时间分辨荧光免疫分析技术在医学领域的应用

<正>标记免疫分析技术是在抗原与抗体特异性反应的基础上标记各种可测量的标记物,是目前在微量检测领域独具优势的免疫分析技术。20世纪60年代初期,Yallow和Berson创立了放射性免疫分析方法(RIA),因其具有极好的微量分析性能而迅速被应用于临床诊断和医学科学研究,但因其放射性危害、试剂昂贵且保存期短等劣势被限制了进一步发展。此后酶     

时间分辨荧光免疫分析法及其临床应用

时间分辨荧光免疫分析法(Time-ResolvedFluoroimmunoassay,TR-HA)同荧光免疫分析法(FIA)的不同之处在于标记物不是荧光素,而是采用稀土元素铕(Eu)标记抗原或抗体。基于Eu~(3+)独特的光谱学性质,配合荧光检测仪的时间门电路的使用,从而解决了FIA 的自然本底荧光干挠问题,大大提高了免疫分析的灵敏度(10~(-17)mol/L),接近或略高于RIA 法,且没有放射性危害和放射性废物。该技术具有测量范围宽、特异性强、标记物稳定及货架寿命长、检测速度快、操作较简便等优点。因此,自八十年代初期崛起后,迅速得     

一种高灵敏度标记免疫分析方法——免疫聚合酶链反应

一种高灵敏度标记免疫分析方法——免疫聚合酶链反应周棱贺佑丰标记免疫分析方法发展至今，已相继使用了多种标记物，如放射性同位素、酶和底物的显色、荧光及化学和生物发光等，扩大了待测物的范围并提高了免疫分析的检测极限。聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａ...     

均相酶技术进展

均相酶技术是利用酶作为标记物,在均匀的液相中进行的免疫分析技术,于1972年由Rubenstein等首创.与酶联免疫吸附法等其他用酶作为标记物的免疫分析枝术不同,均相酶技术无需分离抗原抗体复合物,整个检测过程都在均一的液相中进行.普通的酶免疫法和酶联免疫吸附法以分离的免疫复合物中的酶量多少作为检测指标,而均相酶方法不分离免疫复合物,体系中没有酶量的变化,以酶活性的高低作为检测的指标.根据测定原理,均相酶技术可分类如下.     

原子荧光在免疫学上的应用

在免疫标记检测中常用的有三种方法,即免疫荧光、放射免疫及酶免疫标记。其中最敏感而又特异的方法,莫过于放射免疫和酶免疫标记法。但这些方法,各有明显的缺点,例如:放射免疫检测法(RIA)有难以避免的放射性照射和污染的危险,以及某些放射性标记物(如放射性碘、铬等)半衰期短等缺点;酶免疫检测(EIA),因某些底物有毒性和有诱变作用,对人体可能有潜在     

免疫学检验中的酶免疫技术

20世纪中期，以放射免疫技术为代表的标记免疫技术相继问世，它将某种可微量或超微量测定的物质(如放射性核素、荧光素、酶、化学发光剂等)标记于抗原(抗体)上制成标记物，加入到抗原抗体的反应体系中与相应的抗体(抗原)反应，以检测标记物的有无及含量间接反映被测物的存在与多少。这些将标记技术与抗原抗体反应结合起来的免疫学检测技术以其敏感性高、准确性好、操作简便、     

美国雅培AXSYM免疫发光仪节约成本的使用体会

AXSYM全自动免疫化学发光分析仪是美国雅培公司的产品,其通过微粒子酶免分析法(MEIA)、荧光偏振免疫分析法(FPIA)、离子捕捉免疫分析法(ICIA)及辐射能衰减分析法(REA)等四种方法对多种人体指标进行检测,如肿瘤标记物、性激素、甲状腺激素、病毒及药物浓度等等,其检测快速、准确     

免疫组织化学技术在切片中的应用

免疫组织化学是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质）,对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法等。     

酶联免疫法临床检测中假阳性现象分析

正酶联免疫法即酶联免疫吸附试验,是目前临床实验室和血站应用最广泛的检测抗原抗体的成熟技术,在酶免疫分析技术中,酶联免疫法是发展最快、应用最广,也是最成功的技术[1]。该技术具有灵敏度高、特异度强、准确性好、酶标记物有效期长、试剂价格低廉等优点。酶联免疫法在临床应用中一直占据领先地位,然而实际应用中一直受出现假阳性这一现象的困扰。众所周知,乙型肝炎是我国广泛流行的一种公众危害性疾     

单链DNA标记免疫探针的构建用于免疫聚合酶链反应的初步研究

免疫聚合酶链反应 (免疫ＰＣＲ)是近年出现的全新的标记免疫分析技术。它以一段ＤＮＡ作为标记物来代替酶等常规标记物 ,标记在抗体或抗原上 ,在抗原抗体反应完成后 ,用ＰＣＲ技术对标记的ＤＮＡ进行扩增将信号放大 ,然后 ,根据ＰＣＲ产物的有无及量的多少测定待测抗原或抗体。本研究以碳化二亚胺为连接分子构建单链ＤＮＡ标记的免疫探针 ,并将其用于免疫ＰＣＲ中 ,现将结果报道如下 :一、材料和方法1 .ｓｓＤＮＡ标记的羊抗人ＩｇＧ免疫探针的构建 :(1 )以 5′ ＴＴＧＡＴＣＴＴＣＡＴＧＧＴＧ (ＧＣＡ )ＴＡＧＧＡＧＣＧＡＧＧＧＣＡ 3′…     

影响LUCY-2型化学发光仪结果的常见因素与对策

LUCY-2型化学发光仪即半自动化学发光免疫分析仪,是将化学发光或生物发光体系与免疫反应相结合,用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。其检测原理与放射免疫和酶免疫相似,不同之处是以发光物质代替放射性核素或酶作为标记物,并籍助自身的发光强度直接进行测定,光     

酶联免疫吸附试验质量控制的探讨

酶联免疫吸附试验（ELISA）是将抗原、抗体反应的高度特异性与酶对底物催化作用的高效性相结合起来检测液体标本中微量的免疫物质的一种方法。自20世纪70年代问世以来,已成为临床实验室应用最广泛的免疫学技术之一。ELISA法所用的试剂,如抗原、抗体、酶标记物等均为生物制剂,相对来说生物制剂是不稳定的,不同批次的质量可能有差别,同批次不同保存时间、不同条件下质量也各异。     

酶免疫分析技术进展与自动化

酶免疫分析（Enzyme Immunoassay．EIA）是标记免疫分析中的一项重要技术，是以酶标记的抗体（抗原）作为主要试剂，将抗原抗体反应的特异性和酶催化底物反应的高效性和专一性结合起来的一种免疫检测技术。作为经典的三大标记技术之一，酶免疫技术在检验医学中得到广泛应用并不断得到更新，不断和其他先进技术如荧光、发光技术以及仪器自动化相融合，日臻完善，许多自动化仪器实际上是EIA技术和其他现代化技术的复合体，其分析敏感度已达到甚至大大超过放射免疫分析（Radioimmunoassay，RIA）的水平，因试剂稳定无放射性污染且分析形式日趋多样化，简易灵活，临床应用广泛而倍受重视。     

化学发光免疫分析技术及在临床检验中的应用

化学发光免疫分析技术(CLIA)是20世纪80年代发展起来的,是继发射免疫、酶免疫、荧光免疫测定以后的新一代标记免疫技术。因其具有简便易行、标记物制备非常容易、稳定性高、标本用量少、便于实现完全自动化和不污染环境等优点,特别是能在较短的时间内得到实验结果,因此深受检验医学工作     

标记免疫测定技术的研究进展

近年来检验医学迅速发展,临床实验室使用的免疫测定技术也日新月异。作为临床免疫测定技术的一个重要分支———标记免疫测定技术是最为活跃的,也是发展最快的,其基本原理是利用抗原抗体反应的高度特异性,加上各种标记物的可测量性来达到方便敏感地检测体内各种微量生物活性物质的目的。美国学者Yalow和Berson于1959年建立了放射免疫测定(R IA),开创标记免疫分析的先河[1]。R IA采用放射性核素作为标记物,一般分3个步骤:抗原抗体的竞争抑制反应、结合态(B)与游离态(F)的分离及放射性的测量。其后在R IA基础上又出现了免疫放射测定(IR…     

时间分辨荧光免疫分析技术的应用及进展

时间分辨荧光免疫分析(time-resolvedfluoroimmunoassay,FRFIA)是80年代初期发展起来的一项新的免疫技术,具有放射免疫分析(RIA)的灵敏度高、特异性强、检测速度快等特点,克服了RIA 技术中同位素的辐射防护、半衰期短及需特殊处理等缺陷。该技术问世虽仪数年时间,但已被广泛的应用。可测定的物质种类繁多,包括药物、甲状腺激素、类固醇、多肽、蛋白质、抗原、抗体、酶、肿瘤标志物、NK 细胞等。     

AXSYM免疫发光仪常见"EXCEPTION"提示的处理

AXSYM全自动免疫化学发光分析仪是美国雅培公司最近才投入中国市场的,其通过微粒子酶免分析法(MEIA)、荧光偏振免疫分析法(FPIA)、离子捕捉免疫分析法(ICIA)及辐射能衰减分析法(REA)等四种方法对多种人体指标进行检测,如肿瘤标记物、性激素、甲状腺激素、病毒及药物浓度等等。其检测快速.准确、简便、重复性好。仪器检测过程中出现的问题会以“EXCEPTION”的方式提示,经过摸索,我们找到了对几种常见的“EXCEPTION”的     

乙肝病毒五项指标TRFIA定量测定与MEIA检测结果的相关性研究

乙肝病毒(Hepadts B veius HBV)感染是我国最常见的感染性疾病之一,应用免疫技术测定HBV特异性抗体是HBV感染诊断的主要手段。定量检测乙肝表面抗原(HBsAs),表面抗体(HBsAb),e抗原(HBeAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb)五项乙型肝炎血清学标志物(HBV-M),对乙肝类型的判断和治疗效果的观察具有重要价值。目前,定量测定HBV-M方法主要有微粒子酶免疫分析(micropaaicle enzymeimmunoassay,MEIA)和时间分辨荧光免疫分析(time resolvedfluorescence immunanssav TRFA)技术。TRFIA是近年来出现的一种很有前途的非放射性免疫分析法,该方法灵敏度高,特异性强,标记物稳定、测量范围广、结果重复性好,且自动化程度高[1,2]。本文应用MEIA技术和TRFIA技术分别对200例HBV感染者进行HBV-M五项指标检测。现将结果报告如下。1材料与方法1.1标本来源200例HBV感染者为随机选择2005年6月～10月本院住院或门诊患者。所有受试者均空腹静脉采血5ml。每份标本均用MEIA和TRFIA两种方法同...     

量子点在标记免疫分析中的应用研究进展

免疫分析（Immunoassay IA）是利用抗原抗体的特异性反应进行定性和定量的分析技术。标记免疫分析就是标记技术与免疫反应相结合的分析技术。由于标记物的放大效应可提高分析方法的检测灵敏度。在传统标记免疫分析技术中。放射免疫分析（RIA）存在污染,酶免疫分析（EIA）灵敏度较低,发光免疫分析（LIA）和荧光免疫分析（FIA）发光时间短,容易猝灭。寻找高效的标记试剂一直是人们孜孜以求的工作,早在20世纪70年代就引起科学家重视的量子点由于良好的光电性能重新引起了人们的广泛关注,开始在标记免疫分析中初步应用,并取得了令人满意的效果。本文就量子点的特性,与生物大分子的偶联方式及其在标记免疫分析方面的应用研究做一综述。[第一段]     

四种腹泻病毒抗原联检技术在临床儿童腹泻诊断中的应用价值

目的 评估四种腹泻病毒（轮状病毒、肠道腺病毒、诺如病毒、星状病毒）抗原联检技术在临床儿童腹泻病毒病原学检测中的应用价值.方法 采用荧光免疫法,四种腹泻病毒抗原联检技术（博晖腹泻四病毒联合检测系统）对临床采集的270份婴幼儿腹泻标本进行检测,并用进口的四种腹泻病毒酶免法单检试剂盒同时进行比对实验.结果 酶免法对轮状病毒、诺如病毒、肠道腺病毒及星状病毒的抗原阳性检出率分别为10.37％,14.81％,1.48％和2.96％;荧光免疫法的抗原阳性检出率分别为9.63％,10.37％,4.07％和2.22％.采用配对资料的χ^2检验进行统计分析,两种方法对轮状病毒、诺如病毒及肠道腺病毒的抗原阳性检出率差异有统计学意义（卡方值分别为121.710,4.685和47.592,P值分别为0.000,0.030和0.000,P值均＜0.05）,对星状病毒的抗原阳性检出率差异无统计学意义（卡方值为0.187,P值为0.665,P值＞0.05）;两种方法对轮状病毒的检测结果具有较好的一致性（Kappa值为0.558,0.4＜Kappa值＜0.75）,对诺如病毒、肠道腺病毒和星状病毒的检测结果一致性较差（Kappa值分别为0.142,-0.025和0.361,Kappa值均≤0.4）.结论 两种腹泻病毒检测方法之间除轮状病毒外,其它病毒检测结果的一致性较差,这些方法只可用于腹泻病原的初步筛查,确认必须进一步做培养或分子诊断.但是,在临床检测工效上,荧光免疫法有着明显的优势.