干扰素γ增加去氧氟尿苷和5-氟尿嘧啶抗膀胱癌作用的实验研究

目的　探讨干扰素γ在膀胱癌T2 4细胞中对血小板衍化内皮细胞生长因子 /胸苷磷酸化酶 (PD ECGF/TP)表达的调节作用及其与去氧氟尿苷和 5 氟尿嘧啶抗癌作用的关系。　方法　分别用RT PCR和Western印迹检测PD ECGF/TPmRNA和蛋白质的表达 ,MTS法确定去氧氟尿苷和 5 氟尿嘧啶对膀胱癌T2 4细胞的细胞毒性作用。　结果　干扰素γ增强膀胱癌T2 4细胞表达PD ECGF/TP ,并使去氧氟尿苷的半数致死量 (IC50 )从 (16 .0± 3.6 )mmol/L降至 (6 .2± 0 .9)mmol/L(P<0 .0 1) ,5 氟尿嘧啶的IC50 从 (82 6 .7± 15 5 .1) μmol/L降至 (346 .7± 38.9) μmol/L(P <0 .0 5 )。 　结论　干扰素γ通过诱导膀胱癌T2 4细胞表达PD ECGF/TP增强去氧氟尿苷和 5 氟尿嘧啶的抗癌作用 ,提示联合应用干扰素γ和去氧氟尿苷或 5 氟尿嘧啶可能提高膀胱癌的化疗效果。     

脱氧氟尿苷增强顺铂对人肝癌BEL-7402细胞株的增殖抑制作用

目的 探讨脱氧氟尿苷（5-DFUR）和顺铂（CDDP）联合应用对人肝癌细胞系BEL-7402的增殖抑制作用。方法 采用克隆形成法检测细胞的增殖抑制率、流式细胞术检测细胞周期的改变及凋亡率。结果 5-DFUR（7.815～250mg/L）和CDDP（0.63～20mg/L）单独应用均对人肝癌BEL- 7402细胞有抑制作用，呈现剂量效应关系。5-DFUR与CDDP联合应用对人肝癌细胞BEL-7402产生显著的协同杀伤作用，5-DFUR与CDDP浓度接近IC50时即5-DFUR 62.5mg/L与CDDP 2.5mg/L联合用药时可使CDDP的抑制率从单独用药的45.12%提高到联合用药的89%（P〈0.01）。CDDP、5-DFUR单独应用48h后可诱导人肝癌BEL-7402细胞发生凋亡，凋亡比率分别为15.37%和21.25%，联合用药组在48h细胞凋亡的比率则为19.37%，72h后CDDP、5-DFUR单独应用诱导人肝癌BEL-7402细胞发生凋亡的比率分别为19.3%和28.37%，而联合应用组诱导凋亡细胞的比例达到55.7%（P〈0.01），CDDP与5-DFUR单用72h时，细胞周期G1期阻滞较为明显，而当5-DFUR与CDDP合用后，G1期、S、G2期/M期细胞增加，尤其是G2期/M期细胞数增加明显。结论 5-DFUR与CDDP联合应用对人肝癌细胞BEL-7402可产生显著的协同杀伤作用，其细胞周期调节发生在G2～M期，细胞被阻滞于G2～M期。     

肝癌组织中Fas和FasL mRNA表达水平的变化及其意义

目的　探讨肝癌、癌旁及正常肝组织中Fas和FasL mRNA表达水平的变化与肝癌发生、发展的关系及其意义。方法　应用半定量RT PCR的方法检测肝癌(40例)、癌旁(40例)及正常肝(25 例)组织中Fas及FasLmRNA表达的相对含量。结果　正常肝组织、癌旁及肝癌组织中Fas 和FasL mRNA 表达的相对含量分别为0.792±0.039和0.245±0.043、0.857±0.031和0.429±0.035以及0.473±0.047和0.185±0.041。肝癌组织中Fas mRNA表达的相对含量明显低于正常肝组织和癌旁组织(P<0.05); 肝癌组织中FasL mRNA表达的相对含量亦明显低于正常肝组织(P<0.05)和癌旁组织(P<0.01),但癌旁组织中FasL mRNA表达的相对含量高于正常肝组织中的表达(P<0.05)。结论　肝癌组织不仅通过低表达Fas来逃避机体的免疫监视作用,而且还通过癌旁组织FasL的高表达,使与之接触的淋巴细胞(表达Fas)凋亡,最终使肝癌细胞逃脱机体的免疫杀伤作用,得以增殖和转移。     

肝癌及癌旁组织中p16的表达及其临床意义

目的 探讨抑癌基因p16在肝癌及癌旁中的表达及意义。方法 应用免疫组化方法对50例肝细胞癌（HCC）及癌旁肝硬化组织（44例）手术切除石蜡包埋标本进行p16基因蛋白表达的测定，结合临床病理指标（Child分级、肿瘤大小、Edmondson分级、转移及生存期）进行分析。结果 p16基因在HCC中的阳性表达48％（24／50），癌旁91％（40／44）。p16基因表达与HCC的分化程度密切相关（p=0.014），在分化Ⅰ-Ⅱ级中P16阳性率59％（19／32）明显高于Ⅲ-Ⅳ级的27.8%（5／18）。结论 p16基因在HCC的发生及分化中起重要的调控作用，且P16的失活可能发生在HCC的早期。     

结直肠癌组织中胸苷磷酸化酶表达与5'-脱氧氟尿苷靶向治疗的关系

胸苷磷酸化酶(TP)是嘧啶和核苷代谢过程中的关键酶,近年发现其具有肿瘤血管新生作用,并与肿瘤病人的预后转归密切相关。同时TP还是5’-脱氧氟尿苷(5’-DFUR,商品名为氟铁龙)抑制肿瘤细胞生长的关键转化酶。目前,TP在结直肠癌细胞中是否表达尚无定论,但因其对肿瘤血管新生及增进5’-DFUR治疗效果的双重作用而倍受临床关注。文中对TP在结直肠癌组织中的表达与5’-DFUR细胞内激活、治疗的研究进展进行综述。     

脱氧氟尿苷诱导胃腺癌细胞凋亡的临床研究

目的　了解术前化疗对胃腺癌细胞凋亡的影响。方法　采用抽签法术前随机分为口服脱氧氟尿苷(5′- DFUR)组(18例)、静脉输注5- FU CF组(16例)及对照组(2 0例)。化疗结束后第1～2天手术。采用免疫组织化学及TUNEL法检测癌细胞增殖指数(PI)及凋亡细胞指数(AI)。结果　PI在5′-DFUR组(40±13)、5 - FU CF组(41±15 )明显低于对照组(5 8±16 ) ,差异有统计学意义(P =0 . 0 0 0 ) ;AI在5′- DFUR组(14±9)、5 - FU CF组(14±10 )明显高于对照组(7±7) ,差异有统计学意义(P =0 . 0 17)。4 4例获得随访。总的0 . 5、1、2年生存率分别为93%、86 %、70 % ,0. 5、1、2年无瘤生存率分别为89%、77%、6 7%。3组术后生存时间差异无统计学意义。结论　术前3～5d短程口服5′- DFUR化疗可诱导胃腺癌细胞凋亡,降低癌细胞增殖指数,但不能改善术后生存情况。     

白藜芦醇与氟尿嘧啶对小鼠肝癌的联合治疗作用

目的　探讨白藜芦醇单独及其与氟尿嘧啶 (5 Fu)联合应用对小鼠移植性肝癌的抑制作用。方法　利用小鼠移植性肝癌H2 2 模型研究白藜芦醇的体内抑瘤作用以及其对氟尿嘧啶抑瘤作用的影响。结果　白藜芦醇治疗组能不同程度抑制小鼠肝脏移植瘤的生长 ,10 0mg/kg和 15mg/kg的白藜芦醇治疗时抑瘤率分别为 36 6 %和 4 9 3% ,与对照组比较有明显差异 (P <0 0 1) ;同时发现白藜芦醇与氟尿嘧啶合用能增加氟尿嘧啶的抑瘤率 ,单用 2 0mg/kg或 10mg/kg的氟尿嘧啶 ,抑瘤率分别为 5 3 1% ,4 3 8% ,而合用 10mg/kg的白藜芦醇后抑瘤率分别为 77 3%、72 7% ,两者有显著性差异 ,且无明显的毒性反应。结论　白藜芦醇能增强氟尿嘧啶的抗癌作用 ,降低其毒性 ;白藜芦醇作为生化调节剂可能用于肿瘤联合化疗。     

妊娠期肝细胞癌的临床特征

目的 探讨妊娠期肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的临床特征.方法 回顾性分析4例妊娠期HCC病人的临床资料.结果 4例病人乙肝表面抗原均为阳性,3例血清甲胎蛋白水平明显增高(310.1～5630.0 ng/m1).3例病人在诊断时HCC已为晚期,分别于诊断后第7个月、第6个月、第4个月病死.1例早期HCC行根治性切除后已无瘤生存26个月.结论 妊娠期HCC就诊时多为疾病晚期预后差.建议对妊娠期妇女特别是乙肝流行区域的乙肝携带者行甲胎蛋白和肝脏超声筛查,以早期发现HCC,提高生存期.     

经腹腔镜射频消融术治疗肝细胞癌的临床观察

目的探讨经腹腔镜射频消融术治疗肝细胞癌的临床效果。方法12例共18个肝癌病灶经腹腔镜行射频消融治疗,病灶平均直径3．2cm。术后复查超声造影,观察治疗效果。结果12例均顺利完成手术,单个病灶射频消融时间平均为8．6min。术后均未出现腹腔出血、胆囊损伤、胆漏、胃肠道损伤、膈肌损伤及肝功能衰竭等严重并发症。术后超声造影复查病灶完全坏死率达83．3％,残留病灶均再次B型超声引导下经皮射频消融治疗。随访6～32个月（平均16个月）,2例发现肝内新病灶,3例消融部位复发,均采用B型超声引导下经皮射频消融进行治疗。结论经腹腔镜射频消融治疗肝细胞癌安全可行,减少并发症的发生,扩大了治疗的适应证。但应选择肿瘤位于肝脏表面、肝左外叶的病例进行治疗。     

马氏钳蝎毒搞癌多肽与5-Fu对小鼠肝癌的关系

目的 观察肝癌肝内动静脉分流对术后的肺转移的影响。方法 ３２例可切除肝癌术前经肝动脉插管注入５ｍＣｉ（１８５ＭＢｑ）＾９９ｍＴｃ－ＭＡＡ,获得肝肺分流率,术后随访３年观察肺情况。结果 肺转移病人的肝肺分流率明显高于无肺转移者。结论 肝内动静脉分流量大者术后肺转移的可能性大。     

白细胞介素18对肝细胞肝癌治疗的实验研究

目的研究携带白介素 18基因的腺病毒载体包装细胞对体内肝癌生长抑制作用。方法　构建白介素 18腺病毒载体 ,并进一步通过与Ad5腺病毒DNA TPC复合物同源重组 ,制备IL 18的复制缺陷性重组腺病毒 ,并对实验性肝癌大鼠进行治疗 ,观察抗癌作用。结果IL 18的复制缺陷性重组腺病毒包装细胞肝内局部或脾内注射后抑制肝癌细胞系CBRH3 的生长 ,接种CBRH3 第 1,3天注射者长期生存 ,第 5 ,7天注射者生存期延长空白组及空载体对照组注射者均见癌灶生长 [P =0 0 0 15 ,生存时间 (2 1± 4 )d]。结论肝癌局部及脾内注射IL 18的复制缺陷性重组腺病毒包装细胞能产生有效的抗癌作用 ,早期治疗优于晚期治疗 ,脾内注射安全有效。     

肝癌自发性破裂病人血管内皮细胞超微结构检查

目的　肝癌自发性破裂是一种危险的出血性并发症 ,其发病机制不详。我们既往的免疫组化研究已首次证实了该病人中存在血管病变现象 ,本实验旨在通过电子显微镜对其血管壁进行超微结构检查 ,以进一步证实其血管病变。方法　 1995～ 1997年间 ,对 11例肝癌破裂病人的手术标本与同期随机选取的 11例肝癌非破裂病人手术标本 ,进行血管内皮细胞的透射电子显微镜检查。结果　 11例肿瘤破裂的病人中 ,有 9例病人的血管壁出现内皮细胞受损现象 ,包括 :血管内皮细胞发生细胞连接消失、窗口直径过大及伴有高蛋白合成征象。在肿瘤非破裂的病人中 ,上述血管受损现象仅在 2例病人中发现 ,二者相比有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论　肝癌破裂病人中的血管内皮细胞存在通透性增加及高蛋白合成现象 ,其病变可能与肿瘤破裂有关。     

虚拟肝切除技术在肝癌切除中的临床应用

目的 探讨虚拟肝切除技术在肝癌切除中的价值.方法 2007年9月至2008年9月对13例肝癌病人术前行常规Flash3D增强扫描,用3D-Doctor软件行包括下腔静脉、门静脉、肝静脉和肝短静脉的三维影像重建,测量全肝体积、肿瘤体积、拟切除的肝脏体积、余肝体积和余肝体积/标准肝体积(SFLVR).结果 7例行右半肝切除,6例肝段/叶切除.肝脏三维重建后均能从各个角度显示肝内静脉走向及与肿瘤的空间关系,肿瘤体积为(348±214)ml,拟切除肝体积为(676±375)ml,余肝体积为(714±261)ml,SFLVR为62%±19%.术后并发症包括肺1例肺部感染,中等量腹水6例,大量腹水2例,其中1例肝功能不全.结论 虚拟肝切除技术能直观显示肝脏静脉以及与肿瘤的关系,预测肝切除量,对制定肝脏手术方案具有实用价值.     

纤溶酶原激活物抑制物1与肝细胞癌

目的研究纤溶酶原激活物抑制物１（ＰＡＩ１）在肝细胞癌（ＨＣＣ）蛋白和ｍＲＮＡ水平的表达及其与ＨＣＣ生物学特性的关系。方法取ＨＣＣ石蜡标本４８例,肝良性肿瘤石蜡标本１２例（对照组）做免疫组化染色;液氮冻存ＨＣＣ标本２０例,肝血管瘤５例（对照组）做免疫印迹杂交。结果肝癌细胞与癌周细胞及对照组肝细胞相比,ＰＡＩ１抗原蛋白和ｍＲＮＡ表达显著升高,差异有显著意义,Ｐ值分别＜００１和＜０．０５。术后２年内死亡病例与生存病例相比,ＰＡＩ１阳性率有显著意义的升高,Ｐ＜００５。ＰＡＩ１和纤溶酶原激活物（ｕＰＡ）及其受体（ｕＰＡＲ）同时阳性患者与同时阴性患者相比,前者侵袭性病例较后者升高有显著性意义（Ｐ＜００５）。结论ＨＣＣ中ＰＡＩ１蛋白和ｍＲＮＡ表达明显增高。ＰＡＩ１与ＨＣＣ浸润转移和预后密切相关。     

肝细胞癌肺耐药蛋白基因的表达及临床意义

目的研究肺耐药蛋白 (lungresistance protein ,LRP)基因LRP在肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma ,HCC)中产生的多药耐药机制 ,及其与预后的关系。方法采用SP免疫组织化学法和原位PCR技术对 5 4例未化疗的HCC ,2 4例癌旁和 12例肝炎后肝硬化组织中LRP编码的LRP和mRNAlrp的表达进行检测 ,对术后 2 4例AFP阳性的HCC患者进行术后化疗 ,分析LRP表达与AFP变化关系。结果LRP和mRNAlrp在 3种组织中的阳性表达率分别为 6 1%、33%、17%和 76 %、38%、33%。HCC组织中LRP表达显著高于其他组织 (CMH统计量为 9 32 ,10 96 ,P值均小于 0 0 1)。LRP表达与HCC的分化程度有关 (CMH统计量为 4 2 7,6 71,P值分别小于 0 0 5、0 0 1)。LRP ,mRNAlrp表达阳性组患者术后化疗AFP下降率 [有效率分别为 2 0 % (3/ 15 ) ,2 5 % (4 /16 ) ],显著低于LRP及mRNAlrp表达阴性组 [有效率分别为 78% (7/ 9)及 88% (7/ 8) (P值分别小于 0 0 5、0 0 1) ]。术后随访mRNAlrp表达阳性组患者术后平均生存为 (36± 10 )个月 ,而阴性组为(4 5± 11)个月 (t=2 6 76 0 ,P <0 0 1)。结论HCC化疗多药耐药与其LRP表达有关 ,LRP表达也与HCC的分化程度有关 ,检测LRP表达对预测化疗耐药具有指导意义。