大鼠胚胎小脑的发育学研究

用Ｎｉｓｌ染色法对大鼠胚胎１４、１６、１８及２０ｄ小脑进行形态学观察。结果表明：胚胎１６ｄ以前小脑由室管膜层、外套层及边缘层构成。胚胎１８ｄ开始出现典型的皮层结构。外颗粒层由较密集的深染细胞组成，数目随着胎龄的增加而增多。蒲氏层由较大淡染细胞组成，数目随着胎龄的增加而逐渐减少。颗粒层内细胞成份较复杂，细胞密度随胎龄增加呈下降趋势。     

人胚胎和新生儿心室肌心钠素发生的电镜免疫细胞化学研究

用包理后电镜免疫细胞化学方法，研究了不同胎龄胚胎及新生儿心室肌纤维中心钠素的胚胎发生，对心肌纤维内心钠素颗粒进行了体视学分析及统计学处理。结果表明：随着胎龄增长，细胞内肌丝由稀疏逐渐增多然后形成肌原纤维，线粒体的数目也逐渐增多；心钠素颗粒于第5周开始出现，颗粒的数目随胎龄增加而逐渐减少，至妊娠7月时基本消失。同一胎龄，左心室颗粒多于右心室。新生儿心室肌纤维内未见心钠素颗粒。     

人胚胎和新生儿心室肌心钠素发生的电镜免疫细胞化学研究

用包埋后电镜免疫细胞化学方法，研究了不同胎龄胚胎及新生儿心室股纤维中心钠素的胚胎发生，对心肌纤维内心钠素颗粒进行了体视学分析及统计学处理。结果表明：随着胎龄增长，细胞内肌丝由稀疏逐渐增多然后形成肌原纤维，线粒体的数目也逐渐增多；心钠素颗粒于第５周开始出现，颗粒的数目随胎龄增加而逐渐减少。至妊娠７月时基本消失。     

人胎蓝斑酷氨酸羟化酶样免疫反应 神经元的发育

用免疫组织化学ＡＢＣ法较系统地观察了人胎蓝斑酷氨酸羟化酶（ＴＨ）样免疫反应神经元的分布及形态变化。结果：①蓝斑ＴＨ样免疫反应神经元在胚胎第４个月时已出现在蓝斑的腹侧部。②ＴＨ样免疫反应神经元的数量随胎龄增长逐渐增多，以胎龄第５个月增加显著。ＴＨ样神经元的密度，胚胎早期升高，晚期呈下降趋势。③蓝斑ＴＨ样神经元主要分布在蓝斑的背侧部，少量散在于腹侧部。④蓝斑ＴＨ样神经元开始出现时呈圆形或卵圆形，５￣６     

人胚胎长骨的组织学观察

目的探讨人胚胎长骨的发生及发育过程。方法取第9～38周人胚胎股骨,用HE、硫堇-苦味酸及Mauory氏法染色,光镜观察。结果第9周胚胎股骨为软骨雏形。第10-38周胚胎股骨可分出骺软骨、干骺端及骨干三部分,干骺端原始骨髓腔内富含血管、成骨细胞及造血细胞,成骨细胞与造血细胞的比例随胎龄而异,第20周以前,以成骨细胞为主,造血细胞极少,随胎龄增加,成骨细胞的比例逐渐下降,造血细胞增加;骨干表面不光滑,有许多纵嵴、纵沟,骨外膜内层覆于嵴上并衬于沟内,纵嵴纵沟以第13—26周胚胎为多,第27周以后逐渐减少,骨干表面逐渐变得光滑,足月时出现外环骨板;骨干皮质由骨小梁网构成,胚胎早期网眼大、不规则,随胎龄增加,网眼变小,周围出现分层不清的同心圆状排列的骨板。结论人胚胎长骨的纵向生长速率随胎龄的增加而相对减慢,其横向生长是由于骨外膜内层的成骨细胞以形成纵嵴的方式,不断地在骨干表面添加新的骨质,并进而形成新的哈佛氏系统的结果。     

大鼠下丘脑前部室周区内加压素样神经元与神经肽Y样传入纤？…

目的研究大鼠下的天脑前部室周区内加压素样神经元与神经肽Ｙ样传入纤维的关系，方法 应用包埋前免疫电子显微镜过氧化物酶－抗过氧化物酶双标技术，结果 光学显微下可见下丘脑室周区内加压素样神经元和神经肽Ｙ样纤维末梢，电子显微镜下可见神经肽Ｙ的二氨基丁酸免疫反应产物呈颗粒状或絮状，位于小清亮囊泡周围和线粒体膜上，显示加压素的四甲基联苯胺免疫反应产物呈针状或块状，们于细胞质内，结论神经肽Ｙ样纤维末梢与加压素样     

新生儿血清瘦素与出生体重关系的研究

目的研究早产和足月新生儿血清瘦素与出生体重的关系。方法共收集143例早产和足月新生儿，按胎龄进行分组，并进行出生测量，于生后第3天检测瘦素水平。结果足月儿血清瘦素浓度显著高于早产儿，瘦素浓度与胎龄的关系按非线性模式增加，胎龄34周以后，瘦素浓度增加明显加快；胎龄32周后血清瘦素浓度与出生体重呈正相关关系。结论胎龄〉32周的新生儿体内可能已开始存在脂肪-胰岛素内分泌轴。     

膈淋巴管发育及其与腹腔直接通连的过程

（1）目的：探讨膈淋巴管的发育及淋巴管小孔与腹腔直接通车的过程。（2）方法：应用组织化学，氢氧化钾腐蚀，扫描电镜及透射电镜观察等方法，对174只Wistar大鼠膈淋巴管的发育过程进行了观察。（3）结果：胚胎第16天，膈淋巴管首先出现在膈胸腔面的两侧部，此阶段内皮细胞含有大量的粗面内质网，线粒体，高尔基体和少理的吞饮泡。胚胎第18天，淋巴管内开始出现瓣膜，生后第42天，集合淋巴管长有平滑肌。肌胚第19天，膈的腹腔面开始出现淋巴管，随着年龄增长，胸腔面的淋巴管发出枝芽互相连接形成多角形淋巴管网，腹腔面的淋巴管形成梯形网。生后第0天，膈淋巴管小孔开始开孔于腹腔，此阶段以后，淋巴管小孔急剧增加直至生后第70天。（4）结论：Wistar大鼠膈淋巴管出现于胚胎期；出生后，膈淋巴管开始具有运送腹腔液体的功能。     

胚胎早期胰腺发育中相关因子表达的变化

目的 探讨人胚胎胰腺发育过程中相关因子表达的变化，为胚胎胰腺移植治疗糖尿病提供基础性研究。方法 对7～12周胎龄段的胰腺采用免疫组化S-ABC法分析胰腺发育中相关因子的表达变化、胰岛的分化和形成。结果 胰岛素、胰升糖素、生长激素抑制因子及细胞角蛋白在胚胎胰腺发育中7周开始表达，与胰岛的分化和形成一致，随着胎龄的增加表达增强；IGF-Ⅰ及Ⅶ因子在胚胎12周时出现在胰腺间质内。结论 胰岛素、胰升糖素、细胞角蛋白和IGF-Ⅰ在人胚胎胰腺的发育中起着重要的调控作用，与胰腺内外分泌腺的分化和形成有关；12周后的胚胎胰腺可以作为胚胎胰腺移植的供体。     

人胎蓝斑酪氨酸羟化酶样免疫反应神经元的发育

用免疫组织化学ＡＢＣ法较系统地观察了人胎蓝斑酪氨酸羟化酶（ＴＨ）样免疫反应神经元的分布及形态变化。结果：①蓝斑ＴＨ样免疫反应神经元在胚胎第４个月时已出现在蓝斑的腹侧部。②ＴＨ样免疫反应神经元的数量随胎龄增长逐渐增多，以胎龄第５个月增加显著。ＴＨ样神经元的密度，胚胎早期升高，晚期呈下降趋势。③蓝斑ＴＨ样神经元主要分布在蓝斑的背侧部，少量散在于腹侧部。④蓝斑ＴＨ样神经元开始出现时呈圆形或卵圆形，５～６个月呈锥形和梭形，７～８个月则以梭形、多角形为主。胞体逐渐增大，核浆之比由大变小。胞突由少变多，从宽短粗糙变为细长平滑。结果提示：人胎蓝斑移植以４月份胎龄作供体较适宜。     

食源性肥胖大鼠下丘脑弓状核NPY表达上调

目的:通过观察食源性肥胖(diet-induced obese,DIO)大鼠的摄食量、体重变化和下丘脑弓状核神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)的表达,探讨NPY在大鼠发展为D IO中的作用。方法:SD大鼠给予高能饲料喂养14周后,根据体重筛选出D IO组和肥胖抵抗(diet-resistant,DR)组,记录体重和摄食量,利用免疫组织化学方法半定量分析下丘脑弓状核NPY的表达。结果:约50%的SD大鼠发展为DIO,DIO大鼠的摄食量明显增加,下丘脑弓状核N PY的表达上调,明显高于DR组(P<0.001)和对照组(P<0.05),具有显著性差异。结论:在长期高能饲料喂养下,D IO大鼠下丘脑弓状核N PY的表达上调可能是导致其摄食量和体重增加的重要原因之一。     

泻下、劳倦因素致脾气虚大鼠下丘脑、血浆NPY含量的变化

为了探讨脾气虚模型大鼠下丘脑、血浆神经肽Y(NPY)的变化.以泻下及劳倦法造脾气虚大鼠模型,用放射免疫分析方法检测下丘脑及血浆NPY,并与去势大鼠进行对比研究.结果显示各组大鼠下丘脑NPY均较正常显著升高,去势组升高最明显;而血浆NPY均呈上升趋势,但以泻下组最明显.说明不同造模因素塑造的脾气虚大鼠均存在下丘脑NPY的改变,其变化程度小于去势组大鼠,下丘脑NPY的改变可能对脾气虚证的形成产生重要作用.     

NOV蛋白免疫反应阳性神经元在鲢、鸡和几种哺乳动物脑的比较发育

目的：研究鲢、鸡、牛、犬和大鼠脑肾母细胞瘤过度表达基因（ｎｏｖ）蛋白免疫反应阳性神经元的比较发育。方法：免疫组织化学技术。结果：低等脊椎动物鲢脑仅有少量ＮＯＶ蛋白免疫反应阳性神经元，分布于延髓的一些核团、丘脑前核、丘脑后核、下丘脑背侧核、下丘脑外侧核。鸡脑ＮＯＶ蛋白免疫反应阳性神经元除广泛分布于脑干外，小脑、间脑和大脑纹状体的多数脑区阳性神经元亦较多。哺乳动物牛、犬和大鼠脑ＮＯＶ蛋白免疫反应阳性神经元广泛分布，脑干、小脑、间脑和大脑都检测到强烈阳性信号。结论：ｎｏｖ基因在从低等脊椎动物到高等脊椎动物的进化过程中非常保守，提示它在脑神经元生长、分化及正常生理功能中可能具有重要作用     

糖皮质激素对肥胖大鼠和普通大鼠下丘脑神经肽Y mRNA的影响

目的:研究糖皮质激素对肥胖大鼠和普通大鼠下丘脑中神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)mRNA表达的影响。方法:高脂饲料构建肥胖大鼠模型,肥胖大鼠和普通大鼠分别随机分为生理盐水组、小剂量组和大剂量组,分别连续20天腹腔注射生理盐水0.2 ml/100 g、琥珀酸氢化可的松5 mg/kg和15 mg/kg。并观察其摄食变化,用实时荧光定量PCR方法,检测大鼠下丘脑中NPY mRNA的表达水平。结果:应用大剂量糖皮质激素后普通大鼠和肥胖大鼠的摄食量低于盐水组(P<0.05);应用大剂量糖皮质激素后普通大鼠和肥胖大鼠的下丘脑中NPY mRNA的表达水平低于盐水组(P<0.01);应用小剂量糖皮质激素后普通大鼠的下丘脑中NPY mRNA的表达水平低于盐水组(P<0.01)。结论:大剂量糖皮质激素使普通大鼠和肥胖大鼠食欲下降,抑制肥胖大鼠和普通大鼠NPY mRNA的表达;小剂量糖皮质激素抑制普通大鼠NPY mRNA的表达,NPY在食欲调节中起重要作用。     

神经肽Y在L-NAME致孕鼠高血压中的作用

目的研究神经肽Y（NPY）在一氧化氮（NO）合酶抑制剂亚硝基左旋精氨酸甲酯（L-NAME）致孕鼠高血压中的变化与作用。方法妊娠大鼠随机分为L-NAME组1、L-NAME组2、生理盐水组1、生理盐水组2（上述4组用于不同时间点的NPY含量检测）、NPY抗血清组、无抗体血清组和正常妊娠组（上述3组用于不同时间点的动脉血压观察）,每组各6只。通过腹腔注射L-NAME形成晚期妊娠大鼠高血压,应用放射免疫分析法测定血浆和部分脑区NPY免疫活性物质（ir-NPY）含量的变化;通过静脉注射NPY抗血清（每只5μL,3次）观察其对孕鼠平均动脉压的影响。结果给予L-NAME后孕鼠平均动脉压显著升高;与注射等量生理盐水的孕鼠相比,L-NAME高血压孕鼠血浆ir-NPY的含量于妊娠后d21,下丘脑的含量于妊娠后d21、分娩后d2,延髓的含量于妊娠后d21均显著升高。静脉给予NPY抗血清后,L-NAME高血压孕鼠平均动脉压显著低于无抗体血清组,但仍显著高于正常妊娠组。结论外周与中枢NPY同时参与L-NAME致孕鼠高血压的病理生理过程,其水平的升高是形成和维持孕鼠高血压的因素之一。     

新生鼠反复低血糖引起神经元变性的动态观察

目的 建立新生鼠低血糖脑损伤模型,并观察损伤后不同脑区神经元变性的动态变化。方法 160只新生Wistar大鼠随机分为胰岛素诱导短时间低血糖组(INS-S组,n=40)、胰岛素诱导长时间低血糖组(INS-P组,n=40)、饥饿组(FAS组,n=40)和对照组(CON组,n=40)。在大鼠出生后第2、4、6天分别采用皮下注射胰岛素(15U/kg)和饥饿的手段,诱导新生鼠低血糖;在生后第6天诱导低血糖后2h、6h、1d、3d、7d和14d采用Fluoro-Jade B(FJB)染色法观察7个脑区变性神经元的动态变化,并应用特异性神经核抗原(NeuN)荧光免疫双标对FJB阳性细胞进行细胞类型鉴定。结果 INS-S组、FAS组和CON组新生大鼠各脑区各时间点均未见FJB阳性细胞,而INS-P组在旁矢状面、梨状皮层、海马齿状回、丘脑和下丘脑可见大量的FJB阳性细胞,并同时显示NeuN免疫源性。结论 胰岛素(15U/kg)皮下注射可建立稳定可靠的新生鼠低血糖脑损伤模型。新生鼠反复严重低血糖可引起广泛的神经元变性,皮层、丘脑、下丘脑和海马齿状回对低血糖损害更为敏感。     

中枢胰岛素的存在、分布及与饮食的关系

用免疫组织化学法，在大鼠下丘脑、丘脑、大脑皮层、海马、第三脑室室管膜及脉络膜等脑组织细胞内发现有胰岛素存在，一些细胞的核内也似有胰岛素存在。免疫电镜结果再次证实了上述观察。用放射免疫法发现大鼠各脑区提取液中胰岛素含量高低不等。摄食活动可引起脑内胰岛素含量增加，尤以下丘脑为最，中枢胰岛素的作用之一即可能为参与机体能量平衡的调控。同时测定血浆、脑脊液及脑组织的胰岛素含量，结果表明脑内胰岛素不可能由血浆经脑脊液而进入，尚有其它来源。     

Increased expression of neuropeptide Y and its mRNA in STZ- diabetic rats

目的：研究糖尿病大鼠下丘脑和胰腺神经肽Y的mRNA及蛋白表达情况,以探讨NPY和糖尿病的关系。方法：建立链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型,设立糖尿病、糖尿病胰岛素治疗及对照组,饲养24周后处死动物。用原位杂交和免疫组化检测下丘脑和胰腺NPY的mRNA及蛋白表达情况。结果：1.糖尿病大鼠下丘脑NPY的mRNA及蛋白表达均增加,NPY的mRNA表达主要在弓状核,说明弓状核是NPY产生的主要部位。2.给予胰岛素治疗后,STZ糖尿病大鼠下丘脑的NPY的mRNA及蛋白表达均较糖尿病组明显下降,说明胰岛素缺乏是STZ糖尿病大鼠下丘脑NPY增多的重要原因之一。3.下丘脑NPY增高的糖尿病大鼠具有多饮、多食;胰岛素治疗后其NPY下降,糖尿病大鼠的多饮、多食明显缓解,证实NPY参与STZ糖尿病大鼠的某些病理生理过程。4.首次揭示在STZ糖尿病大鼠胰岛中NPY的mRNA及蛋白表达增加。胰岛素NPY阳性细胞的分布也发生改变,由主要分布在周边变为整个胰岛散在分布,给予胰岛素治疗后,胰岛中的NPY和mRNA及蛋白表达未见明显改变。结论：糖尿病下丘脑NPY的增多,主要参与糖尿病的多饮、多食等病理生理过程。虽然糖尿病胰岛的NPY增多原因及其作用还不完全清楚,但为今后进一步的研究提供了重要线索。     

电针胃俞募穴对单纯性肥胖大鼠下丘脑和血清神经肽Y的影响

目的观察电针胃俞募穴对单纯性肥胖大鼠脂代谢及神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)水平的影响。方法选用清洁级SD雄性大鼠80只,随机选10只为空白组,采取普通饲料喂养,其余大鼠采用高脂饲料饲养。6周后,筛选40只单纯性肥胖大鼠,将其随机分为模型组、中脘组(电针中脘)、胃俞组(电针胃俞)、胃俞募穴组(电针中脘配胃俞),持续电针3周。计算Lee指数,采用全自动生化分析仪检测血清三酰甘油(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)和低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)水平,采用放射免疫法检测下丘脑和血清NPY含量。结果模型组大鼠Lee指数,血清TG、TC、LDL-C水平,以及下丘脑和血清NPY含量均较空白组显著升高(P<0.01)。两因素析因设计的方差分析结果显示,针刺中脘和针刺胃俞对降低Lee指数,血清TG、TC、LDL-C水平,及下丘脑和血清NPY含量的主效应均具有统计学意义(P<0.01);针刺中脘和针刺胃俞对降低Lee指数、血清TG及下丘脑和血清NPY的交互作用均具有统计学意义(P<0.05,或P<0.01)。结论单独电针中脘和胃俞均具有显著的减肥降脂作用,其机制与降低下丘脑和血清NPY有关,俞募配穴对减肥及降低血清TG和下丘脑、血清NPY具有显著的协同作用。     

食源性肥胖大鼠弓状核神经肽Y和GnRH的变化及对卵泡发育的影响

目的观察食源性肥胖大鼠弓状核神经肽Y和促性腺激素释放激素（GnRH）的变化及对卵泡发育的影响,为肥胖所致不孕提供实验依据。方法刚断乳SD雌性大鼠,饲以自制高能饲料,喂养14周后,根据Lee’s指数及连续阴道涂片,筛选出肥胖不孕模型;另有饲普通饲料组为对照组。观察神经肽Y（NPY）、瘦素受体（ob-R）及促性腺激素释放激素（GnRH）在其下丘脑弓状核的表达情况,并测定血清雌二醇（E2）、睾酮（T）、瘦素（leptin）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）的水平。结果肥胖不孕大鼠血清E2、T、leptin水平较对照组明显升高（P（0.05）,FSH、LH水平较对照组明显降低（P（0.05）;下丘脑弓状核NPY表达较对照组增强（P（0.05）;ob-R及GnRH表达较对照组均减弱（P（0.05）。结论食源性肥胖大鼠由于神经内分泌-代谢失调引起NPY表达增强GnRH水平降低,导致下丘脑-垂体-卵巢轴功能失调性无排卵引起不孕。