内源性一氧化碳对缺氧性肺动脉高压与肺血管结构调节的研究

目的 研究内源性一氧化碳（CO）对缺氧性肺动脉高压（PH）和肺血管结构的调节作用。方法 将18只Wistar大鼠随机分为对照组、低氧组、低氧＋ZnPP组。均以右心导管法测定肺动脉压力；对肺组织进行弹力纤维染色，测定肌型动脉百分比，以及肺中、小动脉的相对中膜面积（RMA）、厚度（RMT）；采用免疫组织化学法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达，核酸原位杂交法检测肺动脉Ⅲ型前胶原[Pro－α1（Ⅲ）胶原]mRNA表达。结果 鼠肌型动脉百分比和肺中、小型动脉RNA及PTM均明显增高；ZnPP促使低氧上述肺血管结构重建指标增高更加显著（P均＜0．01）。低氧大鼠肺动脉Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及Pro－α1（Ⅲ）胶原mRNA表达均显著增高，ZnPP促使低氧大鼠动脉Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及Pro－α1（Ⅲ）胶原mRNA表达更加明显（P均＜0．01）。结论 内源性CO在缺氧性PH和肺血管结构重建形成中发挥着重要的保护作用，其机制至少部分与CO对低氧大鼠肺动脉胶原蛋白合成的调节有关。     

低氧性肺动脉高压时内源性一氧化碳体系的研究

目的 探讨内源性血红素氧合酶／一氧化碳(HO／CO)系统在低氧性肺动脉高压大鼠体内的变化。方法 采用常压低氧大鼠肺动脉高压模型,观察低氧大鼠肺动脉平均压(mPAP)和肺组织匀浆碳氧血红蛋白(HbCO)含 量,用核酸原位杂交和免疫组织化学的方法检测低氧大鼠肺动脉血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA和HO-1蛋白的表 达。结果 低氧组大鼠mPAP为(22.00±2.31)kPa,较对照组[(16.57±2.51)kPa]增高32.77％(t=3.90,P <0.01);低氧大鼠在mPAP升高的同时,伴有肺动脉HO-1 mRNA和HO-1蛋白表达积分值增加,分别较对照组增 加82％和260％(t=3.79、5.79,P均<0.01);低氧组大鼠肺组织匀浆CO含量(16.74±0.92)nmol/μg,较对照组 (14.05±1.49)nmol／μg增高19.14％(t=5.85,P<0.01)。结论 低氧促使HO／CO系统上调,HO／CO参与了低 氧性肺动脉高压的发病机制。     

一氧化碳对缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨一氧化碳（CO）对缺氧性大鼠肺血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法 将大鼠随机分为4组：常氧对照组（7只）、低氧组（6只）、低氧＋锌原卟啉组（低氧＋ZnPP组）（6只）及低氧＋低浓度一氧化碳组（低氧＋低浓度CO组）（5只）。应用增殖细胞核抗原（PCNA）单克隆抗体、Fas多克隆抗体经免疫组织化学检测技术及原位缺口末端标记法（TUNEL）对大鼠肺动脉平滑肌细胞进行增殖与凋亡定位及半定量分析。结果 1．低氧＋低浓度CO组肺动脉平滑肌细胞增殖指数（PI）明显低于低氧组和低氧＋ZnPP组（P＜0．01）,低氧＋ZnPP组PI高于低氧组（P＜0．01）;2．TUNEL检测低氧＋低浓度CO组凋亡指数（AI）明显高于其余三组（P＜0．01）;3．低氧＋低浓度CO组Fas表达高于其余三组（P＜0．01）;4．低氧＋低浓度CO组PI／AI与常氧对照组PI／AI相近约等于1。结论 CO对缺氧大鼠肺血管平滑肌细胞有抑制增殖和促进凋亡的作用。     

内源性一氧化氮对低氧大鼠肺动脉硫化氢胱硫醚γ-裂解酶体系的影响

目的　探讨内源性一氧化氮 (NO)对低氧性肺动脉高压 (PH)大鼠肺动脉硫化氢 (H2 S) /胱硫醚γ 裂解酶 (CSE)体系的调节作用。方法　将 19只大鼠随机分为 3组 :低氧组 ( 7只 )、低氧 +L NAME组 (予NOS抑制剂Nω 硝基 L 精氨酸甲酯处理低氧组 ) ( 6只 )和对照组 ( 6只 )。低氧 2 1d后 ,分别测定肺动脉平均压 ,检测右心室 /左心室 +室间隔 (RV/LV +SP)比值 ,测定肺组织匀浆NO含量、血浆H2 S含量及肺组织匀浆CSE活性变化。结果　低氧 2 1d大鼠肺动脉平均压力和RV/LV +SP明显增高 ,同时肺组织中NO和血浆H2 S含量及肺组织CSE活性亦明显下降 (P均 <0 .0 1) ;而低氧 +L NAME组 ,伴随NO含量的下降 ,肺动脉平均压亦显著上升 (P <0 .0 5 ) ,同时血浆H2 S含量及肺组织CSE活性较低氧组显著上升 (P均 <0 .0 5 )。结论　内源性NO对肺动脉H2 S/CSE系统在低氧性PH大鼠中呈抑制作用 ,这一过程参与低氧性PH形成的调控机制。     

慢性缺氧性肺动脉高压大鼠肺血管显微结构研究

目的 观察大鼠在慢性低氧环境中不同节段肺血管显微结构的变化规律，探讨其在慢性缺氧性肺动脉高压形成中的病理意义。方法 将23只Wistar大鼠随机分为对照组、低氧1周组、低氧2周组。以右心导管法测定肺动脉压力；对肺组织进行弹力纤维染色，计数各型肺内动脉百分比；应用计算机图像分析系统测定分别与三级呼吸道伴行的肺动脉的相对中膜面积（RMA）、厚度（RMT）及血管壁内弹力层（IEL）厚度。结果 低氧2周组大鼠肺动脉平均压明显高于对照组及低氧1周组，低氧1周组肺动脉平均压明显高于对照组；低氧2周组肌型动脉百分比（MA％）、三组动脉RMA、RMT均明显高于对照组及低氧1周组，低氧1周组MA％、肺泡水平动脉RMA、RMT明显高于对照组（P均＜0．05）。与对照线相比，低氧2周组和1周组肺内动脉血管壁IEL均明显减少（P均＜0．05）。多因素相关分析表明，肺动脉平均压与肺泡水平动脉RMA、RMT呈正相关；与肺泡水平肺动脉血管壁IEL厚度呈负相关（P均＜0．05）。结论 慢性低氧环境中大鼠肺血管结构呈现节段依赖性的重构规律，这一改变是缺氧性肺动脉高压形成的重要病理基础。     

内源性一氧化碳对培养的肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的调节

目的 探讨内源性一氧化碳（CO）对低氧性肺血管平滑肌细胞（PASMC）增殖与凋亡的影响及机制。方法 体外培养Wistar大鼠PASMC,进行低氧并予以血红素氧合酶抑制剂卟啉锌－9（zinc protoporphyrin IX,ZnPP-9)处理,分为常氧12h组（N1组）、常氧24h组（N2组）、低氧12h组（H1组）、低氧24h组（H2组）、低氧12h ZnPP组（H1＋ZnPP组）、低氧24h ZnPP组（H2＋ZnPP组）,采用流式细胞术、免疫细胞化学方法检测PASMC增殖与凋亡情况。结果 1．碳氧血红蛋白（HbCO)检测：采用双波长法测定细胞培养液中HbCO的吸光度,用以代替培养液中CO的相对含量。低氧12h培养液中HbCO较常氧时显著增高（P＜0．01）,至24h恢复至常氧水平（P＞0．05）;而低氧同时进行干预,H1＋ZnPP及H2＋ZnPP两组HbCO水平均下降,且明显低于单纯低氧组（P＜0．01）,两组与常氧组相比亦有差异（P＜0．001）。2．流式细胞仪检测PASMC增殖指数（PI）与凋亡指数（AI）：H1组PI较N1组下降（P＜0．01）,H2组则较N2组增高（P＜0．001）;H1＋ZnPP组较H1组PI显著增高（P＜0．001）,H2＋ZnPP组与H2组比则无明显变化（P＞0．05）;H1组AI低于H2组（P＜0．01）,H1＋ZnPP组AI高于H1组（P＜0．001）,H2＋ZnPP组则低于H2组（P＜0．001）。3．PCNA免疫细胞化学染色,H1组及H2组PASMC细胞核阳性反应颗粒分别按N1及N2组明显增加（P分别＜0．01及P＜0．001）,H1＋ZnPP组及H2＋ZnPP组分别较H1及H2组增强（P＜0．01）。4．Caspase 3免疫细胞化学：H2组与H1组比胞浆着色增强（P＜0．05）,ZnPP处理12h及24h分别较H1及H2减弱（P＜0．05）。5．NF－κK免疫细胞化学：H1及H2组核染色分别较N1及N2组增强（P＜0．001）,而H1＋ZnPP组及H2＋ZnPP组则又分别较H1、H2组阳性核表达增多（P＜0．01）。结论 1．低氧12h内源性CO对PASMC增殖抑制作用显著,对凋亡可能无直接影响;低氧24h CO促进PASMC凋亡作用明显,而对增殖的影响不显著。2．NF－κB可能参与了内源性CO抑制PASMC增殖的调控机制。     

低氧性肺动脉高压发病中的硫化氢的变化及意义

本文综述了关于低氧性肺动脉高压(HPH)发病中的硫化氢(H2S)变化及其意义,研究H2S对HPH及肺血管结构重建及对一氧化碳/一氧化氮(CO/HO)体系的调节作用、H2S对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的调节作用。以上研究表明H2S与内源性NO和CO相似,在低HPH发病过程起重要作用。     

内源性一氧化氮对大鼠慢性缺氧性肺动脉高压的调节作用

目的探讨一氧化氮对慢性缺氧性肺动脉高压的调节作用。方法采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠１８只，随机将各配伍组大鼠分别分配到组Ⅰ（对照组）、组Ⅱ（缺氧组）及组Ⅲ［缺氧加一氧化氮合酶抑制剂Ｎω－硝基－Ｌ－精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ组）］。研究Ｌ－ＮＡＭＥ对缺氧性肺动脉高压的影响。结果与对照组相比，缺氧加Ｌ－ＮＡＭＥ注射的大鼠肺动脉平均压上升百分数（５８％±１２％）明显高于单纯缺氧大鼠（３４％±１５％）（ｔ＝３．０１３，Ｐ＜０．０１）；缺氧加Ｌ－ＮＡＭＥ注射大鼠血浆一氧化氮下降百分数（３８％±４％）明显大于单纯缺氧大鼠（１２％±１２％）（ｔ＝２７；０．０５＞Ｐ＞０．０２）。结论大鼠慢性缺氧时一氧化氮释放减少，而一氧化氮释放减少可能参与缺氧性肺动脉高压的形成     

肾上腺髓质素缓解低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉中胶原堆积的研究

目的：观察长期应用肾上腺髓质素（adrenomedullin, ADM）对慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺血管胶原代谢的影响,以探讨ADM对慢性低氧性肺血管结构重建的作用及其可能机制。方法：19只雄性Wistar大鼠随机分为对照组（n=6）、低氧组（n=7）、低氧+ADM组（n=6）。对于低氧+ADM组大鼠,通过微量渗透泵皮下持续给予ADM（300 ng/h）2周。低氧2周后,以右心导管法测定肺动脉平均压,检测右心室与左心室加室间隔比值,观测肺血管显微变化。用免疫组化法检测肺动脉中胶原I、胶原III和转化生长因子（TGF）-β的表达。结果：低氧2周后,大鼠肺动脉平均压明显升高(P<0.01),右心室与左心室加室间隔的比值明显增加(P<0.01),肺小血管肌化程度和肺动脉相对中膜厚度较对照组均明显增高（P<0.01）,同时肺动脉胶原I、胶原III和TGF-β表达增强。与低氧组大鼠相比,低氧+ADM组大鼠肺动脉平均压明显降低（P<0.01）,右心室与左心室加室间隔的比值明显下降（P<0.01）,肺小血管肌化程度和肺动脉相对中膜厚度较低氧组均明显降低（均P<0.01）,同时肺动脉胶原I、胶原III和TGF-β表达减弱。结论：外源性补充ADM可能通过抑制肺动脉TGF-β表达,减少肺动脉壁胶原异常堆积,对低氧性肺动脉高压和肺血管结构重建发挥调节作用。     

一氧化氮对缺氧性肺血管结构重建大鼠肺动脉血小板源生长因子表达的影响

目的 探讨一氧化氮对缺氧性肺血管结构重建大鼠肺动脉中血小板源生长因子 （ＰＤＧＦ）表达的影响。方法 将大鼠随机分为４组：常氧组（６只）、低氧组（６只）、低氧＋Ｌ－精氨酸组（低氧＋Ｌ－Ａｒｇ组）（７只）及低氧＋Ｎ＾ω－硝基－Ｌ－精氨酸甲酯组（低氧＋Ｌ－ＮＡＭＥ组）（６只）。以光学显微镜观测４组大鼠肺中、小肌型动脉的相对中膜厚度（ＲＭＴ）。应用ＰＤＧＦ的单克隆抗体经免疫组织化学技术对４组大鼠肺动脉ＰＤ     

缺氧诱导因子-1α及下游因子在缺氧性肺动脉高压新生大鼠肺内的表达研究

目的 通过了解缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、内皮素-1（ET-1）及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的mRNA及蛋白质在缺氧性肺动脉高压（HPH）新生大鼠肺组织中的表达以及和肺动脉压力的关系,探讨三种因子在HPH发病机制中的作用.方法 建立HPH新生大鼠模型;分别在缺氧3、5、7、10、14、21天检测平均肺动脉压力（mPAP）;通过RT-PCR、免疫组织化学和Western blot方法分别对肺组织中上述三种因子的mRNA、蛋白质表达强度及蛋白质表达量进行分析;进行三因子和肺动脉压力的相关性分析.结果 缺氧3、5、7、10天HIF-1 αmRNA及蛋白质表达强度均明显高于对照组（P＜0.05）;缺氧5、7天其蛋白质表达量明显高于对照组（P＜0.05）.缺氧3天ET-1mRNA表达明显高于对照组（P＜0.05）;缺氧3、5、7天ET-1蛋白质表达强度及蛋白质表达量均高于对照组（P＜0.05）,缺氧10天其蛋白质表达量仍高于对照组（P＜0.05）.缺氧3、5、7天iNOSmRNA及蛋白质表达均高于对照组（P＜0.05）.缺氧组在缺氧21天内HIF-1α表达总体与mPAP变化呈正相关（P ＜0.001）;缺氧7天内ET-1、iNOS表达总体与mPAP变化呈正相关（P＜0.05）.结论 HIF-1α、ET-1和iNOS在HPH新生大鼠肺组织中表达增加,与肺动脉压力呈正相关,三种因子在该病发病机制中可能具有重要作用.     

黄芪注射液对低氧性肺动脉高压大鼠肺组织内皮素1与一氧化氮分泌的影响

目的探讨黄芪注射液对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺组织中内皮素1(ET-1)和一氧化氮(NO)的影响。方法将体重为210~310 g健康雄性W istar大鼠21只随机分为3组,每组7只。(1)对照组:室内空气正常饲养;(2)低氧组:在常压低氧舱内[氧浓度(10.0±0.5)%]缺氧,每天8 h,每周6 d,连续30 d;(3)治疗组:缺氧条件同低氧组,自缺氧第一天起给大鼠每天腹腔内注射8g/kg黄芪注射液。对照组与低氧组每天腹腔内注射生理盐水量和治疗组相同。于低氧30 d后用右心导管法测定肺动脉平均压(mPAP),测定颈动脉平均压(mCAP),分光光度法测定肺组织中NO含量和放射免疫法测定肺组织中ET-1含量,观察肺中、小肌型动脉超微结构的变化情况。结果(1)低氧组mPAP(mm Hg)(21.9±1.6)、ET-1(pg/m l)(309.1±58.1)明显高于治疗组(16.2±0.8、287.7±57.5)和对照组(15.3±0.8、241.1±52.5)(P<0.01和<0.05),而治疗组与对照组相比差异无统计学意义。(2)大鼠肺组织中NO含量(μmol/L)低氧组(6.5±0.3)明显低于治疗组(7.9±1.2)和对照组(9.2±0.9),差异有统计学意义(P<0.01),治疗组虽高于低氧组,但仍低于对照组(P<0.05)。(3)三组之间mCAP比较差异无统计学意义。(4)电镜下可见:对照组肺小动脉内皮细胞扁平、结构正常,低氧组肺中、小肌型动脉内皮细胞增生、肥厚、肿胀,平滑肌细胞肥厚,胞浆内可见大量线粒体和内质网,治疗组内皮细胞趋于扁平、胞浆内空泡明显减少。结论慢性低氧可引起大鼠肺组织中ET-1含量升高、NO含量下降、肺血管结构重建及内皮损伤,导致mPAP上升,黄芪注射液可调节肺组织中ET-1、NO含量,对HPH有良好的治疗作用。     

硫化氢对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉增殖细胞核抗原及Bcl-2的调节作用

目的　探讨硫化氢 (H2 S)对低氧性肺动脉高压 (HPH)大鼠肺动脉结构重建和肺动脉平滑肌细胞增殖、凋亡的调节作用。方法　选取体重 180～ 2 0 0g的健康雄性Wistar大鼠 2 4只 ,随机分为常氧组、低氧组、低氧 硫氢化钠 (NaHS)组。监测其血液动力学变化及肺动脉结构重建 ,采用免疫组织化学方法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)和Bcl 2凋亡蛋白表达 ,并对肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡进行定位和半定量分析。结果　低氧组大鼠平均肺动脉压 (mPAP)明显升高 (P <0 .0 1) ,右室 / (左室 室间隔 )比值显著增加 (P <0 .0 1) ,肺动脉相对中膜厚度 (RMT)和相对中膜面积 (RMA)增加 (P均 <0 .0 1) ;NaHS可明显降低肺动脉压力及抑制肺动脉重建 (P <0 .0 1)。低氧组大鼠肺小动脉平滑肌细胞PCNA和Bcl 2凋亡蛋白表达分别较对照组增高 (P <0 .0 1) ;NaHS可明显下调肺小动脉平滑肌细胞PCNA和Bcl 2蛋白表达 (P <0 .0 1)。结论　新型气体信号分子H2 S可降低肺动脉压力 ,抑制肺动脉平滑肌细胞增殖 ,在HPH及肺血管结构重建的形成中发挥重要作用     

通过微量渗透泵应用肾上腺髓质素对大鼠低氧性肺动脉高压的调节作用

目的研究肾上腺髓质素(ADM)对大鼠低氧性肺动脉高压的调节作用。方法24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、低氧组、低氧 ADM组,每组各8只。对于低氧 ADM组大鼠通过微量渗透泵皮下持续给予ADM(300ng/h)。低氧2周后,以右心导管法测定肺动脉收缩压(sPAP)和肺动脉平均压(mPAP),测量体循环平均压(mSAP),检测右心室与左心室加室间隔比值[RV/(LV S)]。结果低氧2周后大鼠sPAP、mPAP和RV/(LV S)较对照组明显增高(P均<0.01),低氧 ADM组大鼠sPAP、mPAP和RV/(LV S)较低氧组明显减低(P均<0.01),而mSAP在3组之间无明显差异。结论通过微量渗透泵皮下持续给予低氧大鼠ADM,缓解了低氧性肺动脉高压形成。     

二氧化硫对低氧性肺动脉高压大鼠内源性硫化氢体系的调节作用

目的 研究二氧化硫( SO2)对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉内源性硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶( CSE)以及H2S/巯基丙酮酸转硫酶(MPST)体系的调节作用.方法 将雄性Wistar大鼠(32只)随机分为对照组、低氧组、低氧+ SO2组和低氧+天冬氨酸异羟肟酸(hydroxamate,HDX)组,每组8只.低氧处理采用常压低氧的方法,氧浓度为10％,每天低氧6h,持续21 d.对照组大鼠在常氧环境中饲养.低氧处理结束后采用右心导管法测定肺动脉平均压,采用硫电极法测定肺组织H2S含量和H2S产率,采用免疫组化法检测各组大鼠肺小动脉内膜及中膜CSE和MPST的蛋白表达.结果 低氧组大鼠肺动脉平均压较对照组高[(33.38 ±6.32) mm Hg vs(16.74±3.81) mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa,P＜0.01];低氧+SO2组大鼠肺动脉平均压较低氧组低[(29.65±2.53)mm Hg vs(33.38±6.32) mm Hg,P＜0.01],低氧+HDX组大鼠肺动脉平均压较低氧组高[(39.44±6.26) mm Hg vs(33.38±6.32) mm Hg,P＜0.01].低氧组大鼠肺组织H2S含量[(2.02±0.43) μmol/g vs (3.11±0.42) μmol/g,P＜0.01]及H2S产率[(19.64±3.48) nmol/(g· min)vs(28.20±5.95) nmol/(g·min),P＜0.05]均较对照组低.给予SO2供体后,低氧+SO2组肺组织H2S含量[(2.73±0.20)μmol/g vs(2.02±0.43)μmol/g,P＜0.01]及H2S产率[(26.24±1.92) nmol/(g· min)vs(19.64±3.48) nmol/(g· min),P＜0.01]均较低氧组升高.当给予内源性SO2生成酶抑制剂HDX后,低氧+HDX组肺组织H2S含量[(1.64±0.23) μmol/g vs (2.02±0.43)μmol/g,P＜0.05]及肺组织H2S产率[(13.94±3.63) nmol/(g·min) vs (19.64±3.48) nmol/(g·min),P＜0.05]均较低氧组低.低氧组大鼠肺小动脉内膜[(0.31±0.02)vs(0.36±0.01),P＜0.01]及中膜[(0.27±0.01)vs (0.30±0.01),P＜0.01]中CSE蛋白表达均较对照组低.低氧+SO2组大鼠肺小动脉内膜CSE蛋白表达较低氧组高[(0.35±0.02) vs (0.31 ±0.02),P＜0.01].低氧+HDX组大鼠肺小动脉内膜CSE蛋白表达较低氧组低[(0.26±0.01) vs (0.31±0.02),P＜0.01].与对照组相比,低氧组大鼠肺小动脉内膜及中膜MPST的蛋白表达差异没有统计学意义.低氧+SO2组大鼠肺小动脉中膜MPST的蛋白表达较低氧组高[(0.32±0.02) vs (0.29±0.01),P＜0.01];而与低氧组相比,低氧+ HDX组大鼠肺小动脉内膜及中膜MPST的蛋白表达差异没有统计学意义.结论 外源性给予SO2供体可上调低氧性肺动脉高压大鼠肺小动脉内膜H2S生成酶CSE及肺小动脉中膜MPST蛋白表达,促进H2S生成增多,从而间接缓解低氧性肺动脉高压的形成.     

缺氧性肺动脉高压新生大鼠肺血管重塑与肺血管HIF-1α、ET-1、iNOS表达的相关性研究

目的：了解缺氧性肺动脉高压（HPH）新生大鼠肺血管重塑与肺血管HIF-1α、ET-1、iNOS表达的相关性。方法：建立HPH新生大鼠模型,检测平均肺动脉压力（mPAP）;并计算肺小动脉中层壁厚占肺小动脉的外径百分比（MT%）、肺小动脉管壁中层横截面积占肺小动脉总横截面积的百分比（MA%）作为肺血管重塑指标;免疫组化法检测新生大鼠肺组织中HIF-1α、ET-1、iNOS反应强度及mRNA表达;进行肺血管重塑与HIF-1α、ET-1、iNOS mRNA相关性分析。结果：缺氧3、5、7、10、14、21 d,新生大鼠mPAP持续增高,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。缺氧7 d后MT%、MA%明显高于对照组（P<0.05）。肺组织中HIF-1α表达在缺氧3、5、7、10 d时显著高于对照组（P＜0.05）,其mRNA表达在3、5、7 d高于对照组（P＜0.05）;ET-1表达在缺氧3、5、7 d时显著高于对照组（P＜0.05）,其mRNA表达在缺氧3 d时高于对照组（P＜0.05）;iNOS蛋白及mRNA表达在缺氧3、5、7 d 时均显著高于对照组（P＜0.05）。MT%和MA%与HIF-1α mRNA呈正相关（r分别为 0.835、0.850,P<0.05）。结论：新生大鼠缺氧7 d后肺血管出现重塑;HIF-1α、ET-1及iNOS共同参与了新生大鼠HPH的发生及发展。     

低氧致肺动脉高压新生大鼠TRIP6和cyclinD1表达及其对肺血管重塑的影响

目的：研究低氧致新生鼠缺氧性肺动脉高压( hypoxia induced pulmonary hypertension, HPH)发生发展过程中,肺组织中TRIP6、cyclinD1蛋白动态变化,及其对肺血管重塑的影响。方法采用低氧方法(FiO20.10~0.12)制备新生SD大鼠HPH模型,对照组予正常氧浓度FiO20.21。每组32只于实验后14 d,监测右心室平均压力,采集心脏及肺组织标本,分别用BL420系统监测右心室压力,测定右心室肥厚指数及肺小动脉中膜面积百分比、肺小动脉中膜厚度百分比评估模型是否成功。同时每组大鼠分别于实验后3、7、10、14 d,采集肺组织标本,采用免疫组织化学及Western blot技术观察TRIP6和cyclinD1蛋白表达变化。结果与对照组比较,模型组14 d后,肺小动脉管壁增厚,管腔变狭窄,肺小动脉中膜面积百分比[(42.28±1.64)％ vs.(24.12±0.83)％]、中膜厚度百分比[(28.26±1.41)％vs.(16.94±0.90)％]、右心室肥厚指数(0.52±0.02 vs.0.29±0.01)、右心室平均压力[(22.00±0.82)mmHg vs.(12.10±0.48)mmHg,1 mmHg＝0.133 kPa]均显著增加(P<0.01);TRIP6在对照组14 d时肺小动脉管壁几乎无表达,模型组明显增强,其表达水平在3、7、10、14 d时明显增高( P<0.05);cyclinD1蛋白表达水平在3 d时两组比较差异无统计学意义( P>0.05),7、10、14 d时明显高于对照组(P<0.05);Pearson相关分析显示,14 d时肺组织TRIP6蛋白与cyclinD1蛋白表达呈明显正相关(r＝0.587,P<0.05),中膜厚度百分比、中膜面积百分比与肺组织TRIP6蛋白、cyclinD1蛋白表达均呈明显正相关(r＝0.878,P<0.01;r＝0.812,P<0.01;r＝0.872,P<0.01;r＝0.789,P<0.01)。结论在HPH发生中,肺组织中TRIP6蛋白和cyclinD1表达上调,并且增加的TRIP6和cyclinD1蛋白表达可能与肺血管重塑相关,进而影响肺动脉高压的发生发展过程。     

当归注射液对大鼠慢性肺动脉高压的影响

目的 探讨当归注射液对大鼠慢性肺动脉高压的影响.方法 30只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成对照组、低氧组、当归保护组,每组10只.当归保护组每天缺氧前腹腔注射25%当归注射液[10mg/(kg · d)];对照组、低氧组于每天缺氧前腹腔注射等量生理盐水.常压低氧建立大鼠肺动脉高压模型,4周末测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、应用免疫组织化学法和图像分析技术定量检测大鼠肺小动脉管壁和内皮细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达水平;同时肺小动脉行HE染色,测定肺小动脉管壁面积占肺小动脉总面积的百分比(wA%).结果 对照组、低氧组、当归保护组的mPAP分别为10.50±1.90、35.36±9.11、18.32±2.30(mm Hg);wA%分别为52.71±5.16、82.38±8.43、64.58±9.54(%),低氧组的mPAP、wA%均高于对照组(P<0.01),而当归保护组mPAP、wA%均明显低于低氧组(P<0.01).对照组、低氧组、当归保护组肺小动脉PCNA表达水平分别为3.15±1.10、24.50±5.72、12.67±3.46(%),缺氧组显著高于对照组(P<0.01),而当归保护组明显低于低氧组(P<0.01).对照组、低氧组、当归保护组肺小动脉血管内皮iNOS蛋白表达水平分别为2.13±1.01、17.33±3.53、37.50±7.04(%),低氧组显著高于对照组(P<0.01),而当归保护组明显高于低氧组和对照组(P<0.01).结论 当归注射液可以降低慢性低氧所致肺动脉高压,其机制与抑制肺小动脉PCNA表达、增加肺小动脉iNOS表达水平有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of angelica solution on chronic hypoxic pulmonary hypertension in rats.Methods Thirty SD rats were randomized into normoxic group,hypoxic group and angelica solution-protected group.The model of rat chronic hypoxic pulmonary hypertension was made by method of isobaric hypoxia.Angelica solution were injected before hypoxia,while the other two groups were injected normal saline.After 28d of hypoxia,pulmonary artery pressure were measured.Expressions of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) in pulmonary artery were detected by immunohistochemical staining.The index of wall thickness of rat pulmonary arteriole-percentage of the wall area in the total vascular area(wA%) were measured by a computerized image analyzer.Results The mean pulmonary artery pressure (mPAP) of normoxic group,hypoxic group and angelica solution-protected group were10.50±1.90,35.36±9.11,18.32±2.30 (mm Hg);wA% of the three groups were 52.71±5.16,82.38±8.43,64.58±9.54 (%),mPAP and wA% were significantly higher in the hypoxic group than those in the normoxic group (P<0.01) and angelica solution-protected group (P<0.01).PCNA expression of normoxic group,hypoxic group and angelica solution-protected group were 3.15±1.10,24.50±5.72,12.67±3.46 (%).The PCNA expression in the pulmonary artery was significantly higher in the hypoxic group than those in the normoxic group (P<0.01) and in the angelica solution-protected group (P<0.01).iNOS expression of normoxic group,hypoxic group and angelica solution-protected group were 2.13±1.01,17.33±3.53,37.50±7.04 (%).iNOS expression in the pulmonary artery was higher in the hypoxic group than those in normoxic group (P<0.01),and angelica significantly increased iNOS expression in comparison with the normoxic and hypoxic groups (P<0.01).Conclusion Angelica solution alleviates chronically hypoxia induced pulmonary hypertension in rats by inhibiting the espression of PCNA in pulmonary artery and up-regulating the expression of iNOS.     

缺氧性肺动脉高压新生大鼠肺血管重塑的研究

目的：通过建立新生大鼠缺氧性肺动脉高压（hypoxia-induced pulmonary hypertension,HPH）模型,探讨HPH新生大鼠发病过程中肺血管重塑的变化。方法：将96只新生Wistar大鼠随机分为2组：缺氧组和常氧对照组,缺氧组建立新生大鼠HPH模型。分别于缺氧3、5、7、10、14、21 d 取缺氧组及对照组同日龄新生大鼠各8只测定其平均肺动脉压（mean pulmonary arteria pressure,mPAP）、右心室肥大指数（right ventricle hypertrophy index,RVHI）,血管重塑指标MT%、MA%,观察肺血管超微结构。结果：缺氧组大鼠在缺氧3、5、7、10、14、21 d mPAP持续上升,明显高于对照组（P<0.05）;随着缺氧时间的延长,差异更为显著。缺氧7 d后MT%、MA%、RVHI明显高于对照组（P<0.05）;随着缺氧时间的延长,差异同样更为显著。透射电镜显示,缺氧7 d后大鼠肺小动脉内膜增厚,内皮细胞增生、变性,细胞器增多;细胞外基质见胶原纤维沉积;出现肺血管重塑改变。结论：新生大鼠缺氧3～5 d肺动脉压力增高,处于肺血管痉挛阶段;缺氧7 d后肺血管出现重塑,右心室肥厚,出现不可逆变化;随着缺氧时间延长,上述变化加剧。