正常骨髓基质细胞促进残留耐药Jurkat细胞凋亡的研究

目的探讨正常骨髓基质细胞对残留耐药Jurkat细胞凋亡的促进作用及其可能机制。方法体外分离培养急性淋巴细胞白血病患者和健康供者骨髓基质细胞(BMSCs),分别模拟白血病和正常骨髓造血微环境,并与获得柔红霉素(DNR)耐药的Jurkat细胞(Jurkat/DNR细胞)共培养。绘制悬浮培养和与BMSCs共培养4d的Jurkat/DNR细胞的增殖曲线,并检测悬浮培养及共培养14、1、0d的Jurkat/DNR细胞的caspase3/7活性和bcl-2、bax、DAPK1 mRNA表达情况。结果与骨髓基质细胞共培养比较,悬浮培养的Jurkat/DNR细胞生长受到明显抑制。共培养41、0d后,Jurkat/DNR细胞caspase3/7活性升高,且共培养10d的活性高于共培养4d(P<0.05)。共培养4、10d后,Jurkat/DNR细胞bcl-2表达增加,共培养14、1、0d后,死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)表达增加(P<0.05)。而bax表达在各时间点间差异无统计学意义(P>0.05)。结论正常骨髓基质细胞能促进Jurkat/DNR凋亡,其机制可能与过表达的DAPK1诱导Jurkat/DNR细胞凋亡和bcl-2转录下调c、aspase3/7活性升高有关。     

浓缩铀诱发PC12细胞的凋亡

细胞凋亡是一种正常生理条件下的程序性死亡和外来因素的细胞自杀过程 ,是细胞针对所处环境因素的特定改变所产生的应答 ,与细胞生长一样 ,在机体中承担着重要调节作用[1 ] 。大剂量照射产生细胞坏死 ,但是发生细胞凋亡的剂量远远低于细胞快速死亡所需的剂量。研究辐射诱发细胞凋亡的量效、时相关系以及阐明细胞凋亡和有关的影响因素具有极为重要临床应用意义[2 ] 。随着α辐射体在核燃料和工业、医疗等方面的应用[3] ,由放射性核素所产生的内照射危害已成为一个具有现实意义的重要课题。笔者研究了浓缩铀诱发神经元样细胞凋亡的时相关系。…     

股骨的朗格汉斯细胞组织细胞增生症一例报告

朗格汉斯细胞组织细胞增生症（Langerhanscell histiocytosis，LCH）是一组罕见的属于单核细胞系统的特定树突细胞和网状细胞增生为共同特点的疾病，其儿童年发病率为3．5—7．0／百万。由于其缺乏典型的临床病史和特异性的临床表现常常导致临床与病检漏诊和误诊。我院近期曾遇一例原发于股骨的LCH，现介绍如下。     

完整细胞打点杂交技术的建立

介绍一些将完整细胞收集在硝酸纤维素膜上裂解释放DNA，并在此基础上进行点杂交的新方法，结果可达到相对定量，此技术较传统打点杂交更为简便、快速且适于批量检测和筛选，易于推广。     

心肌梗死后延迟骨髓细胞移植对大鼠心肌细胞bcl-2/bax mRNA及蛋白表达的影响

目的观察心肌梗死(MI)后恢复期延迟的骨髓单个核细胞(BM-MNCs)移植对心肌细胞bcl-2/bax mRNA及蛋白表达的调节作用,并探讨影响凋亡的可能机制.方法通过结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支制成MI模型.2周后第2次开胸,移植组在心外膜下梗死区及周边区多点注射BM-MNCs混悬液200μl(5×106个细胞),对照组予等体积PBS液.TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白在心肌细胞中的表达水平,原位杂交法检测bcl-2、bax mRNA表达变化.结果 TUNEL结果显示心肌细胞凋亡指数在移植组明显低于对照组(4周0.095±0.017 vs 0.173±0.018, P<0.05;8周0.0926±0.014 vs 0.182±0.015,P<0.05).免疫组化结果表明,移植组Bcl-2蛋白表达高于对照组(4周12.66±3.37 vs 5.68±2.53, P<0.05;8周13.08±3.09 vs 5.02±1.91, P<0.05),Bax蛋白表达则低于对照组(4周11.48±3.13 vs 20.12±3.91, P<0.05;8周9.98±3.03 vs 22.74±3.12, P<0.05).第4、8周(治疗后第2、6周),移植组bax mRNA积分光密度和阳性面积较第2周降低,并低于对照组(P<0.05).结论延迟至心肌梗死后2周行骨髓单个核细胞移植可抑制心肌细胞凋亡,其机制可能与对bcl-2、bax表达的调节有关.     

自制细胞分离器提取表皮细胞治疗白癜风36例

白癜风为皮肤科常见病，病因不明，治疗棘手。目前，国内外医学界普遍认为表皮细胞移植术治疗白癜风疗效较好，尤其对局限性、稳定期的病变，疗效更显著。1999开始，我们应用自制表皮细胞分离器提取含有黑素细胞的表皮移植，在门诊治疗白癜风36例，疗效良好。     

乙酰胆碱对人表皮细胞冷存的影响

目的：探讨乙酰胆碱（Ach）对人表皮细胞冷存活力的影响。方法：应用人表皮细胞的分离、培养技术，并进行MTT检测、病理切片以及电镜检测等手段进行观察。结果：不同浓度的Ach对冷存的表皮细胞均有一定的保存活力作用，其中以10^-1-10^-10mol/L的浓度为最佳。结论：认为Ach对冷存中的人表皮细胞有一定的保存作用，它可提高表皮细胞的保存活力。     

AT细胞对电离辐射敏感原因的探讨

AT细胞具有对电离辐射和拟辐射物质的高敏感性以及DNA合成抑制市性，存在复杂的基因异质性，本从AT细胞的遗传学互补性分析，DNA损伤修复缺陷以及DNA拓扑酶学研究三方面对AT细胞辐射敏感性的分子机理等进行了讨论，认为DNA双链修复缺陷与重接忠实性下降可能是AT细胞电离辐射敏感性的原因。     

一种改良的小胶质细胞培养方法及初步研究

为寻求一种简便、高效的小胶质细胞分离纯化技术,本实验利用“营养丧失”、振摇分离等改良的小胶质细胞培养方法,并结合原位分子杂交、免疫组化染色进行纯度鉴定。获得小胶质细胞比例占95%以上,分离纯化的小胶质细胞在LPS作用后,iNOS mRNA等表达显著。该方法简便易行,纯化程度高,为体外研究小胶质细胞的生物学特性及功能提供了条件。     

鞘磷脂与细胞生长,凋亡调控

鞘脂分子包括鞘磷脂和鞘糖脂两大类。它们不仅是维持细胞膜结构的重要组分，而且它们的代谢产物参与了细胞的生长、分化和凋亡等重要生理活动。１－磷酸鞘氨醇（ＳＰＰ）和神经酰胺是两类重要的代谢产物，它们通过活化或抑制蛋白激酶、磷酸酶、离子通道，传递细胞生长和凋亡的信号。在细胞内，它们的作用是拮抗的，细胞的生与死往往取决于哪一种作用占了主导地位。本文就鞘磷脂的结构与代谢、神经酰胺和ＳＰＰ的信号转导机制及其在治     

HeLa细胞去核条件的优化

细胞去核技术〔１〕的原理是：细胞在细胞松弛素Ｂ（ｃｙ－ｔｏｃｈａｌａｓｉｎＢ，ＣＢ）作用下，微丝聚集受到抑制，细胞核与细胞质间连接变得松散。在离心力的作用下，细胞核从细胞中脱出，从而得到去核细胞。这一技术主要应用于细胞重组，研究核、质间信息传递、ｍＲ...     

用多孔微载体Cytopore高密度培养CHO工程细胞和两株杂…

采用Ｃｙｔｏｐｏｒｅ多孔微载体和低血清添加剂，在１．５Ｌ Ｃｅｌｌｉｇｅｎ灌流培养系统中成功地培养了重组ＣＨＯ工程细胞ＣＬ－１１Ｇ和产尿激酶原单抗的杂产瘤细胞。     

超小超顺磁性氧化铁微粒对神经干细胞生物学活性的影响

目的应用超小超顺磁性氧化铁微粒Sinerem标记大鼠骨髓源性神经干细胞（NSCs），探讨Sinerem的安全性及合适的标记浓度。方法分离、培养大鼠骨髓源性NSCs。制备Sinerem多聚赖氨酸复合物，以不同浓度Sinerem对细胞进行标记。普鲁士蓝染色和电镜观察细胞内铁，CCK-8法检测细胞生长增殖情况，AnnexinV—PI法检测细胞凋亡及死亡情况。结果普鲁士蓝染色显示细胞质内大量铁颗粒存在，标记率在99％以上。电镜观察见Sinerem标记干细胞内含纳米铁颗粒。CCK-8法检测结果表明，25～1500μg/ml不同浓度范围的Sinerem对细胞增殖的影响差异无统计学意义。AnnexinV—PI检测结果显示，Sinerem在25～200μg/ml范围内的不同浓度对细胞凋亡和死亡的影响差异无统计学意义。结论超小超顺磁性氧化铁微粒Sinerem可以有效标记大鼠骨髓源性NSCs，可以应用25～200μg／ml浓度范围的Sinerem标记细胞。     

表皮细胞培养最佳条件的探索

目的：研究表皮细胞培养的最佳条件,为进一步将其作为皮肤组织工程种子细胞奠定基础。方法：以DMEM作为基础培养液,改变培养条件后,计数2周内克隆形成数,检测细胞增殖能力,确定最佳条件。结果：表皮细胞以分离酶分离可得到大多数基底细胞,在培养液pH值为7．0－7．2,钙离子浓度为0．4mmol/L,血清浓度为18％,温度为36℃,CO2浓度为6％时,表皮细胞克隆形成数量高。结论：在最佳培养条件下,表皮细胞生长状态良好,为人工表皮的构建奠定了基础。     

细胞检测的一种数学形态学方法

本文介绍一种利用数学形态学中顶帽变换来检测显微照片中细胞的方法,并设计了确定细胞区域的算法。这种方法运算简单、效果好,并行程度高,优于传统的细胞检出算法。     

脑皮层创伤灶注射法移植神经干细胞的实验研究

目的观察食蟹猴自体骨髓源神经干细胞（NSCs）移植到皮层创伤灶内的存活、生长情况。方法取骨髓分离、纯化骨髓基质细胞，培养诱导成NSCs，Nestin染色阳性说明具备NSCs特征。再加入细胞标记物BrdU进行共培养7d待移植之用。移植前将BrdU标记的NSCs收集、离心，制成干细胞悬液。食蟹猴分即时移植和延迟移植组，用微量注射针将NSCs悬液注入到猴脑皮质损伤灶及创面周边脑皮层，移植后1，3，6个月各灌杀2只食蟹猴，做移植区组织切片染色检查。结果即时移植组和延迟移植组都可观察到脑皮层创伤灶内有BrdU标记阳性细胞，而假移植组织切片中则未见BrdU阳性细胞。移植后1，3，6个月染色可见移植细胞早期呈簇状分布，移植后6个月在移植区邻近的脑白质内也可观察到有BrdU阳性细胞，正电子发射电子计算机断层扫描（PET）检查显示移植NSCs后创伤区域脑组织葡萄糖代谢有所恢复。结论移植的骨髓源性NSCs在脑内有存活，并向邻近区域迁移，有助于创伤脑组织修复。