bFGF在大鼠脑弥漫性轴索损伤中的脑保护作用

目的观察碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在大鼠脑弥漫性轴索损伤 (DAI)中的保护作用。方法选择健康雄性SD大鼠 40只 ,随机分为正常对照组 ( 5只 )、DAI损伤组 ( 2 5只 )和bFGF组 ( 5只 )、DAI生理盐水组 ( 5只 ) ,DAI损伤组大鼠按伤后存活时间又分为第 6h、12h、2 4h、72h及 7d组。用免疫组织化学方法检测大鼠脑皮层bFGF的表达 ,并分析其表达水平变化特点。bFGF治疗组处理同DAI损伤组 ,在脑损伤前 2h向右侧脑室穿刺注射bFGF 10 μl。 结果DAI后 6h出现bFGF表达 ,12h表达增加 ,72h达高峰 ,7d后仍维持较高水平 ,DAI损伤组 72h组与其他各时限比较有高度显著性差异 (P <0 0 1)。HE染色结果显示 ,DAI损伤组脑皮层神经元数量明显减少 ,与DAI生理盐水组相比 ,各时间点bFGF治疗组损伤的神经元数量减少 (P <0 0 5 )。结论bFGF在大鼠脑弥漫性轴索损伤中有明显的脑保护作用。     

大鼠脑挫裂伤后c-jun和c-fos基因快速反应的特点

背景:目前关于c-jun和c-fos基因表达的重要性已逐渐被人们认识,而关于脑挫伤后两种基因表达的特点报道较少。目的:探讨脑挫裂伤后c-jun和c-fos基因表达的特点。设计:随机对照实验研究。地点和材料:实验地点:原张家口医学院实验中心电镜室,成年Wistar大鼠45只,体质量200～310g。干预:将45只大鼠随机分为模型组、假手术组及正常对照组,正常组不做任何处理,假手术组开颅窗不进行打击,模型组大鼠以自由落体法复制脑挫伤模型,伤后30min,1,2,4,8,24,72h杀死大鼠取脑组织,石蜡切片,用PV6000免疫组织化学染色。主要观察指标:c-jun和c-fos基因蛋白表达的异同点。结果:正常对照组和假手术组c-fos无阳性表达,而c-jun呈弱阳性。模型组c-fos阳性神经元分布在伤灶周围区皮质1.0～2.0mm和同侧海马;c-jun阳性神经元在伤侧皮质和海马广泛分布,相邻脑片c-jun阳性细胞着色深,尤其在海马中c-jun阳性细胞密集而核深,72hc-fos基本上已无表达,而c-jun仍有较明显的阳性神经元。结论:脑挫伤后,同侧脑组织c-jun基因表达较c-fos更强烈、更广泛和表达时间更长。     

参麦注射液对缺血性脑损伤大鼠海马c-fos基因表达的影响

背景c-fos基因为神经元细胞最常见的基因,其表达情况可作为受损神经细胞活性和反映性的标志物之一.目的从分子水平探讨缺血性脑损伤大鼠海马c-fos基因表达情况和参麦注射液的保护作用.设计随机对照实验.单位泸州医学院组织学与胚胎学教研室.材料实验于2002-01/03在泸州医学院组织学与胚胎学实验室完成.选择雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组、缺血组和治疗组,每组10只.方法缺血组和治疗组大鼠夹闭双侧颈总动脉30 min后再灌注1 h,建立缺血性脑损伤模型;治疗组在缺血30 min前腹腔注射参麦注射液2 mL/kg(由红参、麦冬等中药组成);缺血组不给药;对照组做假手术,不夹闭颈总动脉,也不给药.取大鼠脑海马组织制备石蜡切片,每只大鼠取1张切片,每组共随机统计100个神经元胞核.根据神经元胞核着色情况观察各组大鼠海马神经元c-fos基因的表达(+++为着色深,呈深棕色.++为着色较深,呈棕色者.+为着色较浅,呈浅棕色者.-为未着色).主要观察指标各组大鼠海马神经元c-fos表达.结果30只大鼠全部进入结果分析.缺血组大鼠海马内神经元c-fos基因的表达明显多于对照组[+++24,7个/视野,P＜0.05],而治疗组明显少于缺血组[+++13,24个/视野,P＜0.05].结论参麦注射液可减少缺血性脑损伤大鼠海马神经元c-fos基因的表达,具有对缺血性脑损伤组织神经细胞的保护作用.     

大鼠脑挫裂伤后c-jun和c-fos基因快速反应的特点

背景：目前关于c-jun和c-fos基因表达的重要性已逐渐被人们认识，而关于脑挫伤后两种基因表达的特点报道较少。目的：探讨脑挫裂伤后c-jun和c-fos基因表达的特点。设计：随机对照实验研究。地点和材料：实验地点：原张家口医学院实验中心电镜室，成年Wistar大鼠45只，体质量200-310g。干预：将45只大鼠随机分为模型组、假手术组及正常对照组，正常组不做任何处理，假手术组开颅窗不进行打击，模型组大鼠以自由落体法复制脑挫伤模型，伤后30min，1，2，4，8，24，72h杀死大鼠取脑组织，石蜡切片，用PV6000免疫组织化学染色。主要观察指标：c-jun和c-fos基因蛋白表达的异同点。结果：正常对照组和假手术组c-fos无阳性表达，而c-jun呈弱阳性。模型组c-fos阳性神经元分布在伤灶周围区皮质1．0-2．0mm和同侧海马；c-jun阳性神经元在伤侧皮质和海马广泛分布，相邻脑片c-jun阳性细胞着色深，尤其在海马中c-jun阳性细胞密集而核深，72h c-fos基本上已无表达，而c-jun仍有较明显的阳性神经元。结论：脑挫伤后，同侧脑组织c-jun基因表达较c-fos更强烈、更广泛和表达时间更长。     

弥漫性脑损伤大鼠Homer 1蛋白的表达规律

目的：观察在大鼠弥漫性脑损伤模型基础上Homerl蛋白分子的表达规律。方法：实验于2004-06／10在第四军医大学西京医院神经外科研究所实验室进行。取SD大鼠105只，随机分为正常组、假手术组及损伤组各35只，每组据标本采集时间又划分为30min和1，6，12，24，72，168h等7个亚组，每组5只。正常组不干预，损伤组制造大鼠弥漫性脑损伤模型，假手术组仅不予以自由落体打击，其余处理同损伤组。分别在相应时间点取大鼠主要脑区及核团进行Hcliner 1蛋白分子的免疫组织化学的检测。结果：102只大鼠进入结果分析。损伤组神经元Homer 1a蛋白免疫组化染色呈阳性，自伤后30min起持续至伤后72h，阳性染色出现于神经元胞膜、胞质及突起处，正常及假手术组于神经元各部均未见阳性染色；而Homer 1b／c于正常组、假手术组及损伤组均可见阳性染色结果。结论：大鼠弥漫性脑损伤后Homer 1a蛋白的表达于损伤前后有显著变化，而Homer 1b／c于损伤前后无明显变化，提示Homer 1a蛋白分子参与了神经元损伤过程。     

实验性大鼠脑损伤后脑组织中肿瘤坏死因子α基因表达的变化

目的：观察闭合性脑损伤后脑组织肿瘤坏死因子αmRNA表达变化，探讨对脑组织的影响。方法：实验于2004—09／2005—03在郑州大学基础医学院人体解剖学教研室神经分子生物学实验室进行，选择SD大鼠72只，随机分为实验组66只和对照组6只，实验组采用Marmarou法制备闭合性颅脑损伤模型，对照组不做任何处理。实验组又分为脑损伤后30min，1，3，9，12h和1，2，3，4，5，6d 11个时间点，每个时间点6只。应用反转录多聚酶链反应检测脑损伤后不同时间点脑组织中肿瘤坏死因子αmRNA表达。结果：72只大鼠全部进入结果分析：对照组未见肿瘤坏死因子α表达。实验组损伤后30min及1h组与对照组无明显差别，9h-5d明显增加，12h-3d达到高峰，6d后开始下降。结论：大鼠闭合性脑损伤后脑组织肿瘤坏死因子dmRNA表达水平增加，是加重继发性脑损伤的重要囡素．     

实验性大鼠脑损伤后脑组织中肿瘤坏死因子α基因表达的变化

目的:观察闭合性脑损伤后脑组织肿瘤坏死因子αmRNA表达变化,探讨对脑组织的影响。方法:实验于2004-09/2005-03在郑州大学基础医学院人体解剖学教研室神经分子生物学实验室进行,选择SD大鼠72只,随机分为实验组66只和对照组6只,实验组采用Marmarou法制备闭合性颅脑损伤模型,对照组不做任何处理。实验组又分为脑损伤后30min,1,3,9,12和1,2,3,4,5,6d11个时间点,每个时间点6只。应用反转录多聚酶链反应检测脑损伤后不同时间点脑组织中肿瘤坏死因子αmRNA表达。结果:72只大鼠全部进入结果分析。对照组未见肿瘤坏死因子α表达实验组损伤后30min及1h组与对照组无明显差别,9h～5d明显增加,12h～3d达到高峰,6d后开始下降。结论:大鼠闭合性脑损伤后脑组织肿瘤坏死因子αmRNA表达水平增加,是加重继发性脑损伤的重要因素。     

弥漫性脑损伤大鼠Homer 1蛋白的表达规律

目的:观察在大鼠弥漫性脑损伤模型基础上Homer1蛋白分子的表达规律。方法:实验于2004-06/10在第四军医大学西京医院神经外科研究所实验室进行。取SD大鼠105只,随机分为正常组、假手术组及损伤组各35只,每组据标本采集时间又划分为30min和1,6,12,24,72,168h等7个亚组,每组5只。正常组不干预,损伤组制造大鼠弥漫性脑损伤模型,假手术组仅不予以自由落体打击,其余处理同损伤组。分别在相应时间点取大鼠主要脑区及核团进行Homer1蛋白分子的免疫组织化学的检测。结果:102只大鼠进入结果分析。损伤组神经元Homer1a蛋白免疫组化染色呈阳性,自伤后30min起持续至伤后72h,阳性染色出现于神经元胞膜、胞质及突起处,正常及假手术组于神经元各部均未见阳性染色;而Homer1b/c于正常组、假手术组及损伤组均可见阳性染色结果。结论:大鼠弥漫性脑损伤后Homer1a蛋白的表达于损伤前后有显著变化,而Homer1b/c于损伤前后无明显变化,提示Homer1a蛋白分子参与了神经元损伤过程。     

参麦注射液对缺血性脑损伤大鼠海马c-fos基因表达的影响

背景：c-fos基因为神经元细胞最常见的基因，其表达情况可作为受损神经细胞活性和反映性的标志物之一。目的：从分子水平探讨缺血性脑损伤大鼠海马c-fos基因表达情况和参麦注射液的保护作用。设计：随机对照实验。单位：泸州医学院组织学与胚胎学教研室。材料：实验于2002—01／03在泸州医学院组织学与胚胎学实验室完成。选择雄性Wistar大鼠30只，随机分为对照组、缺血组和治疗组，每组10只。方法：缺血组和治疗组大鼠夹闭双侧颈总动脉30min后再灌注1h，建立缺血性脑损伤模型；治疗组在缺血30min前腹腔注射参麦注射液2mL／kg（由红参、麦冬等中药组成）；缺血组不给药；对照组做假手术，不夹闭颈总动脉，也不给药。取大鼠脑海马组织制备石蜡切片，每只大鼠取1张切片，每组共随机统计100个神经元胞核。根据神经元胞核着色情况观察各组大鼠海马神经元c-for基因的表达（＋＋＋为着色深，呈深棕色。＋＋为着色较深，呈棕色者。＋为着色较浅，呈浅棕色者。一为未着色）。主要观察指标：各组大鼠海马神经元c-fos表达。结果：30只大鼠全部进入结果分析。缺血组大鼠海马内神经元c-fos基因的表达明显多于对照组[＋＋＋：24，7个／视野，P〈0．05]，而治疗组明显少于缺血组[＋＋＋：13，24个／视野，P〈0．05]。结论：参麦注射液可减少缺血性脑损伤人鼠海马神经元c-fos基因的表达，具有对缺血性脑损伤组织神经细胞的保护作用。     

脑损伤大鼠皮质神经细胞凋亡过程中细胞外调节激酶通路的作用

目的:细胞外调节激酶通路在凋亡信号转导中具有重要作用,观察细胞外调节激酶信号转导通路在颅脑损伤中的作用。方法:实验于2004-09/2006-01在华北煤炭医学院中心实验室完成。选用SD大鼠70只,按随机数字表法分为2组,即对照组(n=28)和模型组(n=42),每组又分为伤后10min,30min,3h,6h,24h,48h和72h7个时相点,对照组每个时相点4只大鼠,模型组每个时相点6只大鼠。按照Mamarou方法建立大鼠重型弥漫性颅脑损伤模型,在不同时相点采用免疫组化、Western-blot法分别检测两组大鼠颅脑损伤后皮质细胞外调节激酶的表达情况,另外分别应用原位杂交方法、原位末端标记法检测半胱氨酸天冬氨酸酶3及凋亡细胞,并进行比较。结果:70只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①模型组大鼠皮质p-细胞外调节激酶1/2蛋白在伤后10min时已较对照组明显升高(P<0.05),逐渐增强,伤后6h达高峰,24h仍有大量表达,明显高于对照组(P<0.01),至伤后48h降至对照组水平(P>0.05)。②模型组大鼠皮质半胱氨酸天冬氨酸酶3mRNA杂交阳性信号表达在伤后3h开始升高,48h达高峰,72h仍明显高于对照组(P<0.01)。③模型组大鼠皮质伤后3h偶见原位末端标记阳性细胞,6h开始增加,明显高于对照组(P<0.01),48h达高峰。④p-细胞外调节激酶1/2蛋白与半胱氨酸天冬氨酸酶3mRNA及原位末端标记阳性细胞均主要分布于损伤中心区及其周围,在分布区域上呈现很大的相似性。结论:脑损伤时p-细胞外调节激酶1/2蛋白表达呈一种过度激活状态,而且与半胱氨酸天冬氨酸酶3mRNA及原位末端标记阳性细胞在分布区域上呈现很大的相似性,推测大鼠脑损伤后细胞外调节激酶通路的过度激活是导致神经细胞凋亡的作用途径之一。