四川大学华西医院近5年粪肠球菌和屎肠球菌耐药情况分析

目的 了解四川大学华西医院近5年分离的粪肠球菌和屎肠球菌的临床分布特点及耐药性变化情况,研究肠球菌耐药变迁趋势,为临床合理用药提供依据。方法 收集四川大学华西医院2007年1月至2011年12月分离的2 069株肠球菌,分析其标本分布特征及耐药变化情况。结果 分离出屎肠球菌1 136株,粪肠球菌933株。标本分布为尿液33.5%、分泌物22.7%、血液15.2%及胆汁9.5%。粪肠球菌和屎肠球菌对常用抗生素耐药情况严重,仅对万古霉素及利奈唑胺耐药率较低,粪肠球菌VRE (Vancomycin-resistant enterococci)分离率为1.0%,屎肠球菌VRE分离率为3.8%。屎肠球菌的总体耐药率高于粪肠球菌 （P=0.033）。然而,连续5年数据分析显示,粪肠球菌和屎肠球菌对常用抗生素耐药率有逐年下降的趋势 （P<0.05）。结论 临床治疗肠球菌引起感染时面临困难,万古霉素和利奈唑胺仍是治疗肠球菌感染的有效药物,但万古霉素应合理减少使用频率。临床微生物实验室应加强肠球菌药敏统计和对VRE的监测工作。     

如何快速鉴定临床标本中的粪肠球菌和屎肠球菌

目的建立荧光原位杂交法,快速鉴定临床标本中的粪肠球菌和屎肠球菌。方法将荧光同位素标记的粪肠球菌或屎肠球菌的核糖体16SrRNA及23SrRNA序列互补的寡核苷酸探针,在同一张玻片上杂交30min～1h,用杂交缓冲液洗涤10min,干燥后置显微镜下观察。结果探针的特异性金标准菌株证实,对163例临床标本测试结果与培养法结果比较,2种探针的特异性和敏感性均为100%。结论荧光原位杂交法适宜于临床标本中粪肠球菌和屎肠球菌的快速鉴定。     

脑脊液中检出粪肠球菌一例

我院从脑脊液中培养出粪肠球菌一例,现报道如下:患者男性30岁CT确诊为脑出血,血象20.0×109/L,分叶91%,淋巴9%,患者一直处于昏迷状态,术后取脑脊液送检培养。     

临床分离粪肠球菌和屎肠球菌的耐药性监测

目的：了解粪肠球菌和屎肠球菌对抗菌药物的耐药性,为临床提供治疗依据。方法：对住院及门诊病人送检样本中培养分离出316株肠球菌(粪肠球菌126株,屎肠球菌190株)的感染分布与耐药情况进行分析。采用稀释法进行药物敏感试验,结果按美国临床实验室标准化研究所标准判定。结果：屎肠球菌对青霉素G的耐药率最高(93.7%),其次为红霉素、氨苄西林和环丙沙星。粪肠球菌对奎奴普丁/达福普汀耐药率最高为(74%),其次为四环素、红霉素和环丙沙星。粪肠球菌和屎肠球菌对利奈唑胺和万古霉素的耐药率均低于(2%),替考拉宁的耐药率最低均为(0)。结论：粪肠球菌和屎肠球菌对不同抗菌药物的耐药率有较大差异,在抗感染治疗前应先做细菌培养和药物敏感试验,依据报告结果合理选用抗菌药物。     

根管内粪肠球菌生物膜的形成研究

目的从根管治疗失败患牙的感染根管内分离、鉴定粪肠球菌;建立粪肠球菌根管内感染体外模型,观察根管内粪肠球菌生物膜的形成。方法收集感染根管样本,培养鉴定粪肠球菌,测定生长曲线;收集离体前牙24颗,截冠保留牙根,完成根管预备,对照组置入无菌水培养,观察组进行粪肠球菌培养,鉴定并以扫描电镜观察。结果感染根管样本可分离到粪肠球菌;观察组8个根管内可见基质包裹细菌形成栅栏样结构粘附在根管壁,密集于根管下1/2段。结论感染根管内可分离到粪肠球菌,该菌在预备后牙根管下1/2段内壁形成生物膜。     

105株粪肠球菌耐药分析

目的:分析粪肠球菌在临床感染中的耐药特征.方法:采用手工方法测定分析分离出的105株粪肠球菌对11种抗菌药物的耐药特征.结果:粪肠球菌对万古霉素敏感率最高97.1%,氨卞西林96.2%、呋喃妥因93.3%,对庆大霉素、青霉素、氧氟沙星、氟哌酸等为50%以下,均有不同程度的耐药.结论:及时了解粪肠球菌感染情况及对其抗菌素的敏感程度对感染者的治疗康复十分重要.     

粪肠球菌对10种抗生素的耐药分析

肠球菌是人、动物肠道的正常菌群 ,异位寄生时可引起败血症、尿路感染、呼吸道感染、心内膜炎等。其对抗生素有天然耐力。近几年由于广谱抗生素的大量使用 ,使肠球菌的感染发生率及耐药菌株日益增多。所以对其耐药性的监测分析成为重点工作之一。粪肠球菌是肠球菌属中的主要成员占90 %。本文对我院 1996— 1998年临床分离的 6 2株粪肠球菌对 10种抗生素的耐药性进行了分析 ,现报告如下。1　材料和方法1.1菌株　来自我院临床分离的 6 2株粪肠球菌。用常规法鉴定部分菌株采用ＡＰＩ系统。痰标本分离 2 2株 ,尿分离 15株 ,创面感染 15株 ,胆汁 …     

185株粪肠球菌与屎肠球菌的临床分布及耐药性分析

目的 了解2009至2011年安徽地区粪肠球菌与屎肠球菌的临床分布及耐药情况,为临床合理用药提供参考证据.方法 185株粪肠球菌与屎肠球菌药敏试验采用琼脂稀释法,结果依据CLSI 2010年推荐的标准进行判读.结果 3年临床分离菌株共185株,其中粪肠球菌92株,屎肠球菌93株,主要分离于尿液及分泌物,其中粪肠球菌分别占63.4%和11.8%,屎肠球菌分别占48.9%和16.3%;粪肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星和加替沙星的敏感性高于屎肠球菌,屎肠球菌对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺的敏感性高均达90%以上,粪肠球菌对三者的敏感性均在90%左右,然而无论粪肠球菌和屎肠球菌对红霉素的耐药性均很高,分别为76.3%和92.6%.结论 粪肠球菌与屎肠球菌对不同的抗菌药物的敏感性不同,临床上应加强对粪肠球菌和屎肠球菌的监测及抗菌药物使用的管理,预防和减少耐药菌株的产生.     

粪肠球菌感染阴道炎3年耐药性变迁

目的：探讨粪肠球菌所致细菌性阴道炎的3年耐药性变迁。方法：将2001年1月～2003年12月收治的78例粪肠球菌致细菌性阴道炎药敏结果进行分析。结果：粪肠球菌致细菌性阴道炎感染占18．44％(78／423)，细菌性阴道炎宫颈分泌物标本中粪肠球菌对13种抗生素耐药性总体为上升趋势。药敏结果显示在青霉素类抗生素中，以氨苄西林耐药率最高，3年平均耐药率为64．1％；头孢菌素中头孢曲松及头孢噻肟耐药性较高，分别为74．7％、72．0％。环丙沙星和左旋氧氟沙星耐药率分别由3年前39．1％、26．1％上升为3年后的73．1％和61．5％，呈升高趋势。红霉素3年内一直保持较高耐药率，3年平均耐药率为65．5％。粪肠球菌对万古霉素耐药性最低，3年平均耐药率为2．4％。结论：对细菌性阴道炎患者治疗时应根据药敏结果选择应用抗生素。     

338株粪肠球菌的临床分析

目的 探讨粪肠球菌在本院临床各科室的分布及对10种抗生素的耐药情况。方法 将临床分离到的338株粪肠球菌采用Kirby-Bauer纸片琼脂扩散法对10种抗生素的耐药情况进行分析。结果 粪肠球菌对大多数常用抗生素耐药率〉50％,只有呋喃妥因的耐药率较低,并发现12株耐万古霉素的粪肠球菌 。结论 临床标本分离出的粪肠球菌应根据药敏试验结果选用合理的抗生素,且注意万古霉素的使用,防止该类药物耐药率的升高。     

Enterococcus faecalis endocarditis

The increasing usage of cephalosporins, to which the enterococci are resistant, has resulted in the rising number of enterococcal infections worldwide. Enterococci are a normal part of the flora of the human gastrointestinal tract, buccal cavity, perineal skin, vagina, urethra and gallbladder, but may occur as pathogens in a number of sites causing urinary tract infections, intra-abdominal infections, fatal bacteremia, meningitis and endocarditis. A Saudi male who developed enterococcal endocarditis with vegetations on both aortic and mitral valves required mitral and aortic valve replacement. The attention of physicians is drawn to the increasing frequency of enterococcus as a cause of nosocomial infections, the risk factors, and antibiotic resistance pattern including resistance to vancomycin as well as its potential for virulence.     

嗜人按蚊种群饲养及标本保存方法对总RNA提取影响的研究

目的 建立适合嗜人按蚊小型种群饲养方法，探讨按蚊标本不同保存方法对总RNA提取的影响，为进行相关性研究提供高质量总RNA标本提供依据。方法 拟合嗜人按蚊的生长习性，在实验室采用多种针对措施以提高按蚊的孵化率、幼虫生存率、蛹化率和羽化率；采用总RNA变性胶凝胶电泳分析乙醚麻醉和低温速冻法对总RNA降解的影响。结果在非专业饲养室中采用简便低廉的改良方法大大提高了嗜人按蚊的孵化率、幼虫生存率、蛹化率和羽化率。低温速冻法较传统的乙醚麻醉法更好得避免了标本RNA的过多降解。结论建立了一种低成本、高成功率的嗜人按蚊饲养方法和一种低降解、安全简便的差异分析用嗜人按蚊标本的保存方法。     

2010～2013年239株粪肠球菌临床耐药特征

目的 探讨本院近三年粪肠球菌临床分布及耐药性特征,为临床用药提供参考.方法 选取近三年临床分离出的粪肠球菌239株,分析其临床分布特征,并做常规抗生素敏感性试验,用whonet5.4软件进行统计学分析.结果 粪肠球菌大多来源于肝胆外科、泌尿外科的尿液、胆汁和引流液标本;对喹努普汀/达福普汀耐药率为100％,对四环素和红霉素耐药率均为53.14％,呋喃妥因对粪肠球菌敏感性较高,为95.82％;粪肠球菌对替加环素、替考拉宁和万古霉素全敏感.结论 加强药敏试验,定期监测临床耐药现象,对指导临床用药具有重要意义.     

适于基因芯片实验的小鼠脑组织RNA提取方法的改进

目的 比较Trizol与两种常用提取试剂盒对小鼠脑组织RNA提取质量的差异,并进行方法改进,以期找到适合于基因芯片的高质量组织RNA提取方法. 方法 以小鼠脑组织为材料,Trizol试剂、Ambion和天根组织RNA提取试剂盒提取总RNA,并对试剂盒提取方法进行改良,检测改良前后RNA浓度、纯度和完整性以及反转录成cRNA的浓度. 结果 与改良前相比,试剂盒经方法改良后提取的RNA产量均有提高;Ambion试剂盒提取的RNA纯度优于Trizol和天根试剂盒. 结论 Ambion试剂盒经方法改良后RNA提取质量优于其他方法,适合于基因芯片的实验要求.     

次氯酸钠溶液冲洗根管对粪肠球菌的作用研究

[目的]研究次氯酸钠溶液对根管内粪肠球菌的作用效果。[方法]将20个离体前磨牙的感染根管标本随机均分为两组,5．25％次氯酸钠溶液冲洗组（NaClO0）和0．9％生理盐水冲洗组（NaCl）。在根管预备、冲洗后取样培养,分别检测24、48h、1周时粪肠球菌的菌落数目。[结果]24、48h,5．25％NaClO组粪肠球菌完全被杀灭,菌落计数为0CFUmL^-1,NaCl组均数分别为1．2×10^6CFUmL^-1、1．7×10^6CFUmL^-1;1周时,5．25％NaClO组有极少量的粪肠球菌被检出,菌落计数为109CFUmL^-1,而NaCl组均数为3．8×10^6CFUmL^-1,两组于3个时间点的差异均具有显著性意义（P〈0．01）。[结论]5．25％次氯酸钠溶液冲洗根管能立即抑制粪肠球菌,但不能完全清除粪肠球菌。     

粪、屎肠球菌对9种常用抗生素的敏感性分析

目的分析我院2003—2006年临床标本分离的粪、屎肠球菌对9种常用抗生素的敏感性,为临床医生提供粪、尿肠球菌感染的治疗对策。方法应用VITEK-32微生物系统回顾性分析近4a我院粪肠球菌、屎肠球菌对抗生素的敏感性。结果432株粪、屎肠球菌在临床分离的所有肠球菌中占77．0％,其中粪肠球菌为274株（48．8％）,屎肠球菌为158株（28．2％）。粪肠球菌、屎肠球菌51起的感染部位有差异,前3位分离粪肠球菌的临床标本依次为尿液46．0％、脓性分泌物31．0％、痰液18．6％。分离屎肠球菌的临床标本依次为尿液75．9％、脓性分泌物15．8％、痰液5．1％。粪肠球菌对呋喃妥因、力奈唑烷、万古霉素敏感率〉90％,对高浓度的庆大霉素、链霉素、四环素、左氧氟沙星和莫昔沙星敏感率〈50％。屎肠球菌对力奈唑烷、万古霉素敏感率〉90％,对四环素敏感率78％～88％。对高浓度的庆大霉素、链霉素敏感率〈50％,对左氧氟沙星、莫昔沙星、青霉素-G敏感率〈10％。结论临床分离的肠球菌以粪肠球菌、屎肠球菌为主,屎肠球菌对四环素敏感率高于粪肠球菌,屎肠球菌对多种抗生素较粪肠球菌具有更强的耐药性,粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素敏感率89．8％和91．6％。粪肠球菌、屎肠球菌对万古霉素耐药率6．9％和7．0％。     

真核细胞RNA的提取和mRNA纯化方法探讨

为采取简便、快速、经济的方法获得高质量的RNA和mRNA，本实验比较了氯化铯超速高心、胍盐／热酚法和“一步法”提取总RNA以及采用Oligo（dT）玻璃柱或离心柱分离纯化mRNA的方法.结果表明:“一步法”与任一种纯化mRNA的方法合用均能获得高纯度、未被降解的RNA和mRNA而可被用于多种实验研究。     

碱性环境对饥饿期粪肠球菌疏水性的影响

目的研究碱性环境对饥饿期粪肠球菌表面疏水性的影响,了解氢氧化钙影响细菌粘附的机制。方法收集饥饿期粪肠球菌,在pH值为7.3、8.3、9.3、10.3的氢氧化钙溶液中分别孵育15 min和1 h,采用微生物粘着碳氢化合物法(MATH)检测细菌表面疏水率;扫描电镜观测不同pH值的碱性环境中粪肠球菌对人牙本质片粘附量的变化。结果随着氢氧化钙溶液pH值上升,饥饿期粪肠球菌表面疏水率逐渐升高(P<0.01);相同pH值条件下,1 h细菌表面的疏水率高于15 min(P<0.05);电镜下细菌对牙本质粘附量随溶液pH值上升而增多。结论碱性环境可提高饥饿期粪肠球菌表面疏水性,促进细菌初始粘附。     

Endocarditis due to high-level gentamicin-resistant Enterococcus faecalis.

We report a case of aortic valve endocarditis caused by Enterococcus faecalis highly resistant to gentamicin, which failed to respond to conventional antibiotic combination therapy. Extensive in vitro testing was required to determine an appropriate antimicrobial regimen. Despite bacteriological resolution and cardiac surgery the patient died from complications of infective endocarditis.