间充质干细胞体外对ITP患者CD4+CD25+T细胞影响

目的:体外观察间充质干细胞(MSCs)对免疫性血小板减少症(ITP)患者CD4+ CD25+T细胞比例的影响.方法:采用Ficoll分离骨髓单个核细胞,通过体外培养,扩增出MSCs,通过Ficoll分离法和尼龙棉柱法获取正常人及ITP患者外周血T淋巴细胞,并应用流式细胞术检测T细胞中CD4+ CD25+T细胞比例;MSCs经丝裂霉素MMC处理后按不同数量(2×103、1×104、5×104个细胞/孔)接种培养板作为基底层细胞,然后分别接种体外分离纯化的异体ITP及正常人T淋巴细胞,于2、4、6天后各自收集T淋巴细胞及培养上清,用流式细胞术检测接种于骨髓MSCs的ITP患者CD4+ CD25+T细胞比例.结果:ITP患者外周血CD4+ CD25+T细胞数量及CD4+ CD25+/CD4+比值均明显低于正常对照组(P＜0.05);在PHA作用下,数量＞1×104的骨髓MSCs与T淋巴细胞共培养4天后,与正常对照组相比,MSCs可显著上调ITP患者及正常人T淋巴细胞中CD4+ CD25+T淋巴细胞比例及CD4+ CD25 +/CD4+比值(P＜0.05),且随MSCs量的增加,作用增强(P＜0.05).体外骨髓MSCs对ITP患者CD4+ CD25+T淋巴细胞具有上调作用,以上这种机制可使ITP患者的细胞因子及CD4+ CD25+T淋巴细胞逐渐接近于正常人但仍达不到正常人水平(P＜0.05).结论:MSCs在体外可能通过上调CD4+ CD25+调节性T细胞,进而诱导ITP患者免疫耐受形成.     

慢性乙型肝炎患者外周血调节性T细胞频率分布及功能标记的研究

目的探讨调节性T细胞（treg）细胞及功能标记在慢性乙型肝炎患者发病过程中的变化及其与疾病进展的关系。方法人组20例健康对照组、53例慢性乙型肝炎（CHB）组、24例乙肝肝硬化（LC）组患者,采用流式细胞仪检测CD4＋CD25＋Fox3＋细胞、CD4＋CD25＋CD127^low细胞、CD39＋Treg细胞、CTLA-4＋Treg细胞频率,同时检测患者临床指标。结果健康对照组、CHB组及LC组的treg细胞频率、CD4＋CD25＋CD127^low细胞频率、CI）39＋treg细胞频率差异均有统计学意义（P均〈0．01）。CHB中重度组treg细胞频率、CD4＋CD25＋CD127^low细胞频率、CD39＋treg细胞频率与轻度组间存在差异（P〈0．05,P〈0．05,P〈0．01）。CHB组内CD4＋CD25＋Foxp3＋细胞频率与ALT呈正相关（r=0．289,P〈0．05）,CD39＋treg细胞频率与ALT、AST均呈正相关（r=0．275,P〈0．05;r=0．302,P〈0．05）,CD4＋CD25＋Foxp3＋细胞频率与CD4＋CD25＋CD127^low细胞频率呈显著正相关（r=0．478,P〈0．01）。结论treg细胞频率及其功能标记频率在慢性乙型肝炎疾病进程中存在变化并与肝脏功能变化密切相关。CD39＋treg细胞可能是一群功能性的treg细胞,CD39是反应treg细胞功能较灵敏的标记。CD4＋CD25＋CD127^low细胞频率一定程度上可以代表treg细胞频率。     

趋化因子受体CCR5、CCR7、CXCR3和CXCR6在丙肝患者肝内及外周血CD4+ T淋巴细胞上的表达及其意义

目的比较趋化因子受体CCR5、CCR7、CXCR3和CXCR6在丙肝患者肝内和外周血CD4^＋T淋巴细胞表面表达水平及其意义,同时进一步了解其与肝脏组织学炎症反应的关系.方法采用荧光标记抗趋化因子受体的单克隆抗体对肝内及外周血中CD4^＋T淋巴细胞表面的趋化因子受体进行染色后,采用9色11参数流式细胞仪LSRⅡ进行检测分析.结果（1）肝内CCR5^＋、CXCR3^＋或/和CXCR6^＋的CD4^＋T淋巴细胞频数高于外周血（P＜0.001）,而CCR7^＋CD4^＋T淋巴细胞频数低于外周血（P＜0.001）;（2）肝内CCR5^＋或CXCR6^＋的活性（CD38^＋）CD4^＋T淋巴细胞频数高于外周血（P＜0.05）;（3）肝内表达2种或2种以上趋化因子受体CCR5、CXCR3和CXCR6的CD4^＋T淋巴细胞频数明显高于外周血（P＜0.001）,而不表达或仅表达一种上述趋化因子受体CD4^＋T淋巴细胞频数明显低于外周血（P＜0.001）;（3）CCR5和CXCR6在肝内CD4^＋T淋巴细胞表面的表达有中等度相关;（4）肝内组织学炎症明显组表达趋化因子受体CCR5、CXCR3或CXCR6的CD4^＋T淋巴细胞频数高于炎症轻微组.结论趋化因子受体CCR5、CXCR3和CXCR6可能介导CD4^＋T淋巴细胞向肝内迁徙定植,并参与肝脏炎症的病理免疫学反应过程.     

HO-1修饰的大鼠骨髓间充质干细胞在体外对淋巴细胞的影响北大核心CSCD

目的：探讨血红素加氧酶1（HO-1）修饰的大鼠骨髓间充质干细胞（BM MSCs）在体外对淋巴细胞的免疫调节作用。方法体外分离培养和鉴定BM MSCs ,用载有HO-1基因的重组腺病毒载体进行感染,形成HO-1/BM MSCs,与大鼠脾淋巴细胞共培养。 MTT法检测淋巴细胞的增殖活性,碘化丙啶染色流式细胞术分析细胞周期的分布情况,ELISA法检测细胞因子含量,流式细胞仪分析T淋巴细胞CD25、CD71的表达。结果 HO-1/BM MSCs参与共培养的淋巴细胞的增殖活性和细胞周期进程均被抑制、促炎因子（ IL-2、TNF-α和IFN-γ）的分泌量降低、抗炎因子（ IL-10）的分泌量升高、T淋巴细胞CD25和CD71的表达降低,与BM MSCs组相比差异有统计学意义。结论 HO-1/BM MSCs较BM MSCs能够更好地发挥对淋巴细胞的免疫调节作用。     

慢性HBV感染者调节性T细胞水平及Foxp3与CD127表达关系的研究

目的 探讨慢性HBV感染者外周血中CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞（RegulatoryT,Treg）的水平,并研究其两种细胞标志--CD127分子的低表达与Foxp3转录因子表达之间的关系.方法 采集34例免疫耐受期、26例免疫清除期和31例非活动或低（非）复制期慢性HBV感染者的外周全血,用流式细胞术分析CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋CD127^（low）T细胞的频率.结果 在慢性HBV感染者外周血中,免疫耐受组CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋CD127^（low）T细胞的频率均比非活动或低（非）复制组高（Z=-2.693,P=0.007和t=3.251,P=0.002）;且病毒阳性组（免疫耐受组＋免疫清除组）比非活动或低（非）复制组高（t=2.266,P=0.026和t=3.208,P=0.002）;ALT异常组（免疫清除组）与ALT正常组（免疫耐受组＋非活动或低（非）复制组）之间的比较差异无统计学意义（P〉0.05）.91例病例外周血中CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋CD127^（low）T细胞之间的表达有一致性,但两者频率的差异有统计学意义（Z=-4.718,P〈0.001）.结论 调节性T细胞在慢性HBV感染者病毒高复制组中明显升高.CD4^＋CD25^＋T细胞中CD127分子的低表达与Foxp3转录因子的表达有一致性,但前者代表Treg的频率明显高于后者.     

CD4＋CD25＋CD127^lowTregs及TGF-β在多发性骨髓瘤患者外周血的表达分析

目的：初步探讨CD4＋CD25＋/highCD127lowT调节性T细胞（Tregs）及TGF-β在不同病程阶段多发性骨髓瘤（MM）患者外周血中的表达水平,并研究患者血清TGF-β水平是否与CD4＋CD25＋/highCD127lowTregs具有相关性。方法：流式细胞术（FCM）检测50例MM患者及30例健康志愿者外周静脉血CD4＋CD25＋/highCD127lowTregs细胞的比例并分析比较。ELISA法定量检测血清TGF-β的表达水平。结果：（1）化疗后组CD4＋CD25＋CD127low、CD4＋CD25highCD127lowT细胞的比例均显高于初诊组及正常对照组;初诊组与正常对照组的CD4＋CD25＋CD127lowT细胞相比无统计学意义,但其CD4＋CD25highCD127lowT细胞明显高于正常对照组。（2）化疗后稳定期CD4＋CD25＋CD127lowT细胞与活动期没有差异,但其CD4＋CD25highCD127lowT细胞明显低于活动期。（3）MM各组TGF-β水平均较对照组明显升高,但各组比较无统计学意义。（4）TGF-β与CD4＋CD25＋CD127^low、CD4＋CD25highCD127lowT细胞的表达水平均不成相关性。结论：CD4＋CD25＋/highCD127low调节性T细胞MM患者外周血中比例明显升高,且化疗及疾病进展程度可能影响其在外周血的比例。TGF-β可能不是导致其比例增加的直接原因。     

乙型肝炎病毒感染者外周血CD4＋T细胞CD25-CD127-表达的检测及临床意义

目的 检测乙型肝炎病毒（ HBV）感染者外周血CD4＋T细胞表面CD25 - CD127 -的表达情况及临床意义.方法 用流式细胞术比较分析53例慢性乙肝患者、53例HBV携带者和26例正常对照人群CD4＋T细胞表面CD25 - CD127 -的表达情况,并对20例用干扰素治疗的HBV-DNA阳性慢性乙肝患者随访.结果 ①与正常对照组比较,慢性乙肝患者、HBV携带者CD4＋ CD25 -CD127 -T细胞均显著升高,两者比较有统计学差异（Q =4.559,P＜0.05;Q=6.230,P＜0.05）;②HBV- DNA阳性患者（n=77） CD4＋ CD25 - CD127 -T细胞显著低于HBV- DNA阴性患者（n=29）,两者比较有统计学意义（t =2.290,P=0.024）;③与治疗前比,慢性乙肝患者干扰素治疗12周后CD4＋CD25- CD127 -T细胞显著降低,两者比较差异有统计学意义（t =2.469,P=0.024）.结论 乙型肝炎病毒感染者外周血CD4＋ CD25 - CD127 -T细胞与病毒的感染和清除相关,外源性干扰素可降低CD4＋ CD25 - CD127 -T细胞.     

小鼠 B10细胞的分离、鉴定及功能特征北大核心CSCD

目的：评估小鼠不同组织中B10细胞的比例,分离B10细胞并鉴定其生物学功能,探讨其对效应性T细胞（ CD4＋CD25-T）及调节性T细胞（ Treg）的免疫调节机制。方法采用流式细胞仪检测小鼠不同组织来源B10细胞的表达以及脂多糖（ lipopolysaccharide ,LPS）对B10激活的影响;采用流式细胞分选术（ FACS）和免疫磁珠分选术（ MACS）分选B10细胞、CD4＋CD25-T 细胞和Treg;利用混合淋巴细胞培养实验观察B10对CFSE标记的CD4＋CD25-T细胞和CD4＋CD25＋T细胞增殖的调节作用及机制。结果（1）脾脏CD19＋CD5＋CD1dhigh B细胞表达为（3．95±0．79）％,与外周血、肠系膜淋巴结和外周淋巴结相比较表达最高,组间差异有统计学意义（P＜0．05）;脾脏CD19＋IL-10＋B细胞表达为（2．02±0．16）％,与外周血、肠系膜淋巴结和外周淋巴结相比较表达最高（P＜0．05）,且IL-10主要由CD1dhighCD5＋B细胞亚群分泌（P＜0．01）;（2） LPS联合乙酸佛波醇（PMA）、莫能菌素（monen-sin）和离子霉素（ionomycin）能活化B10细胞分泌IL-10。延长LPS的作用时间（48 h）能促进CD19＋CD5＋CD1dhigh B细胞高表达及IL-10分泌增加（P＜0．01）;（3） CD19＋CD5＋CD1dhigh B细胞在体外可抑制CD4＋CD25-T细胞增殖（P＜0．01）、促进CD4＋T细胞分泌IL-10（P＜0．01）,同时可促进Treg增殖（P＜0．01）。结论 B10细胞在小鼠脾脏高表达,通过Toll样受体（TLR）信号通路被激活。活化的B10细胞具有免疫抑制性,可抑制CD4＋CD25-T细胞增殖,促进Treg增殖,其可能免疫调节机制是IL-10的释放增加。因此B10细胞有望为治疗多种自身免疫性疾病提供一种全新的治疗方法。     

大鼠骨髓间充质干细胞与Sertoli细胞体外共培育的免疫负调作用

目的 探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）与Sertoli细胞（SCs）体外共培育时对免疫应答的调节作用,为两者联合应用于移植修复提供线索.方法 用密度梯度离心法分离SD大鼠脾脏单个核细胞（简称L）,羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记细胞后,将其加入按照不同的比例混合的BMSCs与SCs共培育体系,设立L细胞为对照组,L＋刀豆蛋白A（ConA）、BMSCs＋L＋ConA、SCs＋L＋ConA、BMSCs＋SCs＋L＋ConA四大组细胞为实验组.培养4 d,通过流式细胞术分析T淋巴细胞的增殖情况.结果 单个核细胞培养体系中加入ConA可以显著刺激T淋巴细胞增殖.BMSCs、SCs均可抑制淋巴细胞增殖,抑制作用随加入BMSCs和SCs的比例增加而增强,BMSCs和SCs混合培养后对淋巴细胞增殖抑制作用进一步增强,且在某些浓度时呈现协同性.结论 BMSCs与SCs体外共培育时可增强免疫抑制作用.     

CD4＋CD25＋调节性T细胞在胃癌患者外周血分布的临床意义和作用机制

目的：探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞在胃癌患者外周血分布的临床意义及其作用机制。方法流式细胞术分析不同TNM分期的胃癌患者和健康者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的比例。免疫磁珠分离胃癌患者和健康者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞,将CD4＋CD25＋调节性T细胞与淋巴细胞体外共培养, CCK8方法检测CD4＋CD25＋调节性T细胞对淋巴细胞的增殖能力的影响。 RT?PCR检测CD4＋CD25＋调节性T细胞特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达水平。结果胃癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的比例明显高于健康者,差异具有统计学意义（P＜0．05）。其中Ⅲ期和Ⅳ期胃癌患者外周血调节性T细胞的比例均明显高于Ⅰ?Ⅱ期胃癌患者,差异具有统计学意义（ P ＜0．05）。与健康者相比,胃癌患者 CD4＋CD25＋调节性T细胞能明显抑制淋巴细胞增殖,其差异具有统计学意义（ P＜0．05）,而且Ⅲ期和Ⅳ期胃癌患者CD4＋CD25＋调节性T细胞抑制淋巴细胞增殖的能力明显强于Ⅰ?Ⅱ期胃癌患者,其差异具有统计学意义（P＜0．05）。进一步分析显示胃癌患者CD4＋CD25＋调节性T细胞Foxp3 mRNA的表达水平均明显高于健康者,差异具有统计学意义（P＜0．05）。其中Ⅲ期和Ⅳ期胃癌患者Foxp3 mRNA的表达水平明显高于Ⅰ?Ⅱ期胃癌患者,其差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论调节性T细胞可能通过增强Foxp3 mRNA表达发挥免疫抑制作用,促进胃癌的发生发展。通过监测外周血调节性T细胞有利于评估胃癌患者免疫功能和病情进展。     

重型乙型肝炎前期患者外周血免疫活性细胞的特点

目的 分析重型乙型肝炎前期(以下简称重肝前期)患者外周血免疫活性细胞的特点.方法 选取重肝前期患者48例,慢性乙型肝炎患者35例,健康志愿者20例,采用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞CD3+、CD3+/CD4+、CD3 +/CD8+、CD4 +/CD25 +/CD45+等亚群表达百分比,计算各淋巴细胞亚群绝对值,并进行统计学分析.结果 与慢性乙肝组及健康对照组相比,重肝前期组CD3+T细胞、CD8+T细胞、CD4+ CD25+调节性T细胞(Tregs)的绝对值均明显下降(P＜0.01或P＜0.05);重肝前期组CD4+T细胞绝对值与慢性乙肝组差异无统计学意义(P＞0.05),但CD4+T细胞百分率明显高于慢性乙肝组(P＜0.05).此外,CD4 +/CD8+比值各组间存在显著差异,重肝前期组显著高于慢性乙肝组和健康对照组(P＜0.01或P＜0.05).结论 重型乙型肝炎前期存在一定程度的细胞免疫功能紊乱,其特征为CD4+T细胞占优势,CD8+T细胞和CD4+ CD25+ Tregs绝对值下降.     

基因修饰树突状细胞诱导前列腺癌患者外周血T细胞亚群重排的研究

目的探讨以腺相关病毒（AAV）为载体,前列腺特异性抗原（PSA）基因转染树突状细胞（DC）诱导前列腺癌患者外周血T细胞亚群变化特点及临床意义。方法抽取30例前列腺癌患者外周血,采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,以rAAV/PSA感染DC前体细胞,采用系列细胞因子诱导DC前体细胞成熟。第6天收集成熟DC并与T细胞按比例混合培养,诱导细胞毒性T淋巴细胞（CTL）。分别于DC与T细胞混合培养前后应用流式细胞术分析外周血T细胞亚群及调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg）的表达水平。结果 PSA基因转染DC刺激T淋巴细胞爆发增殖,与培养前比较,混合培养6d后CD8^＋、CD8^＋CD69^＋、CD8^＋CD28^＋T细胞的比例和CD8^＋/CD4^＋比值均明显增高,差异有统计学意义（P〈0.01）;而CD8＋CD28-T细胞和Treg细胞的比例均显著降低,差异有统计学意义（P〈0.01）。CD4^＋T细胞比例较前略有升高,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 PSA基因转染DC能够有效地激活CD8＋抗原特异性CTL,下调免疫抑制性T细胞,提高患者的细胞免疫功能,为前列腺癌的免疫治疗提供新的有效策略。     

2型糖尿病合并肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群分析及临床护理对策

目的 探讨2型糖尿病合并肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群的特点,为临床护理提供证据支持.方法 利用流式细胞术对41例2型糖尿病合并肺结核患者（DM＋ LTB组）及60例单纯肺结核患者（LTB组）的外周血淋巴细胞亚群进行检测,并以健康成年人为对照组,对检测结果进行统计学分析.结果 DM＋ LTB组和LTB组的外周血淋巴细胞亚群绝对值均显著低于正常对照组（P＜0.05）,DM＋ LTB组CD3＋CD4＋/CD3＋CD8＋比值显著高于LTB组（P＜0.05）.结论 2型糖尿病合并肺结核患者存在比较严重的细胞免疫功能紊乱.护理人员应从加强健康教育、心理及饮食等方面加强护理,提高患者的机体免疫力.     

T淋巴细胞亚群检测在呼吸系统性疾病的诊断价值

目的：探讨T淋巴细胞亚群检测在呼吸系统性疾病的诊断价值。方法：采用流式细胞术对呼吸系统性疾病和正常健康人体内淋巴细胞亚群检测,并通过检测数据分析其淋巴细胞亚群功能变化。结果：①肺结核组、肺炎组和肺癌组的CD3^＋、CD3^＋CD4^＋及T4／T8比值水平均明显低于正常对照组,差异均有极显著变化（P〈0．01）,而CD3^＋CD8^＋水平明显高于正常对照组,差异有极显著变化（P〈0．01）;②肺结核组、肺炎组与肺癌组T淋巴细胞亚群比较：CD3^＋、CD3^＋CD4^＋及T4／T8比值水平均明显高于肺癌组,差异均有极显著变化（P〈0．01）,而CD3^＋CD8^＋水平明显低于肺癌组,差异有极显著变化（P〈0．01）;③肺结核组与肺炎组比较：CD3^＋、CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋及T4／T8比值水平无显著性差异（P〉0．05）。结论：T淋巴细胞亚群参与了呼吸系统性疾病（肺结核、肺炎和肺癌）的病理过程,在其呼吸系统性疾病的发生、发展中起着十分重要的作用。因此,监测呼吸系统性疾病患者外周血T淋巴细胞亚群,可对肺结核和肺炎患者的疗效作出评估和免疫增强提供理论依据,对肺癌患者的辅助免疫治疗支持参照。     

小鼠CD4＋ CD25＋免疫调节性T细胞体外扩增及功能检测的研究

目的 探讨小鼠CD4＋ CD25＋调节性T细胞（Tregs）的体外扩增方法及扩增后Tregs的免疫功能.方法 利用免疫磁珠法分离小鼠Tregs;采用anti-CD3mAb＋rIL-2和Allo-APC＋rIL-2两种方法进行体外扩增,通过TRANSWELL培养系统、细胞因子表达及CFSE染色标记等方法检测Tregs免疫抑制作用的机制.结果 体外分离的Tregs纯度为89.5％;活细胞率约为98％.Tregs扩增的倍数在两组各时间点差异无统计学意义.扩增后CD4＋ CD25＋T细胞、CD4＋T细胞和CD4＋ CD25-T细胞的每分钟计数（CPM）分别为1 470、12 700和14 300.混合淋巴细胞反应（MLR）中当CD4＋：CD25＋T细胞的比例为1∶1时,抑制率为79％,比例为8∶1时,抑制率为33％.CFSE标记后,进入分裂周期的CD4＋T细胞的百分比在未加入CD4＋ CD25＋T细胞组为83.7％,加入CD4＋ CD25＋T细胞组为31.7％,差异具有统计学意义（P=0.0006）.CD4＋ CD25＋T细胞对CD4＋T细胞的增殖抑制率在Transwell和Non-Transwell的培养系统中分别为＜5％和95％.Transwell培养组中IL-2含量高于Non-Transwell组,差异具有统计学意义[Transwell培养组为（158.33±2.08）pg/mL,Non-Transwell组为（23.00±2.00） pg/mL,P ＜0.0001].结论 采用免疫磁珠法分离小鼠Tregs可行,Tregs可有效扩增;Tregs的作用机制为抑制CD4＋T细胞的增殖及抑制CD4＋T细胞分泌IL-2;其抑制作用需要细胞-细胞间接触;体外扩增后的Tregs仍具有免疫特性,其体外免疫抑制作用增强.     

输血相关急性肺损伤患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T淋巴细胞变化的临床意义

目的检测输血相关急性肺损伤（TRALI）患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T淋巴细胞（Treg）的计数及其功能基因又头框蛋白3（Foxp3）mRNA的表达水平,以及探讨其与疾病预后的关系。方法收集2008年6月至2011年11月期间健康体检者（对照组,n=30）和重症监护病房收治的TRALI患者[TRALI组,n=26,TRALI组按预后又分为死亡组（n=5）和存活组（n=21）]外周抗凝血,采用流式细胞术分析各组T细胞亚群。采用四色流式细胞术以Foxp3-FITC／CD25-PE／CD4-PerCP／CD3-PC7抗体组合检测各组受试者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg的计数,比较死亡组和存活组患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg的水平。实时荧光定量PCR技术检测特异性转录因子Foxp3mRNA的表达水平,并分析患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg的比例与Foxp3mRNA的表达水平的关系。结果TRALI患者与对照组健康人间CD3＋T细胞、CD3＋CD4＋T细胞计数的差异无统计学意义,而CD3＋CD8＋T细胞则较对照组增加（P〈0．05）,CD4＋／CD8＋比值降低（P〈0．05）。死亡组CD3＋CD8＋T细胞比例高于存活组（P〈0．05）,C133＋T细胞、CD3＋CD4＋T细胞比例和CD4＋／CD8＋比值则低于存活组（均P〈0．05）。TRALI患者外周血CD4＋CD2.5high Foxp3＋Treg计数为（8．86±3．14）％,明显高于健康对照组（5．67±2．43）％（P〈0．05）。TRALI死亡组患者外周血CD4＋CD2shighFoxp3＋Treg计数为（11．23±3．79）％,显著高于存活组患者（7．69±3．21）％（P〈0．05）。TRALI患者外周血Foxp3mRNA的表达水平为（3．77±2．73）×10^5拷贝/ug,显著高于对照组（0．43±0．21）×10^5拷贝／μg（P〈0．05）。TRALI患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg计数与Foxp3mRNA的表达水平呈正相关（r=0．5131,P〈0．05）。结论TRAM患者外周血CD4＋CD.5highFoxp3＋Treg和Foxp3mRNA的变化可能是导致TRALI疾病发展的关键因素之一,与?     

nTreg与基因1型CHC患者抗病毒疗效的关系

目的研究基因1型慢性丙型肝炎（CHC）患者治疗过程中外周血自然调节性T细胞（nTreg）的动态变化及其与抗病毒疗效的关系。方法32例初治的CHC患者,均为基因1型,治疗方案为干扰素联合利巴韦林治疗48周。分别在治疗前、治疗过程中2、4、8、12、24、48周以及治疗结束后12或24周采集外周血标本。用流式的方法检测外周血单个核细胞（PBMC）中nTreg的比率。COBASAmpliprep／COBAS TaqmanHCV试剂盒检测HCV—RNA定量。结果24例患者治疗12周时HCV—RNA转阴,并且随访至治疗结束后24周仍阴性,达到持续病毒学应答（SVR）;8例患者治疗12周时病毒量未转阴,无应答（NVR）,24周时终止治疗。应答组和无应答组治疗前外周血中nTreg的比率差异无统计学意义（P〉0．05）。应答组治疗过程中2、4、12、24、48周及治疗结束后各个时间点PBMC中nTreg水平分别为（0．91±0．22）％、（1．31±0．29）％、（1．78±0．43）％、（1．92±0．44）％、（1．90±0．37）％、（1．14±0．35）％;在治疗2周（P〈0．001）及治疗结束后（P〈0．001）下降明显。无应答组治疗过程中2、4、12、24周及治疗结束后各时间点PBMC中nTreg水平分别为（1．21±0．15）％、（1．24±0．18）％、（1．42±0．11）％、（1．45±0．11）％、（1．14±0．10）％;Treg水平在治疗4周时缓慢上升（P=O．005）,在治疗结束后显著下降,与治疗24周比较差异有统计学意义（P〈0．001）。结论CHC患者外周血nTreg水平与干扰素／N巴韦林抗病毒治疗的疗效密切相关,抗病毒治疗2周时nTreg水平的下降可以预测其疗效。提示nTreg可能在机体清除病毒的早期过程中起着重要作用。     

胰高血糖素样肽-2对急性胰腺炎小鼠肠黏膜免疫屏障的影响

目的：探讨胰高血糖素样肽-2（GLP-2）对重症急性胰腺炎（SAP）小鼠肠黏膜免疫屏障的影响。方法健康雌性BALB/C小鼠60只,按数字表法随机分成3组：正常对照组（ NC组）、SAP组和GLP-2治疗组（ GLP组）,每组20只。 SAP组、GLP-2组采用腹腔分次注射大剂量L-精氨酸方法制备SAP模型。观察SAP小鼠血和腹水淀粉酶及肠黏膜CD3＋、CD4＋、CD8＋淋巴细胞和IgA λ链的改变,应用GLP-2治疗后观察上述指标的改变。结果 SAP 组小鼠血和腹水淀粉酶值分别为（1260.93±58.99）U/L和（389.33±30.31） U/L,均高于 NC组和 GLP-2组,差异均有统计学意义（P值均〈0.01）。免疫组化法检测SAP组小鼠肠黏膜CD3＋、CD4＋、CD8＋淋巴细胞和IgA λ链的表达分别为（19.57±6.56）个/HP、（5.49±2.97）个/HP、（2.96±1.22）个/HP、（6.20±3.22）个/HP,低于NC组和GLP-2组,差异均有统计学意义（P值均〈0.05）;但GLP-2治疗组与NC组比较,CD4＋淋巴细胞和IgAλ链的表达差异均无统计学意义（P值均〉0.05）。结论 GLP-2能够提高SAP小鼠肠黏膜CD3＋、CD4＋、CD8＋淋巴细胞和IgA λ链的表达,对肠黏膜免疫屏障具有一定的保护作用。     

小柴胡汤对免疫抑制小鼠淋巴细胞共刺激分子的免疫调节作用

目的探讨小柴胡汤对免疫抑制小鼠外周血淋巴细胞共刺激分子的调节作用。方法每日给予正常小鼠及肌肉注射环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠小柴胡汤25g/kg体重,连续10d。并设免疫抑制模型及正常对照小鼠。于实验第11天,收集所有小鼠血样,分离淋巴细胞,采用流式细胞术检测实验小鼠外周血淋巴细胞CD28、CTLA-4、CD80和CD86的表达,并与对照组比较。结果与正常对照小鼠比较,免疫抑制小鼠淋巴细胞亚群发生明显变化、CD4/CD8比例明显倒置（P〈0.01）,淋巴细胞CD28、CTLA-4、CD80和CD86的表达明显降低（P〈0.01）。与正常对照小鼠相比较,给予小柴胡汤的正常小鼠的淋巴细胞亚群及淋巴细胞共刺激分子的表达差异无统计学意义（P〉0.05）。与免疫抑制小鼠相比较,给予小柴胡汤的免疫抑制小鼠CD3＋细胞增加（P〈0.01）,CD3＋CD4＋细胞增加（P〈0.01）,CD3＋CD8＋细胞降低（P〈0.01）,CD4/CD8比例升高（P〈0.01）,CD28、CD86和CD80表达增加（P〈0.01）,而CTLA-4的表达无明显差异（P〉0.05）。结论小柴胡汤可能通过调节淋巴细胞表面协同刺激分子的表达进而调节免疫抑制小鼠的免疫功能。