尿石素A对乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响及其机制研究

目的 研究尿石素A对乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响并探讨其作用机制。方法 CCK-8法考察不同浓度尿石素A作用12、24、36、48 h对MCF-7细胞增殖能力的影响;细胞凋亡染色法考察20、40 μmol/L的尿石素A对MCF-7细胞凋亡的影响;实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测c-Myc、Cyclin D1、Bcl-2、Bax mRNA的表达水平;Western blotting法检测c-Myc、Cyclin D1、Bcl-2、Bax蛋白的表达水平。结果 尿石素A对MCF-7细胞增殖具有抑制作用且呈时间浓度相关性;细胞凋亡染色显示,20、40 μmol/L尿石素A给药后均能够诱导MCF-7细胞凋亡;RT-qPCR及Western blotting结果显示,20、40 μmol/L尿石素A能够显著降低MCF-7细胞中c-Myc、Cyclin D1、Bcl-2 mRNA及蛋白的表达水平（P<0.05、0.01）,升高Bax mRNA及蛋白的表达水平（P<0.05、0.01）。结论 尿石素A具有抑制MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡的作用,其作用机制可能与抑制c-Myc、Cyclin D1、Bcl-2表达,升高Bax表达水平有关。     

共轭亚油酸异构体对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制和促凋亡作用

<正>共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)是一组具18个碳原子,含有共轭双键的多不饱和脂肪酸,是必需脂肪酸亚油酸的同分异构体。近年来大量动物试验表明,CLA具有抗癌~([1])、抗动脉粥样硬化~([2])、降低脂肪沉积~([3])等重要生理功能。虽然目前国内外关于CLA对癌细胞凋亡的影响已做了大量研究工作,但还未见t9,t11-CLA单体抗癌活性的报道。     

线粒体通路在大戟大枣汤对乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制及凋亡诱导中的调控作用

目的探讨大戟大枣汤(DEFSJ)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用及其相关机制。方法 SPF级SD大鼠每天2次分别ig给予溶剂(生理盐水)、DEFSJ 2.5,5.0和10.0 g·kg^-1,共3 d。末次给药1 h后,腹主动脉采血,分离制备DEFSJ含药血清(DEFSJ-CS)。乳腺癌MCF-7细胞分别用对照血清、DEFSJ-CS 2.5,5.0和10.0 g·kg^-1及紫杉醇8 mg·L^-1处理48 h。用甲基纤维素克隆形成实验检测细胞克隆能力;JC-1染色后激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜电位;流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Bcl-2,Bax和Bim mRNA表达水平;免疫荧光法检测Bcl-2,Bax和Bim蛋白表达水平。结果与含溶剂(生理盐水)血清对照组相比,DEFSJ-CS 2.5,5.0和10.0 g·kg^-1组及紫杉醇组人乳腺癌MCF-7细胞克隆形成率显著降低(P<0.05,P<0.01);MCF-7细胞线粒...     

雷公藤甲素对ERα蛋白介导的人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制的影响

目的：研究雷公藤甲素对激素依赖性人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用及可能的机制。方法：MTT法检测雷公藤甲素对MCF-7细胞增殖的抑制作用,Hoechst染色法检测其对细胞凋亡的影响,Western blotting法观察雷公藤甲素对雌激素受体（ER）α蛋白表达的影响。结果：雷公藤甲素对MCF-7细胞增殖有显著的抑制作用,并且呈现良好的时效和量效关系,雷公藤甲素能有效诱导MCF-7细胞凋亡,并且对ERα具有明显的下调作用。结论：雷公藤甲素能抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖并且诱导其凋亡,其诱导MCF-7细胞凋亡的作用机制可能与其下调ERα的表达有关。     

血根碱抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖的机制研究

目的研究血根碱(Sanguinaria canadensis,SAN)诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡可能的作用机制。方法 MTT法检测SAN对MCF-7细胞存活率的影响;激光扫描共聚焦显微镜观察SAN对MCF-7细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量的影响;化学发光法检测SAN对MCF-7细胞内caspase-3、caspase-8、caspase-9活性的影响。结果 SAN能降低MCF-7细胞存活率;SAN可明显升高MCF-7细胞内ROS含量,升高细胞内caspase-3、caspase-8、caspase-9的活性,而这种作用能被抗氧化剂NAC抑制。结论以上结果证明SAN能够抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖,其机制可能是通过升高细胞内ROS水平,激活caspase级联反应,进而诱导细胞凋亡发挥作用。     

冬凌草甲素对MCF-7细胞的生长抑制作用及诱导凋亡作用的实验研究

目的探讨冬凌草甲素对人乳腺癌细胞MCF-7细胞的生长抑制作用及诱导凋亡作用。方法以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的MCF-7细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用Hoechst 33258荧光染色法以及流式细胞仪观察细胞凋亡情况。结果冬凌草甲素可显著抑制MCF-7细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,并呈现出一定的剂量-效应与时间-效应关系。Hoechst 33258荧光染色观察到典型的核浓缩、核碎裂等细胞凋亡的形态学变化。结论冬凌草甲素能显著抑制MCF-7细胞的生长,诱导细胞发生凋亡是其重要作用方式。     

SAHA在Leptin诱导的乳腺癌MCF-7细胞增殖过程中的调控作用

目的为了阐明SAHA调控Leptin诱导的乳腺癌ER+细胞系MCF-7细胞增殖的分子机制,我们采用实时无标记细胞分析系统,动态监测Leptin对MCF-7细胞生长状况的影响。方法通过自动细胞分析仪Muse Cell Analyzer分析Leptin和SAHA对MCF-7细胞活力、细胞凋亡以及细胞周期产生的影响,并应用细胞凋亡抗体芯片测定Leptin和SAHA两种处理因素作用MCF-7细胞后相关凋亡通路分子表达变化的情况。结果低浓度Leptin对MCF-7细胞生长有诱导作用,其浓度为0.625 nmol·L~(-1)时作用效果最明显。细胞分析结果表明,SAHA能明显抑制Leptin诱导的MCF-7细胞增殖,经SAHA处理后MCF-7细胞活力明显下降,细胞凋亡率明显增多,细胞被大量阻滞于G_0/G_1期。凋亡抗体芯片筛查结果发现,SAHA可明显诱导MCF-7细胞内促凋亡因子Bax、Caspase-3的表达,并且与凋亡产生密切相关的TRAIL DR5、p21~(CIP1)蛋白的表达也明显上升,Claspin、Clusterin、XIAP、Survivin蛋白的表达明显下降,而Leptin对上述蛋白的表达具有相反作用。结论 Leptin、SAHA对乳腺癌ER~+细胞MCF-7的影响可能与乳腺癌细胞内凋亡通路激活有关,特别是与内源性线粒体凋亡通路引发的Caspase-3释放密切相关。     

地西他滨联合紫杉醇对耐药MCF-7细胞增殖抑制和诱导凋亡的增敏作用

摘 要 目的：本研究旨在探讨地西他滨联合紫杉醇对紫杉醇耐药细胞MCF-7的细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的影响。方法: 采用CCK-8方法检测联合用药（地西他滨+紫杉醇）或单独用药（地西他滨、紫杉醇）组不同给药浓度在24,48,72 h对耐药细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪检测不同给药组给药后48 h的细胞凋亡率。结果: CCK-8结果显示联合用药组相较于单药组对细胞增殖抑制作用显著增加（P＜0.05）,呈剂量依赖性,不同给药组的细胞增殖抑制率随着时间延长而增大;诱导细胞凋亡结果显示,48 h地西他滨单药组和紫杉醇单药组的细胞凋亡率分别是（20.4±1.98）%和（21.8±3.34）%,联合用药组的细胞凋亡率增加至（70.8±8.23）%。结论:地西他滨联合紫杉醇对紫杉醇耐药MCF-7细胞株的增殖抑制作用增加,促进耐药细胞的凋亡,地西他滨联合紫杉醇对耐药细胞株具有协同抗肿瘤作用。     

魟鱼骨素对人乳腺癌细胞系MCF-7的作用

目的 研究魟鱼骨素(RCE)对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞生长周期的影响.方法 以不同浓度RCE处理MCF-7细胞不同时间,采用MTT法检测各组MCF-7细胞增殖情况,流式细胞仪检测药物作用前后对细胞周期的变化,Western blot检测药物作用前后细胞周期素D1及p21蛋白表达.结果 RCE对MCF-7细胞增殖的抑制呈浓度依赖性和时间依赖性(P＜0.05),且存在最大抑制浓度10 μmol/L.随着RCE作用时间延长,S期细胞百分比明显增加,而G2/M期细胞比例明显减少(P＜0.05),且细胞凋亡率随药物作用时间的延长明显升高(P＜0.05).随着药物作用时间延长,MCF-7细胞中的细胞周期素D1表达降低,p21蛋白表达逐渐增高(P＜0.05).结论 RCE抑制MCF-7细胞增殖,阻滞细胞从S期向G2期转化;其机制可能与调控细胞周期蛋白表达有关.RCE可能成为未来治疗乳腺癌药物之一.     

镰刀菌色素抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖的机制

目的通过对镰刀菌(Fusarium sp JN158)产生色素的分离、结构的鉴定,以此筛选抗肿瘤的活性成分及其部分机制的研究,为抗肿瘤药物的开发提供新途径。方法采用HPLC分离色素,使用紫外、红外及核磁鉴定色素的结构,MTT的方法测定色素对MCF-7乳腺癌细胞增殖的影响,Western blot方法分析MCF-7乳腺癌细胞内CyclinD1、NF-κB、VEGF蛋白表达。结果镰刀菌产生的色素为6个峰,其中Ⅵ号峰化合物分子质量为382,分子式是C17H18O10,为花青苷类色素,通过查新表明该色素可能是一种新的化合物。该化合物能明显抑制MCF-7细胞的增殖(P<0.05)(IC50:1.1×10-2mmol·L-1;而阳性药物乌苯美司的IC50:10 mmol·L-1),并呈现浓度的依赖性,对正常人脐静脉内皮细胞(HUVEC)没有影响;与对照组比较,Ⅵ号化合物可明显抑制MCF-7细胞内CyclinD1、NF-κB、VEGF的基因表达(P<0.05或0.01)。结论Ⅵ号色素化合物能抑制MCF-7细胞的增殖,可能的机制是抑制CyclinD1、NF-κB、VEGF基因的表达,该化合物可能是一种非常有前景的抗乳腺癌活性的化合物。     

丹蒽醌对乳腺癌细胞MCF-7增殖及侵袭转移的抑制作用及其作用机制研究

目的 研究丹蒽醌对乳腺癌细胞MCF-7增殖及侵袭转移的抑制作用,并探讨其作用机制。方法 CCK-8法检测不同浓度（10、20、40、60、80、100 μmol/L）的丹蒽醌作用24、48 h对乳腺癌细胞MCF-7增殖能力的影响;Transwell实验考察丹蒽醌对乳腺癌细胞MCF-7侵袭转移能力的影响。实时荧光当量PCR（RT-qPCR）法检测c-Myc、Cyclin D1 mRNA的表达水平;Western blotting法检测p-AMPKα、ACC、c-Myc、Cyclin D1蛋白的表达水平。结果 不同浓度的丹蒽醌作用不同时间对乳腺癌细胞MCF-7增殖均具有抑制作用;20、40 μmol/L的丹蒽醌能够明显的抑制乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移,同时能够激活p-AMPKα的表达,抑制ACC、c-Myc、Cyclin D1等基因的表达,从而抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖。结论 丹蒽醌对乳腺癌细胞MCF-7增殖及侵袭转移具有抑制作用,其作用机制可能与激活AMPK信号通路抑制c-Myc、Cyclin D1等增殖相关基因表达有关。     

苯并二氢吡喃衍生物xy9902对乳腺癌细胞增殖的影响

目的:研究苯并二氢吡喃衍生物xy9902对乳腺癌细胞增殖的影响。方法:采用MTT比色法测定化合物对MCF-7细胞的增殖作用;用流式细胞术测定化合物对细胞周期的影响;用放射性配体结合法考察化合物与雌激素受体(estrogenicreceptor,ER)的亲和力。结果:低浓度的xy9902促进MCF-7细胞增殖并使细胞周期中S期细胞比例增多,高浓度对MCF-7细胞增殖有抑制作用并使S期细胞比例减少;他莫昔芬可阻断xy9902对MCF-7细胞的增殖作用;xy9902对ERα和ERβ的IC50分别为8.45×10-6和1.66×10-6mol·L-1。结论:化合物xy9902低浓度促进MCF-7细胞增殖,高浓度抑制MCF-7细胞增殖,其增殖作用机制与ERα激动有关。     

二氢青蒿素对人乳腺癌MCF-7细胞的体外抑制作用

目的研究二氢青蒿素(青蒿素生物合成中的可能前体)对肿瘤细胞增殖的影响和机制.方法采用体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞株,利用SRB法测定青蒿素和青蒿琥酯对MCF-7细胞增殖的影响,用流式细胞检定法(FCM)测定细胞周期的变化,用亚G1期含量测定法和DAPI荧光染色法观察细胞凋亡.结果二氢青蒿素能显著抑制MCF-7细胞的增殖,IC50为0.26μmol*L-1;二氢青蒿素作用后细胞周期发生明显变化,细胞被阻滞在G0+G1期,S期细胞显著减少.二氢青蒿素作用细胞24h后可轻微诱导MCF-7细胞凋亡.结论二氢青蒿素能强烈抑制MCF-7细胞增殖,将细胞阻滞于G0+G1期.     

盐酸青藤碱对乳腺癌MCF-7细胞增殖影响的初探

目的 研究盐酸青藤碱对体外培养乳腺癌MCF-7细胞增殖的作用.方法 体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定盐酸青藤碱(SIN)、5-氟尿苷(5-FUR)、SIN+5-FUR对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响.结果 SIN对人乳腺癌MCF-7细胞有增殖抑制作用,且呈浓度依赖性.SIN、5-FUR、SIN+5-FUR对MCF-7细胞的抑制强弱为:SIN＞SIN+5-FUR＞5-FUR.结论 SIN具有抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖的作用,且抑制效果强于5-FUR及SIN+5-FUR.     

香豆雌酚对乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响

<正>乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,它的发病与体内激素水平有关。植物雌激素是从植物中获取的结构与雌激素相似,并具有雌激素效能的天然化合物[1],它可以与雌激素受体(estrogen receptor,ER)结合,不同种类和不同浓度的植物雌激素与ER结合显示出不同的作用效能。香豆雌酚     

三肽化合物酪丝缬肽对人肝癌BEL-7402细胞增殖抑制作用的实验研究

目的观察三肽化合物酪丝缬肽(tyroservaltide,YSV)对体外培养人肝癌BEL7402细胞增殖的抑制作用。方法建立人肝癌BEL7402及Chang氏肝细胞体外培养体系,用BrdU法、MTT法及LDH法,观察YSV对体外培养的BEL7402细胞、Chang氏肝细胞DNA分裂指数、MTT代谢率、LDH释放量的影响,用琼脂糖凝胶电泳观察药物对体外培养BEL7402细胞DNA片段化的影响。结果YSV对BEL7402细胞作用48h、72h时药物浓度为1mg·L-1和0.1mg·L-1组与阴性对照组比较:①能显著抑制肿瘤细胞DNA的合成(P<0.01),抑制率最高为药物浓度1mg·L-1作用72h时可达32.53%,②能表现出明显抑制细胞代谢的作用(P<0.05)其中YSV0.1mg·L-1作用72h时抑制率最高为19.12%,③能增加胞浆内LDH的释放(P<0.05),YSV(1mg·L-1)作用72h时抑制率最高,为36.13%,④能诱导BEL7402肝癌细胞DNA片断化成低分子量DNA,经1%琼脂糖电泳后显示为DNALadder。对正常肝细胞系Chang氏肝仅0.1mg·L-1在48h表现出抑制DNA合成能力的作用。结论YSV抑制人肝癌BEL7402细胞的增殖,对正常肝细胞系Chang氏肝没有影响。     

NVP-BEZ235抑制肝癌细胞HepG2的增殖和迁移及机制研究

目的探究NVP-BEZ235对肝癌细胞Hep G2增殖和迁移的影响及其机制。方法 NVP-BEZ235 (0、25、50、100、250、500 nmol·L-1)处理Hep G2细胞48 h后,采用MTT法检测细胞的活性;通过形态学观察和Hoechst 33342染色法,检测NVP-BEZ235对Hep G2细胞增殖、凋亡的影响;采用划痕实验、Transwell迁移实验,检测NVP-BEZ235对Hep G2细胞迁移能力的影响;免疫印迹法检测PI3K/Akt/m TOR信号通路、上皮-间质转化(EMT)以及Six1/Ezrin信号轴等标志物的表达情况;采用免疫荧光实验检测EMT相关标志物的表达情况。结果 NVP-BEZ235可明显抑制HepG2细胞的增殖,且呈浓度依赖性;NVP-BEZ235可诱导HepG2细胞发生凋亡;NVP-BEZ235可抑制HepG2细胞的迁移能力。在NVP-BEZ235的作用下,p-Akt~(Ser473)、p-S6~(Thr389)、p-4E-BP1~(Thr37/46)的表达下调,上皮标志物E-cacdherin表达上调,间质标志物Vimentin、Snail表达下调,Six1和p-Ezrin~(Tyr353)表达下调。结论NVP-BEZ235可有效抑制HepG2细胞的增殖和迁移,其机制可能与NVP-BEZ235降低p-Akt~(Ser473)、p-S6~(Thr389)、p-4EBP1~(Thr37/46)的表达,抑制Six1/Ezrin信号轴及逆转EMT的进程有关。     

Inhibitory effect of pentalenolactone on vascular smooth muscle cell proliferation

The effect of pentalenolactone, an inhibitor of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, on rat vascular smooth muscle cell proliferation was studied. Addition of pentalenolactone together with serum to quiescent cells dose-dependently inhibited cell proliferation and DNA synthesis. This inhibition was not associated with cell death. When quiescent cells were stimulated with serum and then treated with pentalenolactone, the inhibitory effect on the DNA synthesis declined gradually. A similar result was obtained when PD 98059 (2'-amino-3'-methoxyflavone), an inhibitor of extracellular signal-regulated kinase1/2 (ERK1/2) kinase (MEK1/2), was added to the cells after serum stimulation. Pentalenolactone inhibited serum or protein kinase C activator (phorbol 12,13-dibutyrate)-induced phosphorylation of ERK1/2 and MEK1/2. In contrast, pentalenolactone had little effect on platelet-derived growth factor receptor autophosphorylation. Taken together, these results indicate that pentalenolactone inhibits vascular smooth muscle cell proliferation, and that this inhibition appears to be mediated by inhibition of the ERK1/2 cascade.