杂交瘤细胞系复苏方法的探讨

淋巴细胞杂交瘤技术开展以来,人们获得越来越多的分泌不同特性单克隆抗体的杂交瘤细胞系,一般冻存于液氮罐中,当在复苏时,常常遭遇失败,直接影响后续工作。究其原因,如冻存细胞数量少,生长状态不良、细胞污染或补充液氮不及时等;此外,复苏时培养基条件的改变(换用另一批号小牛血清)及复苏方法不得当等也是原因。本     

杂交瘤细胞的小鼠腹腔复苏法

<正> 已经建立的杂交瘤细胞,常冻存于液氮,应用时再作复苏传代。传统的复苏方法,程序繁琐,耗费试剂,且容易造成污染。为此,我们对杂交瘤细胞在小鼠腹腔内直接复苏进行了探索,简介如下。 一、方法: (一)将抗-HBs/a杂交瘤细胞(本室建立)从液氮中取出,立即置37℃水箱,待刚好解冻后(约1分钟),全部移入50ml塑料离心     

体杂交瘤细胞系的建立

鸡传染睫法氏囊病(IBD)又称甘博罗病，这是鸡的一种高度接触性传染病。该病毒可引起免疫抑制，使新城疫苗的免疫效果降低或失败。使鸡对各种病原体的易感性增强，病死率增高，给养鸡业造成严重的经济损失。     

分泌结核菌单克隆抗体的杂交瘤细胞系

<正> 结核菌单克隆抗体对结核菌的菌种鉴定、分型,抗原提纯及结核病血清学诊断等都有重要意义。我们以超声波打碎的结核菌上清作抗原腹腔注射BALB/e小鼠二次,间隔数月后,再连续四天,每天免疫一次,第五天取脾与小鼠骨髓瘤细胞 NS-1融合,以45%PEG 1,000为促融剂,融合率为90%。以     

胰岛素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

自从Kohler和Milstein建立杂交瘤技术以来,在生物学各领域内得到广泛地研究和应用。在内分泌学方面也得到了应用,已经有十几项激素单克隆抗体代替经典抗血清的报道。本文为建立胰岛素单克隆抗体杂交瘤细胞系而进行了研究,现报道如下。     

杂交瘤细胞系产生单克隆抗体稳定性研究

大文对10株乙肝表面抗原(HBsAg)的McAbs细胞系在BALB/c小鼠体内连续传代和体外连续传代产生HBsAg单克隆抗体(McA-HBs)的稳定性进行了研究。表明10株杂交瘤细胞在体外连续传代12周各株细胞分泌McAb的稳定性是有明显差别的,而在BALB/c小鼠体内连续传3代其产生McA-HBs的能力均较稳定。 Sr-6和Sr-19在37℃和33℃两种不同培养温度下,以及在液氮中长期冻存复苏后对杂交瘤细胞产生McA-HBs的能力也无明显影响。     

腹水杂交瘤细胞的直接冻存法与复苏效果的观察

在单克隆抗体的研究中,目前有关杂交瘤细胞的冻存均是采用传统体外培养的细胞进行。实验表明,这种冻存和复苏后的杂交瘤细胞的活力尚欠理想,尤其一些经数次克     

分泌抗HCG单克隆抗体的杂交瘤细胞系

<正> 人绒毛膜促性腺激素(HCG)的免疫测定在妊娠诊断上有极其重要的作用。本工作目的是决定能否用单克隆抗体取代传统抗血清进行该项测定,为此我们进行了用杂交瘤技术制备抗HCG单克隆抗体的研究。 近交的BALB/c小鼠,以孕妇小便中提纯的HCG免疫,3天后,取脾细胞,与无分泌性的小鼠骨髓瘤细胞SP_2融合。聚乙二醇4,000为促触剂,融合率达100％。融合后10天,用HCG交联的胶乳作凝集试验,测定细胞培养上清液,阳性率为6％。取细胞生长好,阳性强的杂交瘤细胞克隆化四次以上,最后获得10个杂交     

人肝癌细胞系在不同免疫状态小鼠体内生长特性的研究

目的 观察3种不同免疫状态小鼠对人类肝癌细胞系（HHCC）移植瘤的影响。方法：将培养的HHCC以不同途径接种于3种不同免疫状态的小鼠中,观察成瘤情况,并用流式细胞仪测定CD4^ 和CD8^ T的细胞百分率及CD4^ 和CD8^ T细胞的比例。结果 肿瘤在裸鼠中逐渐长大,Balb/c小鼠不成瘤,CBA／N小鼠随接种瘤细胞数量和途径的不同有不同的表面;不同组别的小鼠中CD4^ T细胞的百分率都下降,CD^8 T细胞变化不大,CD4^ 和CD8^ T细胞比值均下降。结论 小鼠的免疫状态对移植的HHCC的生长具有明显的影响。接种部位和接种的瘤细胞数的不同对成瘤与否也有一定的影响。     

抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立秦玉倩吴悦周月梅（上海生物制品研究所免疫研究室，上海２０００５２）Ｖｅｔｅｒｌｅｉｎ等［１］报道用抗尿激酶（ＵＫ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）亲和层析柱，能从ＵＫ粗制品、甚至新鲜尿液中提取高纯度的ＵＫ，从而大大降低制备...     

抗乙酰胆碱酯酶杂交瘤细胞系的建立

用Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞与用乙酰胆酯碱酶(AchE)免疫的BALB/c小鼠脾细胞,在PEG-1000作用下进行融合。获得了5株分泌抗乙酰胆碱酯酶单克隆抗体的杂交瘤。用酶联免疫吸附试验(ELISA)对其分泌的单克隆抗体进行了特异性交叉实验,免疫球蛋白的类型鉴定及染色体检查。以上细胞株经3～6个月稳定传代后冻存于氮液中。     

载脂蛋白E单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

载脂蛋白Ｅ单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立赵满仓，刘菊林，郭刚，解用虹（空军石家庄医院，石家庄０５００６１）载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）主要存在于极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）中。它是１９７３年由Ｓｈｏｒｅ等在人血清的ＶＬＤＬ中首先发现的。ａｐｏＥ有３种主要的异构...     

分泌对小鼠H-2和Ⅰa抗原的单克隆抗体的杂交瘤细胞系

小鼠的免疫淋巴细胞与适当的骨髓瘤系细胞融合,可产生分泌对小鼠H-2或Ia抗原的抗体的杂交瘤细胞系。建立的11株克隆系中,9株产生抗H-2抗体,2株产生抗Ia抗体。此11株是用3个不同的骨髓瘤细胞系和不同的免疫接种技术进行了17次融合而建立的。作者总结了以下几点:(1)有效而良     

高转移性人成骨肉瘤细胞系在裸小鼠体内的筛选和维持

目的：筛选人成骨肉瘤高转移细胞并探讨维持其高转移性状的方法。方法：采用低转移性成骨肉瘤细胞系在裸小鼠腹腔内连续传代和体外培养肺转移灶筛选高转移亚系,通过体内、外交替传代维持其高转移性状,并用流式细胞仪、染色体分析等方法,研究该高转移亚系的细胞周期、形态、增殖等生物学特性。结果：筛选所得腹水型高转移亚系自发性肺转移率达100％。在细胞形态、增殖速度、染色体数目等方面与母系有较大差别,经体内、外交替传代高转移性状得以维持,且出现较高比例的脑、骨、肌肉转移。结论：腹腔连续传代培养转移灶和体内、外交替传代是筛选和维持高转移细胞的可靠方法。     

小鼠抗—HBs的单克隆抗独特型抗体杂交瘤细胞系的建立及鉴定

用纯化的小鼠单克隆抗-HBs(Ab1)免疫同系BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓细胞融合,获得两株(MA1、MA3)持续分泌抗-HBs的单克隆抗独特型抗体(抗-1d,Ab2)杂交瘤细胞系。对MA3做了较全面的鉴定。MA3的Ig类型为IgM,核型分析结果染色体数为106条。通过ELISA竞争抑制和中和抑制试验表明,MA3所分泌的Ab2既能被不同来源的抗-HBs所中和,又能被HBsAg所竞争,且都呈现剂量依赖关系。将纯化的MA3 IgM免疫同系小鼠,诱导出具有抗-HBs活性的抗-抗-独特型抗体(Ab3)。因此认为MA3所分泌单克隆抗体(McAb),可模似HBsAg,具有类似HBsAg的免疫原性,是一种带有HBsAg表位内影像的抗-HBs的单克隆抗-1d。     

小鼠胸腺基质细胞系(MTEC1)在裸鼠体内生物学特性研究

通过流式细胞仪（ＦＡＣＳ）、组织学染色和免疫组化的方法研究了脾内注射的小鼠胸腺上皮细胞系ＭＴＥＣ１和初代培养的小鼠胸腺基质细胞在裸鼠脾脏内存活状态及功能特性。结果发现ＭＴＥＣ１细胞不仅能够在脾脏内存活，而且在ＭＴＥＣ１细胞周围有大量不成熟的淋巴细胞。初代培养的小鼠胸腺基质细胞则不能在脾脏内存活。     

小鼠胸腺基质细胞系（MTEC1）在裸鼠体内生物学特…

通过流式细胞仪，组织学染色和免疫组化的方法研究了脾内注射的小鼠胸腺上皮细胞系ＭＥＥＣ１和初代培养的小鼠胸腺基质细胞在裸鼠脾脏内存活状态及功能特性。结果发现ＭＴＥＣ１细胞不仅能够在脾脏内存活，而且在ＭＴＥＣ１细胞周围大量不成熟的淋巴细胞。初代培养的小鼠胸腺基质细胞则不能在脾脏内存活。