HPLC法测定水晶兰中水晶兰苷的含量

建立HPLC法测定水晶兰中水晶兰苷的含量。采用Kromalsil C18(4.6mm×150 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(85:15);检测波长为231nm;流速为1.0 mL·min-1;柱温为25℃。该测定方法具有良好的线性关系(r=0.9997);平均回收率为98.7%,能准确测定水晶兰药材中水晶兰苷的含量。     

HPLC测定巴戟天中的水晶兰苷

目的 以水晶兰苷为指标,评价商品巴戟天的质量.方法 采用HPLC法,色谱柱为Kromalsil C18柱(150 mm×4.6mm,5 μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(5:95→8.8:71.2,15 min),流速为1 ml·min-1;检测波长为231 nm;柱温为25℃.结果 商品巴戟天中水晶兰苷的含量差异较大,仅广东省德庆县高良镇巴戟天规范化种植基地的4.5年生样品中水晶兰苷的含量较为稳定.结论 商品巴戟天的质量参差不齐,应从源头上控制巴戟天的质量.     

不同炮制去心法对巴戟天水晶兰苷含量的影响

摘 要 目的： 比较不同炮制去心方法炮制的巴戟天中水晶兰苷的含量。方法: 采用HPLC法,色谱柱为Kromalsil C₁₈（200 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液（90∶10）,流速为1.0 ml·min^-1,柱温为30℃,检测波长232 nm,进样量为5 μl。结果:巴戟天各去心炮制品中水晶兰苷含量以润法最高,其次为煮法,泡后蒸法,泡法,清蒸法,最低为盐蒸法。结论: 润法去心对巴戟天中水晶兰苷的含量影响最小,其炮制品中水晶兰苷含量最高。     

白芍总苷对体外培养的成骨细胞和破骨细胞的影响

目的研究白芍总苷(TGP)对成骨及破骨细胞的影响。方法分别取1d龄SD大鼠颅骨及5d龄SD大鼠四肢股骨、胫骨分离培养成骨细胞和破骨细胞。实验分为正常对照组及TGP50,5,0.5,0.05和0.005g.L-1组,采用MTT法检测成骨细胞、破骨细胞活力,金氏法测定成骨细胞培养上清中碱性磷酸酶(AKP)含量。结果 TGP50g.L-1对成骨细胞的存活能力有明显的抑制作用,但对AKP活性影响不明显;TGP5和0.5g.L-1对成骨细胞的存活能力有明显增强作用,使AKP活性明显增强;TGP0.05g.L-1对成骨细胞的存活能力影响不明显,但能明显增强AKP活性;TGP5和0.5g.L-1对破骨细胞存活均有明显的抑制作用。结论白芍总苷可促进成骨细胞存活、增强成骨细胞的AKP活性,过高浓度时则可抑制成骨细胞存活,但对其活性影响不明显;TGP还具有抑制破骨细胞存活的作用。     

淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响

目的研究淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响,评价淫羊藿苷对骨质疏松的预防及治疗作用。方法采用1,25-(OH)2D3诱导兔骨髓单核细胞形成破骨细胞样细胞以及原代分离的乳兔成熟破骨细胞与骨片共培养的方法,考察淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响。结果浓度为100、50μmol.L-1的淫羊藿苷明显抑制1,25-(OH)2D3诱导兔骨髓单核细胞形成破骨细胞样细胞的数目,当其浓度为100、50、10μmol.L-1时,明显抑制破骨细胞的骨吸收功能,具体表现在吸收陷窝数目及表面积均明显减少。结论淫羊藿苷不仅可以明显抑制破骨细胞的分化,同时具有抑制破骨细胞的骨吸收功能的作用,提示淫羊藿苷具有改善骨吸收功能亢进的潜力。     

基于水晶兰苷含量优选制巴戟天炮制工艺

摘 要 目的：以制巴戟天中水晶兰苷含量为指标,优选制巴戟天炮制工艺。 方法: 以甘草用量、拌炒时间和煮制锅温为考察因素进行正交试验设计,采用HPLC法测定各样品中水晶兰苷含量：色谱柱为Kromalsil C₁₈（200 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液（90∶10）;柱温为30℃;流速为1 ml·min^-1;检测波长为233 nm;进样量为5 μl。结果: 制巴戟天经不同工艺炮制后,各试验号水晶兰苷平均含量分别为0.535 6,0.582 4,0.523 4,0.589 1,0.578 6,0.587 8,0.575 2,0.609 1,0.558 7 mg·g^-1,说明制巴戟天炮制工艺的改变对水晶兰苷的含量有影响。结论:基于水晶兰苷含量的制巴戟天最佳炮制工艺为：甘草用量为6%,拌炒时间为10 min,煮制锅温为100 ℃。     

巴戟天中水晶兰苷的提取分离及其含量测定

目的提取分离巴戟天茎中的水晶兰苷并测定巴戟天不同部位中水晶兰苷含量。方法巴戟天茎用80％的乙醇提取，石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，正丁醇萃取物上D101大孔树脂富集环烯醚萜类成分，反复常压正相及反相柱层析，分离得水晶兰苷。采用高效液相色谱法测定巴戟天茎、根、叶中水晶兰苷含量。结果从巴戟天茎中分离得到水晶兰苷。水晶兰苷在巴戟天茎、根、叶的含量分别为18．11、12．22及11．03mg·g^-1。结论巴戟天茎中可以分离得到水晶兰苷，含量比巴戟天根和叶高。     

白芍总苷对共培养诱生的破骨细胞的作用及机制

目的研究白芍总苷(TGP)对佐剂关节炎(AIA)大鼠滑膜成纤维细胞和单核细胞共培养诱生破骨细胞分化的干预作用及机制。方法分离AIA大鼠滑膜成纤维细胞和外周血单核细胞,共培养诱生破骨细胞;分别加入5、50、500、5 000 mg·L-1和50 g·L-1的TGP,检测细胞增殖、TRAP活性和骨吸收功能;ELISA法检测上清中IL-1、TNF-α、M-CSF、RANKL的水平;实时定量PCR测定细胞ERK、JNK和p38的表达。结果 TGP 50⁵ 000 mg·L-1可浓度依赖性地抑制破骨细胞的增殖能力、TRAP活性和骨吸收面积;降低上清中IL-1、TNF-α、M-CSF、RANKL的水平;不同程度抑制破骨细胞ERK、JNK和p38的表达。结论一定剂量的TGP可抑制类风湿关节炎破骨细胞的分化和活性,其作用与抑制滑膜成纤维细胞过度分泌细胞因子,进而阻止MAPKs信号途径的活化有关。     

淫羊藿苷和仙茅苷协同抑制破骨细胞的形成、分化和骨吸收功能

目的 研究淫羊藿苷和仙茅苷配伍抑制破骨细胞形成、分化和骨吸收的相互作用关系.方法 用1,25-(0H)2Vitamin D3和地塞米松;或人巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导骨髓单核细胞使其分化为破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色进行阳性破骨细胞鉴定;磷酸苯二钠法测定抗酒石酸酸性磷酸酶活性;将破骨细胞和骨片共同培养,以计算机图像分析测定骨吸收陷窝的面积;以Hoechst 33258和罗丹明-鬼笔环肽染色,激光共聚焦显微镜观察破骨细胞肌动蛋白环(F-actin Ring)的形态;用Western-blot分析细胞骨架相关蛋白的表达.结果 淫羊藿苷和仙茅苷在1×10-6mol/L浓度下可协同抑制破骨细胞的形成、降低抗酒石酸酸性磷酸酶的活性,减少破骨细胞在骨片上形成的骨吸收陷窝面积,抑制破骨细胞骨架F-actin环的构建及其调控因子Rho GTPases和灶性黏附激酶(focal adhesion kinase,FAK)的表达.结论 淫羊藿苷和仙茅苷协同抑制破骨细胞性的骨吸收,为药对淫羊藿仙茅的配伍提供了实验依据.     

辛伐他汀对体外成骨细胞、破骨细胞的影响

目的 探讨辛伐他汀对体外培养成骨细胞、破骨细胞的影响.方法 分离SD大鼠成骨细胞、破骨细胞,体外培养时给予辛伐他汀刺激,观察药物对成骨细胞增殖率和碱性磷酸酶以及骨细胞骨吸收的影响.结果 辛伐他汀10~(-6)～10~(-9)mol/L对碱性磷酸酶的分泌有明显促进作用,10~(-6)～10~(-8)mol/L的辛伐他汀既促进成骨细胞的增殖,又抑制破骨细胞的骨吸收.结论 辛伐他汀在体外促进骨形成、抑制骨吸收,有望成为治疗骨质疏松的约物.     

薄荷醇对戊巴比妥中枢抑制作用的影响

研究薄荷醇经胃肠道给药对成巴比妥中枢抑制作用的影响,结果发现,薄荷醇对戊巴比妥的中枢抑制作用具有一定的量效关系,含4.5%的薄荷醇溶液可明显使小鼠的入睡时间缩恒,并使急性死亡率增加,而含1.5%和0.5%的薄荷醇溶液对成巴比妥的中枢抑制作用无明显影响。     

川芎嗪对巨噬源性泡沫细胞形成的抑制作用研究

目的:研究川芎嗪对巨噬源性泡沫细胞形成的抑制作用及其可能的作用机制。方法:将人急性单核细胞白血病细胞株1(THP-1)与160 nmol/L佛波酯(PMA)孵育24 h,使之分化为巨噬细胞;再将巨噬细胞与80 mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)培养液孵育24 h,使之向泡沫细胞转化;再将上述细胞随机分为空白对照(ox-LDL)组、模型(AngⅡ)组、阳性对照(缬沙坦)组和川芎嗪低、中、高浓度(质量浓度分别为0.025、0.05、0.1 g/L)组,各组细胞分别与80 mg/L ox-LDL培养液孵育48 h后,采用油红O染色观察巨噬源性泡沫细胞转化率,酶化学法测定细胞内胆固醇含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot法分别检测酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)m RNA、蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,模型组巨噬源性泡沫细胞转化率升高,细胞内胆固醇含量增加,ACAT-1 m RNA、蛋白的表达均增强,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,阳性对照组与川芎嗪低、中、高浓度组泡沫细胞转化率降低,细胞内胆固醇含量减少,ACAT-1 m RNA、蛋白的表达减弱,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:川芎嗪可抑制巨噬细胞分化为泡沫细胞。其可能的作用机制为通过抑制ACAT-1的表达、降低细胞内胆固醇含量,从而减少巨噬源性泡沫细胞形成。     

阿帕替尼联合阿霉素对外周T细胞淋巴瘤的抑制作用及机制研究

目的探讨抗血管生成药物阿帕替尼与常用化疗药物阿霉素联合应用对外周T细胞淋巴瘤Hut78细胞株的抑制作用以及相关分子作用机制,为开发外周T细胞淋巴瘤治疗新方法提供实验依据。方法将Hut78细胞分为不同浓度药物处理组:阿帕替尼单药(10、20、40、60μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2、4μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1、(60+1)μmol·L^-1、(60+2)μmol·L^-1],分别作用72 h,采用CCK-8法检测药物对细胞的增殖抑制作用。采用流式细胞术检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]}作用24 h后对Hut78细胞凋亡的影响。采用流式细胞术检测不同浓度阿帕替尼(10、20、40μmol·L^-1)作用24 h后对Hut78细胞周期的影响。采用蛋白印迹法检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]}作用24 h后,Hut78细胞中PI3K/Akt信号转导通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt及凋亡相关蛋白Bcl-2、Casepase-3、Bax的表达变化。结果不同浓度(10、20、40、60μmol·L^-1)的阿帕替尼作用72 h后,细胞抑制率分别为(13.42±2.19)%、(19.52±4.16)%、(31.49±3.16)%、(52.88±3.37)%,72 h的IC₅₀值为(59.34±0.31)μmol·L^-1,各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ²=10.116,P=0.018);不同浓度(1、2、4μmol·L^-1)的阿霉素分别作用72 h后,细胞抑制率分别为(15.82±3.23)%、(31.70±4.79)%、(42.34±5.23)%,72 h的IC₅₀值为(5.52±0.18)μmol·L^-1,各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ²=10.532,P=0.015);阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1、(60+1)μmol·L^-1、(60+2)μmol·L^-1]作用72 h的细胞抑制率分别为(51.70±2.09)%、(56.62±4.83)%、(61.35±1.79)%、(65.13±3.88)%。两药的联合指数(CI)<1,说明二者具有药物协同作用。阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)作用24 h的细胞凋亡率分别为(15.65±0.75)%、(13.85±2.15)%、(23.60±1.30)%,阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]作用24h的细胞凋亡率分别为(27.00±1.90)%、(33.20±2.30)%,各药物处理组与对照组[(6.10±0.90)%]比较,差异有统计学意义(χ²=16.251,P=0.006)。不同浓度(10、20、40μmol·L^-1)的阿帕替尼作用24 h后,G₀/G₁期细胞比例随浓度升高而升高[(49.27±0.45)%、(50.34±1.24)%、(59.16±1.23)%],S期细胞比例随浓度升高而降低[(42.81±2.22)%、(39.19±2.71)%、(34.08±1.01)%],各药物处理组与空白对照组[G₀/G₁期(39.26±0.65)%,S期(49.40±2.52)%]比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)以及阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]作用24 h后,PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、p-Akt和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平呈下降趋势,促凋亡蛋白Casepase-3和Bax的表达水平呈上升趋势,Akt蛋白的表达水平无明显变化,各药物处理组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2、Casepase-3及Bax蛋白表达水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论阿帕替尼可抑制外周T细胞淋巴瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,同时具有细胞周期阻滞作用,其作用可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路激活实现的。阿帕替尼联合阿霉素对外周T细胞淋巴瘤细胞具有协同抑制作用。     

阿司咪唑的致心律失常作用及其作用机理研究进展

阿司咪唑为H1受体拮抗剂,主要用于荨麻疹、过敏性鼻炎等变态反应性疾病的治疗。其吸收好、起效快、作用时间长、无嗜睡等中枢抑制作用。但其对心脏的副作用,尤其是致心律失常作用及其机理研究越来越受到人们的重视。本文简要阐述该药自上市以来所引起的心律失常主要类型、诱发因素及机理研究进展。为临床合理用药和研发抗心律失常新药提供理论依据。     

阿托伐他汀对LPS诱导人血管内皮细胞IκBα表达的影响

目的通过观察阿托伐他汀对LPS诱导的人血管内皮细胞IκBα表达的影响来探明其抑制核因子κB活性的机制。方法将培养的人血管内皮细胞株ECV304,分为对照组、LPS组、阿托伐他汀低、中、高3个浓度组。阿托伐他汀3组加入不同阿托伐他汀孵育后与LPS组均加入LPS刺激30min。用免疫荧光法观察核因子κB活化情况,用逆转录-聚合酶链反应观察IκBα mRNA的表达情况,用蛋白印迹法观察IκBα及p-IκBα蛋白含量的变化。结果阿托伐他汀3组能够抑制p65由胞质转移至核内、能够剂量依赖性的降低pIκBα蛋白表达、减少IκBα的降解;阿托伐他汀高浓度组IκBα mRNA的表达增加。结论阿托伐他汀可以通过影响IκBα的表达和降解来抑制核因子κB活性。     

Inhibitory effect of putranjivain A on allergic inflammation through suppression of mast cell activation

A great number of people are suffering from allergic inflammatory disease such as asthma, atopic dermatitis, and sinusitis. Therefore discovery of drugs for the treatment of these diseases is an important subject in human health. Putranjivain A (PJA), member of ellagitannin, is known to possess beneficial effects including anti-cancer and anti-viral activities. The aim of the present study was to elucidate whether PJA modulates the allergic inflammatory reaction and to study its possible mechanisms of action using mast cell-based in vitro and in vivo models. The study was performed in anaphylaxis mouse model and cultured mast cells. PJA inhibited the expression of pro-inflammatory cytokines in immunoglobulin E-stimulated mast cells. PJA reduced this expression by inhibiting nuclear factor (NF)-κB and nuclear factor of activated T cell. The oral administration of PJA reduced systemic and cutaneous anaphylaxis, the release of serum histamine, and the expression of the histamine H₁ receptor. In addition, PJA attenuated the activation of mast cells. PJA inhibited the release of histamine from various types of mast cells by the suppression of intracellular calcium. The inhibitory activity of PJA on the allergic reaction was similar to that of disodium cromoglycate, a known anti-allergic drug. These results suggest that PJA can facilitate the prevention or treatment of allergic inflammatory diseases mediated by mast cells.     

丁基苯酞对创伤性脑损伤模型大鼠神经功能的改善作用

目的 探讨丁基苯酞(NBP)对创伤性脑损伤(TBI)模型大鼠神经功能的改善作用,以及对IRE1/XBP1信号通路的影响.方法 将60只大鼠分为假手术组、模型组,以及NBP高、中、低剂量组(40,20,10mg/kg),各12只.采用改良Feeney自由落体撞击法复制大鼠TBI模型.建模后,各组大鼠腹腔注射相应药物,每天...