隐丹参酮对小鼠下肢缺血的保护作用研究

目的:探讨丹参脂溶性有效成分隐丹参酮对小鼠下肢缺血的影响。方法:选取ICR雌性小鼠,随机分为空白组、模型组、假手术组、溶剂组(PBS+4%Tween-80)、前列地尔0.01 mg/kg组、隐丹参酮10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg组。采用左下肢股动脉结扎及分支剔除术构建小鼠下肢缺血模型,其中假手术组仅进行下肢股动脉分离术。通过体式显微镜记录各组小鼠下肢缺血症状并对其进行评分,采用HE染色观察隐丹参酮对下肢缺血模型小鼠下肢肌肉病理组织以及炎症反应的影响,采用免疫组织化学的方法考察隐丹参酮对下肢缺血模型小鼠血管生成及微血管密度(microvascular density,MVD)的影响。结果:20、40 mg/kg隐丹参酮组小鼠左下肢缺血症状评分较模型组显著降低,小鼠左下肢缺血肌肉组织MVD显著增加;40 mg/kg隐丹参酮组小鼠左下肢缺血肌肉组织异常病理反应有所改善;可显著增加小鼠左下肢腓肠肌中CD34、α-SMA的表达。结论:丹参中脂溶性有效成分隐丹参酮对小鼠下肢缺血具有保护和促进血管修复的作用。     

保肺定喘汤对肺心病大鼠病理形态学影响的实验研究

目的:观察保肺定喘汤对肺心病大鼠肺血管重构的影响。方法:60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、保肺定喘汤高、中、低剂量组和硝苯地平组(n=10)。采用野百合碱(60mg/kg)腹腔注射建立肺心病大鼠模型,造模后连续用药28天后处死大鼠,称取RV和LV S重量,计算右心肥厚指数(RV/LV S),右下肺行HE染色、Masson染色及免疫组织化学染色观察肺小动脉病理改变。结果:(1)模型组大鼠右心肥厚指数比正常对照组明显增加(P<0.01),各治疗组右心肥厚指数与模型组比较均明显降低(P<0.01～0.05)。(2)与正常对照组比较,模型组肺小动脉管壁变厚、管腔变小,管壁内胶原纤维及α-SMA表达明显增加(P均<0.01),各治疗组与模型组比较肺小动脉管壁变薄,管腔变大,管壁内胶原纤维及α-SMA表达明显减少(P<0.01～0.05)。结论:保肺定喘汤可以明显减轻肺血管重构,其机制可能与调节胶原纤维和α-SMA在肺小动脉的表达有关。     

姜黄素抗血吸虫病肝纤维化及其机制的实验研究

目的 探讨姜黄素抗血吸虫病肝纤维化的作用及可能机制.方法 小鼠随机分为4组:对照组、感染模型组、吡喹酮治疗组和姜黄素治疗组,除对照组外,各组建立血吸虫病肝纤维化小鼠动物模型,用实时荧光定量PCR反应观察小鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA的表达.应用HE染色,免疫组化法及多媒体病理图文定量分析,观察各组小鼠肝脏的病理改变及转化牛长因子β1(TGF-β1),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的变化.结果 姜黄素可显著减轻肝脏纤维组织增生.感染模型组及吡喹酮治疗组PPARγmRNA表达较对照组及姜黄素治疗组显著减弱(P<0.05);姜黄素治疗组TGF-β1,α-SMA及Ⅰ、Ⅲ型胶原水平均明显低于吡喹酮治疗组和感染模型组(P<0.05).结论 姜黄素有明显的抗日本血吸虫病肝纤维化作用,其抗纤维化机制与其激活PPARγ的表达、抑制肝星状细胞(HSC)表达α-SMA及分泌TGF-β1,并减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成有密切关系.     

丹酚酸B通过调控自噬改善UUO小鼠肾纤维化

目的:探讨丹酚酸B调控自噬改善肾纤维化的作用机制。方法:60只小鼠随机分为6组:假手术组、模型组、醋酸泼尼松(20 mg/kg)阳性对照组及丹酚酸B低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)组,除假手术组外各组均采用单侧输尿管梗阻(UUO)的方法建立小鼠肾纤维化模型。自造模当天各组给予相应药物,假手术组和模型组给予等体积生理盐水灌胃。术后第7天处死小鼠取肾取血,测定血清肌酐和尿素氮,HE染色和Masson染色观察肾脏组织病理变化及纤维化程度,免疫组化法观察肾间质Vimentin的表达,蛋白免疫印记法检测α-SMA及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin1、mTOR的表达。结果:与模型比较,丹酚酸B可降低UUO小鼠血肌酐和尿素氮水平,HE染色和Masson染色结果显示肾组织病理损伤减轻,胶原纤维沉积减少。免疫组织化学法和Western Blot结果表明丹酚酸B可使UUO小鼠肾组织中纤维化标记蛋白Vimentin、α-SMA表达下调,而自噬标记蛋白LC3-Ⅱ、Beclin1表达上调,且mTOR表达下调。结论:丹酚酸B能改善UUO模型小鼠肾纤维化,其作用机制可能与激活肾组织自噬有关。     

肾衰方及其拆方对UUO模型大鼠周细胞中PDGF/PDGFR-β信号通路表达的影响

目的通过观察中药复方肾衰方及其拆方对周细胞中PDGF/PDGFR-β信号通路的表达影响,阐述肾衰方抗肾间质纤维化的机理。方法将108只SD雌性大鼠随机分为:假手术组、模型组(UUO模型)、肾衰方组、袪邪方组、补虚方组、贝那普利组,每组18只,各组大鼠分别于术后第7、14、21天给药2h后各处死6只。检测大鼠肾功能;取肾脏组织行HE、Masson染色,并测定大鼠术侧肾脏肾小管损伤程度评分及肾小管间质纤维化指数;Western blot、RT-PCR法测定肾脏组织中α-SMA、PDGF、PDGFR-β的表达情况。结果同时期模型组与假手术组相比,模型组大鼠血尿素氮、血清肌酐均比模型组升高(P0.05);同时期各治疗组与模型组相比,各治疗组大鼠血尿素氮、血清肌酐均较模型组下降,且以肾衰方组下降更明显(P0.05)。通过HE、Masson染色,从不同时间段观察各组大鼠肾脏病理组织的变化,发现术后7d多以炎症和坏死病变为主,术后14d多以纤维化和炎症病变为主,21d纤维化程度更加明显,模型组病理表现最为明显。经Western blot法测定发现,各治疗组的α-SMA、PDGF、PDGFR-β蛋白阳性表达均低于同时期模型组,以肾衰方组降低更明显(P均0.05);RT-PCR法检测结果显示,模型组及各治疗组大鼠α-SMA、PDGF、PDGFR-βmRNA表达量均高于假手术组(P均0.05),各治疗组α-SMA、PDGF、PDGFR-βmRNA表达较同时期的模型组降低明显(P均0.05),以肾衰方组降低更明显。结论中药复方肾衰方可通过调节周细胞上PDGF/PDGFR-β信号通路的传导,同时下调α-SMA蛋白的表达,达到抗肾间质纤维化的作用。     

补肾健脾活血解毒煎剂对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1及α-SMA表达的影响

目的:研究补肾健脾活血解毒煎剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨其抗肾间质纤维化的作用机制。方法:建立大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型,50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、代文组、补肾健脾活血解毒煎剂低、中剂量组,于造模4周后腹主动脉采血检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),收集24 h尿液检测N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)、β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG),取梗阻侧肾组织,HE、Mason染色观察肾小管间质病变,免疫组织化学染色观察α-SMA、TGF-β1在肾间质的阳性染色表达,并进行半定量分析。结果:与假手术组比较,模型组大鼠Scr、BUN、尿NAG、β2-MG水平以及α-SMA、TGF-β1阳性表达显著升高(P0.01);与模型组比较,补肾健脾活血解毒煎剂低、中剂量组大鼠Scr、BUN水平降低,尿NAG、β2-MG排泄减少(P0.05或P0.01),与代文组相当;补肾健脾活血解毒煎剂低、中剂量组和代文组α-SMA、TGF-β1阳性表达均显著下调(P0.01)。结论:补肾健脾活血解毒煎剂可能通过改善肾小球、肾小管功能,抑制α-SMA、TGF-β1的表达,从而抑制肾小管上皮细胞间充质转分化,达到改善肾间质纤维化的作用。     

芪参养肝方抗肝纤维化的实验研究

目的观察芪参养肝方对刀豆蛋白A(Con A)肝纤维化小鼠肝脏的肝星状细胞(HSC)活化、胶原合成及细胞因子α-SMA、TGF-β1分泌的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法将40只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、芪参养肝方组,造模期间芪参养肝方组给予芪参养肝方药液灌胃。检测3组小鼠肝功能、肝组织中羟脯氨酸含量和α-SMA、Col I、ColⅢ、TGF-β1mRNA表达以及α-SMA、Col I、TGF-β1蛋白表达情况。结果模型组血清ALT、AST水平及肝组织中羟脯氨酸含量均明显高于正常组(P均<0.05),而芪参养肝方组各指标水平均明显低于模型组(P均<0.05)。HE、天狼猩红染色显示,芪参养肝方组肝小叶破坏及胶原纤维增生较模型组明显减轻,胶原沉积明显好转。模型组肝组织中α-SMA、TGF-β1、Col I、ColⅢmRNA表达量及α-SMA、TGF-β1、ColⅠ蛋白表达量均明显高于正常组(P均<0.05),而芪参养肝方组各指标水平均明显低于模型组(P均<0.05)。结论芪参养肝方能抑制Con A肝纤维化小鼠α-SMA、TGF-β1分泌及HSC活化,促进活化的HSC凋亡;并能下调ColⅠ、ColⅢmRNA表达,抑制胶原纤维增生;其有保肝降酶、抗肝纤维化作用。     

肾络通对肾间质纤维化实验大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

目的观察肾络通对肾间质纤维化实验大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响。方法选用健康、雌性SD大鼠50只,用单侧输尿管结扎方法复制大鼠肾间质纤维化模型,将其随机分为缬沙坦组[予缬沙坦10 mg/(kg.d)经口灌服]、肾络通组[肾络通26 g/(kg.d)经口灌服]、肾络通加缬沙坦组[予缬沙坦10 mg/(kg.d)和肾络通26 g/(kg.d)经口灌服]与模型组[予等量0.9%氯化钠注射液经口灌服],并设假手术组,每组10只大鼠。行HE、Masson染色观察实验大鼠梗阻侧肾脏组织形态学改变,并用免疫组化及原为杂交方法检测实验大鼠梗阻侧肾脏α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及角蛋白(CK)在蛋白或基因水平的表达。结果模型组及各治疗组与假手术组比较均呈现程度不同的病理损害(P<0.05),α-SMA的表达也增加(P<0.05),CK的表达明显减少(P<0.05)。各治疗组与模型组比较,病理损害减轻(P<0.05),α-SMA表达明显减少(P<0.05),CK表达明显增强(P<0.05),治疗各组间比较,肾络通加缬沙坦组优于缬沙坦组(P<0.05),其他各组间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论输尿管梗阻后肾组织呈现程度不同的病理损害,这可能与α-SMA蛋白及其mRNA的表达增加有关。肾络通及缬沙坦对其有一定的抑制作用,且肾络通与缬沙坦联合用药,其作用比单一用药更强。     

肾络通对肾间质纤维化模型小鼠肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的探讨肾络通治疗肾间质纤维化的可能作用机制。方法纯系C57BL/6J野生小鼠(WT)及肾上腺髓质素基因敲除杂合子小鼠(AMKO)随机分为假手术组、模型组、依普利酮组及肾络通组,每组5只。除假手术组外,其余各组结扎左侧输尿管复制肾间质纤维化小鼠模型。依普利酮组给予依普利酮100 mg/(kg·d)加入饲料喂养,肾络通组给予肾络通溶液26 g/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组给予蒸馏水0.3 ml灌胃,共10天。HE、Masson染色观察各组小鼠梗阻侧肾组织病理改变;免疫组化法及Western Blot法检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肾上腺髓质素(ADM)的表达;检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平。结果 WT及AMKO小鼠各组血Scr和BUN含量比较差异均无统计学意义(P0.05)。肾脏病理结果显示,模型组肾小管扩张、上皮细胞坏死,肾间质大量炎性细胞浸润,胶原组织沉积显著增多,依普利酮组和肾络通组可明显抑制间质炎性细胞浸润及胶原沉积。与本鼠种假手术组比较,WT模型组和AMKO模型组α-SMA、TGF-β1表达明显升高,而ADM表达明显降低(P0.01)。与本鼠种模型组比较,依普利酮组和肾络通组α-SMA、TGF-β1表达明显降低,而ADM表达明显升高(P0.05或P0.01)。两鼠种之间比较,AMKO假手术组、模型组、依普利酮组、肾络通组ADM表达均低于相应的WT小鼠组(P0.05或P0.01)。结论肾络通可能通过上调ADM表达,降低α-SMA、TGF-β1表达,从而抑制肾小管上皮细胞表型转化,减轻了肾脏病理损伤。     

软肾散对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β_1及α-SMA的影响

目的:观察软肾散对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾间质纤维化(RIF)的影响及可能的作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依那普利治疗组和软肾散治疗组,后3组建立UUO大鼠模型。治疗结束后测定大鼠肾功能、行HE染色观察肾组织病理变化,计算肾小管间质病理积分,用免疫组化方法测定肾TGF-β1、α-SMA的表达情况。结果:两治疗组大鼠BUN、SCr低于模型组(P<0.01),两治疗组组间差异无统计学意义(P>0.05);肾间质病理积分显示两治疗组显著低于模型组(P<0.01),两治疗组组间差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化结果表明,两治疗组TGF-β1和α-SMA的表达均低于模型组(P<0.01),两治疗组组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:软肾散能一定程度上减轻UUO大鼠RIF程度,其作用机制可能与下调TGF-β1和α-SMA表达有关。     

扁蒴藤素对肺纤维化模型小鼠肺组织形态及转化生长因子-β1、α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的观察扁蒴藤素对肺纤维化模型小鼠肺组织形态及转化生长因子(TGF)-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨其作用机制。方法采用气管内注射博来霉素溶液制备小鼠肺纤维化模型。将32只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、扁蒴藤素组及吡非尼酮组,每组8只。正常组和模型组给予等量生理盐水腹腔注射,扁蒴藤素组给予1 mg/kg扁蒴藤素溶液腹腔注射,吡非尼酮组给予50 mg/kg吡非尼酮溶液腹腔注射。给药体积10 mL/kg,每日1次,连续28 d。取肺组织行HE及Masson染色,评估小鼠肺组织病理学变化及胶原沉积;免疫组化和Western bot检测小鼠肺组织TGF-β1及α-SMA蛋白的表达。结果HE及Masson染色显示,扁蒴藤素组小鼠肺泡炎及肺纤维化评分低于模型组(P<0.05,P<0.01);免疫组化及Western blot结果显示,与正常组比较,模型组小鼠TGF-β1及α-SMA蛋白表达明显升高;与模型组比较,扁蒴藤素组和吡非尼酮组小鼠肺组织TGF-β1及α-SMA蛋白表达显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论扁蒴藤素可改善模型小鼠肺纤维化,其机制可能与抑制TGF-β1及α-SMA蛋白表达有关。     

肾病Ⅰ号方对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的影响

目的:观察肾病Ⅰ号方对肾纤维化大鼠α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、UUO模型组、洛丁新组和肾病Ⅰ号方组,每组6只。采用单侧输尿管结扎的方法制备大鼠肾纤维化模型。假手术组和UUO模型组每日予2 m L生理盐水灌胃,洛丁新组按洛丁新片1.67 mg·kg~(-1)·d~(-1)给药,肾病Ⅰ号方组按18.75 g·kg~(-1)·d~(-1)给药。灌胃14 d后处死大鼠,采集血清检测尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血肌酐(serum creatinine,SCr);取肾组织行HE染色评价肾小管间质纤维化损伤程度;采用免疫组织化学染色方法检测α-SMA、COL-Ⅳ、TGF-β1在肾组织中的表达情况;免疫印迹试验(Western blot)检测α-SMA相对蛋白表达量。结果:与模型组比较,洛丁新组、肾病Ⅰ号方组大鼠的SCr,BUN明显下降(P<0.05),肾组织α-SMA、COL-Ⅳ、TGF-β1表达量下降显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:肾病Ⅰ号方对肾纤维化具有一定改善作用,其作用机制可能是通过下调α-SMA、COL-Ⅳ、TGF-β1的表达,从而达到肾脏保护的作用。     

药对桑白皮、百部提取物对小鼠肺纤维化的干预作用

目的:探讨药对桑白皮、百部提取物对小鼠肺纤维化的干预作用。方法:SPF级昆明小鼠分为9组:假手术组、模型组、桑白皮水提物组、百部水提物组、桑白皮+百部水提物组、桑白皮醇提物组、百部醇提物组、桑白皮+百部醇提物组、地塞米松阳性对照组,每组10只。假手术组气管内滴注生理盐水,其余各组气管内滴注博莱霉素造模。术后2 d给药,28 d后取材分别进行HE染色、Mssson染色观察肺组织病理学变化和胶原表达,免疫组化法和免疫蛋白印记法检测TGF-β_1、α-SMA、E-Cadherin蛋白表达量。结果:与模型组比较,HE染色和Masson染色表明,药对桑白皮、百部的水提取物和醇提物均有减轻小鼠肺纤维化炎症和胶原增殖作用;免疫组化法和免疫蛋白印迹法发现桑白皮+百部水提物组、桑白皮醇提物组、百部醇提物组、桑白皮+百部醇提物组TGF-β_1、α-SMA、E-Cadherin蛋白表达量较模型组显著下调。结论:药对桑白皮、百部对肺纤维化有明显干预作用,其机制可能与降低TGF-β_1、α-SMA、E-Cadherin蛋白表达有关。     

参附芎泽方对压力超负荷大鼠心肌TGF-β1、CTGF表达的影响

目的探讨参附芎泽方对压力超负荷大鼠心肌纤维化的干预作用。方法 SD大鼠随机分成假手术组、模型组、方药组,每组10只。采用腹主动脉缩窄术建立压力超负荷大鼠心肌纤维化模型。假手术组和模型组给予纯净水,方药组给予参附芎泽方(含生药量6.4g/kg)相应的等体积药液。以20ml/kg的容积灌胃,一日1次,连续8周。ELISA法检测血清TNF-α、AngⅡ含量;Western blot检测转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)的表达;HE染色观察心肌组织的病理变化。结果与假手术组比较,模型组大鼠血清TNF-α、AngⅡ含量增高,心肌组织中TGF-β1与CTGF表达增多,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,参附芎泽方药组血清TNF-α、AngⅡ含量降低,心肌组织TGF-β1与CTGF表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。HE染色模型组心肌纤维可见明显断裂、部分溶解,排列紊乱,大量结缔组织增生。而方药组心肌纤维排列较为整齐,心肌细胞轻度肿大。结论参附芎泽方可通过降低血清TNF-α、AngⅡ含量,抑制心肌组织TGF-β1和CTGF的表达等途径干预心肌纤维化进程。     

丹参酮ⅡA对病毒性心肌炎小鼠血清炎性因子水平的影响

目的观察丹参酮ⅡA对病毒性心肌炎小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平的影响。方法 80只雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照组(对照组)20例、病毒性心肌炎模型组(模型组)30例、丹参酮ⅡA治疗组(治疗组)30例。模型组、治疗组腹腔接种柯萨奇病毒B3(CVB3)建立病毒性心肌炎模型,对照组腹腔注射不含病毒的Eagle’s液。治疗组于病毒接种0.5 h后腹腔注射丹参酮ⅡA注射液,连续14 d。观察记录小鼠一般情况、记录死亡数,计算小鼠生存率;取血测定小鼠血清IL-6、TNF-α水平;取心脏,计算心脏指数,HE染色,计算病理评分。结果与对照组小鼠比较,模型组小鼠血清IL-6和TNF-α水平、心脏指数、心脏病理评分均升高(P0.05);与模型组比较,治疗组小鼠心脏指数、TNF-α、IL-6水平、心脏病理评分均降低(P0.05)。结论丹参酮ⅡA可通过降低TNF-α、IL-6发挥减轻心肌损伤、治疗病毒性心肌炎作用。     

和络泄浊方对肾间质纤维化大鼠治疗作用机理探讨

目的:通过对肾间质纤维化大鼠肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)基因表达的研究,探讨和络泄浊方对肾间质纤维化大鼠的治疗作用机理。方法:采用单侧输尿管结扎法(UUO)进行肾间质纤维化模型制备,48只W ister大鼠随机分为假手术组、模型组、中药灌胃组。术后第3、10、20、30天每组各处死4只大鼠。HE染色法观察肾脏病理改变,评定各组大鼠肾小管间质损害程度,免疫组化法检测肾脏α-SMA、Ⅳ型胶原蛋白表达,采用RT—PCR法检测肾脏MMP-9、TIMP-1mRNA的表达。结果:α-SMA、Ⅳ型胶原蛋白表达模型组明显增强(P<0.01),中药灌胃组各时间点的表达均少于模型组,假手术组表达无明显异常。模型组肾小管间质损伤指数及TIMP-1mRNA表达明显高于假手术组(P<0.01),并随时间延长表达增强,中药灌胃组肾小管间质损伤指数及TIMP-1mRNA表达亦高于假手术组(P<0.01),但较模型组表达弱(P<0.01)。MMP-9表达在模型组术后明显升高,第10天达到高峰,中药灌胃组在第20、30天时间点高于模型组(P<0.01)。结论:和络泄浊方通过调节α-SMA、Ⅳ型胶原及MMP-9/TIMP-1的基因表达,影响细胞外基质的降解过程,从而减轻肾间质纤维化。     

清化固肾排毒颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β1和α-SMA表达的影响

目的:观察清化固肾排毒颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨其抗肾纤维化的作用机制。方法:72只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、洛丁新组及清化固肾排毒颗粒组,除假手术组外,其余各组大鼠均采用单侧输尿管结扎手术方法 (UUO)建立肾纤维化梗阻大鼠模型,术后各组分别予相应药物或生理盐水灌胃,每天1次。第7、14、21天,各组大鼠禁食不禁水1天,处死,取肾组织做病理检测,HE染色观察其病理变化,免疫组织化学染色检测TGF-β1和α-SMA在肾间质的阳性染色表达。结果:与假手术组比较,干预第7、14、21天,模型组、洛丁新组、清化固肾排毒颗粒组大鼠肾小管间质损伤指数显著增加,肾组织TGF-β1和α-SMA的表达均明显升高,差异均有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,干预第7、14、21天,洛丁新组和清化固肾排毒颗粒组大鼠肾小管间质损伤指数明显减轻,肾组织TGF-β1和α-SMA的表达均明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:清化固肾排毒颗粒可能通过下调TGF-β1和α-SMA的表达来抑制上皮细胞间充质转化和细胞外基质的过度积聚,实现改善肾间质纤维化的作用。     

Smad3基因敲除对5/6肾切除慢性肾脏纤维化小鼠模型的影响

目的 观察Smad3基因敲除对5/6肾切除慢性肾纤维化小鼠模型的影响。方法 清洁级WT-C57及Smad3-KO(以下简写S3-KO)小鼠各24只，分为假手术野生组(SWT)、假手术Smad3-KO组(SS3-KO)和模型野生组(MWT)、模型Smad3-KO组(MS3-KO)4组，模型组以platt法建立慢性肾脏纤维化模型，造模后4周，检测各组小鼠血中肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24h尿蛋白(U-Pro/24h)含量、病理形态学变化；免疫荧光染色法观察肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),I型胶原蛋白(CollageI),纤维连接蛋白(FN)的表达面积变化；蛋白免疫印迹法(WB)和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测各组小鼠肾组织TGF-β1、p-Smad3、α-SMA、CollageI、FN蛋白及mRNA的表达水平；免疫组化法观察肾组织内中性粒细胞阳性表达个数的变化。结果 与假手术组比较，MWT组P-smad3蛋白，Smad3mRNA明显增高(P<0.01),MS3-KO组虽有增高，但无显著性差异(P>0.05)。HE染色SWT,SS3-KO组肾小球形态基...     

补肾益精法中药复方对硬皮病小鼠皮肤纤维化的影响

目的:研究补肾益精法中药复方对硬皮病小鼠皮肤纤维化表型的影响。方法:使用博来霉素诱导建立硬皮病小鼠模型,分别采用补肾益精法中药复方(中药复方组)、生理盐水(模型组)处理硬皮病模型小鼠,共3周,并设正常对照组。HE染色观察皮肤病理改变;使用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,测定各组小鼠I型胶原α2(COLⅠα2)基因表达情况。结果:成功建立硬皮病小鼠模型,皮肤病理HE染色显示,中药复方组小鼠皮肤纤维化有不同程度改善。模型组小鼠COLⅠα2基因表达较正常对照组高(P<0.01);经补肾益精法处理后,中药复方组小鼠COLⅠα2基因表达减少,与正常对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:补肾益精法中药复方可改善硬皮病模型小鼠皮肤纤维化程度。     

芩味胶囊防治肺纤维化的作用及其机制探讨

目的:探讨芩味胶囊对博莱霉素致小鼠肺纤维化的作用。方法:雄性小鼠假手术组经气管注射生理盐水,其他各组经气管注射博莱霉素以制备肺纤维化模型,术后第二天将注射博莱霉素注射的小鼠分为模型组、芩味胶囊2.0,4.0原生药g/kg组,醋酸泼尼松10 mg/kg。每天灌胃给药1次,连续4周。假手术组和模型组给予等体积0.5%CMC-Na溶液,末次给药后24 h,取肺脏称湿重并计算其脏器指数,取右肺测定其羟脯氨酸,左肺用于HE、Masson染色及免疫组化法测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和TGF-β1的表达。结果:模型组肺组织炎细胞浸润明显增加,羟脯氨酸含量明显升高,胶原堆积及α-SMA表达明显增加,与假手术组比较差异均有统计学意义。芩味胶囊2.0,4.0原生药g/kg组均可降低Hyp羟脯氨酸含量,减少胶原堆积及α-SMA和TGF-β1的表达,减少炎细胞浸润。结论:芩味胶囊对博莱霉素所致的小鼠肺纤维化具有较好的防治作用,其作用可能与其抑制TGF-β1表达、减少成纤维细胞活化有关。