生物人工肝的细胞来源及其研究进展

肝衰竭的病死率极高，生物人工肝（BAL）是治疗肝衰竭的重要措施。目前，肝细胞作为BAL的主要生物成分，其来源一直是BAL系统研究的重点及难点之一，现就BAL系统应用的肝细胞来源作一综述。     

生物人工肝细胞材料的研究进展

近年来,许多学者对生物人工肝（bioartificial liver,BAL）多种来源的细胞材料进行了广泛深入地研究和探索,但生物人工肝细胞材料的来源问题至今仍未得到满意解决。本文对近年来生物人工肝细胞材料研究进展进行综述,以期为建立和选择理想的生物人工肝细胞材料的深入研究提供参考。     

生物人工肝之肝细胞分离和培养研究现状

组合型生物人工肝支持系统(Hybrid Bioartificial Liver Support System. HBLSS)具备解毒、分泌、合成与转化等功能。在国外已完成动物试验,并进入了Ⅰ期临床试验,取得良好效果。笔者拟就现代生物人工肝的基础——肝细胞的分离和培养研究作一综述。 1 肝细胞来源 生物人工肝(BLSS)的肝细胞,要求既要有足够的数量,又要有完备的生物学活性。肝细胞来源大概有3条途径:①来自人或动物的肝脏分离的原代肝细胞;②肿瘤肝细胞建株后的     

生物人工肝用肝细胞低温保存的现状与进展

大量功能好的肝细胞是生物人工肝支持系统(bio-artificial liver support system,BLASS)的核心,是制约BLASS临床广泛应用的瓶颈.探索出一种实用的肝细胞低温保存方法,建立一个随时可用(ready to use)的肝细胞库是BALSS普遍推广的基础.目前肝细胞低温保存分为4℃或零下非结冰保存和-80℃或-196℃深低温冻存两大类,两大类保存方法各有优缺点.影响肝细胞低温保存的因素很多,如保存(冻存)液、(冻存)保护剂等.有关肝细胞在低温保存过程中死亡的机制尚未完全阐明,但大量研究发现细胞凋亡是除了坏死之外低温保存肝细胞死亡的另一个重要的途径.     

人工肝用肝细胞的培养及相关技术研究现状

近年来人工肝技术在临床上得到了快速发展,明显降低了肝衰竭的病死率[1,2].生物型人工肝(Bio-artificial liver,BAL)可以较好的替代肝脏解毒、生物合成和分泌代谢等功能,是国内外研究的热点.肝细胞是生物型人工肝发展的关键因素,如何得到满意的生物人工肝用肝细胞、实现肝细胞的体外大规模培养和冻存,使其快速、稳定增殖,而且能在数天或数周内保持良好的分化状态,能在体外完成合成和解毒功能,近年来有较多研究.现就目前BAL用肝细胞培养和相关技术的研究现状作一介绍.     

生物人工肝的研究现状

众所周知，急性肝功能衰竭死亡率很高，严重危害人类的身体健康，１９９０年美国因肝衰死亡达２７０００人，其中１０％为急性可逆性肝衰．我国每年死于急性肝衰的人数远大于此，传统的内科治疗仅２０％有效，近年来虽有用肝移植治疗急性肝衰，存活率提高５５％～７５％，...     

生物型人工肝的研究进展

生物型人工肝（BAL）是以培养肝细胞为基础的人工肝系统。BAL是目前与正常肝脏最为接近的人工肝支持系统,可以比较全面地替代肝脏解毒、生物合成和分泌代谢等功能。BAL由三部分组成：①生物成分;②生物反应器;③辅助循环装置：包括外部控制系统和体外循环系统。     

培养肝细胞应用于人工肝的研究进展

培养肝细胞应用于人工肝的研究进展徐小平综述杨继震高毅审校作者单位：５１０２８２广州第一军医大学珠江医院人工肝的研究始于５０年代，早期的人工肝支持系统主要有：血液透析、体外肝灌注。交叉血循环。活性碳灌流、肝透析、交叉输血及血浆交换。经临床试验表明，对暴...     

生物人工肝乳猪肝细胞的聚集培养、冻存及形态、功能观察

目的　为构建生物人工肝进行肝细胞的准备。方法　采用胶原酶半原位灌流法分离单个乳猪肝细胞 ,并对其活力、单层、聚集培养及冻存复苏后培养的白蛋白、尿素合成功能进行检测。结果　采用本方法从每头乳猪中分离到的单个肝细胞数为 ( 3 .1± 1.5 )× 10 10 ,活性超过 95 %。在加入激素和生长因子的培养基中单层培养时 ,肝细胞功能良好 ,可维持 2周左右 ,而在未加入激素和生长因子的培养基中肝细胞虽能存活 1周 ,但功能于 2 4h后即丧失。球形聚集培养可实现肝细胞的大量培养 ,且生物学活性较单层培养显著提高。冻存复苏后肝细胞活力仍超过 90 % ,肝细胞功能与新鲜分离培养的肝细胞功能间无明显差异。结论　采用胶原酶半原位灌注法所得单个乳猪肝细胞基本满足构建生物人工肝对肝细胞数量的要求。聚集培养接种密度大 ,细胞生物学活性高 ,可用于构建生物人工肝。冻存复苏后肝细胞仍功能良好。     

人体可移植肝细胞来源的研究现状

肝细胞移植和生物人工肝装置的核心问题是具有生物活性的足够数量肝细胞来源，肝细胞来源是解决肝衰竭患者的关键。     

生物人工肝临床应用的疗效与难点

各种原因导致的肝衰竭病死率高,人工肝不仅为肝衰竭患者等待肝移植提供过渡,还为部分患者延长生存时间、争取肝脏再生、避免肝移植提供可能.肝脏具有复杂的代谢、合成、转化等功能,生物人工肝支持系统引入肝细胞,从而部分替代肝脏的解毒与生物合成的功能.随着肝细胞及其体外分离、培养,纯化技术的深入研究,国内外许多类型的生物人工肝支持系统进入临床研究[1 2].     

Progress in bioreactors of bioartificial livers

BACKGROUND:Bioartificial liver support systems are becoming an effective therapy for hepatic failure.Bioreactors,as key devices in these systems,can provide a favorable growth and metabolic environment,mass exchange,and immunological isolation as a platform.Currently,stagnancy in bioreactor research is the main factor restricting the development of bioartificial liver support systems.DATA SOURCES:A PubMed database search of English-language literature was performed to identify relevant articles using the Ke...     

肝细胞在肝脏移植中的免疫学效应

肝脏移植相对于其他实质性大器官移植来说其术后的排斥反应相对较弱，有很多原因与此有关，肝细胞独特的生理和免疫学功能在其中可能起一定的作用，它与肝脏非实质细胞协同作用对宿主免疫系统产生影响，在一定条件下诱导移植肝免疫耐受，但也可通过上调一系列的免疫活性分子而促进排斥反应。现对肝细胞在肝脏移植免疫中的作用作一综述。     

生物人工肝在肝衰竭治疗中的应用

重型肝炎及其引起的肝衰竭病死率极高,迄今仍缺乏特效的治疗方法.目前公认的最有效的治疗方法是肝移植,但由于供肝短缺,远远不能满足临床需求.例如在美国,14%需要紧急肝移植的患者在等待供肝过程中死亡.如果在肝衰竭的严重阶段通过人工的或者辅助的手段代替肝脏的主要功能,则患者将有更多机会获得供肝或者避免肝移植.各种非生物型人工肝,如血液灌流、血浆置换等由于其不能代替肝脏的合成和代谢功能而疗效有限.     

人工肝技术的临床应用

各种原因所致的重型肝炎、肝功能不全和肝功能衰竭在临床上十分常见,内科药物治疗效果差,病死率居高不下。肝移植因为供肝短缺、费用高及技术因素的限制,还远未普及。人工肝就是在此背景下逐步形成的一套以血液净化为基础的实用性很强的治疗方法和应用技术。     

人工肝治疗的问题与对策

人工肝支持系统对治疗重型肝炎发挥了一定的作用，但现有的人工肝主要为非生物型人工肝，其治疗效果有限。如应用恰当，能有效改善病情，为疾病恢复或等待肝移植获得宝贵时间。     

用于生物人工肝的大量猪肝细胞低温冻存技术

目的：比较大量猪肝细胞程序冻存与常规冻存的效果。方法采用二步法胶原酶经肝静脉逆行灌注的方法分离猪肝细胞,分离的肝细胞根据冻存方法与冻存袋的不同分5组：a 组,50 mL 冻存袋,程序冻存;b 组,100 mL 冻存袋,程序冻存;c 组,50 mL 冻存袋,常规冻存;d 组,100 mL 冻存袋,常规冻存;e 组,新鲜分离的肝细胞。各冻存组解冻后,比较各组的肝细胞活性、贴壁率、LDH 漏出量及白蛋白合成能力。结果新鲜分离的肝细胞产量为（1．8＆#177;0．4）1010/肝,活性高达（90．5＆#177;1．7）％,培养后贴壁率为（70．5＆#177;8．5）％。采用程序冻存的 a、b 组在肝细胞活性、贴壁率、LDH 漏出量及白蛋白合成能力方面明显优于常规冻存的 c、d 组（P＜0．05）,但与 e 组新鲜分离的肝细胞相比,其解冻后肝细胞的活性、贴壁率及蛋白合成能力均降低（P＜0．05）,LDH 漏出量增加（P＜0．05）。相同冻存方法条件下,50 mL 袋装与100 mL 袋装冻存效果差异无统计学意义（P＞0．05）。结论采用袋装程序冻存法大量冻存猪肝细胞可满足生物人工肝对肝细胞活性及数量的要求。     

Functional evaluation of a new bioartificial liver system in vivo and in vivo

AIM: To evaluate the functions of a new bioartificial liver (BAL) system in vitro and in vitro. MEHTODS: The BAL system was configurated by inoculating porcine hepatocyte spheroids into the cell circuit of a hollow fiber bioreactor. In the experiments of BAL in vitro, the levels of alanine aminotransferase (ALT), total bilirubin (TB), and albumin (ALB) in the circulating hepatocyte suspension and RPMI-1640 medium were determined during 6 h of circulation in the BAL device. In the experiments of BAL in vitro, acute liver failure (ALF) model in canine was induced by an end-side portocaval shunt combined with common bile duct ligation and transaction. Blood ALT, TB and ammonia levels of ALF in canines were determined before and after BAL treatment. RESULTS: During 6 h of circulation in vitro, there was no significant change of ALT, whereas the TB and ALB levels gradually increased with time both in the hepatocyte suspension and in RPMI-1640 medium. In the BAL treatment group, blood ALT, TB and ammonia levels of ALF in canines decreased significantly. CONCLUSION: The new BAL system has the ability to perform liver functions and can be used to treat ALF.