肺纤维化大鼠BALF中细胞成分与肺组织病理的动态研究

以博莱霉素致大鼠肺纤维化为模型，动态观察肺组织病理与支气管肺泡灌洗液细胞学所见，探讨支气管肺泡灌洗的临床评价及炎性细胞在肺纤维化中的动态变化和作用。结果：肺组织病理所见与支气管肺泡灌洗液中的细胞成份变化在炎症过程中有其一致性；巨噬细胞和中性粒细胞首先出现于肺内，而淋巴细胞则继其后；给予博莱霉素后第１～７天（早期）的肺部病变以肺泡炎为主，而第１４天以后则进入慢性纤维化阶段。提示：ＢＡＬＦ细胞学改变能较准确地反映肺内细胞成分的变化，ＢＡＬ可作为一项重要的检测手段；中性粒细胞主要在急性肺损伤／肺泡炎期起作用，而淋巴细胞则在慢性纤维化阶段扮演重要角色。     

实验性肺纤维化过程中脂质过氧化物和BALF细胞学动态观察

目的：观察实验性肺纤维化过程中血清脂质过氧化物（ｓＬＰＯ）和支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）细胞学的动态变化，以探讨肺纤维化的发病机理。方法：以博莱霉素Ａ５气管内一次注入法复制小白鼠肺纤维化模型，以生理盐水气管内注入作为对照，于注药后第３、７、１４、２８天分四批处死动物，进行ｓＬＰＯ测定（ＴＢＡ比色法）、ＢＡＬＦ细胞计数、分类及肺组织病理学检查。结果：气管内注入博莱霉素Ａ５后第３天ｓＬＰＯ即显著升高，于第７天达高峰，而后渐降至正常；ＢＡＬＦ中白细胞总数、中性粒细胞比例、淋巴细胞比例及嗜酸性粒细胞比例亦显著增高，其变化与ｓＬＰＯ变化相一致；肺组织病理学第３～７天表现为急性肺泡炎，第２８天肺纤维化形成。结论：脂质过氧化及炎症细胞在肺纤维化的发生中起重要作用。     

特发性肺纤维化肺组织STAT1的表达及其临床意义

目的：探讨特发性肺纤维化(IPF)肺组织中STAT1的表达及其临床意义。方法：对15例健康人和11例IPF患者行支气管肺泡灌洗，并同时应用免疫组化方法检测其肺组织的STAT1表达。结果：IPF组支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞总数和中性粒细胞均高于健康对照组；IPF组肺组织STAT1表达明显高于健康对照组；肺组织STAT1表达与BALF中炎性细胞总数呈正相关。结论：IPF患者肺组织中存在STAT1异常表达；STAT1参与了肺组织炎症的形成。     

肺纤维化大鼠肺组织STAT1与血小板源性生长因子表达的研究

目的观察肺纤维化大鼠肺组织信号转导和转录活化因子1（STAT1）和血小板源性生长因子（PDGF）表达的变化,探讨其在肺纤维化的作用机制。方法30只Wistar大鼠随机分为博莱霉素组（BLM组）和对照组（NS组）,①BLM组：气管内灌注BLM（5mg/kg）诱导肺纤维化;②NS组：气管内灌注NS（剂量与用法同上）。于气管内灌注后第7、14和28天各分别处死5只大鼠,右肺支气管肺泡灌洗（BAL）,进行细胞分类、计数;肺组织免疫组化测定STAT1和PDGF蛋白的表达。结果BLM组肺组织中STAT1和PDGF蛋白表达在第7天达高峰,之后下降,第28天时仍高于NS组（P〈0．05）,而且与支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞总数密切相关（r值分别为0．892和0.880,P均〈0.01）。结论肺纤维化发生的可能机制与肺组织STAT1和PDGF的过度表达有关。     

免疫抑制剂对慢性肺部疾病大鼠的作用

目的 探讨免疫抑制剂对慢性肺部疾病的疗效。方法 制作慢性肺部疾病（CLD）模型。将64只大鼠分为4组，骁悉治疗组、地塞米松治疗组、正常对照组和模型组，每组16只，骁悉治疗组和地塞米松治疗组被制成CLD模型后，分别用骁悉和地塞米松治疗（n=16），于实验的第7天和29天分别取支气管肺泡灌洗液和肺组织，做肺组织病理学检查，用酶联免疫吸附法检测支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的活性，用比色法检测肺组织中丙二醛（MDA）含量，用改良Woessner法检测肺组织中羟脯氨酸（HYP）含量。对正常对照组和模型组进行肺成纤维细胞培养，比较二者增殖速度。结果 CLD模型组大鼠在第3天呼吸困难和行动迟缓等症状，其他组大鼠生存良好。模型组的肺组织病理在第7天呈现明显肺泡炎症改变，第29天呈典型肺纤维化改变，两治疗组肺组织病变明显减轻；模型组支气管肺泡灌洗液中TNF-α含量于第7天明显升高，两治疗组低于模型组；模型组肺组织中丙二醛含量明显升高，两治疗组低于模型组；模型组肺组织中羟脯氨酸含量于第29天明显升高，两治疗组低于模型组；两治疗组与模型组比较，病理分级较轻，TNF-α、丙二醛和羟脯氨酸含量较低，差异有显著性（均P〈0．05），两治疗组之间上述指标差异无显著性（P〉0．05）。模型组肺组织块长出细胞时间早于正常对照组1—2d，肺成纤维细胞增殖速度明显高于正常对照组（P〈0．05）。结论 骁悉对CLD大鼠模型有保护作用，疗效和地塞米松相同，可以试用于临床CLD的早期防治。     

TGF—β1在博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织不同细胞表达的定量研究

目的：探讨转化生长因子β１（ＴＧＦ—β１）与肺纤维化的发生、进展的关系及其在肺组织的来源。方法：应用免疫组织化学方法结合图像分析处理系统，定量研究ＴＧＦ—β１在博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织中的免疫反应。结果：ＴＧＦ—β１可广泛分布于正常大鼠的肺组织。而在博莱霉素大鼠ＴＧＦ—β１表达明显增强，在肺泡巨噬细胞的表达第７天达高峰（９２．９２±１３．８２，Ｐ＜０．００１），而在支气管上皮细胞、肺内间质细胞的表达则是第２８天分布最广，阳性表达面积比分别为（５２．２６±７．１４），Ｐ＜０．００１，（６７．９４±９．０４），Ｐ＜０．００１。结论：ＴＧＦ—β１在肺纤维化中具有重要作用，肺泡巨噬细胞与肺纤维化的早期发生密切相关，而支气管上皮细胞、肺内间质细胞则在肺纤维化的持续进展方面发挥一定作用。     

特发性肺纤维化患者支气管肺泡灌洗液谷胱甘肽的检测

应用生化法检测不吸烟的特发性肺纤维化患者１０例及正常对照者６例支气管肺泡灌洗液和血中谷胱甘肽水平，判断氧化剂—抗氧化剂失衡与肺纤维化的关系。结果：支气管肺泡灌洗液中谷胱甘肽水平明显低于正常对照组（Ｐ＜０．０５）；血中谷胱甘肽含量两组无明显差别。表明肺组织局部谷胱甘肽降低对纤维化形成有一定作用     

弥漫性间质性肺疾病肺功能改变和支气管肺泡灌洗液细胞学检测对比研究

弥漫性间质性肺疾病肺功能改变和支气管肺泡灌洗液细胞学检测对比研究李振华孔灵菲宋玉侯显明于润江（呼吸疾病研究所，沈阳１１０００１）关键词间质性肺疾病；肺功能；支气管肺泡灌洗为探讨肺功能改变和支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）细胞学检查对间质性肺疾病（ＩＬＤ）...     

床边纤支镜治疗重型颅脑外伤患者肺灌洗液中细胞学、白细胞介素-8及肿瘤坏死因子-α的变化

目的 探讨应用床边纤支镜治疗对重型颅脑外伤患者肺灌洗液中细胞学、白细胞介素-8（IL-8）及肿瘤坏死因子-α（INF-α）的影响。方法 将68例重型颅脑外伤患者分为纤支镜治疗组（纤支镜组）和对照组，对支气管肺灌洗液做细胞学检查，同时应用放射免疫测定（RIA）法测定IL-8、TNF-α水平。结果 纤支镜治疗组与对照组相比，肺灌洗液中细胞总数在治疗第7、9天显著降低（均P〈0．01）；中性粒细胞在第5、7、9天显著降低（均P〈0．01）；IL-8在第5、7、9天显著降低（均P〈0．01）；TNF-α在第5、7、9天显著降低（均P〈0．01）；IL-8、TNF—α水平与支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞总数、中性粒细胞均成正相关（均P〈0．01）。结论 应用床边纤支镜对重型颅脑外伤患者进行支气管肺泡灌洗术治疗，能够改善气道的炎症状态；IL-8、TNF-α联合检测能准确反映气道的炎症状况。     

茶碱、咯利普兰对肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞的影响

目的 观察茶碱、咯利普兰对肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞数的影响。方法 64只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、茶碱组和咯利普兰组，后三组气管内滴入平阳霉素制备模型，滴入前1d腹腔分别注入生理盐水、氨茶碱溶液[60mg／（kg·d）]和咯利普兰溶液（0．25mg／kg），对照组给予生理盐水；气管内滴药后第7、28天分两批处理动物，收集支气管肺泡灌洗液，进行炎性细胞计数和分类；测定肺匀浆中羟脯胺酸，光镜下观查肺泡炎和肺纤维化程度。结果 BALF中细胞总数和中性粒细胞比例，两治疗组明显低于模型组（P均〈0．05）；模型组肺HYP[（2．40±0．15）mg／g肺组织]显著高于荼碱组[（1．42±0．15）mg／s肺组织]（P〈0．01）和咯利普兰组[（1．32±0．23）mg／s肺组织]（P〈0．01）。结论 茶碱和咯利普兰可减少肺纤维化模型BALF中炎性细胞数，对肺纤维化有阻断作用。     

创建急性肺损伤模型探讨小剂量地塞米松对肺脏的保护作用

目的：探讨小剂量地塞米松对急性肺损伤动物模型肺脏的保护作用。方法：雄性SD大鼠54只，随机平均分为对照组、损伤组和激素组。主要观察指标：支气管肺泡灌洗液细胞总数计数、总蛋白水平、TNF—d水平。次要指标：肺系数、动脉血氧分压、血清中TNF—α的变化及病理检查结果。结果：激素组肺泡结构仍存在，但肺泡间隔增厚，中性粒细胞浸润明显减轻，肺泡腔内见少量渗出；激素组大鼠的动脉血氧分压明显高于损伤组（P〈0．05）。激素组的大鼠肺系数及支气管肺泡灌洗液的总蛋白水平、细胞总数与其他组比较有显著性差异（P〈0．05）；激素组第2h血清中和第2、6h支气管肺泡灌洗液中TNF—α水平与其他组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论．小剂量地塞米松对肺组织损伤有一定保护作用。     

替米沙坦对博来霉素诱导的大鼠肺纤维化模型的干预作用

目的研究替米沙坦对博来霉素诱导的大鼠肺纤维化模型的干预作用，并探讨其机制。方法雌性SD大鼠45只随机等分为三组：生理盐水对照组、博来霉素组（气管内注入博来霉素）及替米沙坦组（气管内注入博来霉素，并给予替米沙坦灌胃）。采用HE染色了解肺泡炎和肺纤维化的情况，酸解法测羟脯氨酸含量，ELISA检支气管肺泡灌洗液（BALF）中转化生长因子-β1（TGF—β1）水平的变化，并观察BALF中的细胞总数变化。结果替米沙坦组与博来霉素组比较，灌注后第7和14天肺泡炎轻；第28天肺纤维化减轻。博来霉素组肺羟脯氨酸含量增高，替米沙组减少。替米沙坦组BALF中的细胞总数第7和14天较博来霉素组少。替米沙坦组BALF中TGF—β1水平于各时间点低于博来霉素组。结论替米沙坦对博来霉素诱导的大鼠肺纤维化模型有抑制作用，其机制可能与抑制TGF-β1水平有关。     

环孢菌素A对大鼠肺纤维化的治疗作用

目的：研究环孢菌素Ａ（ＣsA)对肺纤维化的治疗作用。方法：应用博莱霉素（BLM）复制大鼠肺纤维化模型,观察CsA对支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞成分、肺组织学变化以及应用SABC法检测肺组织中纤维连接蛋白（FN）和血小板衍化生长因子（PDGF）表达的作用。结果：应用博莱霉素后第7天即有严重肺泡炎性改变,晚期有严重的肺纤维化,而CsA组,早期只有轻度炎性改变,BALF中细胞计数较BLM组低（P＜0．001）,FN及PDGF表达显著弱于BLM组（P＜0．01）。结论：CsA通过抑制N及PDGF的表达治疗肺纤维化。     

博莱霉素肺损伤和纤维化超微病理分析

目的:观察和分析博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化超微病理过程.方法:经支气管用博莱霉素灌肺诱导大鼠肺纤维化(5 mg/kg),用透射电镜观察肺损伤后第3、7和28天的病理变化.结果:肺损伤第3天病理特点是以中性粒细胞为主的肺泡炎,毛细血管扩张和肺泡上皮细胞破坏;第7天病理特点为:以巨噬细胞浸润为主的肺泡炎和间质炎,肺泡闭合与代偿性扩张共存,肺间质成分开始增加;第28天病理特点为:肺泡数目明显减少,残存肺泡扩张成大泡,Ⅱ型肺上皮细胞破坏与增殖同在,大部分肺组织呈肉牙肿样变.结论:电子显微镜可以显示肺损伤过程中肺泡上皮细胞、毛细血管和炎性细胞动态变化过程,揭示不同时期的肺损伤病理的实变.     

浓烟吸入诱发大鼠透明质酸升高的研究

目的　探讨大鼠烟雾吸入后透明质酸增多与大鼠肺吸入性损伤的关系。方法　４０ 只ＳＤ 大鼠随机分成５ 组：正常对照组和烟雾吸入后不同时间观察组。分别测定血清、支气管肺泡灌洗液和肺组织中的透明质酸含量,支气管肺泡灌洗液中的炎性细胞比例及蛋白含量。结果　烟雾吸入后,血清和肺组织中的透明质酸含量升高,１２ ｈ 达到高峰［ 血清：１２ ｈ 组（４７０．４±９７ ．５） μｇ／Ｌ,对照组（１８６．４ ±３１．５） μｇ／Ｌ;肺组织：１２ ｈ 组（６９７ ．５±１１５．１）μｇ／Ｌ,对照组（２０２ ．６ ±３９．４） μｇ／Ｌ］ 。而支气管肺泡灌洗液的各时间观察组升高不显著。支气管肺泡灌洗液蛋白含量６ ｈ 达高峰;细胞数在１２ ｈ 最多,主要是中性粒细胞。结论　烟雾吸入后支气管内炎性细胞以中性粒细胞为主。肺内透明质酸含量高于血液。透明质酸似可作为烟雾吸入性肺损伤的病理指征。     

冬虫夏草对COPD模型大鼠肺功能及Th1/Th2的影响

目的：探讨冬虫夏草对大鼠慢性阻塞性肺病（COPD）模型的肺功能及Th1／Th2的影响。方法：42只大鼠随机分为模型、治疗和对照三组，各14只。前两组采用SD大鼠反复被动吸烟和气道内注入脂多糖的方法建立COPD模型。8周后每组随机取7只做肺功能测定，观察肺组织病理变化。每组剩下的7只行支气管肺泡灌洗。取支气管肺泡灌洗液（BALF）做细胞计数及分类；用ELISA法测定BALF中的IL-2、IL-4及Th1／Th2的水平。结果：光镜下，对照组大鼠肺组织结构正常：模型组大鼠的肺组织支气管壁柱状纤毛倒伏、粘连，杯状细胞增生，支气管壁及周围组织有大量炎症细胞浸润，部分肺泡间隔破坏，肺泡孔扩大；治疗组大鼠的肺组织支气管及其周围组织损伤明显减轻。与对照组比较，模型组大鼠BALF中的炎症细胞数明显升高，气道阻力增加，肺顺应性下降：BALF中IL-2水平和IL-2／IL-4比值显著降低；与模型组比较，治疗组BALF中的炎症细胞数明显降低，气道阻力下降，而肺顺应性上升，BALF中IL-2／IL-4比值升高。结论：冬虫夏草有抑制COPD气道炎症反应、改善肺功能及纠正气道Th1／Th2比例失衡的作用。     

染矽尘大鼠早期肺组织的病理学与支气管肺泡灌洗液炎性细胞的关系

阐明大鼠染矽尘早期支气管肺泡灌洗液炎症细胞成份的变化与肺组织病理学观察结果的关系。方法：Wistar大鼠随机分为对照组和矽肺组。气管暴露法建立大鼠矽肺模型。在体全肺肺灌洗法收集支气管肺泡灌洗液，并对其中的炎性细胞总数及其分类进行计数。同时对肺组织作HE染色，普通光镜下观察矽结节的细胞构成。结果：染矽尘后1、7、14、21和28d时，BALF白细胞总数及其分类中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞均有不同程度的升高。早期以中性粒细胞和巨噬细胞增加为主，晚期以淋巴细胞增加为主，与染矽尘大鼠肺组织HE染色结果基本一致。结论：染矽尘大鼠支气管肺泡灌洗液炎症细胞的改变与肺组织普通病理学观察结果基本一致。     

白细胞介素13可能通过转化生长因子β1途径致肺纤维化

目的探讨白细胞介素13(IL-13)在急性肺损伤/肺纤维化发病过程中的作用,并试图阐明IL-13可能通过转化生长因子(TGF)β1途径致肺纤维化.方法选择健康雄性Wister大鼠,经气管一次性灌注博来霉素(BLM)建立急性肺损伤/肺间质纤维化模型.对照组气管内灌注无菌生理盐水.分别于给药后第1、3、7、14、28天处死动物.右肺行支气管肺泡灌洗(BAL),留取支气管肺泡灌洗液(BALF),计数BALF细胞总数,并用HE染色方法计数细胞分数.用免疫组织化学技术,在显微镜下计数BALF中IL-13和TGF β1免疫阳性细胞百分数.右肺组织匀浆后测羟脯氨酸(HYP)含量.结果肺组织HE染色显示BLM第7天肺泡腔内有大量炎性细胞浸润,第28天时肺泡结构破坏,出现斑片状纤维组织灶.BLM第14天时HYP含量较盐水组显著增加,第28天时达最高值.IL-13、TGFβ1在BALF中的巨噬细胞(AM)、嗜酸细胞及淋巴细胞上均有表达,在博莱霉素组表达增强.其中BLM第7天时IL-13、TGF β1表达阳性的AM百分数最高,而且两者阳性细胞百分数呈正相关(r=0.86,P＜0.05).结论IL-13与肺纤维化关系密切,IL-13在急性肺损伤期主要来源于AM.IL-13可能通过TGF β1途径发挥致肺纤维化作用.     

肺纤维化肺成纤维细胞产生透明质酸的实验动态研究

目的：阐明肺纤维化过程中肺成纤维细胞（ＬＦ）产生透明质酸（ＨＡ）的动态变化及作用。方法：检测和对比博莱霉素（ＢＬＭ）致大鼠肺纤维化不同时期支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）和ＬＦ培养上清中ＨＡ水平。结果：（１）ＢＬＭ组ＬＦ培养上清中ＨＡ水平于第１天明显升高，第３天达高峰，第１４～２８天时降至正常。（２）ＢＬＭ组ＢＡＬＦ中ＨＡ水平于第３天明显升高，第７天达高峰，随后下降，但至第１４天时仍高于正常水平，第２８天降至正常。（３）ＢＬＭ组ＢＡＬＦ和ＬＦ上清中ＨＡ水平与ＢＡＬＦ细胞成分之间均具有明显的正相关；ＢＡＬＦ和ＬＦ培养上清中ＨＡ水平之间也有明显的相关性。结论：ＬＦ在肺纤维化的早期肺泡炎阶段就处于活化状态，产生ＨＡ增多，导致肺内ＨＡ的过多聚积；ＬＦ产生ＨＡ增多和ＢＡＬＦ中ＨＡ水平的增高可反映肺泡炎的强度和疾病的活动性     

特发性肺纤维化支气管肺泡灌洗后急性加重四例报告并文献复习

目的探讨支气管肺泡灌洗和特发性肺纤维化急性加重之间的联系。方法收集2000年1月至2014年4月期间在中国医科大学附属第一医院呼吸内科住院并接受支气管肺泡灌洗的特发性肺纤维化患者,对出现急性加重患者的临床特点进行分析总结。结果在153例接受支气管肺泡灌洗的特发性肺纤维化患者中,有4例发生急性加重。其中男3例,女1例;年龄均大于50岁;吸烟者2例;肺功能用力肺活量预计值的60%和/或肺一氧化碳弥散量预计值的50%;支气管肺泡灌洗液细胞分类中中性粒细胞比例升高。大剂量糖皮质激素冲击治疗仍作为治疗特发性肺纤维化急性加重的首选。结论支气管肺泡灌洗可能诱发特发性肺纤维化急性加重,激素冲击治疗有可能缓解特发性肺纤维化急性加重。