急性白血病患者Wilms肿瘤基因(WT1)表达及其临床意义

目的 检测急性白血病患者WT1 mRNA转录水平,探讨WT1基因与白血病病程的关系.方法 应用荧光定量PCR(FQ-PCR)方法对57例白血病病人和10例正常健康人的外周血或骨髓标本进行WT1基因的检测.结果 45例初发急性白血病(AL)中35例WT1 mRNA阳性(阳性率77.8%),其中27例初发急性髓细胞白血病(AML)中24例阳性(88.9%),18例初发急性淋巴细胞白血病(ALL)中11例阳性(61.1%).10例正常人没有检测到WT1 mRNA.结论 急性白血病WT1 mRNA呈高表达.在缺乏特异性克隆标志白血病中监测WT1 mRNA是有价值的.     

口腔颌面部肉瘤组织中端粒酶逆转录酶mRNA和C-myc蛋白的表达

目的:探讨口腔颌面部肉瘤(OMFS)组织中hTERT mRNA和C-myc蛋白的表达.方法:应用原位杂交和免疫组织化学SP法检测37例OMFS、14例良性间叶组织肿瘤及3例口腔正常肌肉或脂肪组织中hTERT mRNA和C-myc蛋白的表达.结果:OMFS组织中hTERT mRNA和C-myc的阳性表达率均高于良性肿瘤和正常组织,低度恶性OMFS组织中2者的阳性表达率低于高度恶性组织(P＜0.05).OMFS中hTERT mRNA和C-myc的表达呈正相关关系(r=0.417,P＜0.05). 结论:C-myc的过表达使hTERT基因得以激活,可能与OMFS的恶性演进有关.     

ATM基因在髓性白血病原代细胞中的表达及其对基因治疗的意义

目的 研究在髓性白血病原代细胞和肿瘤细胞株中共济失调毛细血管扩张症突变基因(ATM)的转录水平。以确定反义封闭ATM基因治疗在白血病中应用的可行性。方法 利用半定量RT-PCR技术。检测了正常人及31例髓性白血病患者和9种肿瘤细胞株的ATMmRNA表达量。结果 31例髓性白血病患者及9种肿瘤细胞株中ATM mRNA表达量普遍降低。结论 由于白血病患者中ATM mRNA表达量普遍降低，因此，反义封闭ATM对于白血病原代细胞基因治疗的适应性有待商榷。     

骨髓Pim-1和C-myc表达在初诊多发性骨髓瘤中的临床意义

目的:探讨莫罗尼鼠白血病病毒前病毒整合基因-1(proviral integration of moloney murine leukemia virus,Pim-1)及Cmyc在初诊多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)发病机制中的可能作用。方法:采用RT-PCR检测22例MM患者骨髓及10例非恶性血液病患者骨髓中Pim-1 mRNA及C-myc mRNA的表达水平。结果:在初诊的多发性骨髓瘤患者中Pim-1和C-myc基因的表达显著高于对照组,二者比较有差异性(P<0.05);Pim-1和C-myc基因的表达成正相关(r=0.577,P<0.01)。结论:Pim-1及C-myc基因的过度表达,在多发性髓瘤的发生发展中可能具有协同作用。     

病理性瘢痕组织中survivin mRNA和C-myc、P27kip1蛋白的表达

目的:探讨病理性瘢痕组织中survivin mRNA和C-myc、P27 kip1蛋白的表达情况.方法:采用原位杂交和免疫组织化学染色技术,分别检测40例病理性瘢痕组织、20例非病理性瘢痕组织和20例正常皮肤组织中survivinmRNA和C-myc、P27kip1蛋白的表达情况.结果:病理性瘢痕、非病理性瘢痕和正常皮肤组织中survivin mRNA、C-myc蛋白和P27kip1蛋白阳性表达率分别为67.5%、40.0%、20.0%,72.5%、45.0%、35.0%,55.0%、85.0%、90.0%;病理性瘢痕与非病理性瘢痕和正常皮肤组织比较,3指标差异均有统计学意义(P＜0.05).病理性瘢痕组织中,C-myc蛋白表达与survivin mRNA表达及P27kip1蛋白高表达均有相关性(P＜0.05),survivin mRNA表达与P27kip1蛋白高表达无相关性(P＞0.05).结论:病理性瘢痕组织中survivin、c-myc表达上调,p27kip1表达抑制,从而导致瘢痕形成.     

急性白血病细胞凋亡抑制基因Livin表达及临床意义

目的 观察 Livin 基因在急性白血病(AL)病人白血病细胞中的表达及其临床意义.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测41例不同时期AL病人白血病细胞Livin mRNA的表达水平,以10例健康人作为正常对照.结果 AL病人白血病细胞Livin mRNA 阳性表达率为53.7%.其中急性淋巴细胞白血病(ALL)和急性非淋巴细胞白血病(ANLL)病人Livin mRNA 阳性表达率分别为53.8%、53.6%,二者比较差异无显著性,但均高于正常对照组(10.0%)(P=0.035、0.017).初治和复发AL病人白血病细胞Livin mRNA 阳性表达率分别为52.4%、85.7%,明显高于对照组(P=0.025、0.004).缓解组病人Livin mRNA阳性表达率为15.4%,明显低于初治组和复发组(P=0.004、0.030),而与对照组相比差异无统计学意义.白细胞计数≥50×109/L的初治白血病病人Livin mRNA的阳性表达率(77.8%,7/9)明显高于白细胞计数＜50×109/L的初治病人(25.0%,3/12)(P=0.022),其表达水平也明显高于后者(T=6.50,P<0.05).结论 Livin mRNA过度表达参与了AL的发病,可作为AL的诊断、复发及预后判断的指标之一.Livin mRNA表达在AL细胞的增殖分化和(或) 抗凋亡过程中发挥了重要作用,可能是导致AL细胞对化疗药物不敏感的原因之一,可作为治疗的一个潜在靶点.     

树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras、C-myc基因表达的影响

目的 为探明树舌多糖GF对HepA瘤组织N-ras、C-myc基因表达的影响.方法 运用原位杂交法、SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中N-ras、C-myc mRNA及蛋白的表达量.结果 树舌多糖组、猪苓多糖组中N-ras、C-myc mRNA及蛋白的表达量均显著低于荷瘤组(P＜0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异.结论 树舌多糖GF可通过降低N-ras、C-myc mRNA及蛋白的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖.     

多西紫杉醇和顺铂联合用药对人乳腺癌MCF-7细胞hTERT及C-myc基因表达的影响

目的研究多西紫杉醇和顺铂联合应用对人乳腺癌MCF-7细胞的作用及其机制。方法MCF-7细胞传代培养后分组加药：第1组加入多西紫杉醇（多西紫杉醇组）；第2组加入顺铂（顺铂组）；第3组加入多西紫杉醇和顺铂（联合用药组）；对照组为未加药的MCF-7细胞。加药24、48、72 h后收集细胞，MTT法检测各组细胞生长抑制率，PCR-ELISA法检测各组细胞端粒酶活性，RT-PCR法检测端粒酶逆转录酶hTERT mRNA的表达，Western blot技术检测C-myc蛋白的表达。结果联合用药组人乳腺癌MCF-7细胞的生长和增殖受到明显抑制，多西紫杉醇联合顺铂对端粒酶活性、hTERT mRNA及转录调控基因C-myc表达的抑制呈明显的时效和效量相关性。结论多西紫杉醇和顺铂联合应用对人乳腺癌MCF-7细胞的抑制具有协同加强作用，其机制可能是对MCF-7细胞的端粒酶活性及其端粒酶转录调控基因C-myc有较强的抑制作用。     

原位杂交法检测树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras、C-myc基因mRNA表达的影响

目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤细胞癌基因N-ras、C-myc mRNA水平的影响.方法:应用地高辛标记探针原位杂交技术,检测树舌多糖GF对HepA瘤细胞中癌基因N-ras、C-myc mRNA丰度的影响.结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中mRNA表达量均显著低于模型组(P＜0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异.结论:树舌多糖GF可通过调节N-ras、C-myc基因mRNA的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖.     

Wnt5a基因在急性髓细胞白血病病例中的表达分析

目的检测Wnt5a基因在良性血液病、急性髓细胞白血病及缓解病例骨髓中的表达情况,探讨Wnt5a在急性髓细胞白血病发生中的作用。方法RT-PCR方法检测18例良性血液病病例,30例急性髓细胞白血病初诊病例和25例缓解病例骨髓中Wnt5amRNA的表达情况;免疫细胞化学法检测对应骨髓中Wnt5a蛋白的表达情况。结果Wnt5a mRNA在良性血液病、急性髓细胞白血病病例和缓解病例中的阳性表达率分别为88.9%(16/18)、30%(9/30)和68.0%(17/25),半定量值分别为(0.3826±0.1908)、(0.1041±0.0590)和(0.2606±0.1466)。统计学分析Wnt5a mRNA在初诊病例中的表达明显低于缓解病例(P0.05),缓解病例与良性血液病之间无明显差异(P0.05);Wnt5a蛋白在良性血液病中阳性表达,在急性髓细胞白血病初诊病例中低表达或表达缺失,在缓解病例中表达恢复。结论Wnt5a基因在急性髓细胞白血病初诊病例中表达缺失而在治疗缓解病例中表达恢复,提示急性髓系白血病的发生可能与Wnt5a基因表达缺失或下调有关,Wnt5a可以作为一个髓系白血病诊断、指导治疗和疗效评价的指标。     

Ras基因和c-myc基因在结节性甲状腺肿合并甲状腺癌中的表达

目的:探讨正常甲状腺组织和结节性甲状腺肿合并甲状腺癌中Ras基因和c-myc基因的表达。方法:采用LSAB法作免疫组化染色检测了20例结节性甲状腺肿旁正常甲状腺组织和40例结节性甲状腺肿、40例结节性甲状腺肿合并甲状腺癌中Ras和c-myc基因的表达。结果:Ras和c-myc基因在甲状腺正常组织中均呈阴性。在40例结节性甲状腺肿合并甲状腺癌中Ras和c-myc基因的阳性表达率分别为52.5%和77.5%。结节性甲状腺肿合并甲状腺癌中Ras和c-myc基因的表达呈明显正相关(P<0.05)。结论:Ras和c-myc基因在结节性甲状腺肿合并甲状腺癌的发生、发展中起到重要作用。     

鼻咽癌中P16,C-myc和PCNA的表达

目的：探讨鼻咽癌组织中P16，基因myc(C-myc)和增殖细胞核抗原（PCNA）表达异常的意义。方法：采用免疫组织化学（S－P）方法。结果：47例鼻咽癌组织中P16性13例（13／47）28．5％，C－myc阳性38例（38／47）81％，PCA性47例（47／47）100％。结论：P16的低表达，C－myc和PCNA的过表达在鼻咽癌细胞增殖和癌变过程中起重要作用。     

抑制C—myc基因表达对移植血管狭窄的影响

目的观察放射菌素D对移植血管中C-myc基因表达及内膜增殖的影响。方法建立大鼠自体静脉移植模型，实验组分别于术前、术后应用不同剂量放射菌素D（0.015，0.15mg/kg），对照组仅做血管移植。分别于术后2h及1周切取移植静脉，应用原位杂交方法检测C-mycmRNA表达，应用计算机图像分析仪测量内膜厚度。结果高剂量组C-mycmRNA表达较对照组明显减少（6.5%，12.5%；P<0.01），移植血管内膜增殖受到明显抑制（18.7，28.5μm；P<0.01）。结论大剂量应用放射菌素D可以抑制C-mycmRNA表达，从而抑制移植血管内膜增殖。早期应答基因C-myc表达在诱导平滑肌细胞增殖中起着重要作用。     

上皮性卵巢癌中ZEB2 和C-myc蛋白的表达及临床意义

目的探讨E盒锌指结合蛋白2（ZEB2）和原癌基因C-myc（C-myc）在上皮性卵巢癌组织（EOC）中的表达情况,并分析其表
达与EOC病理特征和预后的相关性。方法用免疫组化SP法检测191例EOC和13例正常卵巢组织中ZEB2和C-myc蛋白的表
达,并分析ZEB2及C-myc蛋白的表达与肿瘤临床病理特征的相关性。结果EOC和正常卵巢组织中ZEB2蛋白的阳性表达率
分别为49.2%（94/191）和30.8%（4/13）,差异有统计学意义（P=0.007）;C-myc 蛋白的阳性表达率分别为53.9%（103/191）和
15.4%（2/13）,差异有统计学意义（P=0.001）。ZEB2蛋白的表达与EOC病理分型（P=0.003）、FIGO 分期（P=0.028）、T分期（P=
0.002）、淋巴结转移（P=0.04）有关。C-myc 蛋白的表达与EOC中FIGO 分期（P=0.035）、病理学分级（P=0.039）、T 分期（P=
0.002）有关。EOC组织中ZEB2与C-myc蛋白的表达有关联（R=0.358, P<0.001）。同时ZEB2及C-myc的共同表达在T分期和
FIGO分期有关（P<0.001,P<0.008）。结论ZEB2 和C-myc有助于促进EOC的发展、浸润和转移,两者联合检测有望成为EOC
的早期诊断指标。
     

口腔粘膜鳞癌中C-myc和nm23-H1蛋白的表达研究

目的　研究口腔粘膜鳞癌组织中C myc和nm2 3 H1蛋白的表达及意义。方法　采用免疫组化方法检测79例口腔粘膜鳞癌组织中C myc和nm2 3 H1蛋白的表达状况。结果　口腔粘膜鳞癌组织中C myc蛋白的强阳性表达率为 6 3.3% (5 0 / 79) ,nm2 3 H1蛋白的强阳性表达率为 35 .4 % (2 8/ 79) (P <0 .0 5 )。颈淋巴结有转移者较无转移者C myc蛋白的强阳性表达率高 ,而nm2 3 H1蛋白的强阳性表达率低。结论　C myc和nm2 3 H1蛋白的表达状况与口腔粘膜鳞癌颈淋巴结转移有关。     

Survivin与C—myc在非霍奇金淋巴瘤中的表达及临床意义

目的：研究凋亡抑制蛋白Survivin和C-myc癌基因在非霍奇金淋巴瘤（nonHodgkin’s lymphoma,NHL）组织中的表达水平及相互关系,评价Survivin和C—myc癌基因作为NHL患者预后指标的价值。方法：采用免疫组织化学PV一9000两步法检测Survivin蛋白和Cmyc蛋白在62例NHL肿瘤组织和18例淋巴结反应性增生（reactive hyperplasia of lymph node,RH）组织中的表达水平。结果：Survivin、C—myc蛋白在NHL组织中阳性表达率分别为72．58％和77．42％,在淋巴结反应性增生组织中阳性表达率分别为11．11％和22．22％,NHL组织中Survivin、Cmyc表达高于淋巴结反应性增生组织（P〈0．05）;Survivin、C—myc的表达水平均与NHL的恶性程度、临床分期及近期疗效有关（P〈0．05）,与患者的年龄、全身症状、PS评分、结外病变数目无相关关系（P〉0．05）;Survivin、C—myc在NHL组织中阳性表达与NHL的恶性程度和临床分期呈正相关（r=0．333,r=0．462和r=0．530,r=0．447,P〈0．05）,而与近期疗效呈负相关（r=-0．273和r=-0．296,P〈0．05）;且NHI．组织中Survivin与C—myc表达呈正相关（r=0．313,P〈0．05）。结论：Survivin与Cmyc的异常表达与NHL患者恶性程度、临床分期、治疗效果密切相关,可作为新的评价NHL患者预后的生物学参考指标。     

PTTG基因表达在原发性肝细胞癌发生中的作用及其机制的初步研究

目的研究PTTG基因表达在原发性肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用.方法应用原位杂交(DNA-RNA)技术与免疫组化SP法分别检测61例原发性肝细胞癌及癌旁肝组织中PTTG mRNA和PTTG蛋白及c-myc mRNA和c-myc蛋白的表达.结果在原发性肝细胞癌(HCC)中,PTTG mRNA和PTTG蛋白阳性细胞呈弥漫性、小巢状或散在分布,在胞浆内呈全浆型、膜下型表达.PTTG mRNA和PTTG蛋白在HCC中表达率分别为72.1%(44/61)和78.7%(48/61),在癌旁肝组织中分别为93.4%(57/61)和91.8%(56/61),在HCC中表达明显低于癌旁组织(P＜0.005,P＜0.05).相关性检验显示癌及癌旁PTTG基因表达与c-myc基因表达呈正相关(P＜0.005).结论PTTG基因过度表达参与了肝细胞癌发生发展,过度表达的PTTG可能通过激活癌基因c-myc来参与肝细胞恶性转化和肝细胞癌的发生发展过程.     

刺参黏多糖对Hela细胞增殖分化的影响

目的 了解刺参酸性黏多糖(SJAMP)对Hela细胞增殖、分化的影响及其机制.方法 体外培养Hela细胞,通过MTT法观察SJAMP对Hela细胞增殖的作用,电镜观察SJAMP作用下Hela细胞超微结构的变化,RT-PCR法检测Hela细胞CyclinD1、CDK4、C-myc的mRNA的表达.结果 SJAMP能够有效抑制Hela细胞的增殖,并且具有剂量和时间依赖关系.透射电镜观察显示,SJAMP可诱导细胞向成熟细胞分化;SJAMP可以明显降低CyclinD1、CDK4、C-myc的mRNA表达.结论 SJAMP可能是通过抑制细胞周期因子CyclinD1和CDK4的表达而抑制细胞增殖,通过抑制癌基因C-myc的表达来诱导Hela细胞分化.