抗原化抗体免疫学中的应用

抗体是肌体免疫系统中重要的免役分子,参与体液免役应答,是医学中重要诊断试剂、治疗、预防试剂。随着抗体结构深入研究及蛋白质工程的发展，各国学者试图以抗体为载体表达外源抗原表位，即抗体原化抗体。本文将简要介绍抗原体原化抗体的构建及其应用。     

抗体制备方法的改进

抗体是机体免疫系统受抗原物质刺激后,B淋巴细胞被活化、增殖和分泌为浆细胞,由浆细胞合成并分泌一类具有与抗原发生特异结合活性的球蛋白.抗体存在于血清内,具有抗菌、抗感染、增强机体免疫力等功能.抗体是人体内具有重要防御作用的物质,在免疫学实验教学和科研中常用的生物制品、我们教研室改进了常规制备抗体的方法,采用厂对家免进行静脉和皮下交替注射抗原的方法,而且抗原总量相对减少,使抗体效价比原来增加5倍多.     

噬菌体抗体库几种筛选方法的比较

目的：对多种不同的噬菌体抗体库筛选方法进行比较研究。方法：应用抗原固相化吸附筛选法,生物素化抗原液相筛选法和解离速率筛选法对半合成噬菌体抗体库或轻链替换库进行抗角蛋白噬菌体抗体的筛选,比较各自的筛选效率和优缺点。结果：3种方法筛选抗角蛋白抗体均获成功,抗原固相化吸附筛选法效果可靠,所获抗体特异性高但抗原消耗量大,生物素化抗原液相筛选法方法敏感且节省抗原,可以根据实验目的和抗体库性质灵活调节筛选体系,其不足是筛选获得的克隆中容易出现非特异性结合的克隆,而解离速率选是选择性获得高亲和力抗体的有效手段,结论：不同的筛选策略各具优势,在实际应用中可根据不同的实验目的选择相应的筛选方法。     

Rh血型抗体引起的溶血性输血反应11例报告

为探讨Rh血型抗体的血清特异性及其输血反应中的临床意义。将患者血清与一组谱细胞在盐水、酶及抗球蛋白介质中反应，分析鉴定其抗体特异性。结果显示11例患者血清中含Rh血型系统特异性抗体。认为Rh血型抗体是引起溶血性输血反应的重要原因，根据我国汉族人的Rh抗原分布特点，应重视RhD抗原阳性而E抗原阴性患者的输血反应。     

大三阳、小三阳的演变

幼儿感染乙肝病毒后，病毒在肝细胞中复制增殖，血清中则可检出与乙肝病毒感染相关的各种抗原抗体，常规可检出：①表面抗原（HBsAg）；②表面抗体（HB-sAb）；③E抗原（HBeAg）；④E抗体（HBe-Ab）；⑤核心抗体（HBcAb）。以上抗原抗体的检测，医学上称为HBV-M检查（俗称两对半检查），是检查有无乙肝病毒感染的主要指标，也是诊断乙型肝炎的重要依椐。[第一段]     

免疫组化在肿瘤临床的应用

<正> 免疫组化是组织化学吸收了免疫学的理论和技术发展起来的一门重要的方法学,是利用已知的特异性抗体和抗原能特异性结合的特点,通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂,如酶、金属离子、同位素等,显示一定的颜色,并借助显微镜,荧光显微镜或电子显微镜观察其颜色变化,从而在抗原抗体结合部位确定组织结构的一门新兴组化技术。     

生物素化HCV抗原的标记率、提纯纯度及活性检定

目的 建立生物素标记HCV抗原及质量检定方法，研制双抗原夹心检测HCV抗体试剂。方法 用长臂生物素标记修饰过的HCV抗原，采用Avidin亲和层析柱方法计算标记率，SDS-PAGE检测纯度，酶联免疫测定活性。结果 生物素化HCV抗原的标记率为99．15％，纯度96．02％，用于检测抗HCV国家参考品，符合标准要求。结论 生物素化HCV抗原可用于双抗原夹心抗-HCV检测。     

细胞质自身抗原与自身免疫性疾病的研究进展

以往自身免疫性疾病（autoimmune disease，AID）的研究集中在核抗原的自身抗体即抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）上，但在过去10余年里，更多的注意力放在了细胞质抗原中，包括位于线粒体的抗体，位于高尔基体、中心体、核糖体、内体、蛋白酶体、溶酶体、外核体和GW小体的抗体。这些细胞质抗原定位于不同的亚细胞结构。具有多种功能。AID中发现抗细胞质抗原抗体阳性，但ANA却阴性，如60％的类风湿关节炎（RA）患者、5％系统性红斑狼疮（SLE）、20％系统性硬皮病（SSc）、25％干燥综合征（SjS）等患者。这些ANA阴性的AID患者血液中确实表达针对细胞内抗原的自身抗体，包括胞膜抗原和细胞质抗原如高尔基体、内体、溶酶体、蛋白酶体、GW体等。     

单克隆抗体酶标法检测日本血吸虫病人循环抗原及免疫复合物的研究

在血吸虫病的免疫诊断中，当今较为普遍采用的是检测血清抗体的方法．由于抗体在血吸虫病人治疗后仍可存留较长时间，不能确诊现症病人和用于考核疗效；而检测宿主体液中的寄生虫循环抗原可以反映活动性感染和评价药物治疗效果，所以它已成为血吸虫病诊断研究中的一个重要课题．近年已有不少采用克隆抗体或单克隆抗体（McAb）检测循环抗原的报道[1-4]，但由于循环抗原在血清中含量甚微和检测方法的限制，结果均不够理想；同时，因为循环抗原常与相应的抗体形成循环免疫复合物，而导致既往单纯检测游离循环抗原的实验方法检出率不高．为探索…     

乙型肝炎病毒前S1抗原和抗体检测及其临床意义

目的：探讨检测乙型肝炎病毒前S1抗原及其抗体的临床意义。方法：对648例乙型急性肝炎(包括乙型急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、肝癌、HBV携带者及其它非乙肝肝炎)进行前S1抗原和抗体检测，同时检测HBV标志物和HBV DNA。前S1抗原、抗体和HBV标志物检测用ELISA法，HBVDNA检测用PCR法。结果：在HBV复制标志物中，前S1抗原与HBeAg、HBV DNA具有明显的相关性，前S1抗原阳性与HBV DNA阳性的符合率为80．4％；前Sl抗原比HBeAg更敏感，在648例血清中，前S1抗原阳性检测率为60．2％，HBeAg阳性检测率为41．0%。在慢性肝炎、肝硬化和肝癌患者中前Sl抗原检出率分别达66．2％、76．6％和63．6％。结论：前S1抗原、抗体检测对乙肝的早期诊断、病毒复制和预后估计具有重要意义，在慢性HBV感染中，前S1蛋白持续阳性提示病情进展和恶化。     

抗精子抗体与免疫性不育

抗精子抗体（AsAb）是免疫性不育的重要原因之一，已经得到证实[1]。最近的研究表明在原因不明性不育中有10％～30％可能由AsAb引起[2]。随着免疫学技术的发展，人们对AsAb引起的免疫性不育进行了大量研究。本文就精子的抗原性、抗精子抗体的形成、作用机理、检测方法以及抗精子抗体引起的免疫性不育的治疗措施等方面近年来的研究情况加以综述。1精子的抗原性精子的抗原成分很复杂，随着免疫学的发展，越来越多的抗原被发现。目前已知人类精液含30余种抗原，其中精浆抗原达15种之多，精于抗原至少含有7种，某些抗原为精子和精浆所共有。…     

高强度炎症反应诱导关节软骨特异性瓜氨酸化抗原表达

目的 探讨关节软骨蛋白瓜氨酸表位的表达情况，以及瓜氨酸化表位对抗瓜氨酸蛋白抗体（ACPAs）的免疫应答的影响。方法 体外诱导实验：实验组加不同浓度梯度的脂多糖、热灭活细菌（大肠杆菌、金色葡萄球菌）或二型胶原（CII）特异性单克隆抗体等不同刺激物诱导体外培养关节软骨蛋白瓜氨酸化，等量PBS作为对照组，利用特异性结合瓜氨酸化表位的单克隆抗体ACC4（IgG1）进行免疫组织化学染色，ACC1（IgG2a）作为阳性对照，Hy2.15（IgG1）和L243（IgG2a）分别作为同型阴性对照，显微镜下观察瓜氨酸化蛋白表达；体内诱导实验：SD大鼠右膝关节内注射不同浓度脂多糖作为实验组，左膝关节内注射等量PBS为对照组，3 d后取膝关节组织，制成冰冻切片，利用上述抗体进行免疫组化染色，显微镜下观察瓜氨酸化蛋白表达；建立不同种系的胶原诱导性关节炎（CIA）小鼠模型，评价其疾病发生率和严重程度，同时收集小鼠血清与高滴度抗瓜氨酸化抗体的类风湿性关节炎患者血清，采用液相芯片技术检测小鼠及类风湿患者血清中抗瓜氨酸化蛋白抗体水平，并用免疫组织化学检测关节炎小鼠关节软骨瓜氨酸化蛋白的表达水平。结果 特异性结合瓜氨酸化CII 表位的ACC4抗体未能结合至经不同诱导的关节软骨组织；与健康对照组相比，ACC4抗体和含高滴度的抗瓜氨酸化蛋白抗体的类风湿性关节炎患者血清中的抗体均能结合至CIA小鼠关节炎症关节软骨周围的滑膜组织；成功构建不同种系小鼠类风湿性关节炎模型，其发病率和疾病严重程度无统计学差异（P>0.05）；液相芯片技术分析结果显示，小鼠血清中的抗瓜氨酸化抗体低表达或几乎不表达，但抗CII三螺旋结构多肽的抗体反应性较强。结论 轻度急性炎症反应不足以引起关节软骨蛋白瓜氨酸化，其特异性抗原表位的表达需要高强度的炎症反应。二型胶原诱导的小鼠关节炎模型中炎症关节软骨蛋白可表达瓜氨酸化抗原表位，但瓜氨酸化抗原表位的表达不足以引起小鼠体内抗瓜氨酸化抗体的免疫应答，其免疫应答需要更多的刺激信号来诱导。     

乙型肝炎问答

问:乙型肝炎病毒e抗原及e抗体阳性有何意义? 答:e抗原是乙型肝炎病毒,即丹氏颗粒的核心部分,与核心抗原互补存在于病毒的核心。e抗原存在于表面抗原阳性病人的血液中。抗原阳性,血中可以查到丹氏颗粒,核心抗体、表面抗原、DNA聚合酶等均随之转为阳性。因此,e抗原有很强的传染性,是乙型肝炎传染的重要指标。e抗原阳性,有助于确定病人、慢性携带者及孕妇传染性的     

11种分枝杆菌抗原用于肺结核和肺癌血清学鉴别诊断的效果比较

目的：对１１种分枝杆菌抗原制备物用于肺结核和肺癌血清学鉴别诊断的效果进行评估。方法：采用ＥＬＩＳＡ技术分别测定１０４例肺结核患者，１０４例肺癌患者和５２例正常人血清中抗１１种分枝杆菌抗原制备物的抗体水平。结果：淋巴分枝杆菌菌体超声抗原Ｂ６ｂ检测肺结核血清抗体阳性率为８２％，显著高于抗ＰＰＤ抗体的阳性率６２％（Ｐ＜０．０５）。Ｂ６ｂ抗原检测肺癌患者血清抗体的阳性率为１．９％，远低于抗ＰＰＤ抗体的阳性检出率１５．４％（Ｐ＜０．０１）。结论：分枝杆菌抗原制备物的菌种来源、细胞培养方法和抗原制备方法对其用于血清学鉴别诊断的灵敏度和特异性，都有重要影响。其中，Ｂ６ｂ抗原用于肺结核和肺癌的鉴别诊断效果最好     

影响免疫组化标准化染色的几个主要质控问题

免疫组化技术是利用已知的特异性抗体或抗原能特异性结合的特点,通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂通过借助显微镜的观察,从而在抗原抗体结合部位确定组织细胞结构的一门组化技术.     

伤寒杆菌O抗与H抗血清的制备及其应用

在微生物实验课教学中，肥大反应（widal stest）被列为本科临床专业学生实验的必修内容之一。近年来，由于抗生素的早期应用，临床随机采集的患者血清标本抗体含量很低，实验中很难出现典型的抗原抗体凝集现象，由于实验要用到抗血清，而抗血清又难以买到，价格也昂贵，为了节约经费，使用方便，我们尝试了自制抗血清，并且在实验教学中，通过制备抗血清进行抗原抗体之间免疫学反应，使学生获得有关抗原、抗体、抗原抗体问的免疫反应这些抽象的免疫学的基本知识，使教学获得了较好的效果。     

Rh血型抗体引起的溶血性输血反应11例报告

为探讨Rh血型抗体的血清特异性及其输血反应中的临床意义。将患者血清与一组谱细胞在盐水、酶及抗球蛋白介质中反应 ,分析鉴定其抗体特异性。结果显示 11例患者血清中含Rh血型系统特异性抗体。认为Rh血型抗体是引起溶血性输血反应的重要原因 ,根据我国汉族人的Rh抗原分布特点 ,应重视RhD抗原阳性而E抗原阴性患者的输血反应     

自然感染肾综合征出血热病毒大鼠组织中病毒抗原及抗体的定位研究

作者应用小鼠抗肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）单克隆抗体（ＭＡｂｓ）对经检测血清抗体阳性率为２８％的５０只大鼠组织中病毒抗原及抗体（内源性免疫球蛋白，ＥＩｇ）进行了研究。结果：５０只大鼠中，１５只仅检测到病毒抗原阳性，１０只仅检测到ＥＩｇ阳性，１８只抗原、ＥＩｇ均阳性，７只抗原、ＥＩｇ均阴性，其中的血清抗体阳性鼠分别有２，６，３，３只。总抗原阳性率为６６％，ＥＩｇ阳性率为５６％。病毒抗原分布于心肌细胞、肝细胞、脾淋巴细胞、肺支气管粘膜上皮及肺泡壁、肾小管上皮细胞、唾液腺闰管及腺上皮，以及肾上腺腺细胞，Ｇ２抗原多为弥漫性，ＮＰ抗原呈颗粒状包涵体或弥漫性阳性，其中１８只组织中可同时有抗体阳性。ＥＩｇ阳性见于各组织的血管内皮，特别是肾小球毛细血管，以及单核吞噬细胞系统；在心肌和肝脏有呈散在分布的心肌及肝细胞ＥＩｇ阳性。以上结果提示：血清抗体，组织中抗原和抗体三者间无明确一致关系，抗原的检测可能更好地反映动物的带毒状况；另外，大鼠组织中有抗原和免疫复合物存在，作者在本文对大鼠感染ＨＦＲＳＶ病变不严重，亦不引起发病进行了讨论。     

六项EB病毒指标联合检测在儿童传染性单核细胞增多症诊断及治疗中的临床应用

目的:本文旨在研究六项EB病毒指标联合检测在儿童传染性单核细胞增多症诊断及治疗中的临床应用。方法:该实验室收集了366份已确诊传染性单核细胞增多症的患者资料,其同时做了EB病毒六项指标检测,其分别为EB病毒衣壳抗原IgG抗体、EB病毒衣壳抗原IgM抗体、EB病毒早期抗原IgG抗体、EB病毒早期抗原IgM抗体、EB病毒核抗原IgG抗体、EB病毒衣壳抗原IgG抗体亲合力检测,用酶联免疫吸附实验进行检测,综合分析以确定对传染性单核细胞增多症的诊断意义。结果:366份标本中EB病毒衣壳抗原IgG抗体阳性率为89.6%,EB病毒衣壳抗原IgM抗体阳性率为45.2%,EB病毒早期抗原IgG抗体阳性率为48.5%,EB病毒早期抗原IgM抗体阳性率为32.2%,EB病毒核抗原IgG抗体阳性率为56.2%,EB病毒衣壳抗原IgG抗体高亲合力阳性率为39.2%,EB病毒衣壳抗原IgG抗体低亲合力阳性率为58.2%。结论:六项EB病毒指标联合检测,并动态监测指标的变化,在诊断传染性单核细胞增多症及监测疗效中起到重要作用。     

免疫印迹法检测高温作业工人血清中热应激蛋白70ku抗原和抗体方法的研究

热应激蛋白70ku（heatstressprotein，HSP70）是主要的热应激蛋白。用已纯化的HSP70抗原和已制备好的HSP70抗体，采用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳的高分辨率和抗原抗体反应的特异性相结合的免疫印迹法（westernblot）检测17名高温作业工人和17名对照组人群血清中HSP70抗原和抗体。结果，与对照组相比，高温作业工人血清中HSP70含量增加，HSP70抗体阳性率为23.5％。结果表明westernblot法用于检测工人血清中HSP70抗原和抗体是可行的。