活化蛋白1在高糖诱导MC3T3-E1成骨细胞凋亡中的作用

目的观察活化蛋白1(AP-1)在高糖诱导MC3T3-E1成骨细胞凋亡中的作用。方法将体外培养的MC3T3-E1细胞分为正常对照组和实验组,实验组包括22.0 mmol/L D-葡萄糖组(高糖组)、P38MAPK-shRNA慢病毒转染组、P38MAPK信号转导阻断剂组、无关shRNA转染组、AP-1抑制剂SP600125组。采用TUNEL和流式细胞术检测细胞凋亡,用EMSA检测MC3T3-E1细胞AP-1的活性。结果与正常对照组相比,高糖组MC3T3-E1成骨细胞P38MAPK表达、AP-1活性、细胞凋亡显著增加。P38MAPK-shRNA慢病毒转染组和P38MAPK信号转导阻断剂组MC3T3-E1细胞AP-1活性较高糖组分别下降57.9%(P0.01)和45.6%(P0.05)。AP-1抑制剂组MC3T3-E1细胞凋亡率较高糖组下降39.7%(P0.01)。结论高糖通过激活P38MAPK增加AP-1活性,诱导MC3T3-E1成骨细胞凋亡,抑制AP-1活性后高糖诱导的MC3T3-E1细胞凋亡显著下降。     

胃癌金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达增强

近来基质金属蛋白酶（ matrix metalloproteinases, MMPs）在肿瘤浸润、转移中的作用日益受到人们的关注。金属蛋白酶组织抑制因子（ tissue inhibitors of metalloproteinase, TIMPs）可抑制 MMPs的活性,它们有无抑制肿瘤转移的作用,对此我们采用逆转录共扩增定量 PCR方法研究了胃癌金属蛋白酶组织抑制因子— 1基因表达的情况,现报告如下。 　　一、资料和方法 　　1．研究对象：本组 30例胃癌患者中男 23例,女 7例;平均年龄（ 50± 6）岁。内镜下取胃癌组织,经病理检查确诊;所有患者均行手术治疗。另选 19例慢性胃炎患者作为…     

基质金属蛋白酶组织抑制因子mRNA及蛋白在肝硬化组织中的定位

目的：了解基质金属蛋白酶组织抑制因子TIMP－1和TIMP－2蛋白及mRNA在肝硬化组织中的表达和分布状态。方法：以抗TIMP－1和TIMP－2单克隆抗体及TIMP－1和TIMP－2 cDNA探针为试剂,采用免疫组织化学法和原位杂交技术检测肝硬化组织中TIMP－1和TIMP－2蛋白和mRNA,结果：40例肝硬化患者肝组织中TIMP－1和TIMP－2蛋白以及mRNA表达的阳性率为100％,TIMP－1阳性的组织TIMP－2亦为阳性,且TIMP－1强度高于TIMP－2,而正常肝组织未见阳性表达,TIMP－1和TIMP－2蛋白及mRNA表达的阳性信号均位于肝细胞胞浆中,细胞核中无表达,结论：肝硬化患者的肝细胞中存在TIMP－1和TIMP－2蛋白及mRNA的表达,其表达强度与肝组织病理改变呈正相关,这可能是通过抑制基质金属蛋白酶（MMPs)的活性,使得细胞外基质（ECM）降解减少而引起肝硬化。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制因子与糖尿病足

创面修复是一个复杂而有序的生物学过程,许多重要过程均受细胞因子和蛋白酶的调节。研究表明糖尿病患者足部伤口中基质金属蛋白酶(MMPs)表达增加,其抑制因子基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)表达减少,导致伤口难以愈合。MMPs与TIMPs的比例可能比它们的绝对浓度更重要,是预测伤口愈合的重要指标,与伤口愈合时间呈负相关。局部应用强力霉素、一些含蛋白酶抑制剂的敷料以及促有丝分裂的牛血清提取物等均可通过抑制MMPs促进创面愈合。     

氟诱导成骨细胞MC3T3-E1自噬与凋亡及其相互作用分析

目的主要研究氟诱导成骨细胞MC3T3-E1发生自噬、凋亡及两者之间的关系。方法利用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法检测氟对成骨细胞MC3T3-E1的增殖活性影响,探寻氟引起凋亡的浓度;流式细胞术检测细胞凋亡;western blot免疫印记技术检测凋亡相蛋白;利用western blot免疫印记技术检测Beclin 1蛋白及LC3蛋白表达水平及变化。结果氟能明显抑制成骨细胞MC3T3-E1增殖,诱发细胞凋亡,其抑制作用呈时间、剂量依赖性;氟在促进细胞凋亡的同时也促进自噬产生;3-甲基腺素(3-MA)抑制自噬后,氟诱导的凋亡进一步增多。结论氟明显抑制MC3T3-E1细胞增殖,同时诱发细胞凋亡和自噬;氟诱导的自噬部分拮抗其诱导的凋亡。     

食管癌患者金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达的研究

目的：了解金属蛋白酶组织抑制因子－１在食管癌中的作用。方法：３６例食管癌患者术中取及正常食管组织；提取组织总ＲＡＮ：用逆转录共扩增定量ＰＣＲ方法测定金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ１）基因表达水平，结果：食管癌组织ＴＩＭＰ１基因表达水平明显高于正常食管组织。食管癌患者ＴＩＭＰ１基因表达水平与肿瘤大小吾显著负相关，与肿瘤组织学类型无关。结论：ＴＩＭＰ１在阻止食管癌的浸润、转移中可能起重要作用。     

益心方对血管再狭窄小鼠基质金属蛋白酶与组织型基质金属蛋白酶抑制因子表达的影响

目的 探讨再狭窄血管中基质金属蛋白酶(MMPs)与组织型基质金属蛋白酶抑制因子(TIMPs)的表达及益心方对其的影响.方法 制备大鼠血管再狭窄模型,采用不同浓度的益心方药物浓度干预,观察颈总动脉形态学改变,免疫组化法检测颈总动脉MMPs与TIMPs的表达.结果 假手术组血管内膜和中膜处均可见少量散在分布的MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的阳性染色表达颗粒,以MMP-2表达最为明显;与假手术组比较,球囊导管内皮剥脱术后,模型组血管中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达均显著增加(P<0.05或P<0.01),主要在新生内膜中表达,胞浆和基质内出现大量特异性的阳性颗粒;与模型组比较,益心方治疗低、高剂量组能明显抑制血管壁MMP-2、MMP-9的表达(P<0.05或P<0.01),其特异性的阳性颗粒与模型组相比显著减少,对TIMP-1和TIMP-2的表达也有减少的趋势.结论 益心方抑制血管再狭窄,其机制与抑制血管平滑肌细胞MMPs与TIMPs表达有关.     

金属蛋白酶组织抑制因子-1、-2在子宫内膜异位症中的表达

金属蛋白酶抑制因子(TIMPs)是体内基质金属蛋白酶(MMPs)的天然特异性组织抑制剂，通过抑制MMPs的活性及其产生，调控细胞外基质(ECM)的合成和降解，在妊娠分娩、伤口愈合、肿瘤浸润与转移等一系列生理病理过程中发挥重要作用。子宫内膜异位症(EMT)虽是一种良性妇科疾病，但却具有     

基质金属蛋白酶组织抑制因子与肝纤维化

基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)广泛分布于体内多种组织中,可以调节基质金属蛋白酶活性,对肝纤维化的形成和逆转具有重要作用。在TIMPs家族中,TIMP-1和TIMP-2与肝纤维化的关系最为密切。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制因子和肝纤维化

肝纤维化是各种病因引起的慢性肝病的共同病理归宿。慢性肝损伤过程中,肝星状细胞(HSC)在炎症和各种细     

基质金属蛋白酶抑制因子3甲基化与急性白血病的相关性研究

目的探讨基质金属蛋白酶抑制因子3（TIMP3）基因启动子区域甲基化在急性白血病发病机制中的作用。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（PCR）法检测50例急性白血病患者骨髓单个核细胞、巨核细胞白血病CHRF细胞株、人组织细胞淋巴瘤U937细胞株、人慢性粒细胞白血病K562细胞株及10名健康供者外周血单个核细胞内TIMP3基因启动子区域的甲基化情况。结果50例患者骨髓单个核细胞、3种白血病细胞株及健康供者外周血单个核细胞中均未检测到TIMP3启动子区域甲基化。结论TIMP3基因启动子区域甲基化与急性白血病发病可能无相关性。     

Expression of matrix metalloproteinase-1 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in ulcerative colitis

INTRODUCTION Ulcerative colitis (UC) is a chronic, non-specific inflammatory disease of the colonic mucosa with unknown etiology and pathogenesis. Pathologically, it is characterized by ulceration in the mucosal and submucosal areas, and degradation of ex…     

组织金属蛋白酶抑制因子-3蛋白表达在心房颤动结构重构中作用的临床研究

目的 研究组织金属蛋白酶抑制因子-3(TIMP-3)蛋白在心房颤动(房颤)病人中的表达,探讨TIMP-3蛋白在房颤结构重构中的作用及机制.方法 32例接受瓣膜病外科手术患者,随机分为两组:窦性心律组17例和永久性房颤组15例.采用超声心动图检测心脏结构和功能,免疫印迹法定量检测右心房TIMP-3蛋白表达,缺口末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡,计算凋亡指数(AI).颗粒免疫测定法检测血浆高敏C-反应蛋白(hs-CRP)含量.结果 与窦性心律组相比,永久性房颤组患者心房TIMP-3蛋白表达明显上调(P＜0.05),血浆hs-CRP显著增高(P＜0.01),根据hs-CRP水平将患者分为高hs-CRP组(≥5 mg/L)和低hs-CRP组(＜5 mg/L),结果 高hs-CRP组患者心房TIMP-3蛋白表达显著高于低hs-CRP组(0.61±0.22 vs 0.40±0.18,P＜0.05).永久性房颤组患者心房细胞凋亡指数明显增加(P＜0.01),且TIMP-3蛋白表达和心房细胞凋亡指数呈显著正相关(r=0.68,P＜0.05).结论 房颤患者TIMP-3蛋白表达上调与炎症有关,其表达增加可能通过促进心肌细胞凋亡,参与房颤的结构重构.     

秋水仙碱对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶-1及其抑制因子-1表达的影响

目的 观察秋水仙碱对纤维化肝脏基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响,从胶原降解的角度探讨秋水仙碱对肝纤维化有无逆转作用及可能存在的机制.方法 制备免疫性大鼠肝纤维化模型,并给予秋水仙碱治疗;通过RT-PCR检测MMP-1、TIMP-1的表达,并作Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化以及Masson胶原染色.结果 发现秋水仙碱对肝纤维化大鼠MMP-1的表达无明显影响(P>0.05),但可以抑制TIMP-1的表达(P<0.05),促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解(P<0.05);然而在病理形态学的观察中,未发现秋水仙碱治疗组与肝纤维化模型组之间存在的显著性差异(P>0.05).结论 秋水仙碱可以抑制纤维化肝脏TIMP-1的表达,从而增强间质胶原酶的活性,促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解,产生抗肝纤维化的作用,但其作用有限.     

基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶组织抑制物1在不同性质胸腔积液诊断和鉴别诊断中的应用

目的 探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)及MMP-9/TIMP-1比值在结核性和仲瘤性胸腔积液形成过程中的作用及在上述胸腔积液诊断和鉴别诊断中的价值.方法 采用ELISA法测定36例结核性胸膜炎、38例恶性肿瘤和14例漏出液患者胸水中MMP-9和TIMP-1的浓度.结果 ①结核性胸腔积液组胸水中MMP-9浓度、TIMP-1浓度和MMP-9/TIMP-1比值均高于恶性胸腔积液组和漏出液组(P值均＜0.05),恶性胸腔积液组上述指标均高于漏出液组(P值均＜0.05).②恶性胸水脱落细胞学检查阳性组MMP-9浓度、MMP-9/TIMP-1 均高于细胞学检查阴性组(P值均＜0.05),TIMP-1浓度低于细胞学检查阴性组(P＜0.05).③MMP-9和TIMP-1之间呈正相关(r=0.239,P=0.025);MMP-9、MMP-9/TIMP-1分别与胸水乳酸脱氢酶、腺苷脱氨酶、蛋白质、白细胞总数、淋巴细胞比例之间显著正相关(P值均＜0.01);MMP-9、MMP-9/TIMP-1分别与胸水葡萄糖、氯化物之间呈显著负相关(P值均＜0.01);TIMP-1与乳酸脱氢酶、腺苷脱氨酶、蛋白质、淋巴细胞比例之间呈显著正相关(P值均＜0.01).④胸水中MMP9、TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值在恶性胸腔积液诊断中的敏感性分别为63.2%、71.1%和65.8%,特异性分别为83.3%、63.9%和80.6%.采用胸水MMP-9和TIMP-1串联联合检测的敏感性和特异性分别为39.5%和91.7%,并联联合检测的敏感性和特异性分别为94.7%和55.6$%.结论 MMP-9和TIMP-1与结核性胸膜炎和恶性胸腔积液的形成密切相关,MMP-9/TIMP-1比例的失衡在此过程中扮演了重要角色,胸水MMP-9、TIMP-1及MMP-9/TIMP-1比值的检测有助于结核性胸膜炎和恶性肿瘤所致胸腔积液的鉴别诊断.     

地塞米松抑制MG-63成骨样细胞TIMP-1的分泌

10^-9～10^-7mol／L地塞米松对MG-63细胞金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-1）蛋白分泌有抑制作用并呈剂量依赖性。10^-8mol／L地塞米松干预在6～48h时间内对抑制TIMP-1蛋白分泌有时间依赖性（均P〈0．05）。地塞米松具有抑制成骨肉瘤MG-63细胞TIMP-1表达的作用。     

基质金属蛋白酶—1,反义金属蛋白酶组织抑制因子—1表达质粒？…

目的 观察基质金属蛋白酶－１（ＭＭＰ－１）,反义金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ－１）表达质粒对大鼠肝纤维经的影响。方法 运用重组ＤＮＡ技术,构建大鼠ＭＭＰ－１,反义ＴＩＭＰ－１,真核细胞表达质粒,经脂质包埋后,利用腹腔注射将其导入免疫性大鼠纤维化模型体内,观察其对大鼠肝纤维化的影响。结果 ＭＭＰ－１,反义ＴＩＭＰ－１表达质粒均可促进肝脏中Ⅰ,Ⅲ型胶原的降解（Ｐ〈０．０５－Ｐ〈０．０１）,且作     

慢性肝病患者血清MMP-1及TIMP-1的检测及临床意义

目的研究基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)在慢性肝病患者肝纤维化过程中的表达和动态变化。方法采用双抗体"夹芯"酶联免疫吸附(ELISA)法检测64例慢性乙型肝炎和22例乙型肝炎肝硬化患者血清MMP-1和TIMP-1水平,并与20例正常体检者进行对照。结果血清MMP-1水平在慢性肝病患者肝纤维化过程中逐渐降低,而血清TIMP-1水平则逐渐增高,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01);其中慢性肝炎轻度患者血清MMP-1水平与中度、重度和肝硬化之间,中度与重度和肝硬化之间两两比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01),而慢性肝炎重度与肝硬化之间比较无显著性相差(P>0.05);慢性肝炎轻度患者血清TIMP1水平与中度、重度和肝硬化之间,中度与重度和肝硬化之间,重度与肝硬化之间两两比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论血清MMP-1和TIMP-1在慢性肝病患者肝纤维化过程中可能起重要作用,能够被用来做为判断肝纤维化程度的指标,尤其是血清TIMP-1意义更大。