聚合酶链反应检测老年人急性白血病IgH基因重排的意义

目的为进一步了解老年人急性白血病的分子生物学特征。方法应用聚合酶链反应（PCR）检测28例老年人急性白血病免疫球蛋白重链（IgH）则基因重排结果66.7％（4／6）老年人急性淋巴细胞白血病（ALL）和40．9％（9／22）急性非淋巴细胞白血病（ANLL）存在IgH基因重排：IgH基因重排阳性老年人ANLL治疗缓解率（22．2％）显著低于IgH基因重排阴性老年人ANLL（66.7％）（P＜0.05）。结论应用PCR技术检测老年人急性白血病基因重排可帮助了解老年人白血病的分子生物学特征和预后,此方面尚需进一步研究。     

多聚酶链反应检测淋巴细胞白血病免疫球蛋白重链基因重排及其临床意义

用多聚酶链反应技术扩增42例急、慢性白血病患骨髓白血病球蛋白重链（IgH)基因重排产生的第三互补决定区（CDR-Ⅲ）DNA序列。结果显示：35例淋巴细胞白血病中25例出现IgH基因单克隆性重排（71.4%)，其中急、慢性B淋巴细胞白血病各为80%（16/20）和87.5%(7/8)及2例T、B淋巴细胞双表型白血病，另外有1例急性未分化白敌国病也出现这种重排，而5例，急性T淋巴细胞白血病和6例急性髓细胞白血病均无重排，对3例CDR-Ⅲ阳性克隆的B-ALL病例在完全缓解期进行微小残留病变检测，其中2例PCR阳性病人先后复发，1例PCR阴性病人缓解持续时间明显长于阳性病人。     

急性粒细胞白血病TCRγ基因重排的检测及其意义

①目的　探讨急性粒细胞白血病 (AML)中T细胞抗原受体γ链 (TCRγ)基因重排的发生情况及其与AML临床特征的关系。②方法　以构建的TCRγ基因片断为内参照模板 ,用聚合酶链反应 (PCR)法扩增TCRγ基因重排片断。③结果　TCRγ基因重排在AML中发生率为 2 4 .4 % ,在急性单核系白血病中发生率高达 4 8.1% ,差异有极显著性 (χ2 =12 .32 ,P <0 .0 0 1)。有TCRγ基因重排的AML病人的外周血白细胞计数高于无TCRγ基因重排的AML病人 (t=2 .5 35 ,P <0 .0 5 ) ;有TCRγ基因重排的AML病人的肝大程度大于无TCRγ基因重排的AML病人 (t=2 .35 7,P <0 .0 5 ) ;TCRγ基因重排阳性的AML病人达到第 1次缓解的时间长于TCRγ基因重排阴性的AML病人 (t=2 .5 32 ,P <0 .0 5 )。④结论　TCRγ基因重排可发生于部分髓系白血病病人 ,急性单核系白血病的发生率最高 ,这部分病人临床体征明显 ,对标准化疗不敏感 ,不易获得缓解。     

急性早幼粒细胞白血病的基因重排

1957年Hillstead首先将急性早幼粒细胞白血病(APL)从急性非淋巴细胞白血病中区分出来,予以命名,并描述其临床特征。1976年Golomb等发现APL有第17号染色体(chr.17)的长臂部分缺失,即del 17(q11～21),之后又证实这缺失部分移位至第15号染色体的长臂上,形成t(15;17)(q22;q21),当时     

PCR检测脑脊液白血病细胞IgH及TcRr基因重排意义初探

中枢神经系统白血病（CNSL）的诊断目前主要依据脑脊液穿刺细胞学检查和临床表现。由于细胞学检查的敏感性低，特异性差，当临床诊断为CNSL时，多已属疾病晚期，且常伴骨髓复发。脑脊液细胞免疫分型较上述方法敏感，但易产生假阴性，且为非特异性检查，为此，我们应用聚合酶链反应（peR）对脑脊液中白血病细胞k重链及TcRr基因重排进行了检测，并探讨其临床应用价值。1材料与方法1．l一般资料：根据全国小儿白血病诊疗方案，选择确诊急性淋巴细胞白血病患儿16例，其中男10例，女6例，年龄3－15岁，中位年龄7岁。共取脑脊液74份，5例初诊…     

系列PCR方法检测淋巴细胞白血病克隆性基因重排的选择应用

以１次、半巢式及多重ＰＣＲ方法扩增５８例淋巴细胞白血病ＩｇＨ及ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ－克隆性基因重排，结果显示：多重ＰＣＲ和Ｉ次ＰＣＲ的敏感度为１０－１０＾５水平；半巢式ＰＣＲ敏感度可达１０＾－５－１０＾－６水平。ＩｇＨ和ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ重排阳性率为６７．２％和６２．０％；半巢式ＰＣＲ检测ＩｇＨ重排阳性率为７０．７％。上述结果表明，多重ＰＣＲ可同时检测两对目的基因，适于初治病例检测，而地缓解病例的检     

急性非淋巴细胞白血病IgH,TCRr基因重排的检测

研究急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）基因分型和微小残留病（ＭＲＤ）的检测方法，选择ＩｇＨ、ＴＣＲｒ基因重排标记，用ＰＣＲ技术，对３１例ＡＮＬＬ患者进行检测，结果：ＩｇＮ阳性１２．９％，ＴＣＲｒ阳性６．４５％，表明ＡＮＬＬ中存在ＩｇＨ和ＴＣＲｒ基因重排，对ＭＲＤ的研究有一定的临床意义。     

聚合酶链反应阵列同时定量检测37种白血病融合基因

目的建立一种同时定量检测多种白血病染色体易位形成的融合基因的荧光实时定量聚合酶链反应（real-time PCR）方法,了解阵列式PCR的应用可行性。方法组合使用82条引物,设立66个PCR平行管,同时定量检测37种白血病常见融合基因形成的125种剪切体和4种白血病常见的原癌基因活化。实时定量PCR采用Eva Green荧光染料法,用ABL基因做内参,用比较Ct法进行相对定量。用此方案对31例白血病患者标本进行检测,其中6例慢性粒细胞白血病（CML）患者做治疗前后或治疗过程中不同时间的对比检测,28人次与多重巢式PCR方案的检测结果进行对照。结果我们建立的PCR阵列方案有较大的线性检测范围（10^2～10^8拷贝／μl）,有较高的检测灵敏度（232拷贝／μl）和精确性;在31例患者标本的检测中,共检测到14种融合基因类型和所有4种原癌基因活化;检测到一例同时有5种融合基因阳性和两种原癌基因活化的患者;和多重巢式PCR检测结果的对比显示本方案灵敏度略低于巢式PCR,但差异没有统计学意义（P=0．009）;6例CML患者标本的检测显示治疗后患者标本中BCR／ABL融合基因及WT1和EVI1原癌基因表达量均呈现不同程度的降低,与临床治疗情况符合;基因定量分析的结果表明本方案能够对常见白血病融合基因和癌基因活化情况进行定量分析,在白血病的诊断及疗效监测中有应用价值。结论PCR阵列法同时定量检测多种白血病融合基因适于白血病初诊患者融合基因的筛查及微小残留病（MRD）的检测,对于检测同时有多种融合基因存在的病例及治疗过程中融合基因的变异情况更为有用。     

巢式聚合酶链反应对白血病融合基因的检测分析

目的:探讨并分析巢式聚合酶链反应在白血病融合基因中的检测与应用。方法:回顾性分析71例白血病患者的临床资料,运用巢式聚合酶链反应,检测患者包括bcr/abl、PML/RARa、AML/ETO所有融合基因融和变异的引物阳性率。结果:38例慢性粒细胞白血病患者,bcr/abl融合基因的总阳性率为83.4%。12例急性早幼粒细胞白血病患者,PML/RARa融合基因的总阳性率为57.1%。6例急性粒细胞白血病M2患者,AML/ETO总阳性率为27.9%。结论:巢式聚合酶链反应具有较高准确性、灵敏性、简便性,为临床治疗提供较高的参考价值。     

应用PCR技术检测急性淋巴细胞白血病T细胞受体γ基因重排

目的寻找可作为急性淋巴细胞白血病恶性克隆的基因标记。方法应用ＰＣＲ技术扩增Ｔ细胞受体γ链基因重排，选用四种限制性核酸内切酶消化扩增产物。结果初诊或复发１０例急性淋巴细胞白血病病人中，有５例出现清晰扩增带，约４００ｂｐ，扩增物经四种限制性核酸内切酶消化后形成的限制性核酸内切酶图谱各具特色；５例处于缓解期的急性淋巴细胞白血病病人，有４例被检出清晰扩增带。结论应用ＰＣＲ扩术扩增Ｔ细胞受体γ链基因重排，能用于检测急性淋巴细胞白血病微小残留病，如果结合限制性核酸内切酶图谱分析，则能用于研究白血病细胞的克隆演化     

老年人急性白血病T细胞受体VγI-Jγ基因重排分析

OBJECTIVE: To obtain insight into the molecular mechanism of acute leukemia in elderly patients in relation to the clinical features of the disease. METHODS: DNA specimens were obtained from 34 elderly patients with acute nonlymphoblastic leukemia (ANLL), 9 elderly patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) and 10 healthy blood donors. Polymerase chain reaction (PCR) coupled with single-strand conformation polymorphism (SSCP) was performed to detect T cell receptor (TCR) V gamma I-J gamma gene rearrangement. RESULTS: In the 34 elderly ANLL patients, 47.1% (16/34) were found with TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement, showing a higher rate of the rearrangement than in younger ANLL patients (P<0.025). TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement was identified in 7 (77.8%) of the 9 elderly patients with ALL, and 3 of the identified cases had oligoclonal/ subclonal rearrangement, suggesting a higher rate of oligoclonal/subclonal rearrangement in elderly ALL patients than in younger ALL patients (P<0.01). None of the blood donors was found with TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement. The complete remission rate was lower in the elderly ANLL patient with TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement than in those without (P<0.05). CONCLUSION: The detection of TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement can be of value in assessing the therapeutic effect and making prognostic prediction in elderly patients with acute leukemia.     

急性淋巴细胞白血病患者缓解期骨髓涂片PCR检测Ig基因重…

应用多聚酶链反应技术检测１５例急性淋巴细胞白血病患者缓解期骨髓涂片中Ｉｇ基因重排，其中有５例（３３％）检测出残留白血病细胞。回顾性分析结果表明，Ｉｇ基因重排患者均在后一次完全缓解期（ＣＲ）后２￣３个月出现白血病临床复发。ＰＣＲ技术检测微量残留白血病细胞有助于预测白血病复发和指导白血病的化疗。     

急性髓系白血病M2b型患者AML1与MTG8基因重排融合的研究

作者研究了４１例急性聚系白血病（ＡＭＬ）Ｍ２ｂ患者ＡＭＬ１和ＭＴＧ８基因重排融合情况。利用Ｓｏｕｒｔｅｒｎ印迷杂交技术，发现８０％（２４／３０）患者有ＡＭＬ１基因重排，７８．６％（２２／２８）患者有ＭＴＧ８重百。使用逆转录－多聚酶链反应，在３７例ＡＭＬ１－Ｍ２ｂ患者中均检出ＡＭＬ１／ＭＴＧ８融全基因。     

用DNA指纹技术检测儿童急性粒细胞白血病的基因重排

应用ＤＮＡ指纹分析技术检测儿童急性粒细胞白血病的基因重排。用ＬＥ１１．８，ＭＹＯ和Ｍ１３探针，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法检测１２例儿童急性粒细胞白血病患者的外周血或骨髓细胞的基因重排。发现初治或复发与完全缓解时的ＤＮＡ指纹图相比，谱带有增加或减少。结论：急性粒细胞白血病患儿的白血病细胞存在基因重排；ＤＮＡ指纹可以区别白血病细胞和正常细胞；ＤＮＡ指纹技术可以检测到残留的少量白知病细胞。     

老年人急性白血病T细胞受体VγI-Jγ基因重排分析

目的为研究老年人急性白血病分子生物学特点及临床意义。方法提取34例老年人急性非淋巴细胞白血病(ANLL)、9例老年人急性淋巴细胞白血病(ALL)及10名正常献血员DNA标本,应用PCR技术扩增TCRVγI-Jγ基因重排,对阳性的PCR产物进行SSCP分析。结果34例老年人ANLL中有16例(47.1%)发现TCRVγI-Jγ基因重排,老年人ANLL TCRVγI-Jγ基因重排检测阳性率显著高于非老年人ANLL组(P<0.025)。9例老年人ALL中有7例(77.8%)发现TCRVγI-Jγ基因重排,其中3例(33.3%)存在寡/亚克隆重排,老年人ALL寡/亚克隆重排阳性率显著高于非老年人ALL组(P<0.05)。10例正常献血员PCR技术扩增TCRVγI-Jγ基因重排均为阴性。TCRVγI-Jγ基因重排阳性老年人ANLL完全缓解率为25.0%(4/16),显著低于重排阴性老年人ANLL组(61.1%)(P<0.05)。结论应用PCR/SSCP方法分析老年人急性白血病TCRγ重排可作为疗效和预后判断的新指标。老年人急性白血病寡/亚克隆重排检测阳性率显著高于非老年人组可能是导致其疗效差的一个重要因素。     

儿童急性淋巴细胞性白血病IgH基因和TCR基因重排的研究

采用PCR或巢式PCR方法对71例未治疗的急性淋巴细胞性白血病（ALL）患儿骨髓样本的免疫球蛋白重链基因（IgH）和T细胞受体基因（TCR）进行了克隆性重排检测，结果显示在52例B系ALL及19例T系ALL中分别存在82．7％（43例）和15．8％（3例）的IgHCDRⅢ区域重排，而TCRVδ2Dδ3基因重排见于32．7％的B系ALL（17例）和63．2％的T系ALL（12例），二种基因重排在儿童ALL的覆盖面达到88．7％（63例），此结果提示IgHCDRⅢ和TCRVδ2Dδ3基因可作为监测儿童ALL的标志基因；采有相同方法对完全缓解期患儿的67份脑脊液标本进行了检测，结果显示9例存在IgHCDRⅢ基因重排，4例存在TCRVδ2Dδ3基因重排（与骨髓标本重排类型一致），提示采用PCR技术对ALL患儿CSF标本进行IgH和Vδ2Dδ3基因重排的检测对早期诊断中枢神经系统白血病（CNSL）具有较大价值；采用有限稀释法对完全缓解期的儿童ALL病例骨髓样本进行上述二种基因重排的定量分析，结果提示对儿童ALL进行微小残留病（MRD）的持续追踪监测可指导化疗方法的选择，观察治疗效果并预测预后。     

非霍奇金淋巴瘤IgH基因重排分析及其意义

目的 探讨免疫球蛋白重链(IgH)基因重排的检测在非霍奇金淋巴瘤(NHL)中的诊断价值.方法 用半巢式和混合聚合酶链式反应(PCR)方法,联合使用IgH FR3A、FR2A、FR1家族特异性引物Mixtures(VH1、VH2、VH3)检测44例B-NHL患者、1例未分型淋巴瘤、15例T-NHL患者和5例淋巴结反应性增生患者IgH基因克隆性重排情况.结果 ①采用FR3A引物,44例B-NHL有37例出现克隆性IgH基因重排,检测率为84%(37/44);采用FR2A引物,有27例出现克隆性IgH基因重排,检测率为61% (27/44);采用FR1家族特异性引物Mixtures(VH1、VH2、VH3)与J区(JHb、JHc)引物,有34、33例出现克隆性IgH基因重排,检测率为77%、75% (34/44、33/44);结合FR3A、FR2A、FR1家族特异性引物Mixtures(VH1、VH2、VH3),总检测率为95%(42/44).②15例T-NHL有4例出现克隆性IgH基因重排,而5例LRH未出现克隆性IgH基因重排.③1例免疫组化未分型的NHL经PCR检测后明确了分型,为B细胞性淋巴瘤.结论 联合采用多对引物可提高检测阳性率;IgH基因克隆性重排检测对鉴别B细胞淋巴瘤和淋巴结反应性增生以及T细胞淋巴瘤有重要意义.     

急性白血病钙素基因甲基化的PCR检测

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了１０例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）和２２例急性随细胞白血病（ＡＭＬ）降钙素（ＣＴ）基因的甲基化程度。结果表明，７例ＡＩＬ与１６例ＡＭＬ的ＣＴ基因都发生了高度甲基化。临床完全缓解的３例ＡＭＬ和２例ＡＩＬ中有１例ＡＬＬ为阳性，另有１例阴性的ＡＭＬ于１个月后转为阳性，随后出现临床复发。     

白血病患者重排基因检测的临床意义

白血病患者重排基因检测的临床意义徐兵周淑芸孙竞王时书免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）或Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排可作为淋巴细胞系克隆的标志。本研究采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，检测了９０例急性白血病患者ＩｇＨ／和ＴＣＲ重排基因，并对部分病例进行追踪检测，...     

急性白血病细胞免疫球蛋白重链和T细胞受体r基因重排及意义

急性白血病是一组异质性较高的恶性血液病，通过T细胞受体正（TCRr）基因和免疫球蛋白重链（IgH）基因重排检测其白血病细胞，在鉴别T或B一急性淋巴细胞白血病（ALL）有一定价值［’1。对急性白血病细胞来源、分化发育，对分型、监测微小残留细胞及判断预后都有重要意义。！材料与方法1．l病例：27例ALL，l例T细胞淋巴瘤（T－LL），5例急性粒细胞白血病（AML），共33例。男ZI例，女12例；年龄18～53岁。均根据FAB标准确诊和分型。采用间接免疫荧光技术［’］，用CD。、CD。、CD。、CD。、CDI。、CD19、CD。。、OKT。单克…