人肝癌组织中黄曲霉毒素和肝炎病毒基因检测分析

以肝细胞场（ＨＣＣ）患者手术切除标本为研究材料，采用高效液相色谱荧光法检测组织中的黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１），嵌套式多聚酶链反应技术检测组织中的ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。在６９．２％（１８／２６例）的ＨＣＣ患者中检出了３．６５－８９．０６ｎｇ不等的ＡＦＢ１／ｇ肝组织；ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ检出率分别为９０．５％（５７／６３例）和１２．７％（８／６３例）。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶＤＮＡ重叠检出率为６１．５％（１６／２６例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为７．９％（５／６３例），４例ＨＣＣ患者重叠检出了ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ；同步检测对照组５例，无１例出现这种情况。结果表明，上述３种因素均与人类肝癌密切相关，并且可能存在协同致癌效应。     

54例HBsAg阴性慢性肝炎乙肝病毒感染的分析

用聚合酶链反应方法检测５４例乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阴性的慢性肝炎患者血清中的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，结果３１例阳性（５７．４％）。其中单项抗─ＨＢｃ（＋）１０例，检出９例，ＨＢＶ标志物三抗体阳性５例中，检出１例；ＨＢＶ标志物全阴性１４例中检出９例。提示慢性肝炎即使ＨＢｓＡｇ阴性，仍有可能是ＨＢＶ感染，尤其是抗─ＨＢｃ（＋）者。     

肝炎患者TTV感染情况及部分基因序列分析的研究

目的 新发现的ＤＮＡ病毒（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｌ ｖｉｒｕｓ简称ＴＴＶ）被进行了ＴＴＶ ＤＮＡ的检测。方法 利用巢式ＰＣＲ方法扩增ＴＴＶ基因,并对两例ＴＴＶ分离株部分基因进行克隆和序列分析。结果：１０８中有２４例ＴＴＶ ＤＮＡ阳性,阳性率为２２．２％;在非甲～非庚型为中ＴＴＶ的阳性率为３４．６％（９／２６）;甲型肝炎病例中ＴＴＶ ＤＮＡ的阳性率为９．５％（１／１１）;乙型肝     

重型病毒性肝炎经输血传播病毒感染状况调查及其临床意义

目的：调查重型病毒性肝炎经输血传播病毒的感染状况。方法：设计ＴＴＶ基因的特异性引物,采用巢式ＰＣＲ法对３７例重型肝炎进行血清中ＴＴＶ ＤＮＡ的检测,并对ＴＴＶ ＤＮＡ阳性病例进行临床资料分析。结果：３７例重型肝炎中９例血清ＴＴＶ ＤＮＡ阳性（２４．３％）,其中７例重叠感染ＨＢＶ,１例重叠感染ＨＣＶ,１例为单纯ＴＴＶ感染,９例中急性重型肝炎,亚急性重型肝炎１例,亚急性重型肝炎６例,慢性重型肝炎２例;     

湖南地区输血传播肝炎病毒感染者的初步观察

为观察湖南地区输血传播病毒（ＴＴＶ）的感染情况,合成了特异性引物,采用巢式聚合酶链反应两次扩增血清ＴＴＶＤＮＡ。共检测７０例肝炎病人血清和４３例献血员血清。结果显示：在３８例血清ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ阴性的病人中,１０例ＴＴＶＤＮＡ阳性（２６．３％）,ＡＬＴ平均为（４５２±２３６）Ｕ·Ｌ＾－１;３２例血清甲－戊型和庚型肝炎标志物的阴性的病人中,１２例ＴＴＶＤＮＡ阳性（３７．５％）     

HBV感染者重叠感染TTV的研究

目的 研究乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者重叠感染输血传播病毒（ＴＴＶ）的状况。方法 采用斑点杂交法检测乙型肝炎病毒感染者血清ＴＴＶ ＤＮＡ。结果 在１６９例乙型肝炎病毒感染者中检出血清ＴＴＶ ＤＮＡ阳性者２３例,阳性率１３．６１％。其中,急性乙型肝炎患者组阳性率１３．４６％,慢性乙型肝炎患者组和阳性率１５．０７％,ＨＢｓＡｇ携带者组阳性率１１．３６％,三者之间的差异无统计学意义Ｐ〉０．０５。结论 在     

经输血传播病毒的前瞻性调查

目的了解我国供血员、受血者中经输血传播病毒（ＴＴＶ）感染率,及经输血传播ＴＴＶ的发生率。方法对１３０例输血者进行ＴＴＶ以及ＨＢＶ和ＨＣＶ血清标志物检测,其相应的供血者也检查ＴＴＶ。结果３４０例供血员中有３６例（１０．６％）可检测到ＴＴＶ－ＤＮＡ。１３０例受血者输血前有１１例（８．５％）ＴＴＶ阳性,其余１１９例输血后有１８例ＴＴＶ转为阳性,在他们的供血中至少可查到一份ＴＴＶ阳性。４６例输血后肝炎病毒感染者中,其中有４５例为ＨＣＶ感染（包括７例与ＴＴＶ混合感染）,２例为ＨＢＶ感染（包括与ＨＣＶ、ＴＴＶ混合感染各１例）。ＴＴＶ与ＨＢＶ混合感染以及７例ＴＴＶ与ＨＣＶ混合感染中有３例的受血者ＡＬＴ＞９０Ｕ／Ｌ,但是１０例单纯ＴＴＶ感染者,仅有２例伴有轻微的ＡＬＴ增高。结论供血员及住院病人中有较高的ＴＴＶ感染率,单纯ＴＴＶ感染与ＡＬＴ显著升高似乎并无关联。     

武汉地区献血员血清TTV等几种肝炎相关病毒的基因检测

了解武汉地区不同献血员血清ＴＴＶ感染特点及其与其它几种肝炎相关病毒感染之间的关系。方法采用ＰＣＲ及巢式ＰＣＲ对５４例武汉市城区义务献血员及７４例既往乡村献血者分别进行血清ＴＴＶ ＤＮＡ,ＨＣＶ ＲＮＡ及ＨＧＶ ＲＮＡ等检测。结果：ＴＴＶ ＤＮＡ、ＨＣＶ ＲＮＡ及ＨＧＶ ＲＮＡ指标阳性率在既 往乡村个体献血员为４３．２％、２３．０％与２．７％,城区义务献血员为５．６％、１．９％与１．９％,前者ＴＴＶ     

湖南地区输血传播肝炎病毒感染者的初步观察

为观察湖南地区输血传播病毒（ＴＴＶ）的感染情况,合成了特异性引物,采用巢式聚合酶链反应两次扩增血清ＴＴＶＤＮＡ。共检测７０例肝炎病人血清和４３例献血员血清。结果显示：在３８例血清ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ阴性的病人中,１０例ＴＴＶＤＮＡ阳性（２６３％）,ＡＬＴ平均为（４５２±２３６）Ｕ·Ｌ－１;３２例血清甲～戊型和庚型肝炎标志物阴性的病人中,１２例ＴＴＶＤＮＡ阳性（３７５％）,ＡＬＴ平均为（５８２±２５９）Ｕ·Ｌ－１;４３例献血员中,４例ＴＴＶＤＮＡ阳性（９３％）,ＡＬＴ在正常范围。提示湖南地区首次发现ＴＴＶ感染者。本资料与日本首次报道者相近;不能排除ＴＴＶ感染与ＡＬＴ升高的关系。     

乙肝病毒DNA阳性患儿家族成员的调查

本文对１４例ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性患儿的家庭成员２３人进行血清学检测，并收集２２例正常人血清为对照组。２３例家庭成员中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率为３４．８％（８／２３），明显高于对照组４．５％（１／２２），Ｐ＜０．０１。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率在患儿的双亲为４０％（４／１０），而在其祖父母辈为３３．３３％（３／９），二者无显著差异（Ｐ＞０．０５）。提示乙肝病毒感染的家庭聚集性存在双亲或祖父母辈与患儿间的易感性相似。     

生物素探针分子杂交试验检测乙型肝炎患者血清HBV－DNA的意义

用生物素探针分子杂交试验检测６１７例临床各类型乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，总阳性率为３５．６６％（２２０／６１７），各临床类型间无差异性。ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率：在ＨＢｅＡｇ阳性患者中为６７．０２％（１８７／２７９），而ＨＢｅＡｇ阴性患者中为９．７６％（３３／３３８）；在ＨＢｓＡｇ阳性患者中为３９．１５％（２１１／５３９），而ＨＢｓＡｇ阴性患者中为１１．５４％（９／７８）；抗－ＨＢｅ阳性者为８．１７％（１７／２０８）；抗－ＨＢｓ阳性者为１２．５％（５／４０）。２３例非乙型肝炎患者均未检出血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。检测结果表明本方法是一种快速、简便、特异、敏感、无同位素污染的方法。     

PCR检测乙肝病人肝组织和血中HBVDNA

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合地高辛素标记的乙肝病毒ＤＮＡ探针（ＨＢＶＤＮＡ－Ｄｉｇ）杂交技术检测了４９份乙型肝炎患者的肝组织标本和４６份血清标本中的ＨＢＶＤＮＡ。结果表明：ＰＣＲ检出乙肝病人肝组织和血清中ＨＢＶＤＮＡ阳性率比斑点杂交高（Ｐ＜０．０５）。在２１例同时检测了肝组织和血清中ＨＢＶＤＮＡ的病人中，肝组织ＨＢＶＤＮＡ阳性率为５７．１％（１２／２１）；血清阳性率为６１．３％（１３／２１）；两者总阳性率为８０．９％（１７／２１），说明用ＰＣＲ同时检测肝组织和血中ＨＢＶＤＮＡ，可明显提高ＨＢＶＤＮＡ的检出率。     

不同人群输血后肝炎相关病毒检测及临床意义探讨

目的：对不同人群进行ＴＴＶＤＮＡ检测并初步探讨了ＴＴＶ的感染状况及临床意义，方法：采用斑点杂交方法检测几组不同人群共９２例血清ＴＴＶＤＮＡ。结果：非甲～戊型肝炎患者组１８例中检出ＴＴＶＤＮＡ阳性（３８．９％），７例其中２例为亚重型肝炎，非甲非乙型肝炎患者组１２例中检出ＴＴＶＤＮＡ阳性３例（２５．０％），乙肝患者组４０例中检出ＴＴＶＤＮＡ阳性９例（２２．５％）正常献血员组１７例中检出ＴＴＶＤＮＡ阳性     

HBV DNA在HBsAg阴性的原发性胆管细胞性肝癌石蜡包埋肝组织中的检出

对２４例酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）ＨＢｓＡｇ阴性的原发性胆管细胞性肝癌的石蜡包埋肝组织，应用ＰＣＲ－ＥＢ法检测了乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，并与ＥＬＩＳＡ法检测的血清免疫学标志物（乙肝５项：ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ）结果进行对比。结果显示血清学乙肝５项均阴性的及ＨＢｓＡｇ阴性但其它４项中至少有１项阳性的胆管细胞性肝癌石蜡包埋肝组织中，ＨＢＶＤＮＡ阳性检出率分别为３８．９％和４５．８％，证实ＨＢｓＡｇ血清学阴性者肝组织中仍有ＨＢＶＤＮＡ存在     

聚合酶链反应和原位杂交检测成人肾炎肾组织HBV DNA

目的 探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染与成人肾小球肾炎（肾炎）之间的联系,及研究ＨＢＶ对肾脏的致病作用。方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和原位杂交（ＩＳＨ）技术检测３９例血清ＨＢＶ标志物阳性的成人肾有活检组织ＨＢＶ ＤＮＡ的存在状态。结果 用ＰＣＲ法测定肾活检组织抽提物ＨＢＶ ＤＮＡ１７／３９例阳性（４３．６％）,其中５例ＰＣＲ阳性者再且地高辛素标记的ＨＢＶ ＤＮＡ探针原位杂交,测定肾活检石腊包埋切     

防止角膜移植传播乙型肝炎病毒的研究

为了检测角膜有无ＨＢＶ－ＤＮＡ，防止角膜移植传播乙型肝炎病毒（ＨＢＶ），应用ＰＣＲ技术对２９例乙型肝炎、乙型肝炎病毒感染患者和１０例健康人角膜的ＨＢＶ－ＤＮＡ进行了检测。同时对１１例乙型肝炎病毒感染患者的结膜和２６例乙型肝炎患者的泪液也进行了检测。结果ＨＢｓＡｇ阳性的１６例角膜有１１例（６８．７％）检测到ＨＢＶ－ＤＮＡ，１３例ＨＢｓＡｇ阴性的角膜有４只（３６．６％）ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，１０例健康人角膜无１例ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性。１１例乙型肝炎病毒感染患者的结膜中，有７例（６３．６％）ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，２６例乙型肝炎患者的泪液中，有１４例（５３．８％）检测到ＨＢＶ－ＤＮＡ。说明角膜也是ＨＢＶ的贮存场地，临床不能应用乙型肝炎病毒感染者的角膜作供体行角膜移植术     

人肝细胞癌及癌旁肝组织HBV-DNA的原位杂交检测

①目的探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ与增生结节和肝癌的关系。②方法应用原位杂交技术检测５８例肝细胞癌（ＨＣＣ）及癌旁组织中ＨＢＶ－ＤＮＡ的表达。③结果肝细胞癌及癌旁组织中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为３７．９％（２２／５８）和４４．８％（２６／５８），差异无显著性（χ２＝０．５６，Ｐ＞０．０５）。ＨＢＶ－ＤＮＡ在癌旁组织中主要位于胞浆内，而肝癌组织中以胞核定位为主。２２例ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性的ＨＣＣ中，１６例ＨＣＣ及癌旁组织均阳性，６例ＨＣＣ单独阳性，两者差异有显著性（χ２＝９．０９，Ｐ＜０．０１）。６例癌旁增生结节中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性（６／２７），以胞核定位为主。④结论ＨＢＶ感染与ＨＣＣ存在密切关系。癌周组织ＨＢＶ－ＤＮＡ以复制型为主，癌组织内ＨＢＶ－ＤＮＡ以整合型为主；癌旁增生结节为ＨＣＣ的癌前病变。     

广西慢性肝病病人中TTV感染及致病性研究

目的 探讨ＴＴＶ感染在广西慢性肝病病人中的致病作用,方法：用套式ＰＣＲ对确诊的原发性肝癌、慢性肝病病人并以非肝病病人作为对照进行了ＴＴＶＤＮＡ检测。结果 原发性肝癌病人、非甲一庚型肝炎病、慢性乙肝轻度、中度、重度、肝硬变、重症肝炎病人及对照组ＴＴＶＮＤＡ检出率分别为：２０．４５％（１８／８８）,９．０９％（１／１１）,８．３３％（１／１２）,５．８８（４／１７）,９．０８％（１／１１）,２０．０％     

肝细胞癌和其它慢性肝病HCV HBV感染比较分析

对１２８例有病理诊断依据的肝细胞场（ＨＣＣ）、４７例慢迁肝（ＣＰＨ）、１０５例慢活肝（ＣＡＨ）、４６例肝硬化（ＬＣ）．采用嵌套式ＰＣＲ技术检测其血标本中的丙型肝炎病毒（ＨＣｖ）ＲＮＡ和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＩＩＡ，对这两种病毒的血清学标志也进行了研究。结果：在ＨＣＣ组。ＨＣＶＲＮＡ１４．１％阳性，ＨＢＶＤＮＡ７ｉ．３％阳性。ＣＰＨ，ＣＡＨ，ＬＣ和ＨＣＣ的ＨＢＶ感染率均在９０％左右，而ＨＣＶ感染率则分别为８．５％、９．５％、１７．４％和１９．５％，显示ＨＣＶ感染率随肝病严重程度的增加而有增加的趋势；晚期肝病组的ＨＣＶ感染率（１９．０％）显著高于慢性肝炎组（９．２％，Ｐ＜０．０５）。提示ＨＣＶ感染后经过慢性肝炎、肝硬化发展为ＨＣＣ可能是一个逐渐演进的病理过程。ＨＣＶ，ＨＢＶ重叠感染率。ＨＣＣ组高于ＣＰＨ，ＣＡＨ，而与ＬＣ相近，显示ＨＣＶ重叠感染在原有ＨＢＶ感染的基础上促进病变向着迁延化、慢性化，进而向着肝硬化、ＨＣＣ方向发展。     

应用聚合酶链反应进一步探讨原发性肝癌与HBV,HCV感染的关系

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测原发性肝癌（ＰＨＣ）及肝硬化（ＬＣ）患者血中ＨＢＶ－ＤＮＡ及ＨＣＶ－ＲＮＡ，同时检测血中乙肝５项标志及抗－ＨＣＶ。结果５６例ＰＨＣ中，ＨＢＶ５项标志阳性者４３例（７６．７８％），ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者４２例（７５．００％），两种方法联合应用阳性率为４９例（８７．５％）；其中３４例检测ＨＣＡ－ＲＮＡ阳性者８例（２３．５３％）。６２例ＬＣ中，ＨＢＶ５项标志阳性者３５例（５６．４５％），ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者３８例（６１．２９％），二者联合应用阳性数为４５例（７２．５８％），其中３４例检测ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性数为９例（２３．６８％）。ＰＨＣ组ＨＢＶ感染率显著高于ＬＣ组（Ｐ＜０．０５），ＨＣＶ感染率两组差异无显著性（Ｐ＜０．０５）。并对ＨＢＶ、ＨＣＶ感染与ＬＣ、ＰＨＣ的发生发展作进一步讨论。