姜黄素治疗大鼠肝纤维化及其对肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响

目的 观察姜黄素治疗肝纤维化的效果及其对肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响,探讨两者间的关系.方法 以四氯化碳腹腔注射的方法制作大鼠肝纤维化模型,姜黄素治疗组大鼠于第9周起分别给予姜黄素10、20、40 mg/100 g灌胃,设立正常对照组、溶剂对照组、模型组和丹参组,检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原肽(PC-Ⅲ)含量,肝组织行HE和Masson胶原染色,光镜下观察肝脏病理学改变,并按肝纤维化半定量计分系统(SSS)进行评分.免疫组织化学染色观察肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化,专业图像分析软件进行分析.结果 与模型组比较,姜黄素治疗组大鼠肝纤维化时异常升高的ALT、AST、HA、LN、PC-Ⅲ明显降低(P＜0.05);大鼠肝纤维化的病理学改变明显改善,肝纤维化评分明显降低(P＜0.05),接近正常组;肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显降低,且这种效果随着姜黄素剂量的增大而增强.结论 姜黄素具有治疗大鼠肝纤维化的作用;增强胶原纤维降解可能是其重要的作用机制之一.     

复方牛胎肝提取物片治疗肝纤维化的多中心研究

目的观察研究复方牛胎肝提取物片治疗肝纤维化在扩大人群中的临床疗效。方法采用多中心、自身对照的研究设计。筛选肝纤维化患者共115例,所有病例给予口服复方牛胎肝提取物片治疗24周,治疗前均行肝穿刺做肝活体组织检查,其中有38例患者住治疗后再次做肝活体组织检查。患者均在治疗前、治疗后12、24周和36周,应用放射免疫法检测患者血清肝纤维化标志物HA、LN、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）,观察用药前后各项指标及肝组织病理学变化。结果口服复方牛胎肝提取物片治疗前（0周）,治疗后24周和36周,患者血清肝纤维化标志物HA值分别为（279.2±81.4）ng/ml、（136.8±56.7）ng/ml、（86.9±40.7）ng/ml,LN值分别为（170.8±73.0）ng/ml、（112.5±39.5）ng/ml、（60.8±31.8）ng/ml;Ⅳ-C值分别为（153.7±60.1）ng/ml、（112.4±43.1）ng/ml、（96.3±44.1）ng/ml,治疗后血清肝纤维化标志物较治疗前显著降低（P〈0.05）。肝活体组织病理检查显示,治疗后肝组织纤维化分期比治疗前有明显降低（P〈0.01）。结论复方牛胎肝提取物片具有改善肝纤维化的作用,对于治疗慢性肝病肝纤维化具有较好的疗效。     

养肝软坚方抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的：探讨中药复方养肝软坚方对四氯化碳（CCl4）诱导的实验大鼠肝纤维化的治疗作用。方法：60只雄性SD大鼠随机分为：正常对照组、模型组及治疗组,除正常对照组外所有大鼠均给予皮下注射40%CCl4（每3天1次,共11周）。造模3周后治疗组大鼠给予养肝软坚方10ml.kg-1.d-1,正常对照组及模型组大鼠给予等量生理盐水,1次/d,共8周。实验结束时检测大鼠肝功能、血清透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）和肝脏羟脯氨酸（Hyp）,采用光镜观察肝脏病理组织学改变。结果：养肝软坚方能改善肝纤维化大鼠的肝功能,可显著降低血清HA、LN、PCⅢ水平和肝组织中过高的Hyp,病理组织学观察表明其能显著改善肝纤维化程度。结论：养肝软坚方对CCl4诱导的大鼠具有较好的抗肝纤维化作用。     

甲磺酸伊马替尼对大鼠肝纤维化及转化生长因子-β1表达的影响

目的研究甲磺酸伊马替尼在四氯化碳＋橄榄油肝纤维化模型中的抗纤维化作用及其对转化生长因子（TGF）-β1表达的影响。方法甲磺酸伊马替尼对照组大鼠（n=8）每周2次腹腔内注射橄榄油，每日予甲磺酸伊马替尼20mg／kg灌胃；正常对照组（n=8）每周2次腹腔内注射橄榄油，每日予生理盐水灌胃；肝纤维化模型组（n=12）每周2次腹腔内注射四氯化碳和橄榄油混合物，每日予生理盐水灌胃；甲磺酸伊马替尼干预组（n=12）每周2次腹腔内注射四氯化碳和橄榄油混合物，每日予甲磺酸伊马替尼20mg／kg灌胃。第8周末取动物肝中叶，Masson染色后测定胶原面积，a-SMA免疫组化染色后定量活化肝星状细胞（HSC）。反转录（RT）-PCR法测定TGF-β1、c-Ab1和金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）-1mRNA表达，Western印迹检测肝组织磷酸化血小板衍化生长因子（PDGF）β受体和TGF-β1蛋白表达，免疫组化检测TGF-β1、c-Ab1表达。测定肝羟脯氨酸含量。结果与肝纤维化模型组比较，甲磺酸伊马替尼干预组肝组织胶原面积和活化HSC数分别减少35％和20％[分别为（25．61±0．92）％比（16．23±1．01）％和13．10±1．21比10．52±1．33，P值均〈0．05]；TGF-β1、c-Ab1和TIMP-1的表达均较肝纤维化模型组有明显下降（0．54±0．08比0．93±0．12，0．33±0．06比0．87±0．11，0．59±0．09比0．87±0．12，P值均〈0．05）；肝组织羟脯氨酸含量（0．26±0．10）mg／g较肝纤维化模型组（0．39±0．08）mg／g有显著下降（P〈0．01）。结论甲磺酸伊马替尼可通过抑制HSC增殖和细胞外基质沉积缓解肝纤维化，并抑制TGF-β1的表达和促纤维化活性。     

肺结核患者血清纤维化指标与肺通气功能的相关性研究

目的 探讨血清纤维化指标作为肺结核患者肺纤维化诊断及治疗的实验室指标的可行性.方法 测定所选病例的肺功能及血清纤维化指标,根据肺功能结果分为肺功能基本正常组[1]（A组,20例）、轻度减退组（B组,35例）、显著减退组（C组,46例）、严重减退组（D组,29例）.结果 A组血清Ⅲ型前胶原（PⅢP）平均值为16±2 ng/ml,血清透明质酸（HA）、血清层连蛋白（LN）平均水平分别为（88±6）、（98±15）ng/ml,血清Ⅳ型胶原（cⅣ）均值为（120±26） ng/ml;B组PⅢP均值为（19.5±4）ng/ml,HA均值为（92.6±12）ng/ml, LN均值为（102±16）ng/ml,cⅣ均质为（141±31）ng/ml;C组PⅢP均值为（25.4±4）ng/ml,HA均值为（95±21）ng/ml,LN均值为（111.8±30）ng/ml,cⅣ均质为（158±39）ng/ml;D组PⅢP均值为（28.9±5）ng/ml,HA均值为（108±18）ng/ml,LN均值为（132±37）ng/ml,cⅣ均质为（193±46）ng/ml.四组中cⅣ、PⅢP的平均值经方差分析F值分别为17.85、55.9,说明4组cⅣ、PⅢP均值有显著性差异,经F检验各组间有显著性差异;4组中HA、LN的均值经方差分析F值分别为7.38、8.69,具有显著性差异,经F检验各组间无显著性差异;cⅣ、PⅢP、HA、LN分别与一秒钟用力呼气容积率（FEV1.0%）做相关回归分析P值分别为0.015、0.009、0.093、0.12,说明cⅣ、PⅢP与肺功能存在直线关系,而HA、LN则不具有.结论 血清纤维化指标与肺结核患者的肺功能状态有相关性,在一定程度上反应了肺纤维化程度,其中cⅣ、PⅢP与肺纤维化程度的相关性最强.     

软肝丸治疗肝炎肝硬化临床观察

研究扶正化瘀方较肝丸改善肝功能、抑制肝纤维化的疗效。用软肝丸治疗肝炎肝硬化45例,另设对照组43冽,治疗前后观察症状、体征;肝功能检测;测定血清透明质酸（HA）,Ⅲ型前胶原（PCⅢ）。结果：治疗组症状、体征的改变明显优于对照组（P＜0．05）肝功能明显改善。HA及PCⅢ分别由治前的398±196（μg/L）及342±6．25（μg/L）下降至治疗后的190±78（μg/L）及110．8±57．2（μg/L）（P＜0．01）。治疗组肝功能的改善及PCⅢ、HA的降低,明显优于对照组。结论：软肝丸治疗肝炎肝硬化三个月,肝功能明显改善,肝纤维化亦明显减轻。     

抗氧化剂mTHC对大鼠脏器缺血再灌注损伤的拮抗作用

目的探讨抗氧化剂mTHC对缺血再灌注（I/R）大鼠脏器损伤的拮抗作用。方法取24只Wistar大鼠建立I/R损伤模型。灌注前15min和缺血前期分别予mTHC 10mg/kg给药2次。再灌注末期将大鼠断头,取肝、回肠和肺组织样本做生化分析;以肺湿重/干重计算肺损伤程度。结果应用mTHC后,肝脏、小肠、肺丙二醛（MDA）水平分别为（49.2±1.5）、（21.2±2.7）、（79.4±3.7）μmol/g,P〈0.01;髓过氧化物酶（MPO）水平分别为（14.7±1.1）、（17.8±1.1）、（36.7±2.1）U/g,P〈0.05;还原型谷胱甘肽（GSH）水平分别为（1.34±0.1）、（1.72±0.1）、（1.20±0.1）μmol/g,P〈0.05,AST、ALT分别为（36.2±2.4）、（50.1±2.2）mg/dl,肺湿重/干重为6.9±0.5。结论mTHC可能对I/R诱发的器官损伤有保护作用。     

虾青素对四氯化碳诱导的慢性肝损伤大鼠的保护作用

探讨虾青素对慢性肝损伤大鼠肝功能的保护作用。方法采用四氯化碳（CCl4）制备大鼠慢性肝损伤模型,设正常组、模型组、虾青素干预组。通过酶联免疫法测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总蛋白（TP）以及肝组织超氧化物歧化酶（ superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽转移酶（ glutathione-S-transfcrase,GST）活性、谷胱甘肽（glutathione,GSH）及丙二醛（malondialdehyd,MDA）水平。对肝组织病理切片行Masson三色染色,检测肝纤维化情况,采用RT-PCR法检测Ⅰ型胶原mRNA水平。结果正常组大鼠肝胶原指数为（0.42±0.12）,模型组大鼠肝胶原指数为（1.84±0.24,P＜0.01）,虾青素治疗组肝胶原指数为（0.89±0.12）,显著低于模型组（P＜0.05）;正常大鼠肝组织Ⅰ型胶原mRNA水平为（0.12±0.02）,模型组为（0.48±0.06,P＜0.01）,虾青素治疗组为（0.35±0.09）,明显低于模型组（P＜0.05）;正常组肝组织MDA、GST、GSH和SOD水平分别为（1.93±0.76） nmol/mg、（18.43±5.34） U/mg、（75.45±9.67） mg/g、（678.80±76.56） U/mg,模型组MDA和GST分别为（6.56±1.09） nmol/mg、（54.34±7.65） U/mg,均显著升高（P＜0.05）,而GSH为（35.45±9.01） mg/g,SOD为（203.89±89.00） U/mg,均显著降低（P＜0.01）;与模型组比,虾青素治疗组MDA为（3.34±1.12） nmol/mg,GST为（30.89±4.78） U/mg,均显著低于模型组（P＜0.01）,而GSH为（56.78±7.78）mg/g,SOD为（432.34±92.56） U/mg,均较模型组显著升高（P＜0.01）。结论虾青素可以缓解四氯化碳诱导的大鼠慢性肝损伤,其可能机制与提高抗氧化能力有关。     

肝病患者纤维化不同分期时肝左叶上下径和前后径的测定及意义

目的研究慢性肝炎患者纤维化不同分期时肝左叶上下径、前后径的变化规律及其联合血清纤维化指标对无创诊断中晚期肝纤维化或早期肝硬化的价值。方法经肝活检确定72例慢性肝炎患者肝纤维化分期。肝穿前一日,B超测定肝左叶上下径、前后径等及肝穿刺点定位。放射免疫法测定血清HA、LN、CⅣ和PCⅢ含量。结果随纤维化程度增加,肝左叶上下径呈缩短趋势,其S4期测值为（5.7±1.5）cm明显短于S0期测值（7.7±1.4）cm;肝左叶前后径呈增长趋势,其S4期测值长于S0期分别为（6.5±1.1）cm和（5.3±0.7）cm。血清HA、LN、CⅣ和PCⅢ含量亦随纤维化增加而升高,HA、PCⅢ在S3期开始显著升高,均高于同组S0期［（273.4±131.3）μg/L对（66.2±35.0）μg/L、（167.4±48.1）μg/L对（103.4±23.8）μg/L］。结论肝左叶上下径、前后径及血清HA、PCⅢ含量变化可能间接反映了活动性肝纤维化中晚期或早期肝硬化。     

Smad7和尿激酶型纤溶酶原激活剂基因共表达对大鼠肝纤维化的治疗作用

目的观察Smad7和尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）基因共表达对CCl4诱导大鼠肝纤维化的治疗作用。方法40只SD大鼠皮下注射CCl4建立肝纤维化模型。将动物分为模型组、Adsmad7／uPA组（尾静脉注射AdSmad7／uPA）、AdSmad7组（尾静脉注射AdSmad7）和AdGFP组[尾静脉注射仅表达绿色萤光蛋白（GFP）的腺病毒载体]，每组10只，另取10只大鼠作为正常对照组。采用放射免疫法测定血清Ⅲ型前胶原（PCⅢ）和层粘连蛋白（LN）水平；碱水解法检测肝组织羟脯氨酸含量；免疫组化法检测肝组织Smad7和uPA表达；天狼星红染色法检测肝纤维化程度。结果注射3d后，AdSmad7／uPA组肝组织Smad7和uPA表达量均显著增加，血清ALT、AST、PCIl、LN和羟脯氨酸水平较AdGFP和AdSmad7组明显下降（P值均〈0．05）。AdSmad7／uPA组的肝纤维化面积为（5．96±2，72）％，明显低于AdGFP组的（13．32±2．47）％和AdSmad7组的（8．73±2．30）％（P值均〈0．05）。结论Smad7和uPA双基因共表达可协同阻断CCl4诱导大鼠肝纤维化进程。     

血管紧张素Ⅱ受体阻断剂抗肝纤维化的实验研究

目的 探讨血管紧张素Ⅱ１型受体阻断剂对四氯化碳（ＣＣｌ４）诱导的实验性肝纤维化大鼠血清层粘连蛋白等细胞外基质水平的影响。地大鼠肝实质损伤性肝纤维化模型由ＣＣｌ４诱导。５０只雄性ＳＤ大鼠被随机分为５组：对照组、模型组及治疗组（高、中、低剂量组）,每组１０只,除对照组外所有大鼠均给予皮下注射４０％ＣＣｌ４（精制橄榄油配制,每３日１次,共６周）,对照组注射等体积的精制橄榄油。治疗组同时给予血管紧张素Ⅱ受     

奥曲肽抗肝纤维化的实验研究

目的 观察奥曲肽(Oct)对大鼠实验性肝纤维化的治疗效果,并探讨其作用机制。方法 用四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,将实验动物随机分为正常对照组、治疗前模型组、治疗后模型组和Oct治疗组。Oct治疗组给予Oct(50ng/100g)皮下注射,每日2次,连续用药30d,分别用放射免疫法检测血清层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC Ⅲ)及透明质酸(HA)。VG染色法组织切片观察组织病理变化,免疫组织化学法检测肝组织平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β_1(TGFβ_1)表达及逆转录聚合酶链反应法检测Ⅰ型和Ⅲ型前胶原mRNA表达。结果 治疗前和治疗后模型组大鼠血清HA(ng/L)为121.8±9.5和110.3±13.4,正常对照组为33.1±3.7、LN(μg/L)为85.7±12.1和78.2±7.9,正常对照组为37.1±6.3、PC Ⅲ(ng/L)为35.9±3.5和33.7±2.6,正常对照组为15.6±2.8。Oct组大鼠血清HA为55.8±7.2、LN为43.1±3.4、PC Ⅲ为27.8±3.4,与模型组大鼠比较,差异有显著性,t=2.76～11.07,P<0.05。Oct能显著降低纤维化大鼠肝组织纤维化积分,下调α—SMA和TGFβ_1蛋白质及I型和III前胶原mRNA表达水平。结论 Oct抑制肝星状细胞激活和转化、下调TGFβ_1蛋白质及I型和III型前胶mRNA表达而发挥抗肝纤维化作用。     

黄芪注射液对肝纤维化抑制作用的实验研究

目的探讨黄芪注射液对大鼠肝星状细胞(HSC)和肝纤维化的作用。方法体外细胞实验: 用不同浓度黄芪注射液(0、25、50、100、200、400 mg/ml)作用HSC不同时间(24、48、72h)后,采用四甲基偶氮唑盐法检测其活化增殖;流式细胞术检测HSC增殖周期;溴乙锭/吖啶橙荧光染色和流式细胞术检测HSC凋亡。动物实验:用40%四氯化碳和5%乙醇制备大鼠肝纤维化动物模型,实验分为正常对照组、模型组和黄芪注射液组。黄芪注射液组和模型组在模型制备的同时分别给予黄芪注射液(800 mg·kg-1·d-1)和等渗盐水腹腔注射,第8周时测定血清透明质酸(HA),层黏连蛋白(LN)水平及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量,免疫组织化学方法观察肝组织LN的表达,苏木素-伊红、苦味酸-酸性品红染色观察肝组织病理改变。结果在体外细胞实验中,与0 mg/ml组比较,黄芪注射液其它浓度组明显抑制了HSC增殖,并呈剂量和时间依赖性;HSC增殖周期被抑制在G2-M期;黄芪注射液各浓度组荧光染色法和流式细胞术均未检测到HSC凋亡。在体内实验中,血清HA、LN含量:模型组分别为(114.3±25.6)μg/L和(78.8±11.7)μg/L,黄芪注射液组分别为(85.6±37.3)μg/L和(66.8±17.6)μg/L,P <0.05;肝组织SOD活性黄芪注射液组为(75.9±5.9)NU/mg,模型组为(49.6±5.7)NU/mg,P< 0.01;而MDA含量黄芪注射液组为(2.4±0.2)μmol/g,模型组为(3.7±0.4)μmol/g,P<0.01。显微镜下黄芪注射液组肝纤维化程度明显轻于模型组,免疫组织化学结果黄芪注射液组肝组织LN表达明显减少。结论黄芪注射液可延缓肝纤维化的发生,其机制除可直接抑制HSC增殖外,还有抗氧化、抗脂质过氧化、减少LN产生,防止肝窦毛细血管化等作用。     

Effects of PPARg agonist pioglitazone on rat hepatic fibrosis

AIM: To investigate effects of pioglitazone on rat hepatic fibrosis and to explore its mechanism. METHODS: Rat hepatic fibrosis was induced by carbontet. achloride (CCI4). Forty Sprague-Dawley rats were divided randomly into 4 groups: control, model, and two treatment (PⅠ, PⅡ) groups. Except for rats in control group, all rats were given subcutaneous injection of 400 mL/L CCI4, twice a wk for 8 wk. Rats in PⅠ and PⅡ groups were also treated with pioglitazone of 3 mg/kg, daily via gastrogavage beginning on the 1^st day and at the end of the 2^nd week, administration of CCI4 respectively. Liver functions (ALT, AST), serum fibrotic markers (HA, LN, PCIII) and hepatic hydroxyproline (HP) concentration were determined respectively. Histochemical staining of formalin-fixed liver sections with HE, Masson-Trichrome, and immunohistochemical staining for m-smooth muscle actin (α-SMA) were performed. Modified Knodell and Chevallier semi-quantitative scoring system (SSS) was used to evaluate necroinflammatory activity and fibrosis degree. RESULTS: Compared with model group, pioglitazone significantly reduced the serum levels of ALT, AST, HA, LN and PCⅢ (P&lt;0.05 or &lt;0.01). The HP concentrations in PⅠ(210.90&#177;24.07 μg/g), and PⅡ (257.36&#177;30.55 μg/g) groups were also lower than those in model group (317.80&#177;36.44) μg/g) (P&lt;0.01). Histologic examination showed that PⅠ and PⅡ groups had milder hepatocellular degeneration, necrosis and infiltration of inflammatory cells, and thinner or less fibrotic septa than did model group. The scores for necroinflammation in P (2.80&#177;1.03), and PⅡ (3.00&#177;1.05) groups were significantly reduced as compared with model group (4.88&#177;2.30) (P&lt;0.05 or &lt;0.01); the fibrosis scores in PⅠ (3.40&#177;1.65), and PⅡ (4.60&#177;1.35) groups were also markedly lower than those in model group (7.00&#177;3.21) (P&lt;0.05 or &lt;0.01). Immunohistochemical staining showed that expression of α-SMA in PⅠ and PⅡ groups was ameliorated dramatically compared with model group. CONCLUSION: PPARγ, agonist pioglitazone greatly retards the progression of rat hepatic fibrosis induced by CCI4 through inhibition of HSC activation and amelioration of hepatocyte necroinflammation in rats.     

Inhibitory effect of Huangqi Zhechong decoction on liver fibrosis in rat

AIM: To assess the inhibitory effect of Huangqi Zhechong decoction on hepatic fibrosis in rats induced by CCl(4) plus alcohol and high fat low protein diet. METHODS: Male SD rats were randomly divided into hepatic fibrosis model group, control group and 3 treatment groups consisting of 12 rats in each group. Except for the normal control group, all the rats were subcutaneously injected with CCl(4) at a dosage of 3 mL/kg. In 3 treated groups, either high-dose group (9 mL/kg), or medium-dose group (6 mL/kg), or low-dose group (3 mL/kg) was daily gavaged with Huangqi Zhechong decoction, and saline vehicle was given to model and normal control rats. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and biochemical examinations were used to determine the changes of alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), hyaluronic acid (HA), laminin (LN), type-III-procollagen-N-peptide (PIIIP), and type IV collagen content in serum, and hydroxyproline (Hyp) content in liver after sacrificing the rats. Pathologic changes, particularly fibrosis were examined by hematoxylin and eosin (HE) and Van Gieson staining. RESULTS: Compared with the model control group, serum ALT, AST, HA, LN, PIIIP and type IV collagen levels dropped markedly in Huangqi Zhechong decoction groups, especially in the medium-dose Huangqi Zhechong decoction group (1 954+/-576 U/L vs 759+/-380 U/L, 2 735+/-786 U/L vs 1 259+/-829 U/L, 42.74+/-7.04 ng/mL vs 20.68+/-5.85 ng/mL, 31.62+/-5.84 ng/mL vs 14.87+/-1.45 ng/mL, 3.26+/-0.69 ng/mL vs 1.47+/-0.46 ng/mL, 77.68+/-20.23 ng/mL vs 25.64+/-4.68 ng/mL, respectively) (P<0.05). The Hyp content in liver tissue was also markedly decreased (26.47+/-11.24 mg/mgprot vs 9.89+/-3.74 mg/mgprot) (P<0.01). Moreover, the stage of the rat liver fibrosis in Huangqi Zhechong decoction groups was lower than that in model group, and more dramatic drop was observed in medium-dose Huangqi Zhechong decoction group (P<0.01). CONCLUSION: Huangqi Zhechong decoction can inhibit hepatic fibrosis resulted from chronic liver injure, retard the development of cirrhosis, and notably ameliorate the liver function. It may be a safe and effective therapeutic drug for patients with fibrosis.     

Protection of Veratrum nigrum L. var. ussuriense Nakai alkaloids against ischemia-reperfusion injury of the rat liver

AIM： TO investigate the protective effects and possible mechanisms of Veratrum nigrum L. var. ussuriense Nakai alkaloids （VnA） on hepatic ischemia/reperfusion （I/R） injury in rats.
METHODS： Forty male Wistar rats were randomly divided into four experimental groups （n = 10 in each）： （A） Control group （the sham operation group）; （8） I/R group （pretreated with normal saline）; （C） Small-dose （10 μg/kg） VnA pretreatment group; （D） Large-dose （20 μg/kg） VnA pretreatment group. Hepatic ischemia/ reperfusion （Hepatic I/R） was induced by occlusion of the portal vein and the hepatic artery for 90 min, followed by reperfusion for 240 min. The pretreatment groups were administered with VnA intraperitoneally, 30 min before surgery, while the control group and I/R group were given equal volumes of normal saline. Superoxide dismutase （SOD） activity, myeloperoxidase （MPO） activity and nitric oxide （NO） content in the liver tissue at the end of reperfusion were determined and liver function was measured. The expression of intercellular adhesion molecule-1 （ICAM-1） and E-selectin （ES） were detected by immunohistochemical examinations and Western blot analyses.
RESULTS： The results showed that hepatic I/R elicited a significant increase in the plasma levels of alanine aminotransferase （ALT： 74.53 ± 2.58 IU/L vs 1512.54 ± 200.76 IU/L, P 〈 0.01） and lactic dehydrogenase （LDH： 473.48 ± 52.17 IU/L vs 5821.53 ± 163.69 IU/L, P 〈 0.01）, as well as the levels of MPO （1.97 ± 0.11 U/g vs 2.57 ± 0.13 U/g, P 〈 0.01） and NO （69.37 ± 1.52 μmol/g protein vs 78.39 ± 2.28 μmol/g protein, P 〈 0.01） in the liver tissue, all of which were reduced by pretreatment with VnA, respectively （ALT： 1512.54 ± 200.76 IU/L vs 977.93 ± 89.62 IU/L, 909.81 ± 132.76 IU/L, P 〈 0.01, P 〈 0.01; LDH： 5821.53 ± 163.69 IU/L vs 3015.44 ± 253.01 IU/L, 2448.75 ± 169.4 IU/L, P 〈 0.01, P 〈 0.01; MPO： 2.57 ± 0.13 U/g vs 2.13 ± 0.13 U/g,     

姜黄素干预对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的影响

目的利用博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化模型观察姜黄素对肺纤维化的作用效果及其机制。方法54只大鼠按随机数字表法分为正常对照组、博莱霉素组和姜黄素组，每组18只。正常对照组：于实验0d气管内一次性注入生理盐水2ml／kg，第14天起每日腹腔注射生理盐水0．5ml／kg；博莱霉素组：气管内一次性注入博莱霉素屯制剂5mg／kg，第14天起每日腹腔注射6％乙醇和6％聚乙二醇混合溶液0．5ml／ks；姜黄素组：气管内一次性注入博莱霉素屯制剂5mg／kg，第14天起每日腹腔注射姜黄素（溶于6％乙醇和6％聚乙二醇混合溶液）50mg／kg。分别于第17、21、28天各取6只大鼠处死，取肺组织行苏木精-伊红（HE）和Masson染色以观察其病理变化；用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定肺组织中转化生长因子β1（TGF-β1）和干扰素γ（IFN-γ）mRNA表达；用消化法测定羟脯氨酸含量，收集支气管肺泡灌洗液（SALF）测定TGF-β1、IFN-γ的含量。结果（1）肺泡炎评分：姜黄素组与博莱霉素组在第28天分别为（1．3±0．5）分、（2．0±0．9）分，两组比较差异有统计学意义（q=3．26，P〈0．05）；（2）肺纤维化评分：姜黄素组与博莱霉素组在第21天分别为（1．3±0．5）分、（1．8±0．4）分，第28天分别为（1．2±0．4）分、（2．2±1．O）分，两组比较差异有统计学意义（q值分别为3．33、4．00，P均〈0.05）；（3）肺组织羟脯氨酸含量：姜黄素组与博莱霉素组在第28天分别为（1．75±0．36）μg／g、（2．47±0．24）μg／g，两组比较差异有统计学意义（q=7．20，P〈0．01）；（4）BALF中TGF-β1含量：姜黄素组与博莱霉素组在第21天分别为（20±3）ng／L、（39±7）ng／L，第28天分别为（24±4）ng／L、（40±7）ng／L，两组比较差异有统计学意义（q值分别为5．30、6．27，P均〈0．05）；（5）肺组织中TGF-β1mRNA的表达：姜黄素组与博莱霉素组在第21天分别为0．51±0．11、0．59±0．13，第28天分别为0．50±0．07、0．64±0．11，两组比较差异无统计学意义（q值分别为1．55、3．13，P均〉0．05）；（6）BALF中IFN-γ含量：姜黄素组与博莱霉素组在第21天分别为（28±5）ng／L、（35±13）ng／L，第28天分别为（30±11）ng／L、（39±13）ng／L，两组比较差异无统计学意义（q值分别为1．85、2．03，P均〉0．05）；（7）肺组织中IFN-γmRNA的表达：姜黄素组与博莱霉素组在第21天分别为0．49±0．17、0．50±0．08，第28天分别为0．52±0．15、0．52±0．11，两组比较差异无统计学意义（q值分别为0．17、0．00，P均〉0.05）。结论姜黄素可减轻博莱霉素诱导的大鼠肺泡炎和肺纤维化，其作用机制可能与抑制TGF-β1有关。     

ROC curves in evaluation of serum fibrosis indices for hepatic fibrosis

AIM:Use Receiver operating characteristic(ROC) curves to find out the relationship between serum level of hyaluronic acid(HA),typeⅢ procollagen (PCⅢ）,N-terminal procollagen Ⅲ peptied(PⅢNP),iaminin(LN),type Ⅳ collagen(C-Ⅳ）and hepatic fibrosis,as well as to determined their value in clinical practice.     

外源性尿激酶抗肝纤维化的作用机制

目的 探讨外源性尿激酶抗大鼠肝纤维化的作用机制.方法 采用复合致病因子复制肝纤维化大鼠模型.大鼠随机分为对照组(正常饮食)、肝纤维化组(复合致病因子饲养6周)和尿激酶预防组(复合致病因子+尿激酶饲养6周).检测并比较各组大鼠血透明质酸含量、肝组织内羟脯氨酸、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)、尿激酶型纤溶酶原激活物(μPA).尿激酶型纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、转化生长因子β1(TGF β 1)、Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白表达量以及PAI-1 mRNA和TGF β 1 mRNA的相对表达量.多组间用单因素方差分析q检验,两组间比较采用t检验,多组间等级资料比较采用Kruskal Wallis H检验,多样本间两两比较采用扩展的t检验. 结果血浆ALT、AST、总胆红素、透明质酸和肝组织内羟脯氨酸含量在尿激酶预防组大鼠分别为(46.66±6.30)U/L、(126.26±31.65)U/L、(31.11±4.20)μmol/L、(109.70±18.81)μg/L和(0.98±0.09)mg/g,较肝纤维化组的(101.57±11.97)U/L、(205.89±56.26)U/L、(67.75±2.75)μmol/L、(184.43±32.36)μg/L和(1.65±0.16)mg/g均明显降低(q值分别为3.3801～20.0061,P值均<0.01).尿激酶预防组α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、TIMP-1、PAI-1及TGF β 1蛋白相对表达量分别为299.27±37.36、210.05±27.17、192.94±24.48、213.70±32.21、204.25±17.92和205.97±23.81,较肝纤维化组的418.83±30.21、323.77±21.53、302.37±31.43、376.63±25.19、313.53±26.67和327.42±36.75均明显减少,而uPA蛋白表达增加.尿激酶预防组PAI-1 mRNA,TGF β 1 mRNA表达减少,肝纤维化程度明显减轻. 结论 预防性使用外源性尿激酶可减轻肝损伤,降低血浆转氨酶、胆红素,减少肝星状细胞活化,降低TIMP-1、PAI-1蛋白表达,增加uPA蛋白表达,加速组织损伤修复,延缓肝纤维化的发生.     

Effect of emodin on pancreatic fibrosis in rats

AIM： To establish the rats model of chronic fibrosing pancreatitis and to prove the anti-fibrotic effect of emodin in chronic pancreatitis with fibrosis.
METHODS： Fifty rats were randomly divided into five groups, 10 rats in each group. Trinitrobenzene sulfonic acid （TNBS） was infused into the pancreatic duct to induce chronic pancreatitis in rats （except for normal group）. Emodin-treated rats were fed with different doses of emodin （20, 40 and 80 mg/kg body weight） for 28 d, while normal group and control group received 0.9% sodium chloride solution. Serum levels of hyaluronic acid （HA） and laminin （LN） were determined by radioimmunoassay. Histopathological alterations were studied by optical microscopy. Expression of collagen was also examined while transforming growth factor- beta-1 （TGF-131） was localized by immunochemistry. RESULTS： In emodin-treated rats, the serum levels of HA and LN were decreased significantly （HA, 62.2 ± 19.3 μg/L vs 112.7 ± 26.5μg/L, P 〈 0.05; LN 44.3 ± 10.4 μg/L vs 86.2 ± 16.5 μg/L, P 〈 0.05）; the degree of fibrosis was ameliorated observably; the expression of collagen in pancreatic tissue was reduced especially in high-dose emodin-treated group （36% ± 5% vs 42% ± 6%, P 〈 0.05）; with the increased doses of emodin, the expression of TGF-β1 was declined, compared with those in control group.
CONCLUSION： Emodin has an anti-fibrotic effect on pancreatic fibrosis in rats. Because of its anti-fibrotic effect, it could be a potential herb for the treatment of chronic pancreatitis.