经圆窗膜给地塞米松改善放射致豚鼠 内耳损害的研究

目的 探讨经圆窗膜局部应用地塞米松对放射性内耳损害的保护作用,为头颈部肿瘤放疗所致内耳损害的预防和治疗提供理论依据。方法 选取130只豚鼠随机分为4组:(1)地塞米松组(45只):对豚鼠右耳进行70 Gy⁶⁰Coγ线照射后,经圆窗膜给地塞米松1次;(2)单纯照射组(45只):对豚鼠右耳进行70 Gy⁶⁰Coγ线照射;(3)盐水对照组(30只):对豚鼠右耳进行70 Gy⁶⁰Coγ线照射后,经圆窗膜给生理盐水1次;(4)健康对照组(10只):不做任何处理。前3组动物在实验前、照射(给药)后第3天、第2周、第2个月后,分别检测听觉脑干反应(ABR),各组动物均观察中耳黏膜,铺片及扫描电镜观察耳蜗毛细胞的形态学变化。结果 ABR阈值正常值为(8.2±2.8)dB,经照射后的3组实验动物ABR阈值均较正常值升高并呈随时间推移逐渐升高的趋势。ABR阈值在第3天、第2周和第2个月的时间段,地塞米松组分别是:(24.0±14.1)、(27.1±9.9)和 (38.0±15.1)dB;单纯照射组分别是:(24.5±13.5)、(39.5±15.4)和(57.2±18.4 )dB;盐水对照组分别是:(27.0±14.6)、(42.8±13.5) dB(本组仅观察第3天和第2周)。其中,地塞米松组在术后第2周和第2月ABR阈值较其他两组降低,差异具有统计学意义( P <0.05)。在基底膜铺片和扫描电镜下观察中,健康对照组外毛细胞缺失为(8.0±2.7)个,内毛细胞缺失为(3.7±1.2)个。照射后的3组动物的内、外毛细胞的缺失数量均有明显增加,且外毛细胞多于内毛细胞。各组均表现为随时间推移缺失数逐渐增加的趋势。在术后第2周和第2个月,地塞米松组比单纯照射组的外毛细胞缺失个数减少,分别为(30.7±7.6)与(60.3±14.5)和(67.3±7.0)与(100.0±5.3),两者的差异均有统计学意义( P <0.05)。扫描电镜观察发现,照射后耳蜗毛细胞表现为纤毛倒伏,融合或缺失其中以第3排外毛细胞为重,并随时间推移而加重。地塞米松组的毛细胞损害在第3天和第2周较其他组轻,但在第2个月时没有明显差异。结论 经圆窗膜给地塞米松可以在一定的程度上减轻大剂量放射所造成的豚鼠的内耳损害。     

Stattic抑制STAT3和HIF-1α途径对食管癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

目的 探讨Stattic对食管癌ECA109细胞裸鼠移植瘤的放射增敏效果及其可能的作用机制。方法 建立食管癌ECA109细胞裸鼠移植瘤模型;移植瘤平均体积增至约150 mm³时,采用随机数表法将24只裸鼠分为4组,药物+照射组（25 mg/kg Stattic+6 Gy）、单纯药物组（25 mg/kg Stattic）、单纯照射组（6 Gy）、对照组,每组6只。25 d后测量移植瘤体积,计算肿瘤体积抑制率,Western blot法检测移植瘤组织中STAT3、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达。结果 药物+照射组裸鼠移植瘤体积为（705.1±75.5）mm³,显著低于单纯照射组（1 113.5±101.4） mm³和单纯药物组（1 696.5±100.6）mm³（t=4.35、14.14,P<0.05）,其抑制率达（66.1±3.2）%。Western blot检测发现,药物+照射组移植瘤组织中pSTAT3、HIF-1α、VEGF蛋白表达水平较单纯照射组明显降低（t=17.07、5.05、3.54,P<0.05）。结论 Stattic对食管癌ECA109细胞裸鼠移植瘤具有放射增敏作用,可能与其抑制pSTAT3、HIF-1α、VEGF途径有关。     

DNA依赖蛋白激酶催化亚基抑制剂NU7026对结肠癌HCT116癌干细胞的放射增敏作用

目的 以结肠癌细胞HCT116为研究对象,评价DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)抑制剂NU7026对癌干细胞的放射增敏作用及其机制。方法 以CD133+/CD44+为标志物,流式细胞术检测癌干细胞亚群。将HCT116细胞分为对照组、单纯药物(20 μmol/L NU7026)组、单纯照射(2 Gy γ射线)组和药物+照射(20 μmol/L NU7026联合2 Gy γ射线)组,照射前2 h加入NU7026。细胞集落形成实验检测HCT116细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡, γ-H2AX foci的免疫荧光激光共聚焦分析DNA双链断裂损伤修复。结果 体外培养HCT116细胞中CD133+/CD44+癌干细胞亚群比例高达(88.14±0.47)%,HCT116细胞低密度接种无血清培养基中集落形成率为(84.75±1.35)%。与单纯照射组比较,药物+照射组细胞存活率显著降低(t=7.22,P<0.01)。受照后48 h,药物+照射组的癌干细胞亚群比例较单纯照射组显著降低(t=9.55,P<0.01)。受照后24 h,NU7026明显增加G₂/M期阻滞(t=7.67,P<0.01),48 h细胞早期凋亡发生率也明显增加(t=8.24,P<0.05)。药物+照射组在照后2、4、8和24 h DNA双链断裂(γ-H2AX foci)残留比单纯照射组明显增多(t=19.58、11.95、7.01和9.45,P<0.01)。结论 NU7026对癌干细胞为优势亚群的结肠癌HCT116细胞具有明显的放射增敏作用,显著增加对癌干细胞的杀伤效应,增敏机制包括抑制DNA修复,诱发不可逆G₂/M期阻滞和增加细胞凋亡。     

氯碘羟喹联合锌离子对人宫颈癌HeLa细胞的放射增敏研究

目的 探讨氯碘羟喹(CQ)联合锌离子(zinc)对人宫颈癌HeLa细胞系的放射增敏作用。方法 将细胞分为对照组、药物组、单纯照射组、药物+照射组。CCK-8法检测不同浓度氯碘羟喹联合锌离子对HeLa细胞的毒性作用;集落形成实验检测氯碘羟喹联合锌离子对HeLa细胞放射敏感性的影响,依据单击多靶模型拟合剂量-生存曲线,并计算放射增敏参数;流式细胞仪检测HeLa细胞周期与凋亡率;单荧光素酶报告基因法检测核转录因子NF-κB的活性。结果 氯碘羟喹联合锌离子对HeLa细胞的生长抑制作用呈浓度依赖性(F=188.00,P<0.01)。单纯照射组和药物+照射组的平均致死剂量(D₀)分别为3.16和2.04 Gy,放射增敏比(SER)为1.55。药物+照射组较单纯照射组相比,G₂期阻滞降低(t=10.39,P<0.05),24 h凋亡率增加(t=5.64,P<0.01),药物+照射组NF-κB活性降低(t=21.42,P<0.05)。与对照组比较,药物组NF-κB活性降低(t=12.48,P<0.05),单纯照射组NF-κB活性升高(t=6.23,P<0.05)。结论 氯碘羟喹和锌离子二者联合使用可增加HeLa细胞的放射敏感性,其机制可能与药物去除X射线诱导的G₂期阻滞,增加射线诱导的细胞凋亡,以及抑制细胞NF-κB活性有关。     

神经生长因子基因转染对爆震性听力损伤毛细胞的保护作用

目的观察人类神经生长因子口基因（human beta-nerve growth factor，hNGFβ）转染对爆震性听力损伤毛细胞的保护作用。方法选用20只白色纯种豚鼠，制备豚鼠爆震性耳聋模型（172dB SPL），爆震前后分别行听觉脑干诱发电位（ABR）检测，选爆震前后听阈阈移大于75dB SPL的豚鼠，共15只，随机分为2组，其中I组10只，为实验组（导入目的基因Ad-hNGFβ），Ⅱ组5只，为人工外淋巴液（artificial perilymphatic fluid，APF）对照组（导入APF）；另外选正常白色纯种豚鼠5只，作为正常组，不接受爆震和转染。进行爆震前和基因转染后ABR反应阈测定、耳蜗电镜扫描观察及免疫组织化学染色检测Ad-hNGFβ蛋白表达。结果基因导入后第1周，可见Ad-hNGFβ在豚鼠耳蜗内成功转染，耳蜗各回均有表达，强度基本相等。基因导入后第1周，Ⅰ组豚鼠ABR反应阈恢复显著快于Ⅱ组豚鼠ABR反应阈；4周后，Ⅰ组豚鼠ABR已恢复正常水平，而Ⅱ组豚鼠ABR未能恢复正常水平。扫描电镜示，基因导入后第1周，Ⅰ组豚鼠外毛细胞静纤毛有轻度紊乱及松散，Ⅱ组豚鼠外毛细胞静纤毛排裂扭曲、倒伏、紊乱、融合及部分缺失；4周后，Ⅰ组豚鼠外毛细胞静纤毛病变完全恢复，Ⅱ组豚鼠外毛细胞静纤毛病变减轻，部分病变没有完全恢复。结论腺病毒介导的hNGFβ基因在爆震损伤后豚鼠耳蜗中能高效表达，对听觉有明显的保护作用。     

肿节风在小型猪放射性肺损伤过程中对TGF-β1/Smads表达水平的影响

目的 研究肿节风在小型猪放射性肺损伤过程中对TGF-β1/Smads信号通路上各信号转导分子表达水平的影响。方法 75头小型猪按随机数字表法均分为健康对照组(不照射,给予生理盐水)、单纯照射组(右肺单次15 Gy γ射线+生理盐水)及药物+照射组(右肺单次15 Gy γ射线+肿节风)。分别于照射后2、4、8、12及24周取出右肺。应用HE染色观察肺组织病理改变,Real-time PCR及Western blot分别检测上述各时间点小型猪肺组织内TGF-β1、Smad2、Smad3和Smad7 mRNA及蛋白表达情况。结果 肿节风能显著减轻小型猪放射性肺损伤的炎症表现及纤维化程度。与健康对照组比较,单纯照射组TGF-β1和Smad3的表达水平从照射后第2周起、Smad2和Smad7的表达水平分别从照射后第8周和第12周起显著升高(P<0.05)。与单纯照射组比较,药物+照射组TGF-β1和Smad2的表达水平分别从照射后第4周和第8周起明显下降(P<0.05),Smad3的表达水平无明显变化,而Smad7的表达水平则从照射后第2周起显著升高(P<0.05)。结论 在放射性肺损伤的发病过程中,肿节风通过调节TGF-β1/Smads信号通路中主要信号转导分子TGF-β1、Smad2和Smad7的表达水平而发挥放射防护作用。     

氮氧自由基化合物对60Co γ射线致BALB/c小鼠辐射损伤的防护作用

目的 观察氮氧自由基化合物NHCOCH3-TEMPO对雄性BALB/c小鼠电离辐射损伤的防护效果。方法 将120只雄性BALB/c小鼠按随机数字表法分成4和7 Gy照射组,每组60只,每组再按随机数字表法分成6组,每组10只,分别为生理盐水对照组、生理盐水照射组、低剂量TEMPO照射组、中剂量TEMPO照射组、高剂量TEMPO照射组和阳性对照(WR-2721)组。⁶⁰Co γ射线照射前0.5 h动物腹腔注射防护药物,剂量分别为:WR-2721组200 mg/kg、低、中、高剂量TEMPO组分别为100、200和400 mg/kg、生理盐水对照组和生理盐水照射组给予等量生理盐水。4 Gy全身照射组用于观察小鼠照后8和15 d骨髓有核细胞数、骨髓DNA含量和外周血象的变化;7 Gy全身照射用于观察小鼠照后30 d生存率。结果 4 Gy照射后,TEMPO预处理组小鼠骨髓有核细胞计数、骨髓DNA含量较生理盐水照射组均明显增加(t=2.53~6.13,P<0.05);中剂量TEMPO预处理组小鼠外周血白细胞数较生理盐水照射组明显增加(t=4.34,P<0.05),但外周血红细胞数与生理盐水照射组相比,差异无统计学意义。7 Gy照射后,低剂量TEMPO预处理组小鼠30 d存活率较生理盐水照射组明显增加(χ²=5.934,P<0.05)。结论 氮氧自由基化合物NHCOCH3-TEMPO对雄性BALB/c小鼠γ射线辐射损伤有一定的防护作用。     

二甲双胍对大鼠放射性肺纤维化的防治作用机制

目的 探讨二甲双胍对大鼠放射性肺纤维化的防治效果及机制。方法 将30只成年Sprague-Dawley（SD）大鼠按随机数字表法分为3组：对照组、单纯照射组和照射联合二甲双胍组,每组10只。采用6 MV X射线,对大鼠右侧肺照射20 Gy。在观察期间测定CT值。在放疗后第12周,取肺组织进行HE染色、Masson染色和天狼星染色,检测肺组织的纤维化及炎症标的相关蛋白表达。非小细胞肺癌（NSCLC）A549和H460细胞经5 mmol/L二甲双胍或PBS预处理24 h后,分别暴露于0和2 Gy的X射线。CCK-8检测细胞活性。结果 在大鼠模型中,与单纯照射组比较,二甲双胍可显著减轻由于射线造成的影像学和组织学的纤维化表现以及肺密度（6.52±0.43 vs. 3.31±0.57,t=6.37, P<0.01）和羟脯氨酸含量的增加（32.58±1.59 vs. 23.47±2.46,t=12.72, P<0.01）。同时,与单纯照射组相比,其明显降低I型胶原蛋白、p-AMPKα和TGF-β的表达,并抑制p-Smad2和p-Smad3表达。此外,二甲双胍以剂量依赖的方式抑制A549和H460细胞的活性。结论 二甲双胍对射线诱发的肺纤维化具有保护作用,其可以被用作放射防护剂。     

RNA干扰抑制c-jun基因表达对放射抗拒人鼻咽癌细胞系CNE-2R放射敏感性的影响

目的 利用RNA干扰技术抑制放射抗拒人鼻咽癌细胞系CNE-2R中高表达的c-jun基因,研究其对CNE-2R细胞放射敏感性的影响及其潜在机制.方法 设计合成3组特异性针对c-jun基因的siRNA,构建慢病毒vshRNA载体,感染CNE-2R细胞,采用RT-PCR和Western blot方法检测各组对目的基因的抑制效果;并通过克隆形成实验测定其放射敏感性,CCK-8实验检测细胞的存活能力,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 重组慢病毒c-jun-RNAi-LV2能明显下调CNE-2R细胞中c-jun的mRNA和蛋白水平的表达(F=217.20、42.07, P<0.05).6 MV X射线联合c-jun-RNAi-LV2组在0、2、4、6和8 Gy照射后细胞的吸光度值均显著低于未转染组和阴性对照组(F=42.70~200.67, P<0.05).克隆形成实验显示,c-jun-RNAi-LV2组与未转染组及阴性对照组相比,SF₂、D₀和D_q值均减小,放射增敏比(SER_D0)为1.41.细胞凋亡实验结果显示,未经照射的c-jun-RNAi-LV2组与联合2 Gy照射的凋亡率分别为(20.93±1.99)%和(38.17±0.83)%,均高于未转染组和阴性对照组的凋亡率[0 Gy:(10.97±0.70)%和(20.43±0.25)%;2 Gy:(10.80±1.25)%和(19.53±1.50)%;F=50.54、330.14, P<0.05].结论 RNA干扰技术可有效抑制放射抗拒人鼻咽癌细胞系CNE-2R中高表达的c-jun基因,使细胞放射敏感性增高,其作用可能与c-jun基因的下调使细胞增殖能力减弱,细胞凋亡增多有关.     

维生素D对不同剂量X射线照射小鼠免疫功能的保护作用

目的 观察维生素D对不同剂量X射线照射小鼠免疫功能的影响。方法 将小鼠采用随机数字表法分为5组:健康对照组、2 Gy和5 Gy照射组、2 Gy+药物(维生素D)组和5 Gy+药物(维生素D)组。给药组小鼠在不同剂量X射线照射后,连续7 d腹腔注射6 IU维生素D[1,25(OH)₂D₃]/g体重,于给药后第8天,5组小鼠均处死。测定小鼠体重、胸腺和脾脏指数,ConA诱导的脾脏T淋巴细胞增殖能力,ELISA法检测脾细胞IL-2的分泌量。结果 与健康对照组相比,2和5 Gy照射组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力、脾细胞IL-2的分泌量均显著降低(F=36.20、7.13,P<0.05);与2 Gy照射组相比,2 Gy+药物组小鼠胸腺指数、脾脏指数、脾脏T淋巴细胞增殖能力均显著增高(t=-2.54、-2.24、-2.84,P<0.05);与5 Gy照射组相比,5 Gy+药物组小鼠的胸腺指数、脾细胞IL-2的分泌量显著增高(t=-5.02、-2.64,P<0.05)。结论 维生素D能够改善受照小鼠的免疫功能,但随照射剂量增大,改善作用减弱。     

富氢水减轻造血干祖细胞的辐射损伤

目的 探讨富氢水对辐射诱导的造血干祖细胞（HSPCs）损伤的保护作用。方法 32只C57BL/6小鼠根据体重分层随机区组法分为健康对照组、富氢水组、照射组、照射+富氢水组,共4组,每组8只。富氢水组和照射+富氢水组小鼠于照射前5 min至照后7 d,每天灌胃给予0.5 ml富氢水,其余小鼠每天灌胃给予0.5 ml蒸馏水,照射组和照射+富氢水组小鼠接受2 Gy的¹³⁷Cs γ射线全身照射。照后15 d取小鼠骨髓,检测骨髓中HSPCs比例、骨髓细胞的克隆形成和移植重建能力、骨髓中LSK细胞的活性氧（ROS）水平和细胞凋亡情况。结果 与照射组相比,照射+富氢水组小鼠骨髓中造血祖细胞和LSK细胞比例升高（t=-4.935、-7.898,P<0.05）,骨髓细胞形成克隆的数目增加（t=5.488,P<0.05）,竞争性骨髓移植后受体小鼠的供体嵌合率升高（t=-12.769,P<0.05）,骨髓中LSK细胞的ROS水平和细胞凋亡比例降低（t=4.380、3.954,P<0.05）。结论 富氢水对2 Gy电离辐射诱导的HSPCs损伤具有一定的保护作用。     

复方树莓籽粉对急性放射性损伤作用的研究

目的探究复方树莓籽粉对急性放射性损伤大鼠的防护作用。方法 40只Wistar大鼠,采用随机数字表法分为4组：空白对照组、单纯照射组、维生素组、复方树莓籽粉组,每组10只。维生素组和复方树莓籽粉组,给予相应药物连续灌胃7 d,第7天灌胃结束1 h后单纯照射组、维生素组、复方树莓籽粉组进行8 Gy一次性全身X射线照射,建立急性X射线损伤模型,24 h后处死4组大鼠,检测各组大鼠白细胞数、血小板数、血浆超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活力,用单细胞凝胶电泳法测定淋巴细胞DNA损伤。结果与单纯照射组比较,维生素组、复方树莓籽粉组大鼠白细胞和血小板数量、SOD活力、MDA含量、GSH-PX活力升高,差异均有统计学意义（F=14.869、6.376、7.705、3.851、3.134,P<0.05）;单纯照射组大鼠淋巴细胞DNA损伤情况较其他3组严重（F=5.493,P<0.05）。结论预防性补充复方树莓籽粉对急性放射性损伤大鼠有较好的防护作用。     

不同分割照射对胰腺生物学效应的影响

目的 探讨不同分割模式X射线照射后大鼠胰腺的损伤程度。方法 将健康成年Wistar大鼠80只,随机分为常规分割组,12 Gy分6次照射,每天1次;单次大剂量组,一次性照射12 Gy;中等低分割组,12 Gy分2次照射,中间间隔4 d;对照组,给予假照;每组20只。于照射前及照射后4、7、14、21和42 d称重、测空腹血糖、淀粉酶,观察胰腺组织学改变。结果 各实验组血糖照射后4 d时降至最低,最低时达(3.1±0.1)mmol/L,(LSD-t=20.06~28.74,P<0.001),单次大剂量组较常规分割组、中等低分割组降低更明显(LSD-t=8.72~9.71,P<0.001),常规分割组、中等低分割组差异无统计学意义,14 d及以后接近正常;血淀粉酶照射后4和7 d时升高,最高时可达(84.5±6.4 )U/L(Dunnett's-t=23.10~46.10,P<0.001),7 d时单次大剂量组较常规分割组、中等低分割组升高更明显(Dunnett's-t=7.11,P<0.05),常规分割组与中等低分割组比较差异无统计学意义,14 d及以后恢复正常。光镜下,单次大剂量组4 d时个别腺泡变性坏死,14 d时腺管周围间质纤维增生,21 d时胰岛细胞间纤维增生,42 d时腺细胞增生。常规分割组、中等低分割组出现同样变化,仅程度较轻,出现较晚。结论 当分次剂量及间隔时间合适时,中等低分割照射损伤程度未超过常规照射,这对临床非常规放疗的开展有一定的参考价值。     

电离辐射对小鼠胸腺Th17细胞相关细胞因子的影响

目的 通过研究电离辐射对小鼠胸腺Th17细胞相关细胞因子的影响,探讨高、低剂量辐射诱导不同的免疫效应中Th17细胞功能。方法 将健康ICR小鼠按随机数字表法分为健康对照组、低剂量照射组(0.05、0.075 Gy)和高剂量照射组(0.5、1.0、2.0、4.0 Gy)探讨剂量-效应关系,用X射线深部治疗机进行不同剂量的全身照射,于照射后24 h处死。同时,探讨时间-效应关系,即分为健康对照组、低剂量照射组(0.075 Gy)和高剂量照射组(2.0 Gy),于照射后12、24、48 h处死,取胸腺组织制备成组织匀浆,ELISA法检测小鼠胸腺细胞中白介素-17a(IL-17a)与白介素-21(IL-21)的浓度。结果 在时间-效应结果中,与健康对照组相比,0.075 Gy照射组胸腺细胞IL-17a和IL-21分泌量呈下降趋势,其分泌量于48 h降到最低(t=3.85、4.73,P<0.05);而2.0 Gy照射组均呈大幅度上升趋势,其分泌量在48 h达到最高(t=-6.74、-6.19,P<0.05);在剂量-效应结果中,与健康对照组相比,较低剂量照射组胸腺细胞IL-17a与IL-21分泌量下降,在0.05 Gy最低(t=8.39、16.45,P<0.05);较高剂量照射组胸腺细胞的分泌量上升,在4.0 Gy时升至最高(t=-15.60、-18.62,P<0.05)。结论 高剂量辐射可以诱导小鼠胸腺细胞IL-17a与IL-21分泌量的增加,而低剂量辐射使其下降,表明Th17细胞相关的细胞因子在低剂量辐射诱导的免疫功能增强效应和高剂量辐射诱导免疫抑制效应中起着重要的作用。     

丰富环境对辐射诱导小鼠认知障碍的保护作用及可能机制

目的 研究丰富环境对辐射诱导小鼠认知功能障碍的保护作用及其可能机制。方法 将45只2月龄雌性昆明小鼠采用随机数表法分为对照组、照射组和照射丰富环境组,每组15只。照射组和照射丰富环境组予以单次4 Gy全身¹³⁷Cs γ射线照射,照射丰富环境组辐射后连续35 d给予丰富环境刺激。新旧事物识别实验检测小鼠认知功能;免疫组织化学方法检测小鼠海马区小胶质细胞标记物IBA-1的表达;Western blot方法检测小胶质细胞激活标记物CD68及突触囊泡素（SYP）的表达。结果 与对照组相比,照射组小鼠在新旧事物识别实验中新事物分辨率降低,海马区IBA-1阳性细胞数目增加,CD68蛋白表达升高,SYP蛋白表达降低（t=3.66、6.83、5.79、6.84,P<0.05）。与照射组相比,照射丰富环境组小鼠新事物分辨率升高,海马区IBA-1阳性细胞数目减少,CD68蛋白表达降低,SYP蛋白表达增加（t=3.56、7.69、4.59、4.06,P<0.05）。结论 4 Gy单次全身¹³⁷Cs γ射线照射可构建放射性认知功能障碍模型,丰富环境可改善模型小鼠认知功能,其机制可能与抑制海马区小胶质细胞激活以及减少神经元突触丢失有关。     

不同照射方式对结直肠癌CL187细胞的抑制作用和分子机制初探

目的 研究单次、分次和125Ⅰ粒子持续低剂量率照射对结直肠癌CL187细胞生物学效应的影响.方法 实验分高剂量率单次照射组(400 cGy/min,单次组)、分次照射组(2 Gy/次/d,400 cGy/min,分次组)和125Ⅰ粒子持续低剂量率照射组(2.77 cGy/h,125Ⅰ组).3组细胞照射0、2、4和8 Gy后,24和48 h进行细胞计数和锥虫蓝染色,比较细胞总数和细胞存活率的差异.利用克隆形成实验比较3组细胞增殖能力的差异.通过流式细胞仪检测细胞凋亡.蛋白免疫印迹法分析PHLPP2、PTEN和Bax蛋白表达的变化.结果 与单次组和分次组相比,125Ⅰ组细胞总数减少(t=34.28和29.48,P＜0.05)、存活细胞比例减少(t=-12.38和-14.61,P＜0.05),细胞克隆形成能力下降,相对生物学效应是1.41.照射后48 h细胞凋亡检测发现125Ⅰ组细胞凋亡比例增加(t=-15.08和-11.99,P＜0.05).蛋白免疫印迹法检测发现125Ⅰ组Bax表达量升高,PHLPP2和PTEN的表达量3组间差异无统计学意义.结论 单次、分次和持续低剂量率照射后细胞PHLPP2蛋白表达水平均升高,但剂量率的高低并不影响其表达水平.不同方式照射后,凋亡相关蛋白Bax的表达水平上升,125Ⅰ组升高更加明显,125Ⅰ持续低剂量粒子照射可能通过影响凋亡相关蛋白Bax的表达水平实现对结直肠癌CL187细胞的杀伤作用.     

双光子成像技术在大鼠放射性皮肤损伤修复评估中的应用

目的 采用双光子激发荧光（TPEF）成像技术,无创、活体评估X射线引起大鼠皮肤放射性损伤发展和修复过程。方法 24只SD大鼠采用随机数表法分为4组,健康对照组、25 Gy组、35 Gy组和45 Gy组,每组6只。照射后不同时间评估皮肤损伤程度,通过TPEF成像技术在体检测表皮细胞尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸（磷酸）[NAD（P）H]和真皮胶原纤维荧光信号的病理改变。结果 第10天,各辐射组大鼠出现红斑和脱皮;第15~20天,随着辐射剂量地增加,辐射组出现递进性的渗出、水肿和溃疡;第25天,25 Gy组开始修复,其他组仍有渗出和溃疡。第10天,25、35和45 Gy组表皮细胞NAD（P）H荧光信号减少,乳头层和网状层荧光信号值减少,与健康对照组比较,差异有统计学意义（t=24.145、28.303、26.989、6.654、7.510、7.997,P<0.05）;第30天,25 Gy组表皮细胞NAD（P）H和真皮胶原纤维开始修复,颗粒层、棘层和基底层细胞出现荧光信号,35、45 Gy组未出现NAD（P）H荧光信号;25 Gy组乳头层和网状层荧光信号均逐渐增高,但仍低于健康对照组（t=115.133、17.431,P<0.05）,而45 Gy组未出现荧光信号。结论 TPEF技术可以无创、活体检测X射线照射后表皮细胞和真皮胶原纤维信号损伤和修复的病理变化。     

Icariin protects against radiation-induced mortality and damage in vitro and in vivo

Abstract

Purpose: The present study aimed to investigate the potential protective effects of icariin both in vivo and in vitro, an active flavonoid glucoside derived from medicinal herb Epimedium, and its possible mechanisms against radiation-induced injury.

Methods: Male C57BL/6 mice were exposed to lethal dose (7?Gy) or sub-lethal dose (4?Gy) of whole body radiation by X-ray at a dose rate of ～0.55?Gy/min, and icariin was given three times at 24?h and 30?min before and 24?h after the irradiation. After irradiation, hematological, biochemical, and histological evaluations were performed. We further determined the effect of icariin on radiation-induced cytotoxicity and changes in apoptosis-related protein expression.

Results: Icariin enhanced the 30-day survival rates (20 and 40?mg/kg) in a dose-dependent manner, and protected the radiosensitive organs such as intestine and testis from the radiation damages. Moreover, hematopoietic damage by radiation was significantly decreased in icariin-treated mice as demonstrated by the increases in number of peripheral blood cells, bone marrow cells (1.7-fold), and spleen colony forming units (1.7-fold). In addition, icariin decreased the radiation-induced oxidative stress by modulating endogenous antioxidant levels. Subsequent in vitro studies showed that icariin effectively increased cell viability (1.4-fold) and suppressed the expression of apoptosis-related proteins after irradiation.

Conclusion: These results suggest that icariin has significant protective effects against radiation-induced damages partly through its anti-oxidative and anti-apoptotic properties.     

西咪替丁对胸部分割照射小鼠脾脏损伤的治疗作用

目的探究西咪替丁(CMTD)对局部分割照射小鼠的治疗作用。方法雄性C57BL/6小鼠30只,随机单位组设计分为对照组、单纯照射组和照射给药组(CMTD,100 mg/kg),每组10只;采用X射线局部分割照射小鼠右胸腔,8 Gy/d照射,连续3 d,累积照射剂量为24 Gy,剂量率为0.883 Gy/min。照射后连续7 d给予照射给药组小鼠灌胃CMTD(100 mg·kg^-1·d^-1),对照组和单纯照射组给予生理盐水。照射后第7天检测小鼠体重、脏器指数、脾脏T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞亚群、NK细胞亚群变化以及脾脏组织病理学改变。结果分割照射对小鼠体重影响不大,但可诱发远端效应,使脾脏脏器指数降低为(0.369±0.011),与对照组的(0.396±0.022)比较,差异有统计学意义(t=2.978,P<0.05);改变脾脏病理结构,脾脏CD3+、CD4+、CD8+、CD3+CD4+、CD3+CD8+淋巴细胞比例显著降低(t=5.754、3.570、4.442、5.281、4.570,P<0.05)。而照射给药组小鼠体重恢复明显,脾脏组织损伤缓解,脾脏淋巴细胞亚群比例恢复,CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+淋巴细胞显著升高(t=3.523、2.706、2.520,P<0.05),但仍低于正常水平。结论CMTD可有效改善X射线分割照射对小鼠脾脏的损伤,提高照后小鼠的免疫功能,可作为潜在的抗辐射治疗药物。