奥曲肽抑制重症急性胰腺炎大鼠诱生型一氧化氮合酶

一般认为奥曲肽（善宁）治疗急性胰腺炎的显著疗效常与抑制胰酶、消化液分泌有关，重症急性胰腺炎（ＳＡＰ）急性期常伴有急剧的全身病理生理改变，细胞因子和炎症介质的过度表达可引起急性胰腺炎组织损伤，诱生型一氧化氮的过量产生可明显引起细胞毒性作用以及脏器血供的低灌注。本研究探讨奥曲肽缓解急性胰腺炎的病情，是否还通过抑制过量产生的一氧化氮（ＮＯ）。     

一氧化氮合酶在门静脉高压大鼠胰腺的分布

一氧化氮(ＮＯ)与消化道疾病的关系日益受到重视。我们采用依赖还原性辅酶Ⅱ硫辛酰胺脱氢酶(ＮＡＤＰＨｄｉａｐｈｏｒａｓｅ,ＮＡＤＰＨｄ)免疫组织化学方法和神经元性一氧化氮合酶(ＮＯＳ)免疫组织化学法对正常和门静脉高压大鼠胰腺组织ＮＯＳ的分布进行研究。一、材料和方法1.实验动物:同批ＳＤ大鼠,雌雄各半,体重200～270ｇ(由同济医科大学实验动物学部提供),分为3组,Ⅰ组为对照组(6只),Ⅱ组为肝硬化组(8只),Ⅲ组为肝前性门静脉高压组(8只)。肝硬化组皮下注射50%ＣＣｌ42ｍｌ/ｋｇ体重,3天1次,共计10周,经病理证实肝硬化形成。肝前性门…     

选择性诱生型一氧化氮合酶抑制剂对人结直肠癌Lovo细胞生长的影响

目的研究选择性诱生型一氧化氮合酶（iNOS）抑制剂氨基胍（AG）对人结直肠癌细胞株Lovo增殖与凋亡的影响，并对其作用机制进行初步探讨。方法应用四唑盐（MTT）比色法检测AG对Lovo细胞增殖的抑制作用，流式细胞术检测分析不同浓度AG作用后Lovo细胞的凋亡率和细胞周期分布变化，并用丫啶橙结合溴化乙锭染色荧光显微镜观察凋亡细胞形态学改变。结果AG 0．5 mmol／L组和AG 1．0 mmol／L组的A值与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；各组在不同浓度AG作用24、48和72h后A值比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。Lovo细胞生长抑制率曲线显示，AG对Lovo细胞生长的抑制率呈明显的时间和浓度依赖性。流式细胞分析显示，随AG浓度的增高，Lovo细胞G0／G1期比率增高，S期与G2/M期则相应降低（P〈0．05）；SPF值和增殖指数（PI）降低，凋亡率增加（P〈0．05）。AG作用于Lovo细胞24h后细胞体积缩小、核固缩、荧光染色增强及凋亡小体形成。结论AG可抑制Lovo细胞的增殖。促进细胞凋亡；其作用的可能机制为氨基胍阻止Lovo细胞周期的进展。     

内源性一氧化氮对急性胰腺炎大鼠胰腺微血管通透性的影响

目的 探讨内源性一氧化氮（NO）对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺炎大鼠胰腺微血管通透性的影响。方法 以5%牛磺胆酸钠溶液胰胆管注射（1ml/kg）制成大鼠急性坏死性胰腺炎模型,以工具药L-硝基精氧酸（L-NNA）和内源性NO的阻断Evans Blue的漏出代表微血管的通透性,观察内源性NO对胰腺组织损伤程度、胰腺内Evans Blue漏出等的影响。结果 牛磺胆酸钠胆管注射造成大鼠胰腺组织明显坏死和炎性细胞浸润,以及血清淀粉酶浓度升高、胰腺湿/干重比率产加和明显的胰腺组织内Evans Blue积聚。以L-NNA（12.5mg/kg）阻断内源性NO后,胰腺组织坏死和炎性细胞浸润进一步加重,并使血清淀粉酶浓度升高,胰腺湿/干重比率增加,Evans Blue的漏出率也较之单纯胰腺炎组大鼠明显增加。结论 内源性NO具有胰腺保护作用,其保护机制可能与维持胰腺微血管的完整性有关。     

一氧化氮合酶与急性缺血性肾损伤

一氧化氮合酶是一类复杂的生物合酶，其产物一氧化 机体内发挥广泛而重要的作用。随着对一氧化氮合酶的结构及功能认识的深入，发现一氧化氮及其合酶的变化在急性肾缺血性损伤中有重要作用。     

诱生型一氧化氮合酶在胆道感染大鼠肝细胞中的表达

目的　了解诱生型一氧化氮合酶 (induciblenitricoxidesynthase ,iNOS)在胆道感染大鼠肝细胞中表达的情况及其规律。方法　制作大鼠胆道感染模型 ,采用还原型辅酶Ⅱ黄递酶组织化学法检测大鼠肝细胞中iNOS的表达。结果　大鼠胆道感染 2h后肝细胞即有iNOS的表达切片积分光度(13 5 8± 0 6 4) ,与对照组切片积分光度 (3 5 9± 0 2 8)相比 ,P <0 0 1。 8h达到峰值切片积分光度(2 9 2 7± 0 90 ) ,2 4h至 48h仍有较高表达切片积分光度分别为 (19 47± 0 6 5 )和 (19 96± 0 78)。结论　胆道感染时肝细胞可持续高效地表达iNOS ,提示胆道感染时肝脏是合成NO的重要器官 ,并可能对胆道感染的转归具有重要影响     

大鼠阴茎组织一氧化氮合酶基因表达的雄激素依赖性

一氧化氮 (ＮＯ)是由一氧化氮合酶 (ＮＯＳ)催化产生 ,介导阴茎勃起的主要神经递质。我们建立雄激素变化ＳＤ大鼠模型 ,测定睾酮 (Ｔ)、游离睾酮 (ＦＴ)和二氢睾酮 (ＤＨＴ)变化后阴茎组织神经型ＮＯＳ(ｎＮＯＳ)、内皮型ＮＯＳ(ｅＮＯＳ)的信使核糖核酸 (ｍＲＮＡ)表达 ,以明确ｎＮＯＳｍＲＮＡ、ｅＮＯＳｍＲＮＡ的雄激素依赖性。1.材料与方法 :模型建立 :ＳＤ雄性大鼠 16 0只 :Ａ组 ,5周龄 5 6只 ;Ｂ组 ,10周龄 5 0只 ;Ｃ组 ,5 8周龄 5 4只。Ａ、Ｂ和Ｃ各组均分成 :( 1)正常对照组 ;( 2 )去势组 ;( 3)去势 ,每月肌注 2 5ｍｇ/ｋｇ的十一…     

一氧化氮合酶与急性缺血性肾损伤

一氧化氮合酶是一类复杂的生物合酶，其产物一氧化氮在机体内发挥广泛而重要的作用。随着对一氧化氮合酶的结构及功能认识的深入，发现一氧化氮及其合酶的变化在急性肾缺血性损伤中有重要作用     

大鼠移植肝组织中一氧化氮合酶的表达及其抑制剂的作用

目的 观察大鼠移植肝组织中一氧化氮合酶(iNOS)的表达及iNOS抑制剂氨基胍和免疫抑制剂他克莫司(FK-506)对肝移植术后急性排斥反应的影响。方法 实验分为4组：同基因组(供、受者均为LEW大鼠)；急性排斥组(供者为BN大鼠，受者为LEW大鼠)；氨基胍组、FK506组在异基因大鼠肝移植后分别应用氨基胍和FK506。用免疫组织化学法检测各组移植肝组织中iNOS表达水平。结果 急性排斥组iNOS表达呈强阳性，与氨基胍组、FK506组、同基因组比较，差异显著。结论 在大鼠原位肝移植发生急性排斥反应时，iNOS增高程度与排斥反应的强度有明显关系。氨基胍和FK506可以抑制iNOS的表达，明显减轻移植肝组织的急性排斥反应。     

一氧化氮合酶抑制剂对创伤性休克的干预作用

目的：评价选择性诱导型一氧化氮合酶（iNO）抑制剂氨基胍（AG）和非选择性一氧化氮合酶抑制剂L-N位硝基精氨甲酯（L-NAME）对创伤性休克的治疗效果。方法：40只Wistar大鼠制作创伤性休克动物模型。双侧股骨干砸伤后并经股动脉放血至平均动脉压（MAP）35～45mmHg（4．67～6.00kPa），维持30min，然后回输失血和等量的林格式液。随机分为休克组（10只）,AG组（根据复苏时静脉注射AG含量为10，50mm／kg。则分为AGⅠ，AGⅡ各10只），L-NAME组（10只，复苏时静脉注射LNAME10mg/kg），观察休克前后血浆NO浓度的动态变化及24h大鼠存活率。并留取肺、肝、肾、小肠组织，观察病理改变。结果：大鼠创伤性休克后，血浆NO水平明显高于休克前；AG各组动物复苏后血浆NO的水平明显降低，各脏器的病理损害亦显著减轻，存活率明显提高，AGⅡ组效果最好；L-NAME组动物复苏后血浆NO的水平也明显降低，各脏器的病理损害无明显变化，存活率无明显提高。结论：NO在创伤性休克的病理发展过程中起着重要作用，应用AG有助于创伤性休克的改善；L-NAME能降低NO的水平，但对休克的预后无明显改善。     

甘遂对重症急性胰腺炎大鼠胰腺环氧合酶-2表达的影响

目的探讨甘遂对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠胰腺组织环氧合酶-2（COX-2）表达的影响及意义。方法将SD大鼠随机分为假手术组（S组）、SAP组、甘遂治疗组（K组），每组40只。建立SAP模型后K组立即给予甘遂灌胃（200mg／kg体重），每8h1次。各组动物在术后2、6、12、24h检测胰腺组织的COX-2mRNA和蛋白表达、血浆TXB2和6-Keto-PGF1α水平、胰腺光镜和电镜检查。结果SAP组COX-2mRNA和蛋白表达、血检查B2（TXB2）、6-酮-前列腺素F1α（6-Keto—PGF1α）水平及TXB2／PGF1α比值均显著高于S组（P〈0．01）。K组6，12hCOX-2mRNA表达显著低于SAP组（P〈0．05）；6、12、24hCOX-2蛋白表达、TXB2及TXB2／PGF1α比值均显著低于SAP组（P〈0．01）。TXB2／PGF1α比值与COX-2蛋白表达呈显著正相关（r=0．851，P〈0．01）。K组胰腺组织损害较SAP组减轻，微血管内血栓较SAP组明显减少。结论SAP时有COX-2的高表达，甘遂可以下调COX-2的表达，减轻炎症反应，并可能通过纠正TXA2和PGI2之间的失衡改善胰腺微循环。     

诱导型一氧化氮合酶、一氧化氮在脑积水大鼠脑组织及脑脊液中的含量变化

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和一氧化氮(NO)在实验性大鼠脑积水中的病理生理作用。方法实验组SD大鼠36只,随机平分为3个组,用显微外科技术向枕大池内注入 25％白陶土混悬液,分别在第2、3、4周后行核磁共振检测,鉴定脑积水形成情况,之后24 h内取脑脊液和脑组织,用免疫组织化学方法测脑组织不同部位iNOS表达情况,硝酸还原酶法测脑脊液中 NO含量。对照组12只大鼠于枕大池内注入生理盐水,用同样方法检测。结果实验组共25只大鼠成功诱发脑积水。与对照组相比,实验组脑组织中iNOS表达率均升高,尤其是白陶土注射后第 4周脑室周围白质更为明显(40．65±4．06)％;实验组脑脊液中NO含量亦均增加,其中白陶土注射后第4周最高(51．37±6．48)μmol／L。结论 iNOS和NO可能参与了脑积水的病理生理过程。     

诱导型一氧化氮合成酶在大鼠坏死性胰腺炎肺泡巨噬细胞的表达

目的通过研究诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在急性坏死性胰腺炎(ANP)肺泡巨噬细胞(AM)中的表达,明确其在ANP所致肺损伤中的作用。方法72只成年SD大鼠随机分为正常对照组、ANP组、N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)组,每组24只。逆行性胰胆管注射3%牛磺酸钠建立ANP大鼠模型。经支气管肺泡灌洗获取AM,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平,AM分泌iNOS水平及iNOSmRNA表达情况,并行肺组织学检查。结果ANP大鼠AM iNOS的表达随时间进展而增强,同时肺损伤也逐渐加重。L-NAME组则恰好相反,与ANP组相比有显著性差异(P<0.05)。结论ANP发生后,肺泡巨噬细胞iNOS表达增强,并促进肺损伤。     

一氧化氮对重症急性胰腺炎肺损伤的作用及其机制

目的研究一氧化氮(NO)减轻重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤的机制。方法采用逆行胰胆管牛磺胆酸钠注射制造SAP大鼠模型。动物分为假手术组、胰腺炎组、L-精氨酸(L-Arg)治疗组和氯喹(CQ)治疗组。硝酸还原酶法检测肺组织NO的浓度变化,实时定量PCR(RT-PCR)检测肺组织TLR(Toll-like receptor)2／4 mRNA表达变化。结果与假手术组比较,SAP大鼠肺组织NO浓度降低,肺损伤加重;肺组织TLR2／4 mRNA表达增高,肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达升高(P<0．05)。给予不同剂量L-Arg治疗后,肺组织NO浓度明显升高,肺损伤程度减轻;TLR2／4 mRNA表达降低,肺组织TNF-α表达降低(P<0．05)。给予CQ抑制肺组织TLR2／4 mRNA表达后,肺组织内NO浓度升高,肺损伤减轻,TNF-α表达降低(P<0．05)。结论NO可以明显抑制SAP肺组织TLR2／4 mRNA的表达,减少细胞因子的合成及释放,从而减轻肺组织损伤。     

七氟烷麻醉对大鼠脑一氧化氮合酶活性和一氧化氮含量的动态影响

目的 观察七氟烷吸入麻醉不同时期大鼠大脑皮质、脑干、海马一氧化氮合酶(NOS)活性和一氧化氮(NO)含量的动态变化规律,以探讨脑区NOS和NO在七氟烷麻醉效应中的地位。方法SD大鼠随机均分为5组:对照组、诱导期组、麻醉期组、恢复期组和清醒期组。分光光度法测定不同时期各脑区NOS活性和NO含量变化。结果与对照组比较,诱导期大脑皮质、脑干、海马NOS活性分别降低34.8％、30.3％、30.0％,NO含量分别降低20.3％、21.0％、25.2％;麻醉期NOS活性和NO含量降至最低水平(P均<0.01),大脑皮质、脑干、海马NOS活性分别降低57.4％、56.6％、58.8％,NO含量分别降低41.5％、49.5％、44.7％;而恢复期又开始上升,但仍低于对照组水平,大脑皮质、脑干、海马NOS活性分别降低25.2％(P<0.05)、19.3％(P>0.05)、28.1％(P<0.05),NO含量分别降低28.3％、29.8％、26.2％(P均<0.01);清醒期NOS活性和NO含量基本恢复至对照组水平(P>0.05)。大鼠各脑区NOS活性和NO含量的改变与麻醉深度的变化有趋同性。结论七氟烷可明显抑制大鼠大脑皮质、脑干、海马NOS活性和降低NO含量,且与麻醉深度有相同的变化趋势,提示脑区NOS可能是七氟烷的作用位点之一,七氟烷可能通过抑制NOS活性和降低NO含量而发挥麻醉效应。     

急性胰腺炎治疗方式的研究进展

近年来随着急性胰腺炎治疗理念的更新及诊断与治疗技术的提高,在急性胰腺炎的治疗方案中多学科合作与微创化治疗已占据主导地位,有效降低了急性胰腺炎患者的病死率.与此同时出现的一系列新的治疗方法,如升阶梯治疗方案,与传统手术治疗比较具有显著优势,能明显改善重症急性胰腺炎患者的预后,并得到国内外学者的认可.     

补体C5抑制剂对急性胰腺炎大鼠肾细胞因子的调控作用

目的 观察补体C5抑制剂对急性胰腺炎大鼠肾细胞因子的调控作用.方法 Wistar大鼠42只,随机分为3组:正常对照组(HC组,n=6);AP造模组(AP组,n=18);AP造模+C5抑制剂组(AP-C5I组,n=18).分别在6、12、18 h三个时间点处死AP组、AP-C5I组各6只.分别测定其血C5a水平;采用实时荧光定量逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定各组大鼠肾组织中C5、IL-1β、TNF-α和IL-10 mRNA表达情况.结果 AP组血清C5a水平显著升高(P＜0.01、vs HC);AP-C5I组其水平显著降低(P＜0.01 vs AP).HC组肾内C5 mRNA表达较弱;AP组该值较HC组有显著增高,差异有统计学意义(P＜0.01 vs HC);AP-C5I组肾组织C5 mRNA表达较AP组无显著改变(P＞0.05 vs AP).AP组.肾组织IL-β、TNF-αmRNA在6 h明显增多并持续增至18 h(P＜0.01 vs HC),AP-C5I组两值较同时相AP组明显降低(P＜0.01 vs AP);AP组和AP-C5I组肾组织IL-10 mRNA水平于建模后先升后降,AP-C5I组于6 h和12 h较AP组差异有统计学意义(P＜0.05 vs AP).结论 补体C5抑制剂能够阻断补体系统的激活,并部分恢复肾组织促抗炎细胞因子平衡.     

大黄附子汤对重症急性胰腺炎早期大鼠肠黏膜机械屏障的影响及其意义

目的:观察大黄附子汤(DHFZT)对早期重症急性胰腺炎肠黏膜机械屏障的影响。方法:24只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为4组：假手术(SH)组、假手术-DHFZT(SH-DHFZT)组、重症急性胰腺炎(SAP)组、DHFZT治疗(SAP-DHFZT)组,每组6只。SH组、SH-DHFZT组大鼠开腹后,翻动胰腺数次后关腹...     

急性胰腺炎过度治疗与干预不足

在急性胰腺炎临床诊治过程中,从来没有这么多的科室和专科医师参与和试图主导急性胰腺炎的治疗.临床上急性胰腺炎的治疗十分混乱,过度治疗和干预不足的现象普遍存在,尤以前者为甚.在急性胰腺炎治疗上仍然有不少的问题存在着疑惑和争论.本文复习了相关文献,运用循证医学证据进行了研究分析,为急性胰腺炎的合理治疗提供依据.

Abstract：

There was never a time in history that so many disciplines and specialists participate and try to lead the clinical management for acute pancreatitis. Chaos remains at bedside, and episodes of under-intervention and especially over-treatment frequently happened. Physicians are easily confused by questions and controversies in management for acute pancreatitis. We have reviewed the articles in acute pancreatitis and made our recommendations based on the latest evidences.     

一氧化氮对重症急性胰腺炎肺损伤Toll样受体2/4表达的影响

目的 观察一氧化氮（NO）对重症急性胰腺炎（SAP）肺损伤Toll样受体（TLR）表达的影响。方法 动物分为假手术组、胰腺炎组、氯喹（CQ）治疗组和L-精氨酸（L-Arg）治疗组；实时荧光逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肺组织TLR2／4mRNA表达。结果SAP大鼠肺组织TLR2／4表达明显增高（3h：0．787±0．751、1．512±1．794E-2：6h：1．086±1．738、2．097±3．735E．2；12h：1．113±6．141、2．957±2．620E-2），肺损伤加重（P〈0．05或P〈0．01）。以CQ抑制肺组织中TLR2／4表达后（3h：0．313±5．491E-2，0．005±1．419E-3；6h：0．488±7．442E．2，0．010±1．518E-3；12h：0．883±8．911E-2，0．024±2．760E-3），肺损伤减轻（P〈0．05或P〈0．01）。给予L-Afg治疗后，肺组织NO浓度明显升高，TLR2／4表达降低（0．656±3．972 E-2，1．501±6．111 E-2；0．260±0．891 E-2，0．732±5．135 E-2；0．126±0．914 E-2，0．414±1．678E-2），肺损伤程度减轻（P〈0．05或P〈0．01）。结论 肺组织内TLR2／4表达在SAP肺损伤中明显上调，肺组织损伤加重；NO可以明显抑制SAP肺组织TLR2／4表达从而减轻肺组织损伤。