骨髓基质干细胞研究进展

骨髓基质干细胞(BMSCs)又称为骨髓间充质干细胞(MSCs),已广泛应用于脑和脊髓损伤、骨损伤、软骨缺损与损伤、心肌细胞损伤等的修复、基因治疗和临床治疗的研究。文中从BMSCs的发现及应用研究现状、BMSCs的制备、培养及生物学特征、BMSCs向神经细胞分化的研究进展等方面对BMSCs的国内外研究进展进行综述。     

开窍法治疗缺血性中风临床研究进展

开窍法作为治疗缺血性中风的重要方法，已被人们重新认识，本文就开窍法治疗缺血性中风的病因病机、方荮论治、实验研究、展望诸方面作一综述．     

冰片对BMSCs透过血脑屏障的影响

目的:探讨冰片对骨髓基质干细胞(BMSCs)透过血脑屏障(BBB)的影响。方法:复制脑缺血再灌注大鼠模型,将大鼠随机分为BMSCs+冰片组、BMSCs组、冰片组、模型组和正常组5个组;MCAO术后24小时,灌服冰片30min后,以3×106BMSCs经右颈总动脉注射入大鼠体内;分别于脑缺血再灌注后第1、14、28天检查各组大鼠的神经功能,并于实验结束时采血检测血象、肝肾功能。结果:BMSCs+冰片组和BMSCs组神经功能显著改善,而前者又优于后者;各组大鼠血象、肝肾功能都正常,主要器官组织未见肿块形成。结论:冰片能够促进BMSCs透过BBB,改善神经功能;血管内移植BMSCs未见明显的副作用。     

电针联合骨髓基质干细胞移植对大鼠脑出血神经再生的影响

目的 观察电针联合骨髓基质干细胞(BMSCs)移植治疗脑出血后对神经再生的影响.方法 通过脑立体定位仪向SD大鼠脑尾壳核注射胶原酶和肝素制备脑出血动物模型,第3天分别注射生理盐水、移植BMSCs以及移植BMSCs联合电针,建立生理盐水组、BMSCs组和电针BMSCs组.免疫组织化学染色观察突触素(Syn)和神经生长相关蛋白(GAP -43)以及神经丝蛋白(NF)在脑出血周边区的表达.结果 电针BMSCs组各时间段Syn、NF和GAP - 43免疫阳性产物均比生理盐水组和骨髓基质干细胞组显著增加.结论 BMSCs移植联合电针治疗较单纯BMSCs移植更能促进脑出血周围区神经再生.     

骨髓基质干细胞移植治疗脑和脊髓损伤的研究进展

骨髓基质干细胞具有多向分化潜能,取材、培养简便,组织相容性好,易于基因操作等特点,已广泛应用于脑和脊髓损伤的实验研究和临床应用研究。笔者对国内外应用移植骨髓基质干细胞治疗脑和脊髓损伤的研究进展进行综述。     

电针联合骨髓基质干细胞移植对大鼠脑出血凋亡相关蛋白表达的影响

目的观察电针联合骨髓基质干细胞移植治疗脑出血后对神经再生的影响。方法通过脑立体定位仪向SD大鼠脑尾壳核注射胶原酶和肝素制备脑出血动物模型,第3天分别注射生理盐水、移植BMSCs、以及移植BMSCs联合电针,建立生理盐水组、BMSCs组和电针BMSCs组。Tunel和免疫组织化学染色观察细胞凋亡数及Bax和Bcl-xl蛋白的表达。结果电针组凋亡细胞数明显下降。在各时间点电针+BMSCs组的Bcl-xl阳性细胞数与BMSCs组和生理盐水组相比显著增加;而Bax阳性细胞数则减少。结论电针联合BMSCs移植治疗脑出血大鼠可能通过抑制细胞凋亡、上调Bcl-xl和下调Bax蛋白的表达发挥更好的神经保护作用。     

大暑骨髓间质干细胞的分离培养与中药诱导分化的研究

目的：研究掌握骨髓基质干细胞（MSCs）的分离培养和诱导：．口＼化的方法；方法：是将大鼠骨髓基质干细胞自股骨中分离，利用骨髓基质干细胞具有贴壁生长的培养特点，应用贴壁筛选法…进行分离培养和传代，并应用中药进行诱导分化；结论：该方法是简便安全有效的骨髓基质干细胞的分离、培养和诱导方法     

益气活血开窍法治疗缺血性中风120例临床观察

目的 探讨益气活血开窍法对缺血性中风恢复期患者的康复作用.方法 120例脑梗死患者随机分为治疗组与对照组各60例,对照组采用常规西药治疗,治疗组在西药常规治疗基础上予以益气活血开窍方,比较两组患者神经功能缺损和生活行为能力评分的变化,并判断疗效.结果 治疗组可显著降低患者神经功能和认知功能评分,总有效率显著优于对照组.结论 益气活血开窍法可显著提高缺血性中风恢复期患者神经功能,改善生活行为能力,疗效优于常规西药治疗.     

骨髓干细胞移植配合中药治疗股骨头缺血性坏死

目的：探讨在髓芯减压基础上,应用骨髓干细胞移植配合中药治疗股骨头缺血性坏死的疗效。方法：在行髓芯减压的同时植入自体骨髓干细胞及自体髂骨,配合中药辨证施治。结果：本组14例20髋,按F icat分期：Ⅰ期12髋,Ⅱ期6髋,Ⅲ期2髋,经1年随访观察,患者髋关节功能明显改善。结论：本疗法安全,有效,对治疗早中期股骨头缺血性坏死是一种理想的选择。     

陶瓷化骨对成人骨髓基质干细胞分化的影响

目的:观察陶瓷化骨时成人骨髓基质干细胞生长和分化的影响.方法:体外分离培养成人骨髓基质干细胞,将第二代细胞以陶瓷化骨为载体进行培养,利用倒置显微镜、碱性磷酸酶细胞化学染色、碱性磷酸酶活性检测等条件,了解陶瓷化骨对成人骨髓基质干细胞生物学行为的影响.结果:体外连续培养6d,倒置显微镜下可见成人骨髓基质干细胞与陶瓷化骨相容性好,材料周边细胞生长密集,并有向陶瓷化骨趋化迁移现象,3周后形成矿化结节.碱性磷酸酶染色呈阳性、碱性磷酸酶活性检测有明显的细胞分泌量.结论:体外培养条件下,陶瓷化骨可诱导成人骨髓基质干细胞向成骨和骨质细胞分化.     

黄芪与当归对骨髓干细胞移植治疗糖尿病缺血下肢血管再生的影响

目的:研究黄芪、当归对体外培养骨髓干细胞移植治疗糖尿病缺血下肢血管再生的作用,并探讨其可能机制。方法:采用黄芪、当归体外培养2型糖尿病大鼠骨髓干细胞14d后,移植入糖尿病大鼠缺血下肢。28d后,激光多普勒血流仪检测肢体皮肤血流灌注量;碱性磷酸酶染色法检测微血管密度;Western Blot法检测肌肉组织的VEGF蛋白表达量。结果:黄芪组及黄芪当归合用组的缺血肢体的血流灌注量、微血管密度和VEGF蛋白表达量均明显高于当归组与对照组(P<0.05或P<0.01),而且黄芪当归合用组的以上效应均较单用黄芪组增强(P<0.05或P<0.01)。结论:单用黄芪或与当归合用体外培养骨髓干细胞可促进骨髓干细胞移植治疗糖尿病缺血下肢血管再生,其机制与其上调骨髓干细胞VEGF蛋白表达有关,且黄芪与当归合用具有协同作用。     

浓缩自体骨髓移植配合中药治疗骨不连临床研究

目的：观察自体浓缩骨髓移植结合中药骨愈康对骨不连治疗的效果。方法：浓缩自体骨髓移植阳中药组（A组）采用局部经皮自体骨髓移植结合中药内服治疗骨不连患者25例,另设浓缩自体骨髓移植组（B组）采用单纯自体骨髓移植治疗骨不连患者25例,观察X线所示骨痂形成情况和临床体征,评价2组在治疗前后的骨折愈合情况。结果：A组25例患者骨折最终愈合,平均愈合时间6.8个月。B组22例患者骨折最终愈合,平均愈合时间8.4个月。2组骨折愈合时间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：自体骨髓移植结合中药骨愈康可以改善成骨能力,促进骨折愈合。     

参附注射液对冠心病慢性心力衰竭患者心功能及骨髓干细胞动员的影响

目的 探讨参附注射液对慢性心力衰竭患者心功能及骨髓干细胞动员的影响。     

注射用丹参多酚酸配伍注射用血栓通（冻干）通过抑制MMPs对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性的影响及机制

目的:探究注射用丹参多酚酸配伍注射用血栓通(冻干)通过抑制金属基质蛋白酶(MMPs)对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障(BBB)通透性的影响及机制。方法:采用线栓法建立大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO/R)模型。选取雄性Wistar大鼠60只,随机分为假手术组,模型组,依达拉奉组(6 mg·kg-1),丹参多酚酸组(21 mg·kg-1),血栓通组(100 mg·kg-1),丹参多酚酸配伍血栓通组(21 mg·kg-1+100 mg·kg-1),尾静脉注射给药每日1次,连续2 d。采用神经功能(mNSS)评分法观察大鼠神经功能缺损情况;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脑缺血半暗带组织病理学变化;Nissl染色及神经元特异核蛋白(NeuN)荧光染色检测缺血半暗带神经元损伤情况;免疫球蛋白G(IgG)/CD31免疫荧光双染观察缺血半暗带IgG渗漏情况;免疫荧光法观察紧密连接(TJs)相关蛋Occludin,Claudin-5及基底膜(BM)相关蛋白Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ),层粘连蛋白(LN),纤维连接蛋白(FN)表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测金属基质蛋白酶MMP-2,MMP-9蛋白表达情况。结果:与模型组比较,丹参多酚酸组、血栓通组、丹参多酚酸配伍血栓通组可显著改善大鼠脑缺血再灌注损伤神经功能缺损、组织形态学变化,并可抑制神经元损伤,减轻缺血半暗带IgG渗漏,明显升高TJs蛋白Claudin-5,Occludin及基底膜相关蛋白Col-Ⅳ,LN,FN表达(P0.05,P0.01),明显降低MMP-2,MMP-9蛋白表达(P0.05,P0.01);且配伍用药组疗效最佳,对各项指标均有明显的改善,改善程度优于丹参多酚酸或血栓通单独干预。结论:注射用丹参多酚酸、注射用血栓通(冻干)及两者配伍应用可减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,且配伍应用效果优于单独应用,其机制可能与通过抑制MMPs的表达减轻脑微血管内皮紧密连蛋白及基底膜损伤,进而抑制缺血后BBB损伤有关。     

中药联合干细胞蛛网膜下腔移植对缺血再灌注大鼠脑脊液NGF的影响

目的:研究中药对蛛网膜下腔移植骨髓单个核细胞(BMNC)或骨髓间充质干细胞(BMSC)治疗缺血性脑卒中大鼠干细胞因子的影响。方法:分离培养BMNCs和BMSCs,140只Wistar大鼠随机分为7组:1正常组,2假手术组,3模型组,4BMNC组,5BMNC联合中药组,6BMSC组,7BMSC联合中药组。3、4、5、6、7组应用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌2h模型(MCAO),24h后通过蛛网膜下腔注射法移植100微升0.01MPBS溶液(3组)、BMNCS悬液(4组、5组,2.0×107个)或BMSCs悬液(6组、7组,2.0×107个),5组、7组当日进行中药灌胃。应用定量ELISA法于移植后4天、28天检测脑脊液(CSF)内Neural growth factor(NGF)含量。结果:模型组CSF中NGF水平在移植后28天有所升高,4、5、6、7组在移植后4dNGF水平均较模型组明显升高(P<0.05),5、6、7组在移植后28天NGF水平均较模型组明显升高。BMNC组和BMSC组间比较没有明显差异。中药联合BMNC组在治疗28天时较单纯BMNC组明显升高,中药联合BMSC组在治疗4天、28天时均较单纯BMSC组增高。两组中药联合组间比较,治疗4天时中药联合BMSC组NGF含量更高。两中药联合治疗组在治疗28天时均较4天水平升高。结论:脑动脉阻塞本身就可以使大鼠脑脊液中NGF水平升高,BMNC和BMSC移植可进一步提高MCAO大鼠CSF中NGF水平,中药联合BMNC或BMSC移植治疗对NGF水平的升高具有协同增效作用。     

肺癌干细胞研究进展及与中医药关系的思考

近年来肿瘤干细胞的作用不断被认识,它的存在可能导致肿瘤细胞增殖的加速[1],它是肿瘤形成、生长、转移和复发的根源[2-4],随着研究的深入,人们已经意识到肺癌可能是一种干细胞疾病。肺癌干细胞的研究[5]是目前国际肿瘤界研究的热点和重点。具有自我更新和无限增殖能力的肺癌干细胞是肺癌发生的"根源",肺癌的复发、侵袭转移、耐药、抗辐射等恶性表型特征都与肺癌干细胞有关。因此,针对肺癌干细胞的治疗[6]可能效果更持久,同时能阻止肿瘤的复发、转移,这对于肺癌的治疗有深远的意义。2009年以前有关肺癌干细胞的研究已有许多人对其进行了总结。鉴于上述原因,作者将2010年至今的有关肺癌干细胞的研究综述于下,并将中医理论与肿瘤干细胞的关系进行初步探讨,以期为从事肺癌干细胞研究的人员提供思路。     

益肾活血汤联合氯沙坦对维持性血液透析患者炎症细胞因子的影响

目的:观察益肾活血汤联合氯沙坦对维持性血液透析(maintenance hemodialysis)患者炎症细胞因子的影响。方法:选取本院2010年3月—2014年5月收治的80例MHD患者作为研究对象,随机分为对照组和治疗组各40例,对照组给予氯沙坦50~100 mg·d-1口服,治疗组在对照组治疗的基础上采用益肾活血汤治疗,疗程均为3个月,比较两组患者治疗前后肾功能及血清炎症指标变化。结果:两组患者治疗后MIS评分、Hs-CRP及IL-6水平均较治疗前明显降低(P0.05),但治疗组较同期对照组比较改善更明显(P0.05);两组患者治疗前后肾功能指标比较并无明显差异(P0.05)。结论:益肾活血汤联合氯沙坦可明显减轻MHD患者微炎症状态,改善炎症细胞因子水平。