胃癌患者血清survivin抗体和胃泌素水平变化及意义

目的 观察胃癌患者血清survivin抗体和胃泌素水平变化,并探讨其临床意义.方法 采用ELISA法检测70例胃癌患者(胃癌组)及20例健康体检者(对照组)血清survivin抗体和胃泌素水平,分析二者的关系及其与胃癌临床病理参数的关系.结果 胃癌组血清中survivin抗体和胃泌素水平均高于对照组(P均＜0.05);血清胃泌素水平与与胃肿瘤的淋巴结转移、分化程度、临床病理分期及肿瘤部位有关(P均＜0.05),血清survivin抗体水平与肿瘤淋巴结转移、分化程度、临床病理分期有关(P均＜0.05).胃癌患者血清中survivin抗体和胃泌素水平呈正相关(r =0.665,P＜0.05).结论 胃癌患者血清survivin抗体和胃泌素水平增高,二者与胃癌的发生、发展密切相关,联合检测有助于胃癌病情及预后的判断.     

血清VEGF和p53抗体与非小细胞肺癌的相关性研究

目的分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清VEGF、p53抗体表达水平及其诊断价值。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测69例初诊为NSCLC的患者血清VEGF和p53抗体浓度,另有45例健康志愿者作为对照。结果 NSCLC患者血清VEFG和p53抗体均明显高于对照组健康人群（P〈0.001）,两者在病理分型中腺癌最高（P〈0.001）,临床分期中以Ⅳ期最高（P〈0.001）;VEGF与p53抗体浓度值呈正相关（r=0.762,P〈0.001）;两项联合检测全部NSCLC的敏感性为86.9%,高于单项检测（P〈0.001）。结论 NSCLC患者血清VEFG和p53抗体显著增高,检测患者血清这两项指标对于肺癌的临床辅助诊断有着重要意义。     

纤支镜活检组织检测Survivin mRNA的临床意义

目的 探讨纤维支气管镜活检组织survivin表达对肺癌诊断及评估疾病进展的价值.方法 采用实时荧光定量PCR技术,对临床疑诊肺癌患者进行纤支镜活检,分为肺癌组及肺良性疾病组,检测活检组织survivin mRNA的表达.结果 32例肺癌Survivin的相对拷贝数明显高于9例肺良性疾病（P〈0.05）;32例肺癌不同性别、年龄、组织分化程度、组织类型之间无显著性差异（P〉0.05）,10例有远处转移者survivin mRNA表达高于22例无远处转移者（P〈0.05）.结论 纤支镜活检组织survivin检测联合病理学能更好地评估肺癌进展,survivin可能成为预测肺癌转移的指标.     

痰液中survivin、p53蛋白检测对肺癌的诊断价值

目的 探讨检测痰液中survivin、p53蛋白在肺癌诊断中的应用价值。方法 采用改良Saccomanno法收集40例肺癌患者、11例肺良性病变者和9名健康者痰液，用流式细胞技术检测痰液中survivin、p53蛋白的表达水平。结果 ①肺癌患者组痰液survivin、p53蛋白的表达量显著高于肺良性病变组和健康对照组（P〈0．05）；肺良性病变组和健康对照组痰液间无显著性差异（P〉0．05）；②痰液中p53蛋白的表达与吸烟指数有关。③痰液中survivin的表达与p53相关（r=0．575，P〈0．01）。结论 ①survivin、p53蛋白表达增高在肺癌的发生中起着重要作用。②痰或诱导痰中survivin、p53蛋白检测有可能为肺癌的诊断提供一个新的无创、安全的辅助方法。     

血清p53抗体在肺癌早期诊断中的价值

目的探讨p53抗体在肺癌诊断,尤其是早期诊断中的价值。方法应用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测32例健康者、37例肺疾病患者和82例肺癌患者血清中p53抗体的水平。结果肺癌患者血清p53抗体水平显著高于肺疾病及健康者（P〈0.05）;血清p53抗体诊断肺癌的敏感性和特异性分别为29.27%及100%;血清p53抗体阳性率与肺癌病理分型及临床分期无关（P〉0.05）。结论p53抗体可作为肺癌诊断,尤其是早期诊断的新的有价值的标志物。     

survivin和VEGF在胆囊癌中的表达及其与肿瘤微血管密度相关性研究

采用免疫组化sP法检测42例原发性胆囊癌患者癌组织标本（观察组）凋亡抑制基因（survivin）与血管内皮生长因子（VEGF）、肿瘤微血管密度（MVD）的相关性,将结果与40例胆囊息肉患者息肉组织（对照组）比较。免疫组织化学sP法检测survivin、VEGF和CD34在胆囊癌组织中的表达情况,用CD。单抗标记的血管计数MVD。结果：观察组survivin、VEGF阳性表达率及MVD明显高于对照组P〈0．01;观察组Ⅲ、Ⅳ期患者survivin和VEGF的阳性表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者P〈0．05;高分化者survivin和VEGF阳性表达率低于中、低分化者（P〈0．05）;有淋巴结转移者survivin和VEGF阳性表达率明显高于无淋巴结转移者（P〈O．01）;两者在腺癌中的阳性表达率无统计学意义（P〉0．05）;VEGF与survivin的阳性表达呈正相关。认为survivin、VEGF在胆囊癌组织中呈高表达,且与淋巴结转移和病理分级有关;两者表达成正相关,且与肿瘤微血管形成密切相关。     

Survivin靶向RNA干扰对人结肠癌HCT116细胞生长影响的研究

目的设计和构建survivin特异性的siRNA真核表达载体,观察survivin siRNA重组体对人大肠癌HCT116细胞株生长的影响,为大肠癌的基因治疗提供理论依据。方法针对survivin mRNA序列设计合成编码siRNA的DNA模板,构建2个survivin RNAi真核表达载体;实验分为survivin siRNA重组质粒转染组、空载体组和HCT116组,转染大肠癌细胞HCT116细胞,采用RT-PCR法检测survivin mRNA的表达,观察重组质粒对转染的HCT116细胞survivin基因表达的影响;用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测量细胞生长情况;用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果测序表明survivin干扰序列完全正确,RT-PCR结果显示2条survivin siRNA真核表达质粒均能有效抑制survivin mRNA的转录表达。MTT比色法检测显示,与阴性对照组及未转染组细胞比较,干扰组细胞增殖率明显下降（P〈0．05）。流式细胞术检测的转染重组质粒组细胞凋亡率高于脂质体对照组和空质粒对照组（P〈0．05）。结论成功构建了survivin干扰真核表达载体,siRNA重组体能有效抑制人大肠癌细胞survivin mRNA表达,并抑制结肠癌细胞生长,促进其凋亡。     

凋亡抑制蛋白survivin在白血病细胞中的表达及其意义

目的探讨白血病原代细胞中凋亡抑制蛋白survivin基因的表达情况,及其与疗效的关系.方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测45例白血病患者和10例健康人骨髓中survivin的表达水平,并给与合适的方式化疗,评判疗效.结果白血病细胞中survivin mRNA 阳性率为68.9%（31/45）.急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞中survivin mRNA表达阳性率为73.3%,较急性髓系白血病（AML）的63.6%稍高;慢性粒细胞白血病（CML）患者中survivin mRNA 表达率很高,可达80.0%,慢性淋巴细胞白血病（CLL）中则为66.7%,但均高于正常对照组的20.0%（P＜0.05）.在22例AML患者中,survivin mRNA表达阴性者接受2个疗程化疗后缓解率（CR）87.5%,明显高于表达阳性患者的64.3%.在15例ALL患者中也有类似的结果,CR分别为100%和81.8%.CML患者中,survivin mRNA阳性的4例中有2例两年内发生急变;CLL患者病情均较稳定.结论survivin基因在白血病细胞中有较高的表达,并与疗效及预后有密切的关系.     

survivin基因及增殖细胞核抗原与急性白血病关系的研究

目的 探讨增殖细胞核抗原（PCNA）、survivin基因与急性白血病（AL）的关系：方法收集2003—2004年浙江大学医学院附属第一医院住院AL患者的资料，采用免疫组化方法检测PCNA和RT—PCR方法检测survivin在AL在治疗前后以及与正常对照组的比较：结果初发AL患者与正常对照组的PCNA和survivin的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。AL在治疗前与治疗缓解后其PCNA的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。survivin高表达的急性髓细胞白血病（AML）缓解率低，但是急性淋巴细胞白血病（ALL）的缓解率与survivin表达无关。结论 PCNA和survivin在白血病中均高表达，与白血病的发生及发展有一定的联系，PCNA与survivin互补，可作为判断急性白血病的疗效和预后指标。     

食管癌癌组织中survivin基因的表达及其意义

目的探讨食管癌癌组织中survivin基因表达的临床意义。方法采用RT-PCR法检测52例食管癌手术切除标本中survivinmRNA的表达,免疫组化法检测152例食管癌手术切除标本中survivin和p33^INC1蛋白表达以及187例食管活检标本中survivin蛋白的表达。结果①食管癌手术切除标本中,survivin mRNA及蛋白的表达明显高于食管正常黏膜（P〈0．05）;survivin mRNA及蛋白在胞质中表达与肿瘤病理特征无关（P〉0．05）,但survivin蛋白在胞质和胞核同时表达时,与肿瘤浸润深度及淋巴结转移有关（P〈0．05）。②食管活检标本中,survivin蛋白在食管由正常向癌转变过程中,表达逐渐增高（P〈0．05）。③食管癌手术切除标本中,survivin与p33^INC1.蛋白表达呈负相关（P〈0．05）。结论①survivin基因的再次激活表达与食管癌发生、发展有关,survivin基因的转录异常启动是survivin再表达的关键机制,survivin蛋白核定位预示食管癌具有较强的侵袭和转移潜能。②survivin功能的激活和p33^INC1功能的下调共同对抗细胞凋亡,参与食管癌的发生、发展。     

子宫腺癌患者血清CA125及内膜p16、survivin蛋白的表达及临床意义

目的探讨血清CA125、组织蛋白p16及survivin在子宫内膜腺癌中的表达及临床意义。方法检测正常子宫内膜组、子宫内膜不典型增生组及子宫内膜腺癌组各40例患者的血清CA125水平及组织中p16及sureivin蛋白的阳性表达情况。结果子宫内膜腺癌组血清CA125水平在手术前后均明显高于其余两组（P均〈0．05）;p16蛋白在子宫内膜腺癌组的表达明显降低,与其余两组比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）;survivin蛋白在不典型增生组和子宫内膜腺癌组的阳性表达率及强阳性表达率与正常内膜组相比差异有统计学意义（P均〈0．05）。随着手术病理分期的增高,子宫内膜腺癌患者血清CA125的阳性表达率与survivin的强阳性表达率也明显增高,而p16的阳性表达明显降低。结论血清CA125水平、p16及survivin蛋白对子宫内膜腺癌的手术病理分期及临床预后判断均有重要意义     

肺癌组织中OATP-B、D蛋白及其mRNA表达变化及意义

目的检测肺癌组织中人类有机阴离子转运多肽（OATP）-B、D mRNA及其蛋白的表达,并探讨其意义。方法取40例肺癌组织（观察组）和10例正常组织（对照组）,采用荧光定量RT-PCR法检测OATP-B、D mRNA,采用免疫组化法检测OATP-B、D蛋白。结果与对照组相比,观察组OATP-B和OATP-D的mRNA及蛋白表达均上调,P均〈0.05。观察组有、无淋巴结转移者OATP-B、D mRNA及蛋白表达相比P均〈0.05。结论肺癌组织中OATP-B、D mRNA及蛋白表达水平均升高。肺癌组织中OATP-B、D mRNA及蛋白表达,与淋巴结转移相关。     

NSE、CYFRA21-1及CEA检测在肺癌诊断中的价值

目的探讨三种肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中的价值。方法采用电化学发光免疫分析法检测86例肺癌患者（肺癌组）、52例结核性胸膜炎患者（结核组）胸腔积液和血清中神经元特异性烯醇化酶（NSE）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）及癌胚抗原（CEA）的水平,并与67例健康人（对照组）血清中上述指标比较。结果肺癌组胸腔积液及血清中的NSE、CYFRA21-1、CEA水平均显著高于结核组及对照组（P均〈0.01）。NSE在小细胞肺癌中的水平显著高于其他类型肺癌（P均〈0.01）,CYFRA21-1在肺鳞癌中的水平明显高于其他类型肺癌（P均〈0.01）。三项指标联合检测对不同病理类型肺癌诊断的敏感性均明显高于单项指标（P均〈0.01）。结论联合检测胸腔积液中上述三种肿瘤标志物水平可提高肺癌的检出率;NSE、CYFRA21-l有助于鉴别肺癌类型。     

血清及痰液CEA、SA、SP-A检测在肺癌诊断中的应用

目的探讨血清及痰液中癌胚抗原（CEA）、唾液酸（SA）、肺表面活性物质相关蛋白A（SP-A）在肺癌诊断中的应用价值。方法应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测65例肺癌、55例肺部良性疾病患者及31例健康查体者血清、痰液中的CEA、SA、SP—A。结果肺癌患者血清及痰液中三项肿瘤标志物水平均高于其他良性疾病患者（P均〈0．01）。痰液中三种标志物检测诊断肺癌的灵敏性和特异性均明显高于血清（P均〈0．05）。SA＋SP—A联检对肺癌的敏感性（78．5％）和特异性（92．7％）均处于较佳水平,并具有较高的诊断准确性（85．0％）。结论血清、痰液CEA、SA、SP-A在肺癌的诊断中均有应用价值,痰液标本检测价值大于血清。痰液SA和SP-A联合检测是诊断肺癌较好的组合。     

survivin基因在非小细胞肺癌中的表达及与P53、c-myc、k-ras蛋白表达的关系

目的：探讨survivin基因在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达,及与P53、c-myc、k-ras蛋白表达的相互关系。方法：逆转录PCR法检测了76例NSCLC肿瘤组织,20例良性瘤样病变和21例病灶旁正常肺组织survivin mRNA表达,免疫组织化学法检测P53,c-myc,k-ras蛋白表达,并将结果进行了相关分析。结果：61％NSCLC癌组织表达survivin mRNA基因,而良性瘤样病变和正常组织则分别为30％和19％（P＜0．001）。survivin基因表达与肺癌组织细胞类型,分化程度,TNM分期及淋巴结转移无明显相关关系。P53蛋白,c-myc与survivin基因表达显著相关,k-ras蛋白表达与survivin基因表达未见明显相关。结论：（1）survivin基因在肺癌组织中表达上调,提示该基因对NSCLC发生发展起重要作用。Survivin基因有望成为肺癌基因治疗的新靶点。（2）抑癌基因P53的失活和癌基因c-myc的上调与survivin基因的表达可能在NSCLC癌变中起协同作用。survivin和k-ras基因则可能通过各自不同的机制参与NSCLC的发病机制。     

重症急性胰腺炎外周血中性粒细胞凋亡及其调控机制的研究

目的初步探讨重症急性胰腺炎（SAP）外周血中性粒细胞的凋亡及凋亡抑制蛋白survivin在SAP中性粒细胞凋亡延迟调控中的作用。方法48只SD大鼠随机分为急性坏死性胰腺炎（ANP）组和假手术（SO）组。采用胰胆管逆行注射4％牛磺胆酸钠（1ml／kg体重）制模，制模后24、48、72h分别处死动物。取胰腺组织评估病理变化；TUNEL荧光标记法检测外周血中性粒细胞的凋亡；RTPCR检测外周血中性粒细胞survivin mRNA的表达。结果ANP组胰腺病理评分较（SO）组明显升高（P〈0．05）。ANP组中性粒细胞凋亡率较SO组明显降低，随时间延长更明显（P〈0．05）。ANP组中性粒细胞survivin mRNA水平均较SO组明显升高，且随时间延长更明显（P〈0．05）。ANP组中性粒细胞凋亡率分别与胰腺病理评分和survivin mRNA水平呈负相关（r=0．97，r=0．99，P〈0．05）。结论ANP时外周血中性粒细胞凋亡明显延迟，survivin mRNA高表达．表明survivin在调控SAP外周血中性粒细胞凋亡延迟机制中可能具有重要作用。     

结直肠癌组织中cyclin E、survivin、PTEN的表达及意义

采用免疫组化SP法检测95例结直肠癌组织及40例正常结直肠组织中细胞周期素（cyclin）E、生存素（survivin）及第10染色体同源丢失性磷酸酸—张力蛋白基因（PTEN）蛋白,采用RT-PCR技术检测46例结直肠癌组织中的cyclin E mRNA、survivin mRNA及PTEN mRNA。95例结直肠癌组织中cyclin E、survivin及PTEN的阳性表达率分别为45.3%、48.4%及36.8%,40例正常结直肠组织分别为0、0及95.0%。cyclin E表达与结直肠癌组织学分级、TNM分期有关（P均〈0.01）,survivin表达与结直肠癌组织学分级有关（P〈0.05）,PTEN与结直肠癌浸润深度、组织学分级、TNM分期有关（P均〈0.05）。cyclin E或survivin的阳性表达率与PTEN呈负相关（r分别为-0.3438、-0.3470,P〈均0.01）。cyclin E mRNA、survivin mRNA及PTEN mRNA在46例结直肠癌中的表达与组织学分级及TNM分期有关（P均〈0.05）。认为检测癌组织cyclin E、survivin及PTEN可评估结直肠癌的生物学行为,cyclin E和survivin表达上调与PTEN表达下调可能在结直肠癌的发生和进展中发挥协同作用。     

血清NSE、pro—GRP、MMP-9、CEA联合检测在肺癌诊断中的应用

目的探讨血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胃泌素释放肽前体（pro—GRP）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、癌胚抗原（CEA）联合检测在肺癌诊断中的应用价值。方法选择肺癌112例、肺结核45例、健康对照者40例,采用BeckmanACCESS2化学发光法检测血清NSE、CEA,ELISA法检测血清pro—GRP、MMP-9。结果肺癌组血清NSE、pro—GRP、MMP-9、CEA水平明显高于结核组、对照组（P均〈0．05）,小细胞肺癌（SCLC）患者血清NSE、pro—GRP水平明显高于鳞癌、腺癌患者（P均〈0．05）,腺癌患者血清MMP-9、CEA水平明显高于鳞癌、SCLC患者（P均〈0．05）。MMP-9和CEA联合检测对腺癌诊断敏感性为90．7％,明显高于单项检测的71．8％、68．4％,P均〈0．05;pro—GRP和NSE联合检测对SCLC诊断敏感性为91．5％,明显高于单项检测的64．3％、84．2％,P均〈0．05。结论血清NSE、pro-GRP、MMP-9、CEA联合检测可有效提高肺腺癌与SCLC的诊断灵敏度,有助于肺癌的诊断与鉴别诊断。     

血清肿瘤标志物在肺癌辅助诊断中的应用

目的探讨5种血清肿瘤标志物在肺癌辅助诊断中的应用价值，并选择最理想的血清肿瘤标志物组合。方法应用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测170例肺癌患者、50例健康人和60例肺部良性疾病患者血清中神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胃泌素释放肽前伴（pro-GRP）、细胞角蛋白19（CYFRA21-1）、p53抗体和癌胚抗原（CEA）的水平含量。结果肺癌患者的5种血清肿瘤标志物水平均明显高于健康人组和肺部良性疾病组，差异有统计学意义（P〈0．01）。NSE、pro-GRP在小细胞肺癌中的水平明显高于其他类型的肺癌（P〈0．01），CYFRA21-1在鳞癌中的水平明显高于其他类型的肺癌（P〈0．01）。p53抗体的特异性为100％，NSE、pro-GRP对小细胞肺癌检测的敏感性明显高于其他类型的肺癌（P〈0．01），CYFRA21-1对鳞癌检测的敏感性明显高于其他类型的肺癌（P〈0．01）。5种血清肿瘤标志物经组合后，敏感性明显高于任一单项肿瘤标志物（P〈0．01）。结论5种血清肿瘤标志物对于肺癌的辅助诊断有一定的临床意义。NSE、pro-GRP二者可作为联合检测小细胞肺癌的首选标志物．CYFRA21-1、CEA和p53抗体三者可作为联合检测非小细胞肺癌的首选标志物。p53抗体对肺癌的辅助诊断有很高的特异性．CYFRA21-1对鳞癌的辅助诊断有一定的作用。     

血清CEA、CYFRA21—1、NSE联合检测在肺癌诊断中的临床价值

目的探讨血清癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片段21—1（CYFRA21—1）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）联合检测诊断肺癌的临床价值。方法用电化学发光免疫分析技术检测140例肺癌、189例肺良性疾病患者的血清CEA、CYFRA21-1、NSE表达水平。结果肺癌患者的血清CEA、CYFRA21—1、NSE均明显高于肺良性疾病患者（P均〈0．05）;三者联合检测诊断肺癌的敏感性明显高于其单独检测,且在肺癌不同病理类型中三者联合检测的阳性率有统计学差异（P均〈0．05）。结论血清CEA、CYFRA21—1、NSE是诊断肺癌较好的标志物,三者联合检测可明显提高肺癌诊断的敏感性。