葡萄籽原花青素对H2O2损伤PC12细胞的保护作用

目的：检测葡萄籽原花青素对H2O2引起PC12细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法：用盐酸-香草醛法检测葡萄籽原花青素中低聚花青素的含量，并用DPPH（1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl）法检测其对自由基的清除能力，以PC12细胞为实验对象，进一步检测葡萄籽原花青素对氧化损伤的PC12细胞的保护效应。结果：低聚原花青素含量为45．16％的葡萄籽原花青素在浓度为64μg/ml时对DPPH自由基的清除率为76．69％，对H2O2损伤的PC12细胞在浓度为100μg／ml时保护率为83．1％，同时可使细胞内超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽（GSH）活性增加，细胞的脂质过氧化水平降低。结论：葡萄籽原花青素是通过清除自由基和提高细胞内源抗氧化酶来保护PC12细胞免受氧化损伤。     

藜芦提取物的体外DPPH自由基清除作用和对PC9肺癌细胞增殖的影响

目的探讨藜芦（Veratrum nigrum）提取物对DPPH自由基清除作用和对人体肺癌细胞系PC9细胞增殖的影响,比较藜芦的水提物与醇提物的作用差异。方法DPPH自由基清除法和CCK-8细胞毒性检测法。结果藜芦水提物和醇提物在10mg／ml时体外DPPH清除率分别为52．3％和42,8％。在体外培养的条件下能明显抑制PC9细胞的增殖,并且呈浓度依赖性,而水提物只在高浓度时有抑制作用。结论藜芦提取物具有DPPH自由基清除作用,并且对PC9细胞的体外增殖有明显的抑制作用。     

金丝桃苷对叠氮钠诱导PC12细胞凋亡的保护作用(英文)

目的:研究金丝桃苷对叠氮钠诱导的PC12细胞凋亡的保护作用。方法:将PC12细胞与不同浓度金丝桃苷共同孵育4h后,加入20mmol·L-1的叠氮钠继续孵育3～24h,观察金丝桃苷的保护作用。采用MTT、Hoechst33342分别检测细胞存活率和细胞形态变化。以Ac-DEVD-AMC为底物检测caspase-3活性,CM-H2DCFDA法用于测定ROS水平。Western blotting用于分析Bcl-2和Bax表达水平。结果:金丝桃苷在0.01,0.1及1μmol·L-1浓度时,可显著提高叠氮钠作用后PC12细胞的存活率,抑制细胞凋亡,减少细胞内活性氧自由基生成和caspase-3活性,提高抗凋亡蛋白Bcl-2表达,降低促凋亡因子Bax表达。同时结果显示caspase-3抑制剂呈时间依赖性地减少细胞内活性氧自由基含量。结论:金丝桃苷对叠氮钠诱导的PC12细胞凋亡具有保护作用,活性氧自由基生成与凋亡进程中caspase-3活性密切相关。     

淫羊藿总黄酮对谷氨酸和咖啡因损伤PC12细胞的保护作用

目的探讨淫羊藿总黄酮(TFE)对谷氨酸和咖啡因损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12细胞)的保护作用及相关机制。方法制备谷氨酸和咖啡因诱导的PC12细胞损伤模型,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率、荧光染料Fura-2/AM法测定细胞内Ca~(2+)、比色法测定细胞培养液中的乳酸脱氢酶(LDH)活性、细胞内羟自由基(·OH)和三磷酸腺苷(ATP)酶活性来观察TFE对损伤细胞的保护作用。结果 TFE能剂量依赖性地提高细胞存活率,减轻细胞内Ca~(2+)超载,降低细胞外LDH活性和细胞内·OH活性,恢复细胞内ATP酶活性。结论 TFE对谷氨酸和咖啡因致PC12细胞损伤具有保护作用,其机制可能与抑制细胞内Ca~(2+)超载、抗氧化和改善能量代谢有关。     

葡萄籽原花青素对H_2O_2损伤PC12细胞的保护作用

目的:检测葡萄籽原花青素对H2O2引起PC12细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法:用盐酸-香草醛法检测葡萄籽原花青素中低聚花青素的含量,并用DPPH(1,1-d iphenyl-2-p icrylhydrazyl)法检测其对自由基的清除能力,以PC12细胞为实验对象,进一步检测葡萄籽原花青素对氧化损伤的PC12细胞的保护效应。结果:低聚原花青素含量为45.16%的葡萄籽原花青素在浓度为64μg/m l时对DPPH自由基的清除率为76.69%,对H2O2损伤的PC12细胞在浓度为100μg/m l时保护率为83.1%,同时可使细胞内超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽(GSH)活性增加,细胞的脂质过氧化水平降低。结论:葡萄籽原花青素是通过清除自由基和提高细胞内源抗氧化酶来保护PC12细胞免受氧化损伤。     

芍药苷对谷氨酸引起的PC12细胞损伤的保护作用

 目的探讨芍药苷对谷氨酸引起PC12细胞损伤的保护作用。方法MTT和测定细胞存活率,流式细胞仪测定细胞凋亡率,采用Fura3/AM为荧光指示剂,用1420 Vector2多标记免疫分析仪研究芍药苷对谷氨酸所致损伤PC12细胞内Ca²⁺的作用,流式细胞仪检测线粒体跨膜电位。结果芍药苷可明显提高谷氨酸诱导的PC12细胞还原MTT的能力,抑制该细胞LDH的释放;芍药苷还可抑制兴奋性氨基酸所引起的细胞内Ca²⁺含量的升高;剂量相关性地降低PC12细胞的凋亡百分率。结论芍药苷可抑制谷氨酸诱导PC12细胞凋亡,其作用机制可能与其抑制细胞内钙超载,稳定细胞线粒体跨膜电位有关。     

阿魏酸和芍药苷混合剂对PC12细胞损伤的影响

目的观察阿魏酸和芍药苷混合剂对FeSO4和H2O2诱导的PCI2细胞损伤的影响,初步探讨其作用机制。方法采用FeSO4和H2O2作用产生自由基的方法诱导建立PC12细胞损伤模型。倒置相差显微镜进行细胞形态学观察;采用MTT比色分析测定细胞存活率;硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量;黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果与FeSO4和H2O2损伤组进行比较,阿魏酸和芍药苷的混合剂能明显改善PC12细胞的存活数量,降低MDA的含量和提高SOD活性。结论浓度为5～50μmol／L的阿魏酸和浓度为1～10μmol／L的芍药苷混合剂对FeSO4和H2O2诱导PC12细胞损伤有明显的保护作用,其作用机制可能与阿魏酸和芍药苷清除自由基和抑制脂质过氧化有关。     

芥子碱对连二亚硫酸钠引起的PC12细胞凋亡损伤的保护作用

目的：探讨芥子碱对连二亚硫酸钠诱导PC12细胞缺氧损伤的作用并探讨其机制。方法：用连二亚硫酸钠消除培养基中的氧，建立细胞缺氧损伤模型，MTT法检测细胞的存活率；应用流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的改变：测定乳酸脱氢酶（LDH）的释放量，培养基和细胞内丙二醛（MDA）含量。结果：与对照组和单纯缺氧模型组相比，芥子碱能显著提高损伤后细胞的存活率，降低细胞内LDH的漏出，使细胞内的MDA减少，降低细胞的凋亡率并提高线粒体的膜稳定性。结论：芥子碱具有显著的神经保护作用，其机制可能与提高细胞的抗氧化能力，减少细胞凋亡有关。     

阿纳其根醇提物对冈田酸诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的研究阿纳其根醇提物对冈田酸(OA)诱导PC12细胞损伤的保护作用及其作用机制。方法制备OA诱导的PC12细胞损伤模型。倒置显微镜观察PC12细胞形态的变化;MTT比色法测定阿纳其根醇提物对PC12细胞存活率的影响;流式细胞仪检测阿纳其根醇提物对PC12细胞凋亡和细胞周期的变化。结果与正常组相比,20 nmol/L OA作用PC12细胞24 h,细胞活力显著下降(P0.01),细胞凋亡率上升(P0.01),细胞分裂周期阻滞(P0.01)。与OA损伤组相比,阿纳其根质量浓度在0.5~5.0 mg/m L范围内可呈浓度依赖性地恢复OA诱导的PC12细胞损伤,明显提高模型细胞的存活率(P0.01),降低细胞凋亡比率(P0.05),增高细胞在S期和G2/M期的细胞比率(P0.01),促进细胞的增殖和生长。结论阿纳其根醇提物对OA诱导PC12细胞具有明显保护作用,能有效促进细胞存活率、抑制细胞凋亡、减轻细胞周期阻滞现象。     

生地黄水煎剂对H2O2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用研究

目的:探讨生地黄水煎剂对H2O2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用。方法:以H2O2处理PC12细胞制作成氧化应激损伤模型,采用MTT法检测生地黄水煎剂对PC12细胞活性的影响,并采用Westen blot法检测PC12体外凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、细胞色素C、caspase3的表达情况。结果:经150μmol/L H2O2处理的PC12细胞存活率明显降低,而经生地黄水煎剂(2.5、5、10mg/m L)预处理后,细胞存活率大致呈浓度依赖增长,并明显抑制细胞凋亡相关蛋白Bax、细胞色素C、cleaved-Caspase3的高表达,提高Bcl-2/Bax比值。结论:生地黄水煎剂对氧化应激损伤的PC12细胞凋亡具有保护作用,其保护机制是通过抑制细胞凋亡相关蛋白Bax、细胞色素C、cleaved-Caspase3的表达,并提高Bcl-2表达而实现的。     

天然抗氧化剂对抗PC12细胞氧化损伤的实验研究

目的:研究五味子乙素(SchB)对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用及作用机制。方法:SchB与PC12细胞预培养24h后,加入H2O2处理,在倒置显微镜下观察细胞的形态改变,采用MTT法测定细胞生存率,采用单细胞凝胶电泳法测定DNA单链损伤,采用荧光法测定细胞内的谷胱甘肽(GSH)含量。结果:H2O2处理后细胞生存率明显降低,细胞内DNA单链损伤明显升高,而GSH含量明显降低。经SchB预培养的细胞生存率明显升高,细胞内DNA单链损伤明显减轻,GSH含量明显升高,其作用呈剂量依赖关系。结论:SchB对PC12细胞有明显的保护作用,其作用机制可能与提高GSH抗氧化系统的能力有关。     

刺五加多糖对过氧化氢诱导海马神经元氧化应激损伤及细胞凋亡相关基因-2家族的影响

目的观察刺五加多糖(ASPS)对H2O2诱导海马神经元氧化应激损伤及细胞凋亡相关基因-2(Bcl-2)家族的影响,并探讨其可能机制。方法运用海马神经细胞原代培养技术,采用H2O2诱导建立细胞氧化损伤模型。观察细胞形态学变化;MTT法测定细胞活性;TUNEL法,检测H2O2诱导大鼠海马神经元凋亡;免疫组化法检测细胞中Bc l-2,Bax蛋白表达;化学比色法检测细胞匀浆液中一氧化氮合酶(NOS),过氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)含量。结果形态学观察显示:与模型组比较,ASPS组细胞损伤程度明显减轻;ASPS组细胞活性比模型组细胞活性高;TUNEL法显示ASPS预处理组细胞阳性率明显高于模型组细胞;ASPS组Bcl-2表达量较高而Bax表达量较低;NOS活力及MDA生成量ASPS组明显低于模型组,但SOD活力ASPS组显著高于模型组。结论ASPS能提高海马神经细胞的抗氧化应激损伤能力并上调Bcl-2基因表达,下调Bax表达。     

远志皂苷对H2O2诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的：观察远志皂苷（Tenuigenin TEN）对过氧化氢（H202）所致PCI2细胞损伤的保护作用。方法：以H2O2损伤PCI2细胞为氧化应激损伤模型，MTT法检测细胞存活率；采用紫外分光光度法测定LDH漏出量，观察细胞的损伤程度；硫代巴比妥酸法测定MDA含量，黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性。结果：TEN能明显改善H：0：导致的细胞损伤，与H2O2处理组相比，20、10mg／L组可使细胞存活率升高，LDH漏出量明显降低，降低MDA含量，提高SOD活性。结论：TEN对H2O2诱导的PCI2细胞损伤具有明显的保护作用。     

Inhibition of Corydalis decumbens Alkaloids on Hydrogen Peroxide- induced Apoptosis of PC12 Cells through Down-regulating Caspase-3 Expression

Objective To extract alkaloids from Corydalis decumbens(AsCD) by supercritical CO2 fluid extraction(SFE) and to evaluate protective effects of AsCD against hydrogen peroxide(H2O2)-induced apoptosis in rat PC12 cells. Methods AsCD were extracted by SFE and oxidative damage PC12 cells model was induced by H2O2.The survival rate of the cells was determined by MTT assay;Lactate dehydrogenase release was determined by ultraviolet spectrophotometry;Flow cytometry was used to detect apoptosis;Caspase-3 mRNA and protein were determined by real-time PCR and Western blotting assay,respectively.Results AsCD remarkably reduced the cytotoxicity, prevented membrane damage,and inhibited cell apoptosis.AsCD inhibited Caspase-3 mRNA and protein expression induced by H2O2 in PC12 cells.Conclusion AsCD possess protective effects against H2O2-induced apoptosis in PC12 cells,and the mechanism of AsCD responsible to the inhibition of apoptosis is possibly attributed to the down-regulating Caspase-3 expression.AsCD might be useful in the treatment of oxidative stress-related neurodegenerative diseases.     

开心散抑制过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的机制

目的:研究开心散(Kaixin San,KXS)对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞凋亡的影响,并探讨其抗凋亡的机制。方法:以过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡为模型,采用MTT比色法,琼脂糖凝胶电泳分析,荧光染色观察及流式细胞技术,考察KXS对凋亡的保护作用;采用比色法测定caspase活性、Western blot技术检测胞浆中细胞色素C水平,RT-PCR技术分析Bcl-2和Bax mRNA的表达,考察KXS抗凋亡的机制。结果:KXS可以有效地改善H2O2诱导的PC12细胞的凋亡,抑制caspase-3、caspase-9的活性,降低胞浆中细胞色素C的水平,增加Bcl-2mRNA的表达,减少BaxmRNA的表达,从而导致Bcl-2/Bax比值的增加。结论:KXS可能通过线粒体途径抑制H2O2诱导的PC12细胞的凋亡。     

当归补血汤超滤物抗H2O2致人脐静脉内皮细胞（ECV-304）氧化损伤的影响

目的研究当归补血汤超滤物对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilieal vein endothelial cells,HUVECs)ECV-304氧化损伤的影响,并初步探讨其作用机制。方法通过酶消化法对离体的人脐静脉内皮细胞系ECV-304细胞进行消化传代,建立过氧化氢(peroxide hydrogen,H2O2)诱导的ECV-304细胞氧化损伤模型。采用超滤技术对当归红芪合剂进行分离与纯化,以不同分子量(2万以下、5万以下、10万以下)且浓度均为15.0 g/L的当归红芪超滤膜提取物作用于氧化损伤的ECV-304细胞,黄嘌呤氧化酶法检测细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,硫代巴比妥酸(TBA)法检测细胞内丙二醛(malondialdeyde,MDA)活力,流式细胞仪(flow cytometry,FCM)分析细胞周期的变化,RT-PCR检测细胞内AT1 mRNA的表达。结果经0.5mmol/L H2O2刺激后细胞活性明显降低,SOD活力明显降低,MDA活力明显提高,G0/G1期细胞的数目明显增加,S期细胞的数目明显减少,AT1 mRNA表达增加(P﹤0.05);与H2O2组相比,当归红芪超滤膜提取物可以增强H2O2诱导ECV-304细胞氧化损伤的细胞活性,增加细胞的存活率且以作用72 h为佳,提高氧化损伤的ECV-304细胞的SOD活力,降低氧化损伤的ECV-304细胞的MDA活力,促进氧化损伤的ECV-304细胞向S期转变,减少细胞内AT1 mRNA表达(P﹤0.01,P﹤0.05)。结论当归补血汤超滤物对氧化损伤ECV-304细胞的保护作用可能与其提高了抗氧化酶活性,降低了脂质过氧化物活性,促进了内皮细胞DNA合成复制及减少了细胞内AT1 mRNA的表达有关。     

丹参多糖保护H2O2致心肌细胞损伤作用机制

目的 研究prohibitin在H2O2致心肌细胞氧化应激损伤中的表达及中药丹参多糖对其调节作用.方法 以H2O2干预体外培养乳鼠心肌细胞建立氧化应激心肌损伤模型;MTT法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫印迹法检测prohibitin蛋白表达情况.结果 与模型组相比,丹参多糖组的细胞活力明显上升,凋亡率显著降低,其中高剂量组尤为明显(P＜0.01);prohibitin在正常心肌细胞内表达较低,而在模型组表达代偿性增高,丹参多糖用药组其表达有所增加,高剂量组增加更明显,与模型组相比有显著性差异(P＜0.05).结论 丹参多糖可通过上调prohibitin蛋白表达发挥其保护H2O2致心肌细胞损伤的作用.     

Neuroprotective effects of Hypericum perforatum on trauma induced by hydrogen peroxide in PC12 cells

The standard extracts of Hypericum perforatum L. (SEHP), a well-known medicinal plant, are used for the treatment of depression, exhibited upgrading and significant protective effects on the trauma of PC12 cells induced by 200 microM H2O2 in a dose-dependent manner within 24-hour treatment. Cell viability was assessed by the MTT method, and in situ cellular hydrogen peroxide (H2O2)-induced oxidative stress was examined by measurement of reactive oxygen species (ROS) formation using CDCFH procedures. Intra- and extra-cellular ROS levels decreased significantly to 71.9% and 50.0% of the control at a moderate concentration of 20 microg/ml, respectively, suggesting that SEHP could easily enter the cells and play important roles in reducing ROS levels. Our results were proved by detection of DNA fragmentation and inspection of cell morphology of PC12 cells. SEHP can obviously block DNA fragmentation and prevent the cells from shrinking and turning round of H2O2-induced apoptosis in PC12 cells at concentrations of 10 approximately 100 microg/ml. This data suggests SEHP may be a candidate for application in neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease or Parkinson's disease.     

人参皂苷Rg1对过氧化氢诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用

观察人参皂苷Rg1（GSRg1）对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤时细胞存活率、DNA及蛋白的影响。GSRg1与PC12细胞共同培养24h,经H2O2 处理30min,通过显微镜观察细胞的形态,MTT法测定细胞生存率,用单细胞凝胶电泳法测定DNA单链损伤,ELISA方法测定细胞内的羰基蛋白含量。结果：经H2O2 处理后细胞生存率明显降低,细胞内DNA单链损伤及羰基蛋白含量明显升高,并随H2O2浓度的增加而加重。而经GSRg1预培养的细胞生存率明显升高,细胞内DNA单链损伤及羰基蛋白含量明显减轻,其作用呈剂量依赖关系。结论：GSRg1通过降低H2O2 对PC12细胞内DNA和蛋白的氧化损伤而起到对神经细胞的保护作用。