Polybrene微孔板法测不规则抗体初探

为提高血液质量，保证献血员和受血者的安全，献血员不规则抗体的筛选是一项亟待解决的问题，经典的Polybrene试管法对大批量标本的检测难以适应，为此笔者对polybrene微孔板法进行探讨，取得满意效果，观察报告如下：１材料和方法１．１标本来源：本血站献血员１０４５份标本，８份IgG型阳性标本（由广州市血液中心提供）。１．２试剂：改良Polybrene试剂盒（批号２００１０４０６）。红细胞血型抗体筛选细胞（２００１０４１８），均由上海血液中心生产。１．３仪器：奥地利TecanRSP１００型自动加样器，德国HettichRotina３５型平板…     

改良微孔板木瓜酶法检测不规则抗体的实际应用

目的为研究改良微孔板木瓜酶法进行不规则抗体的检测和应用。方法用已知阴性、阳性样本血浆或试剂与抗体筛选细胞混合,筛选IgM类抗体,添加木瓜酶溶液,37℃孵育,室温静置,离心,振荡,筛选IgG类抗体。使用该方法与微孔板木瓜酶法比对18例IgG类、4例IgM类不规则抗体阳性样本,测试其阳性检出率。平行比对2 000例样本,测试其灵敏度和特异性。结果改良微孔板木瓜酶法检测出18例IgG类、4例IgM类不规则抗体阳性样本。2 000例样本平行比对,改良微孔板木瓜酶法检测出IgM、IgG类不规则抗体。结论改良微孔板木瓜酶法可大幅降低假阳性,能检测出IgM及IgG类不规则抗体,方法灵敏度高特异性强,成本低,适用于日常大规模不规则抗体筛查。     

双波长微孔板赖氏法测ALT含量

献血者丙氨酸氨基转移酶(ALT)的测定,目前多采用赖氏试管法,费工、费时.随着血站自动化加样系统的使用,国内一些血站采用单波长微孔板赖氏法测定ALT含量,但该法检测结果受脂血、板孔差异、板底划痕等因素干扰.     

自动化微量板法检测红细胞不规则抗体的研究

目的利用自动化设备寻找一种简便快速的献血者红细胞不规则抗体(RBC-IAb)筛选方法。方法采用微量板聚凝胺三步法试验(TSPT)、菠萝酶法、抗人球蛋白法(AGT)及经典试管TSPT,平行检测一批Rh等抗体效价,选出最佳的筛查方法,并观察抗凝剂、溶血、脂血对实验的影响。结果在上述四种方法中,以微量板TSPT作为筛检最佳,对14 210名献血者进行了RBC-IAb筛查,发现40例阳性,最多为抗-Mur 15例。结论微量板TSPT筛查献血者RBC-IAb,操作简便迅速,敏感性高,可在自动化加样仪中使用,并能与酶标仪和计算机相结合,尤其适合大批标本筛查。     

全自动微量板法检测RhD抗原和不规则抗体的可行性分析

RhD抗原在输血中的临床意义仅次于ABO血型，由不规则抗体引起的溶血性输血反应时有发生。目前国内血站普遍采用的检测方法为手工平板法和试管法，具有费时、费力和操作繁琐等缺点，不适合大批量样本的检测。笔者通过对大量实验条件的摸索，成功地开发出“全自动微量板法”。现将     

应用全自动凝聚胺微板法对武汉地区献血者不规则抗体筛查

目的探讨武汉地区汉族人群红细胞血型不规则抗体的频率,分布和滴度特征。方法应用全自动凝聚胺微板法对本地区无偿献血者进行抗体筛查;对于筛查阳性的标本运用抗球试管法进行抗体鉴定。结果试验针对本地区共计20 000名无偿献血者进行了抗体筛查,检出不规则抗体42例,阳性检出率为0.21%(男性0.17%,女性0.27%);其中Ig M抗体30例,Ig G抗体12例:抗-M 15例、抗-P16例、抗-E 4例、抗-D 3例、抗-Leb3例、抗-c E 2例、抗-C 1例、抗-Lea1例、抗-Mur 1例;检出抗体效价从1-128皆有覆盖。结论全自动凝聚胺微板法能有效的检出不同种类、不同效价的抗体,该方法快速、准确,经济、适合推广。     

全自动血型分析仪与微板法应用于献血者不规则抗体筛查的比较分析

目的比较分析Beckman Coulter PK7300全自动血型分析仪与微板法应用于献血者不规则抗体筛查的效果。方法应用全自动血型分析仪法和STAR加样微板手工比色法检测献血者O细胞(Oc),Oc凝集者送血型室进一步鉴定。结果在12 337份献血者标本中,全自动血型分析仪法与STAR加样微板手工比色法对Oc检出率分别为0.19%和0.15%。微板法检出的1例冷自身抗体,全自动血型分析仪法结果为阴性。全自动血型分析仪法检出的1例抗-E、1例抗-Leb、2例抗-P1、1例冷自身抗体,微板法均未检出凝集。结论全自动血型分析仪用于不规则抗体筛查的灵敏度优于微板法,更易发现盐水介质凝集试验阳性的抗体,在保证临床用血安全方面较微板法具有更广阔的应用空间。     

梅毒微孔板法检测实验参数优化

目前国内血站普遍采用TRUST纸片法对献血者进行梅毒筛选。该方法简单,不需特殊设备,但经验性强,无客观评价指标,更无法做到标准化,且效率低下。对此笔者对在微孔板上进行TRUST梅毒检测做了一些探讨。该法在一定程度上弥补了纸片法的不足。现总结如下。     

微孔板法自动检测技术筛查 Rh 血型

目的：建立微孔板法快速筛查献血者Rh阴性血型的方法。方法（1）用A T-PL U S2全自动加样系统,在96孔微孔板上按编制好的程序进行加样;（2）通过离心、孵育、悬浮、静止等过程,完成微孔板凝集试验,利用自动扫描技术判读结果,凝集孔 A值超过阳性下限判定为Rh血型D抗原阳性,非凝集孔 A值未超过阴性上限判定为Rh血型D抗原阴性;（3）通过优化选择最适抗-D血清浓度、受检红细胞浓度及孵育、悬浮、判读等最佳条件。结果抗-D血清1∶4稀释为最适工作浓度;受检红细胞最适浓度为4％;孵育条件为8 min ,400 r/min ,3 accel ;悬浮最适条件：2 min ,1000 r/min ,2accel ;阳性下限 A值为0．75,阴性上限 A值为0．35。结论实现了大批量筛选Rh血型的自动化及标准化。     

关于不规则抗体检测

正在血型血清学试验中,不规则抗体一般用于泛指抗-A、抗-B之外的红细胞血型抗体。不规则抗体的检测与临床输血的安全性和有效性密切相关。随着输血技术的发展,不规则抗体的检测方法不断丰富、检测水平不断提高,越来越多的不规则抗体被发现。因此,输血技术人员有必要深入了解不规则抗体的性质,包括相关检测方法的优缺点。本期     

献血者不规则抗体分析

<正>不规则抗体是指不符合ABO血型系Landsteiner法则的血型抗体,也就是抗-A、抗-B以外的血型抗体。其主要原因是输入血型不配合的红细胞及含有血型物质的血浆、血型不配合的妊娠、注射纯化血型物质及含有血型活性物质的病毒或细菌产物等免疫刺激产生。它是目前临床输血中引起输     

微柱凝胶法检测不规则抗体的临床应用

目的对受检者进行不规则抗体检测,选择受者相容的血液制品,保证临床输血安全。方法选择2007年7月1日～2008年12月31日在本院入院进行治疗性输血和手术备血的患者,采用微柱凝胶法对受血者进行血清中不规则抗体的筛查,并对筛查阳性标本进行抗体特异性鉴定。结果在30 298例受血者血清中共检测出不规则抗体120例（阳性率0.2%）,其中抗-D 4例、抗-E 17例、抗-C 1例、抗-c 2例、抗-Ec联合抗体1例,抗-M 17例、抗-s 2例、抗-JK^a 1例、抗-Fy^a1例、抗-K 1例、抗-Le^a3例、抗-Le^b1例、自身抗体2例、67例未确定抗体的特异性。结论输血前检测不规则抗体是保证输血安全的必要手段,微柱凝胶法简便快捷、灵敏度高、结果稳定,适于临床输血前不规则抗体血清学检测。     

微柱凝集法筛检不规则抗体的临床应用

目的　探讨微柱凝集法对患者输血前不规则抗体筛检的临床应用价值。方法　对需输血的患者运用微柱凝集技术提前作不规则抗体筛检 ,将阳性血清再用间接抗球蛋白试验予以确证。结果　 4 2 0 0名患者中有 11例阳性 ,并全部被间接抗球蛋白试验所确证 ,其中 9名有输血史或妊娠史。结论　微柱凝集法适合临床常规不规则抗体筛检 ;输血前作不规则抗体筛检对有输血史或妊娠史的择期手术患者尤为重要。     

Olympus微孔板法检测稀有血型的效果

稀有血型的重要意义已经被世界各国的输血工作者所认识。中国这一多人口、多民族的国家，十分有利于开展稀有血型的筛选工作。然而对于在人群中出现频率很低的稀有血型，其筛选工作存在筛选成本高、工作量大等困难。我们通过Olympus微孔板法与试管法、U型96孔微量板法的对比，探索其在稀有血型筛选方面的应用前景。     

微孔板法评价碘伏的消毒效果研究

摘要 目的 利用微孔板建立微量试验法检测碘伏的抑菌和杀菌效果。方法用微孔板法鉴定中和剂对碘伏的中和效果;用微孔板悬液定量杀菌试验检测碘伏对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的杀灭效果;用微量肉汤法检测碘伏对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的最小抑菌浓度,平板划线后计算最小杀菌浓度。结果微孔板悬液定量杀灭实验显示,310～2 500 mg/L的碘伏随作用时间（30 s～5 min）延长,对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的杀灭作用逐渐增强。碘伏对两种细菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度均为625 mg/L。结论微孔板法可用于检测碘伏对常见细菌的抑菌和杀菌效果。     

PCR-微孔板反向杂交法检测HBV DNA

用ＰＣＲ－微也板反向杂交法检测ＨＢＶ ＤＮＡ，通过固定于板上的捕获探针与５′端带有生物素的ＰＣＲ扩增产物杂交后，加入酶标亲合素通过酶联反应显色。本法检测敏感度明显高于电泳法，检测时间约是Ｋｅｌｌｅｒ法的１／１０。     

Capture-R法与微柱凝胶法在不规则抗体筛查中的应用

目的探讨Capture-R法与微柱凝胶法在不规则抗体筛查中的临床应用价值。方法采用微柱凝胶法与Capture-R法对600份临床患者标本做不规则抗体筛查平行试验,对抗体筛查阳性标本进行抗体鉴定。分析比较两种方法在不规则抗体筛查试验中的灵敏度和特异性。结果微柱凝胶法和Capture-R法阳性检出率分别为3.17%（19/600）和2.83%（17/600）,两种方法灵敏度比较差异无统计学意义（P〉0.05）;特异性分别为89.47%（17/19）和100.00%（17/17）,两种方法特异性比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 Capture-R法在不规则抗体筛查试验中的灵敏度和特异性均达到微柱凝胶法检测水平,可有效检出有临床意义的红细胞抗体,提高临床输血安全。     

Capture-R法应用于献血者不规则抗体筛查的可行性探讨

目的探讨Capture-R法应用于献血者不规则抗体筛查的可行性。方法将17例含不规则抗体的标本随机放入本中心2015年12月的532例常规检测献血者标本中,分别用Capture-R法-混合细胞试剂和Capture-R法-3细胞试剂进行检测。结果 17例标本均为阳性反应,而532例献血者标本经Capture-R法-混合细胞检测有5例标本呈阳性反应,其中1例经鉴定含抗-D,4例不含不规则抗体;经Capture-R法-3细胞检测有2例标本呈阳性反应,其中1例为Capture-R法-混合细胞检出含抗-D的同一标本,1例不含不规则抗体。结论 Capture-R法能有效检出不规则抗体且Capture-R法-混合细胞试剂更适用于献血者的大规模筛查。