药物价格昂贵,临床应用受到了限制。1995年12月至1996年1月对9例住院病人进行了国产rhGMCSF的Ⅰ期临床试验。每3例为一组,各组分别按2.5,5.0和7.5μg/(kg·d)皮下注射,每例用药7d,共注射63人次,观察到的6种不良反应(疲乏,骨痛,局部疼痛,肌肉酸痛,发热和心悸)均为Ⅰ~Ⅱ级。9例病人全部按计划完成试验,3个剂量组均有较好的耐受。同时,3个剂量组不同程度地显示了升高白细胞的作用  相似文献   

11.
目的:探讨人脐带血清(CBS)在骨髓造血祖细胞培养中的效应,为脐血的应用提供实验依据.方法:用人骨髓单个核细胞,分别加入CBS或混合脐带血清(MCBS)和细胞因子,进行造血祖细胞(CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM)培养,观察集落数.结果:10?S能直接刺激骨髓细胞CFU-GM的形成.CBS的刺激活性和骨髓细胞血型相同与否无关.4人份以上的MCBS,刺激产生的CFU-GM显著高于单人份、双人份混合者,活性稳定.在CFU-GM培养时,20%MCBS与100ng/mlGM-CSF、20%马血清具有相同的效果.MCBS可提高CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM常规体系的集落产率.10%MCBS相当于65.6ng/ml GM-CSF、0.23U/ml、0.3U/ml 0.46U/ml Epo对CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM所起的作用.20%MCBS可直接刺激CFU-E形成.如培养体系内无BpA(爆式集落活性)存在时,形成 BFU-E、CFU-GEMM较少或几乎为零,当含BpA时,可形成一定量的BFU-E、CFU-GEMM集落.结论:CBS(MCBS)内含有能刺激CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM的生长活性;同血型或不同血型4人份以上混合,其刺激活性高,且稳定.具有良好的应用前景.  相似文献   

12.
观察小鼠骨髓细胞及骨髓基质细胞混合输注对骨髓移植后造血重建的影响。给予受致死剂量照射的Balb/c小鼠输注同基因骨髓细胞1×107 个及经体外扩增的同基因原代骨髓基质细胞 2×105 个,与单纯骨髓移植组比较,移植后第14 天外周血白细胞、血小板回升较快,第15 天、第20 天BFU-GM、BFU-E、CFU-E、CFU-S明显高于后者,第20 天已达正常。 结论:原代骨髓基质细胞不仅是可以移植的,而且能够加快造血重建,提高移植效果。  相似文献   

13.
目的 比较骨髓与脐带血细胞体外培养基质细胞的基本特性,为基质细胞的选择应用提供依据。方法 用Dexter长期培养体系培养骨髓和脐带血基质细胞,以细胞增殖、细胞形态、细胞化学染色、细胞表面抗原及基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区、长期培养起始细胞为指标,比较两者的生长特性、成分及功能。结果 生长特性:出现贴壁细胞时间,骨髓细胞为培养3d,脐带血细胞为培养5-6d;细胞融合成片时间,骨髓细胞为培养10~14d,脐带血细胞为培养12—18d;第21天细胞增殖数,骨髓比脐带血细胞增殖少。细胞成分:21d培养后细胞成分,骨髓来源者以成纤维细胞为主,其次是巨噬细胞与内皮细胞,脂肪细胞最少;而脐带血细胞来源者,以巨噬细胞为主,其次是内皮细胞、成纤维细胞,偶见脂肪细胞;细胞化学与上述结果基本一致;细胞表面抗原检测,CD14、CD45的表达骨髓细胞明显低于脐带血细胞。细胞功能:骨髓来源的基质细胞较脐带血细胞的基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区和长期培养起始细胞明显多。结论 ①生长特性:形成贴壁细胞时间骨髓较脐带血短,骨髓细胞比脐带血细胞有核细胞数增殖快、持续时间相对短。②细胞成分特性:骨髓来源形成的基质细胞以成纤维细胞为主,脐带血来源者以巨噬细胞为主。③细胞功能特性:骨髓细胞形成的贴壁细胞较脐带血细胞形成的贴壁细胞更利于鹅卵石造血区、长期培养起始细胞生长。  相似文献   

14.
短期培养小鼠骨髓细胞的增殖、分化及其移植效果   总被引:4,自引:0,他引:4       下载免费PDF全文
实验采用添加肌条件培养液方法进行小鼠骨髓细胞短期液体培养,细胞增殖分化十分活跃。2天起细胞总数和CFU-C逐渐增多,6天分别增至原来的4倍和6倍。淋巴细胞在培养4天或3天消失。CFU-S 6天时减至原来的21%。照后1天或3天静脉输注培养6天的CFU-S,提高照射900拉德同系小鼠的活存率82%。照后30天和60天分别活杀,8只受体小鼠的骨髓细胞2只为供体型,5只为以供体型为主的嵌合体,1只为受体型为主的嵌合体。  相似文献   

15.
目的:比较人脐带血清(CBS)与细胞因子在骨髓血细胞培养中的效应。方法:在体外人骨骨CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM、CAFC、LTC-IC培养体系中,加入CBS或/和细胞因子,观察所形成的集落。结果:与细胞因子比,CBS中含有较高的GM-CSF、EPO、SCF、IL-3、IL-6等活性,能直接刺激骨髓造血细胞形成。结论:CBS内的造血刺激活性能刺激CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM的生长,使CAFC、LTC-IC、得到明显扩增,具有一定应用前景。  相似文献   

16.
刘芳  夏凌辉  方峻  宋善俊  洪梅 《放射学实践》2007,22(12):1279-1281
目的:提高对外周血干细胞移植后发生以中枢神经系统受累为主要表现的慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的认识,早期诊断、及时治疗.方法:报告一例非血缘外周血干细胞移植术(MUD-PBSCT)后发生以中枢神经系统受累为主要表现的慢性移植物抗宿主病病例及诊治经过,并对相关文献进行复习.结果:患者于移植后9个月出现发热和皮疹,伴渐进性智力障碍、口齿不清、认知力下降、肾病综合征等临床表现,头颅MRI显示给予MMF 2 g/d、FK506 2.5 mg/d及甲强龙治疗后,病情明显改善.结论:非血缘异基因造血干细胞移植MUD-PBSCT后,慢性GVHD以中枢神经系统受累为主要表现者国内少有报道,及时诊断并给予有效治疗十分重要.  相似文献   

17.
目的应用MR多技术扫描评价转染血管内皮生长因子的自体骨髓基质细胞移植于慢性缺血动物模型猪后对心功能的保护和促血管新生作用。方法将慢性缺血心脏病模型猪随机分2组:注射转染血管内皮生长因子基因的自体骨髓基质细胞组(组Ⅰ,n=9)和注射空腺病毒载体的对照组(组Ⅱ,n=7)。治疗后4周应用MR多技术扫描检测各实验组射血分数、缺血坏死节段,取心脏标本测定梗塞区的百分比、荧光显微镜下标记细胞、血管数量。结果与组Ⅱ相比组I的射血分数明显提高,缺血坏死面积明显减少(P<0.05),且荧光显微镜下可见大量CM-D iI标记的移植存活细胞。组I缺血区血管计数高于组II并有显著性差异。结论携带血管内皮生长因子的自体骨髓基质细胞移植治疗缺血性心脏病具有明显的优越性,移植细胞成活率高,心功能和局部血运改善明显。  相似文献   

18.
目的:观察高原低氧条件下大鼠骨髓细胞凋亡情况,并应用沙利度胺进行干预研究,探讨细胞凋亡在慢性高原病发生发展中的作用。方法:TUNEL方法检测高原低氧条件下及其在沙利度胺干预后的大鼠骨髓细胞凋亡指数,与对照组进行比较分析。结果:高原低氧条件下1天时大鼠骨髓细胞凋亡指数减低,低氧1天组为(1.34±0.65)%,对照组为(2.73±0.51)%(P〈0.01);与低氧21天组比较,沙利度胺干预后细胞凋亡增加,低氧21天组为(2.65±0.98)%,干预组为(4.02±2.13)%(P〈0.05)。结论:高原低氧条件下大鼠骨髓细胞凋亡减少,细胞凋亡可能是慢性高原病的重要发病机制之一。抗血管新生药物沙利度胺有促进高原低氧大鼠骨髓细胞凋亡的作用,可能成为慢性高原病治疗的新手段。  相似文献   

19.
目的:探讨Sprague-Dawley大鼠外周血来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)的动员、分离培养及鉴定方法,分析其表面标记和多向分化潜能,为运动创伤中的细胞治疗和组织工程产品培育提供新来源的、可以微创获得和自体细胞移植的种子细胞。方法:联合动员大鼠外周血MSC,采集腹主动脉外周血4 ml,使用淋巴细胞分离液结合密度梯度离心方法分离外周血单核细胞,体外培养至第3代,于显微镜下观察其形态和生长状态。取第3代MSC,鉴定其表型并向成骨、成脂和成软骨诱导分化,以证明其干细胞的特性。结果:经淋巴分离液结合密度梯度离心方法分离培养的外周血单核细胞,3~5天可见少量长梭形细胞贴壁,7~9天见细胞成簇生长,并形成克隆集落。第3代细胞形态较均一,生长增殖良好;表达典型的MSC标记CD44和CD90,不表达造血干细胞标记CD34和CD45。成骨诱导21天后,茜素红和ALP染色阳性,有矿化结节形成。成脂诱导21天后,油红O染色阳性,细胞内有脂滴形成。细胞微团无血清成软骨诱导21天后,甲苯胺蓝染色阳性,细胞外有蛋白多糖分泌;免疫组织化学染色示,特异性软骨基质II型胶原表达阳性。结论:采用联合药物动员方法能促进干细胞向外周血释放,分离培养的外周血干细胞经鉴定为MSC,体外具备三系分化潜能,有望成为运动创伤中新的细胞治疗和组织工程产品培育的种子细胞来源。  相似文献   

20.
目的探讨放烧复合伤对骨髓造血微环境损伤的机制。方法采用流式细胞仪、光镜、扫描电镜和透射电镜观察5.0Gyγ线放射损伤、15%Ⅲ度体表总面积烧伤和放烧复合伤小鼠骨髓基质细胞的细胞周期、DNA含量和形态学变化。结果随伤后时间的延长,单烧组骨髓基质细胞的G2+M期比例、DNA含量呈高→低的变化;单放组和复合伤组G2+M期比例呈低→高的变化趋势,其DNA含量的变化具有单放组和单烧组的特点。结论放烧复合伤骨髓基质细胞的细胞周期比例、DNA含量和形态的改变可能是导致放烧复合伤造血微环境损伤的物质基础  相似文献   

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