磷脂酰胆碱,磷脂酰乙醇胺的柱层析分离

本文报道以薄层层析为先导,用柱层析法分离磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)。实验表明利用普通的柱层析法分离PC和PE是可行的,为不用昂贵仪器设备分离制备不同磷脂纯品提供了可能性。     

元首口服液对家兔血清磷脂酰胆碱：胆固醇酰基转移酶活性…

用元首口服液养家兔１个月，测定其前后血清总胆固醇、游高胆固醇、高密度脂及蛋白胆固醇的含量，结果表明，元首口服液有明显提高家兔血清中的磷脂酰胆碱；胆固醇酰基转移酶活性，提高表ＨＤＬ－Ｃ含量。     

大鼠肝CTP:磷酸胆碱胞苷酰转移酶的部分纯化及其特性

介绍一种部分纯化磷脂酰胆碱生物合成的关键酶——CTP:磷酸胆碱胞苷酰转移酶(CT)的方法。应用盐析、DEAE-纤维素、磷酸-纤维素及CTP-聚琼脂糖柱层析可将大鼠肝胞液中的CT纯化100倍以上。对部分纯化CT的性质进行了研究。在肝胞液中及经离子交换层析后CT相当稳定,但在进一步纯化过程中,其活性丧失迅速。鼠肝总磷脂及油酸可激活CT且使其聚合,CT聚合物可被辛基-葡萄糖苷(一种温和的去污剂)解聚,且保留80%酶活性。用纯化磷脂观察,发现磷脂酰丝氨酸是鼠肝总磷脂中起主要作用的CT激活物。用CT常规的底物CTP的类似物dCTP、CDP、dCDP、CMP及dCMP代替或与CTP混合实验,发现dCTP是比CTP更好的底物,CDP、dCDP对以CTP或dCTP为底物时的酶活性有抑制作用,而CMP、dCMP无抑制或激活作用。实验结果提示分子中糖的2’-OH并非CT底物所必需,而和胞苷相连的三个磷酸基则不可缺少。     

多烯磷脂酰胆碱治疗乙醇性脂肪肝24例疗效观察

目的观察多烯磷脂酰胆碱治疗乙醇性脂肪肝的临床疗效。方法48例乙醇性脂肪肝患者均戒酒,随机分为治疗组24例和对照组24例。治疗组给予多烯磷脂酰胆碱注射液465 mg/d,对照组用复方甘草酸苷注射液80 mL/d,疗程均为4周。结果治疗组患者临床症状明显消失,肝功能及B超检查明显好转,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论多烯磷脂酰胆碱能改善乙醇性脂肪肝患者临床症状、肝功能,疗效优于复方甘草酸苷。     

酸枣仁中磷脂酰胆碱含量的HPLC法测定

本文采用HPLC法对酸枣仁中的磷脂酰胆碱的含量进行了测定。色普条件:硅胶色谱柱,流动相为正己烷—异丙醇—醋酸盐缓冲液(PH5.6,7.7:8:1),紫外检测波长206nm,样品中各组分分离较好,平均回收率103.17%,变异系数1.86%。     

磷脂酰胆碱抗氧化作用的研究

磷脂酰胆碱500mg/kg灌胃20日可使O_3环境中的小鼠红细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性显著增强,血浆丙二醛(MDA)含量显著降低,说明磷脂酰胆碱具有抗氧化作用.     

高效液相法测定大豆磷脂中的磷脂酰胆碱

介绍了一种用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）快速准确测定大豆磷脂中主要活性成分磷脂胆碱（ＰＣ）的新方法。采用硅胶色谱柱,以正己烷－异丙醇－磷酸－水为流动相,紫外检测器在２０６ｎｍ下检测,样品中ＰＣ和其它磷脂组分完全分离,ＰＣ出峰时间短（〈１０ｍｉｎ）,样品经溶解后可直接进样,不需任何预处理。     

血管活性肠肽对肺组织CTP：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性的影响

OBJECTIVE: To investigate the effect of vasoactive intestinal peptide(VIP) on the microsomal CTP: phosphorylcholine cytidylyltransferase activity of cultured lung explants and its mechanisms. METHODS: The CDP-[M-14 C] choline content reflecting the microsomal CTP: phosphorylcholine cytidylyltransferase activity of cultured lung explants was measured with liquid scintillation. RESULTS: 1. VIP increased the microsomal CTP: phosphorylcholine cytidylyltransferase activity of cultured lung explants in a dose-dependence manner and in a time-dependence fashion; 2. The effect of 3 x 10(-7) mol.L-1 VIP on the microsomal CTP: phosphorylcholine cytidylyltransferase activity of cultured lung explants was inhibited by H-7, a protein kinase C(PKC) inhibitor and W-7, a calmodulin antagonist respectively. CONCLUSION: VIP in the lung may be one of the key regulators involved in the synthesis of phosphatidylcholine mediated by PKC and calmodulin.     

水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物的急性毒性研究

目的　了解水飞蓟宾 -磷脂酰胆碱复合物 (SLC)的急性毒性资料 ,为亚急性毒性、致突变试验及临床应用剂量提供依据。方法　将小白鼠随机分组 ,按不同的剂量、相同的容积以灌胃的方式给药 ,记录结果 ,计算LD50 值和 95 %的平均可信限。结果　用SLC给小鼠灌胃给药的LD50 值为 4 4 0 6 .0mg·kg-1,其 95 %可信限为 4 4 0 6 .0± 193.8mg·kg-1。结论　实验测得的SLC对小鼠经灌胃方式给药的LD50 值很大 ,说明SLC是一种毒性很低的物质     

磷脂酰胆碱拮抗自由基致小鼠微核作用的研究

应用小鼠周血正染红细胞（ＮＣＥ）微核实验，评价臭氧产生的自由基对细胞遗传毒理效应及其磷脂酰胆碱对其遗传的损伤的保护作用。实验结果显示：臭氧可使小鼠ＮＣＥ微核率明显增高，经统计学处理有显著性差异而磷脂酰胆碱对自由基诱导微核作用有明显的抑制。提示：磷脂酰胆碱具有拮抗自由基造成的ＤＮＡ氧化损伤作用。     

氧化型低密度脂蛋白对人THP1细胞 Notch1表达及分泌细胞因子的影响

探讨氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)刺激人单核细胞株THP1对Notch1表达及分泌细胞因子的影响探讨对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)发病的可能作用。方法：将人单核细胞株（THP1）经氟波酯 （P M A）刺激转化为巨噬细胞后给予不同浓度ox-LDL刺激,相差显微镜动态观察细胞形态变化,RT-PCR检测不同浓度ox-LDL刺激后细胞表面Notch1 mRNA水平,用Western-blot测定Notch1蛋白表达,用ELISA法测定上清液中血管细胞黏附分子1（vascular cell adhesive molecule1,VCAM-1）和单核细胞趋化分子1（Monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）浓度。结果：ox-LDL诱导48h后巨噬细胞发生树突样细胞形态改变;与对照组相比,OX-LDL能刺激巨噬细胞表面Notch1蛋白和mRNA表达升高(P<0．05),培养上清液中VCAM-1和MCP-1的表达升高(P<0．05),在50ng/ml浓度下诱导最佳。结论：ox-LDL能够刺激THP1细胞诱导Notch1表达增加,同时能增加动脉粥样硬化相关细胞因子VCAM-1和MCP-1的分泌,ox—LDL致动脉粥样硬化作用可能部分由Notch1介导。     

氧化型低密度脂蛋白对单核巨噬细胞株U937表达Siglec-1蛋白及分泌细胞因子的影响

目的探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)的致动脉粥样硬化(AS)作用是否通过上调单核巨噬细胞表面Siglec-1的表达发挥作用。方法制备ox-LDL并用不同浓度刺激人巨噬细胞株U937,48h后收集细胞和培养上清液,分别用流式细胞仪和RT-PCR检测不同浓度ox-LDL刺激后Siglec-1蛋白和Siglec-1mRNA的表达水平,并用ELISA试剂盒测定培养上清液中MIP-1α、MCP-1和IL-8的浓度。结果与对照组相比,ox-LDL能刺激U937细胞表面Siglec-1蛋白和Siglec-1mRNA表达升高(P<0.01),培养上清液中MIP-1α、MCP-1和IL-8的表达升高(P<0.01),并呈浓度依赖性。结论ox-LDL的致AS作用可能部分是通过上调单核巨噬细胞表面Siglec-1蛋白表达而活化巨噬细胞,分泌细胞因子和趋化因子诱导更多巨噬细胞和淋巴细胞的活化参与粥样斑块中的炎症反应。     

Effects of Kupffer cells stimulated by triglyceride and very low-density lipoprotein on proliferation of rat hepatic stellate cells

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ,ｖｅｒｙｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ（ＶＬＤＬ）,ａｎｄＫｕｐｆｅｒｃｅｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄｍｅｄｉｕｍ（ＫＣＣＭ）ｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍｔｒｉｇｌ...     

糖基化低密度脂蛋白、氧化低密度脂蛋白和2型糖尿病合并冠心病的关系

目的:探讨血清糖基化低密度脂蛋白和血浆氧化低密度脂蛋白在2型糖尿病合并冠心病的作用。方法:测定89例2型糖尿病患者和30例正常对照的血清糖基化低密度脂蛋白和血浆氧化低密度脂蛋白水平,血清糖基化低密度脂蛋白采用氯化硝基四氮唑蓝比色法,血浆氧化低密度脂蛋白采用酶联免疫吸附法测定。结果:(1)2型糖尿病患者血清糖基化低密度脂蛋白(0.398±0.081)mmol/L与正常对照组相比增高(0.268±0.074)mmol/L;2型糖尿病患者血浆氧化低密度脂蛋白(58.264±24.201)ug/dl明显高于对照组(33.35±8.341)ug/dl,差异均有显著性(P<0.01)。(2)2型糖尿病并发冠心病组的血清糖基化低密度脂蛋白(0.414±0.074)mmol/L较无冠心病组(0.373±0.085)mmol/L增高、血浆氧化低密度脂蛋白水平2型糖尿病并发冠心病组(64.685±22.225)ug/dl显著高于无冠心病组(48.357±24.430)ug/dl,差异均有显著性(P<0.01)。(3)2型糖尿病患者血清糖化低密度脂蛋白与血浆氧化低密度脂蛋白正相关(r=0.713,P<0.01)。结论:糖基化低密度脂蛋白和氧化低密度脂蛋白与2型糖尿病合并冠心病有关。     

氧化修饰低密度脂蛋白对血管内皮依赖性舒张的影响

目的：探讨氧化修饰低密度脂蛋白（ Ｏｘ Ｌ Ｄ Ｌ）中溶血性卵磷脂（ Ｌ Ｐ Ｃ）与血管效应的关系。方法：采用 Ｃｕ２＋ 对低密度脂蛋白进行氧化修饰,测定 Ｏｘ Ｌ Ｄ Ｌ 的磷脂含量及其对血管舒张的影响。结果： Ｏｘ Ｌ Ｄ Ｌ 中的 Ｌ Ｐ Ｃ 量增加,卵磷脂（ Ｐ Ｃ）量减少。 Ｏｘ Ｌ Ｄ Ｌ 明显抑制血管内皮依赖性舒张,且抑制强度与 Ｌ Ｐ Ｃ量呈正相关。结论： Ｏｘ Ｌ Ｄ Ｌ 对血管舒张的抑制作用与 Ｌ Ｐ Ｃ 有关。     

Apolipoprotein B100 quality control and the regulation of hepatic very low density lipoprotein secretion

Apolipoprotein B （apoB） is the main protein component of very low density lipoprotein （VLDL） and is necessary for the assembly and secretion of these triglyceride （TG）-rich particles. Following release from the liver, VLDL is converted to low density lipoprotein （LDL） in the plasma and increased production of VLDL can therefore play a detrimental role in cardiovascular disease. Increasing evidence has helped to establish VLDL assembly as a target for the treatment of dyslipidemias. Multiple factors are involved in the folding of the apoB protein and the formation of a secretion-competent VLDL particle. Failed VLDL assembly can initiate quality control mechanisms in the hepatocyte that target apoB for degradation. ApoB is a substrate for endoplasmic reticulum associated degradation （ERAD） by the ubiquitin proteasome system and for autophagy. Efficient targeting and disposal of apoB is a regu- lated process that modulates VLDL secretion and partitioning of TG. Emerging evidence suggests that significant overlap exists between these degradative pathways. For example, the insulin-mediated targeting of apoB to autop- hagy and postprandial activation of the unfolded protein response （UPR） may employ the same cellular machinery and regulatory cues. Changes in the quality control mechanisms for apoB impact hepatic physiology and pathology states, including insulin resistance and fatty liver. Insulin signaling, lipid metabolism and the hepatic UPR may impact VLDL production, particularly during the postprandial state. In this review we summarize our current understanding of VLDL assembly, apoB degradation, quality control mechanisms and the role of these processes in liver physiology and in pathologic states.     

血中糖氧化低密度脂蛋白测定方法的建立

目的 我们利用亲和层析和荧光分光光度技术建立了血中糖氧化型低密度脂蛋白（Gly-ox-LDL)的测定方法。方法 利用柠檬酸－肝素溶液沉淀血中低密度脂蛋白（LDL）,使用氨基苯硼酸琼脂糖凝胶分离其中糖化低密度脂蛋白（Gly-LDL),再用荧光分光光度技术测定Gly-LDL中的丙二醛含量,确立了反应体系中最佳测定条件。结果 证实颈动脉粥样硬化病人血中Gly-ox-LDL含量明显高于对照组。     

血凝素样氧化低密度脂蛋白受体与内皮细胞p38丝裂素活化蛋白激酶关系的研究

目的探讨血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)活化人脐静脉内皮细胞p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路中的作用。方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),用不同浓度的ox-LDL孵育,通过W estern印迹检测LOX-1、p38MAPK蛋白水平,逆转录聚合酶链法观察LOX-1 mRNA表达,并以LOX-1特异阻断性抗体(JTX92)预处理内皮细胞,检测p38MAPK蛋白水平。四氮唑蓝法观察ox-LDL对细胞活力的影响。结果ox-LDL引起内皮细胞形态结构的改变,而且抑制内皮细胞的生长(P<0.05);ox-LDL呈浓度依赖性地上调LOX-1蛋白和mRNA表达(均P<0.05),并呈浓度依赖性激活p38MAPK通路,不同浓度ox-LDL(25μg/m l,50μg/m l,100μg/m l)组p-p38MAPK蛋白质表达水平均明显高于对照组(48±7,79±15,113±14 vs 24±5,P<0.01);JTX92+ox-LDL(100μg/m l)组p-p38MAPK蛋白水平明显低于ox-LDL(100μg/m l)组,(58±13 vs 113±14,P<0.01)。结论ox-LDL通过LOX-1途径激活p38MAPK信号通路,LOX-1上调是ox-LDL致动脉粥样硬化的重要环节。