下调lncRNA SPINT1-AS1通过靶向miR-211-5p对卵巢癌细胞生长和侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)SPINT1-AS1对卵巢癌细胞生长和侵袭的影响及分子机制。方法 GEPIA数据库分析卵巢癌组织和正常组织中lncRNA SPINT1-AS1的表达。荧光实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)方法测定卵巢癌细胞系SKOV-3、A2780、OC3、HO-8910和永生化卵巢上皮细胞系IOSE80中lncRNA SPINT1-AS1的表达。将SKOV-3细胞分为si-SPINT1-AS1组(转染lncRNA SPINT1-AS1 siRNA)和si-NC组(转染siRNA control)。MTT法和Transwell小室实验测定下调lncRNA SPINT1-AS1对SKOV-3细胞增殖活性和侵袭的影响。Western blot检测增殖表型蛋白(PCNA、CyclinD1)和转移表型蛋白(MMP2、MMP9)的表达。采用双荧光素酶报告系统鉴定lncRNA SPINT1-AS1和miR-211-5p的靶向关系。qRT-PCR检测下调lncRNA SPINT1-AS1对miR-211-5p表达的影响。结果 与正常组织比较,卵巢癌组织中lncRNA ...     

ASH2L在上皮性卵巢癌中的表达及其对SKOV-3细胞系增殖的影响

目的 探讨混合谱系白血病(MLL)甲基转移酶的核心亚单位ASH2L对人上皮性卵巢癌细胞系SKOV-3增殖的影响.方法 免疫组化方法检测上皮性卵巢癌组织标本中ASH2L蛋白表达的定位.Western blot法检测卵巢癌组织标本和正常卵巢组织标本中ASH2L的表达水平,以及卵巢癌细胞系SKOV-3中ASH2L的表达水平.采用ployplus试剂介导ASH2L质粒转染,通过Western blot法验证ASH2L的转染效率,并利用CCK-8法检测转染后SKOV-3细胞的增殖情况.结果 ASH2L蛋白表达定位于卵巢癌组织细胞核内.与正常人的卵巢组织相比,上皮性卵巢癌组织中ASH2L蛋白表达水平上调(P＜0.01),与293T细胞系相比,SKOV-3细胞系中ASH2L蛋白表达水平上调(P＜0.05).SKOV-3细胞系在转染ASH2L质粒后,细胞中ASH2L蛋白的表达升高,与空载质粒转染的SKOV-3细胞相比,ASH2L质粒转染的SKOV-3细胞增殖增加(P＜0.01).结论 ASH2L在上皮性卵巢癌中表达升高.高表达的ASH2L可促进卵巢上皮性肿瘤细胞SKOV-3的增殖.     

miR-9和miR-210在卵巢癌SKOV-3及SKOV-3/DDP细胞株中的表达及机制探讨

目的 检验miR-9和miR-210在卵巢癌SKOV-3及SKOV-3/DDP细胞株中的差异表达,观察其对卵巢癌细胞生物学功能的影响并探讨其作用机制,为卵巢癌的靶向治疗积累数据,提供参考方向。 方法 培养人正常卵巢上皮细胞株,卵巢癌SKOV-3和SKOV-3/DDP细胞株,RT-PCR(实时荧光定量聚合酶链反应)检验miR-9和miR-210在各细胞株中的表达差异;将miR-9mimics和miR-210mimics转染至卵巢癌SKOV-3及SKOV-3/DDP中,用CCK-8法检测细胞增殖,Annexin V/PI法测细胞凋亡,细胞划痕实验测细胞迁移能力的改变及细胞侵袭实验测细胞侵袭情况。 结果 miR-9在SKOV3及其耐药株SKOV-3/DDP中低表达,而miR-210在SKOV3及其耐药株SKOV-3/DDP中高表达;miR-9/miR-210过表达抑制3种细胞的增殖;miR-9/miR-210过表达促进细胞发生凋亡;miR-9/miR-210过表达导致3种细胞迁移和侵袭能力下降。 结论 miR-9/miR-210在卵巢癌细胞中起到抑癌基因的作用,过表达miR-9/miR-210能显著抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力并促进肿瘤细胞的凋亡;miR-9/miR-210可以作为卵巢癌及复发性卵巢癌新的潜在治疗靶点。      

ELF1负调控TRIM16促进胃腺癌上皮间质转化

目的 探讨E74样因子1(ELF1)对胃腺癌细胞迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响及其机制。方法 利用基因表达谱交互分析2(GEPIA2)数据库分析ELF1在胃腺癌组织中的表达情况。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot分析胃癌细胞和正常胃黏膜细胞中ELF1的表达水平。ELF1短发夹RNA(sh-ELF1)或其阴性对照短发夹RNA(sh-NC)转染AGS细胞,分别命名为sh-ELF1组和sh-NC组。划痕实验检测细胞迁移能力,Tranwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测EMT相关分子Snail、E-cadherin、Vimentin及三重基序包含蛋白16(TRIM16)的表达情况。染色质免疫共沉淀-PCR(ChIP-PCR)实验检测ELF1与TRIM16启动子区的结合情况。选取AGS细胞进行挽救实验,分为sh-ELF1+si-TRIM16组(sh-ELF1和TRIM16小干扰RNA共同转染)和sh-ELF1+si-NC组(sh-ELF1和阴性对照小干扰RNA共同转染),Western blot检测TRIM16、Snail、E-c...     

CIP2A在卵巢癌癌组织中的表达及其基因沉默后对肿瘤细胞侵袭和迁移能力的影响

【摘要】目的 探讨蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子（CIP2A）在卵巢癌癌组织中的表达及其基因沉默后对肿瘤细胞侵袭、迁移能力的影响。方法 收集2015年7月～2016年7月在我院实施卵巢癌手术的患者47例卵巢癌组织为卵巢癌组,选择同期行卵巢良性病变部分切除时的5例正常卵巢组织为正常组,测定组织中CIP2A的表达水平。应用siRNA干扰卵巢癌细胞系A2780和SKOV3的CIP2A表达,将细胞分为对照组和干扰组,采用MTT法检测两组细胞增殖,Transwell检测两组细胞侵袭和迁移能力,Western Blot检测E 钙黏蛋白（E cad）、基质金属蛋白MMP 2、MMP 9、转移性肿瘤抗原1（MTA1）蛋白的表达水平。结果 与正常组比较,卵巢癌组CIP2A蛋白和CIP2A mRNA表达量显著升高（P＜0.05）;与对照组相比,干扰组A2780和SKOV3细胞增殖率、侵袭和迁移力显著下降（P＜0.05）,E cad的蛋白表达量显著升高（P＜0.05）,MMP 2、MMP 9和MTA1的蛋白表达量显著下降（P＜0.05）。结论 CIP2A在卵巢癌组织中具有高表达,可有效调节细胞侵袭和迁移相关蛋白的表达,调控细胞的侵袭和迁移力。     

卵巢癌预后不良基因ATP6V1F、GINS1、GINS4的筛选

目的 筛选卵巢癌预后不良的分子生物学标志。方法 从GEO数据库获得卵巢癌GSE14001、GSE14407数据集，用在线分析工具GEO2R、Venn筛选得到卵巢癌和正常卵巢组织差异表达基因(DEGs),对DEGs进行富集分析，构建蛋白互作网络(PPI),以及构建网络模块得到关键基因，利用Kaplan Meier plotter网站分析关键基因与卵巢癌患者总生存期之间关系，应用GEPIA数据库分析DEGs在卵巢和卵巢癌组织中表达，应用The Human Protein Atlas数据库获取筛选基因的免疫组化结果，对比它们在卵巢和卵巢癌组织间的表达差异。结果 得到211个DEGs, 92个上调和119个下调。差异基因生物学过程主要涉及侧枝发芽的正向调控、乏氧反应、间充质-上皮细胞信号传导；细胞组分主要集中在质膜顶、细胞表面、细胞外外泌体等部位；分子功能主要涉及丝氨酸型内肽酶活性、金属内肽酶活性、受体活性等；信号通路富集于白细胞跨内皮细胞迁移、细胞黏附通路、癌症通路等信号通路。得到35个候选基因，其中14个基因高表达、8个基因低表达与患者总生存期相关(P<0.05)。其中ATP6V1F...     

c-cbl 基因沉默对卵巢癌 SKOV3细胞增殖和侵袭的影响

目的：探讨 c-cbl 在卵巢癌的表达及其对卵巢癌细胞增殖、侵袭的影响。方法通过免疫组织化学法（S-P 法）检测c-cbl 蛋白在卵巢癌组织的表达;EdU 检测卵巢癌 SKOV3细胞沉默 c-cbl 基因后细胞增殖能力变化;Transwell 检测卵巢癌 SK-OV3细胞侵袭能力;Western blot 检测 P21蛋白和 P53蛋白的表达。结果 c-cbl 蛋白在卵巢癌中表达位于细胞质,在卵巢癌中, c-cbl 蛋白呈强阳性表达,在正常卵巢组织 c-cbl 蛋白呈弱阳性或者阴性表达。与正常卵巢组织比较,c-cbl 蛋白在卵巢癌表达明显增高（P＜0．05）;c-cbl 蛋白在卵巢癌的表达与 FIGO 分期相关（P＜0．05）;沉默卵巢癌 SKOV3细胞 c-cbl 基因后,卵巢癌细胞增殖能力和侵袭能力降低（P＜0．05）;沉默 c-cbl 基因后,P21和 P53蛋白表达上调（P＜0．05）。结论 c-cbl 蛋白在卵巢癌表达上调,沉默 c-cbl 基因可能与上调 P21和 P53蛋白有关。     

MUC4､MUC16在卵巢上皮癌细胞系SKOV-3､OVCAR-3､CAOV-3和组织中的表达及临床意义

目的 :研究MUC4、MUC16在卵巢上皮癌细胞系SKOV-3、OVAR-3、CAOV-3和卵巢上皮癌组织的表达及与临床病理特征关系。方法:1培养卵巢癌SKOV-3、OVAR-3、CAOV-3细胞系,行免疫细胞化学SABC法和Western blot观察MUC4、MUC16蛋白表达;2对临床卵巢癌组织采用免疫组织化学SP两步法检测正常卵巢组织和肿瘤组织中MUC4、MUC16表达与临床病理特征关系。结果:1经免疫细胞化学和Western blot研究发现MUC4在人卵巢癌SKOV-3和OVCAR-3细胞中不表达,而在CAOV-3细胞中有表达;MUC16在人卵巢癌OVCAR-3细胞中表达量最高,其次是CAOV-3细胞,在SKOV-3细胞表达量最低;2在正常卵巢组织和卵巢良性肿瘤中,MUC4和MUC16表达量均较低。但在卵巢交界性肿瘤和卵巢癌中,MUC4和MUC16表达非常明显;3 MUC4在卵巢浆液性和黏液性上皮癌中表达无差异(86.36%vs 75.00%),而MUC16在浆液性卵巢癌中阳性表达率(81.81%)明显高于黏液性卵巢癌(25.00%)(P<0.05)。MUC4在早期卵巢癌表达偏高,达91.67%,而MUC16在晚期卵巢癌表达(85.70%)明显高于早期(50.00%)。结论:不同卵巢癌细胞MUC4和MUC16表达不同;联合MUC4和MUC16的检测有助于卵巢癌的病理分型、临床诊断及预后的判断。     

TRIM14对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭及上皮——间充质转化的影响及其作用机制

目的：探讨三结构域蛋白14(TRIM14)对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮—间充质转化（EMT）的影响及相关作用机制。方法：收集40例宫颈癌患者的宫颈癌组织及癌旁正常宫颈组织标本，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测TRIM14基因表达。体外培养宫颈癌HeLa细胞，将TRIM14小干扰RNA(si-TRIM14)转染至HeLa细胞。采用CCK-8法检测细胞增殖，划痕实验检测细胞迁移，Transwell小室法检测细胞侵袭，Western blotting法检测EMT相关蛋白和单磷酸腺苷蛋白激酶（AMPK）/雷帕霉素靶蛋白（m TOR）信号通路相关蛋白表达。结果：宫颈癌组织中TRIM14 mRNA表达水平显著高于癌旁正常宫颈组织（P<0.05）。与si-NC组比较，si-TRIM14组细胞增殖活性、细胞迁移率、侵袭细胞数目均降低，E-cadherin蛋白表达量升高，N-cadherin、Vimentin、Snail1蛋白表达量均降低（P<0.05）。si-TRIM14组细胞中p-AMPK/AMPK比值高于si-NC组，pmTOR/mTOR比值低于si-NC组（P&l...     

卵巢上皮性癌OPCML基因的表达缺失和启动子甲基化

目的探讨OPCML基因在卵巢上皮性癌中的失表达及其与基因启动子CpG岛甲基化的关系。方法用逆转录—聚合酶链反应、限制性内切酶-聚合酶链反应检测卵巢正常组织、良性上皮性肿瘤、上皮性癌组织和SKOV-3、3AO、CAOV3卵巢癌细胞株OPCML基因的失表达及CpG岛甲基化。结果在卵巢癌中OPCMLmRNA的表达率显著低于正常卵巢组织(χ2=30·108,P=0·0000)和卵巢良性肿瘤组织(χ2=21·162,P=0·000)。SKOV-3和CAOV3细胞未见OPCMLmRNA表达,而3AO细胞可见OPCMLmRNA表达。在卵巢癌中,启动子CpG岛尤其是HapⅡ酶切位点甲基化率显著高于正常卵巢组织(χ2=13·630,P=0·0000)和良性肿瘤组织(χ2=11·797,P=0·000)。卵巢癌OPCML启动子CpG岛甲基化和mRNA失表达呈显著相关(r=11·589,P=0·002)。SKOV-3和CAOV3细胞有内切酶位点甲基化,而3AO细胞无酶切位点甲基化。结论卵巢上皮性癌细胞存在OPCML基因失表达;基因启动子CpG岛,尤其是HapⅡ酶切位点的甲基化是导致OPCML基因失表达的途径,但不是唯一途径。     

沉默EGFL6基因表达抑制卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化

目的:探讨表皮生长因子样结构域蛋白6(EGFL6)在卵巢癌中的表达及其对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(Epithal-Mesenchymal Transition,EMT)的影响。方法:实验分为si-NC组和si-EGFL6组,将si-EGFL6使用Lipofectamine2000转染至卵巢癌SK-OV-3和OV-90细胞。使用在线工具GEPIA和KM-plotter分析EGFL6在卵巢癌中的表达水平及其与预后的关系。CCK-8实验检测SK-OV-3和OV-90细胞的增殖,划痕愈合实验和Transwell实验分别检测SK-OV-3和OV-90细胞的迁移和侵袭能力,q RT-PCR实验检测SK-OV-3和OV-90细胞中EGFL6的表达水平,Westernblot检测EGFL6及EMT相关基因E-cadherin、Vimentin和N-cadherin的蛋白表达水平。结果:EGFL6在卵巢癌高表达,和卵巢癌的不良预后相关,具有临床诊断意义。沉默EGFL6表达后,SK-OV-3和OV-90卵巢癌细胞增殖能力受到明显抑制(P<0.01),迁移和侵袭能力降低(P<0....     

不同恶性行为卵巢癌细胞系DPP Ⅳ基因的表达

目的探讨二肽肽酶Ⅳ(DPP Ⅳ)基因在卵巢癌细胞系中的表达并分析其与卵巢癌细胞恶性行为的关系.方法利用细胞增殖、粘附、侵袭和迁移能力试验鉴定A2780、SKOV-3、HO-8910、HO-8910PM卵巢癌细胞系的恶性行为差异;应用酶活性测定、流式细胞和半定量RT-PCR技术检测DPP Ⅳ基因在A2780、SKOV-3、HO-8910和HO-8910PM细胞系中的表达并分析它与卵巢癌细胞恶性行为的关系.结果4种卵巢癌细胞的增殖、粘附、侵袭和迁移能力由高到低依次为:HO-8910PM、HO-8910、SKOV-3、A2780细胞系.DPP Ⅳ基因在A2780、SKOV-3、HO-8910和HO-8910PM细胞系中mRNA转录水平分别为0.7512±0.0012、0.5596±0.0015、0.3369±0.0009和0.2777±0.0006;酶活性分别为0.79±0.02、0.64±0.03、0.21±0.02和0.18±0.01;流式细胞术测定DPP Ⅳ基因蛋白表达水平分别为657.83±1.14、538.53±5.29、130.50±1.46和33.14±0.47.卵巢癌细胞的粘附、侵袭和迁移能力与DPP Ⅳ基因的mRNA转录水平相关系数分别为:-0.987、-0.983和-0.991;与蛋白表达水平相关系数分别为:-0.959、-0.988和-0.968;与酶活性相关系数分别为:-0.952、-0.868和-0.983.结论DPP Ⅳ基因的mRNA转录、蛋白表达水平以及酶活性与卵巢癌细胞系的粘附、迁移和侵袭能力呈负相关性.     

NCOA5通过调控上皮间质转化促进卵巢癌细胞的侵袭转移能力

目的 研究核受体共激活因子5 (NCOA5)对卵巢癌细胞侵袭和转移能力的作用及分子机制。方法 常规培养卵巢癌细胞株SKOV-3、A2780、OC3、HO-8910和正常卵巢上皮细胞系IOSE80,Western blot检测各细胞中NCOA5蛋白的表达水平。选取高表达NCOA5的卵巢癌细胞SKOV-3 和A2780,各分为si-NC组、si-NCOA5组,并分别转染NC siRNA和NCOA5 siRNA。Boyden实验检测各组细胞侵袭能力,Transwell实验检测各组细胞转移能力,Western blot检测各组细胞上皮间质转（EMT）相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、vimentin和Slug蛋白的表达水平。结果 Western blot结果显示NCOA5在卵巢癌细胞中的表达显著上调(P<0.05)。在SKOV-3和A2780细胞中干扰NCOA5的表达均显著抑制卵巢癌细胞侵袭和转移能力 (P<0.05),并促进EMT相关蛋白E-cadherin的表达,抑制细胞中EMT相关蛋白N-cadherin、vimentin和Slug蛋白的表达(P<0.05)。结论 NCOA5促进卵巢癌侵袭转移能力,具有作为卵巢癌新型预后生物标志物和治疗分子靶点的潜力。     

基于数据库挖掘分析BUB1基因在卵巢癌中的表达及意义

目的探讨BUB1在卵巢癌(Ovarian cancer, OV)中的表达及与预后的关系。方法利用Oncomine数据库挖掘BUB1在各种肿瘤中的表达;通过GEPIA数据库分析BUB1在卵巢癌组织中的表达,采用Kaplan-Meier数据库分析BUB1在卵巢癌中的预后价值;通过Coexpedia数据库构建BUB1在卵巢癌中的共表达基因网络,并用FunRich软件对score>13的共表达基因注释。利用WebGestalt对其进行KEGG通路富集分析。按score高低筛选出关键基因,GEPIA进一步分析BUB1与关键基因的相关性。结果 (1)从Oncomine数据库检索出BUB1基因相关研究424项,其中高表达85项,低表达15项。(2)GEPIA分析表明,BUB1在卵巢癌组织中的表达高于正常组织(P<0.05)。(3)Kaplan-Meier数据库分析结果显示,BUB1基因低表达的卵巢癌患者总生存期(HR=1.2,P<0.05)增加。(4)BUB1的共表达基因主要有AURKA、DLGAP5、KIF2C、TPX2、BUB1B、DEPDC1、KIF23、CDCA3、TTK、...     

UBE2T基因对卵巢癌细胞增殖的调控作用及其机制

目的 探讨泛素结合酶E2T (UBE2T)基因在卵巢癌组织中的表达水平及其对卵巢癌细胞增殖的调控作用和机制。方法 通过基因表达谱交互分析(GEPIA)网站分析UBE2T基因在卵巢癌组织与正常组织中的差异表达。收集52例卵巢癌组织和癌旁组织样本,采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测UBE2T基因在卵巢癌组织和癌旁组织中的差异表达;采用MTT法检测细胞增殖的改变;采用Western blotting检测FA/BRCA通路FANCF和FANCD2蛋白的表达;采用彗星实验检测DNA损伤。结果 qRT-PCR结果显示,UBE2T基因在卵巢癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P <0.01)。转染cDNA-UBE2T至SKOV3细胞后UBE2T蛋白高表达,与阴性转染组比较,细胞增殖水平明显增加(P <0.05)。Western blotting结果显示,UBE2T过表达后可增加SKOV3细胞中FA/BRCA通路FANCF和FANCD2蛋白的表达(P <0.05)。彗星实验发现,UBE2T过表达可以抑制顺铂引起的卵巢癌细胞DNA损伤。结论 UBE2T基因在卵巢癌组织中高表达,...     

卵巢癌中C-erbB_2、p53基因表达及临床意义

目的:探讨卵巢癌中C-erbB2基因、p53基因的表达情况及p53蛋白表达与PCNA的相关性。方法:对比2008年1月～2009年1月应用免疫组化SP三步法检测的40份卵巢癌组织、10份正常卵巢组织中C-erbB2基因、p53基因的表达情况及PCNA计数。结果:卵巢癌组织中存在C-erbB2基因与p53基因的异常表达,阴性率显著高于正常卵巢组(P<0.01),p53蛋白表达阳性与阴性两组间PCNA计数差异有统计学意义,阳性组高于阴性组(P<0.05)。结论:C-erbB2基因、p53基因的异常表达与卵巢癌的发生有关,其异常表达强度与肿瘤的分化及患者的预后有关,临床联合检测C-erbB2基因、p53基因的表达情况及PCNA计数,有助于准确判断卵巢癌的恶性程度及患者的预后。     

基于Oncomine数据库及生物信息学方法分析KIF11在浆液性卵巢癌中的表达及临床意义

目的：探究驱动蛋白家族成员11(KIF11)在浆液性卵巢癌中的表达及临床意义。方法：应用Oncomine、GEPIA数据库分析KIF11 mRNA在卵巢癌与正常卵巢中的表达情况;应用Kaplan-Meier Plotter分析KIF11表达水平与卵巢癌预后的关系;应用免疫组化法检测89例浆液性卵巢癌组织及26例正常卵巢组织中KIF11蛋白表达水平,分析KIF11蛋白表达水平与卵巢癌患者临床病理特征的相关性。结果：Oncomine数据库示,浆液性卵巢癌组织中KIF11 mRNA的表达高于正常卵巢组织（P<0.05）。GEPIA数据库示,KIF11 mRNA在卵巢癌中高表达（P<0.05）。Kaplan-Meier Plotter分析示,KIF11高表达组卵巢癌患者的总生存期（OS）、无进展生存期（PFS）低于低表达组（P<0.05）。免疫组化示,KIF11蛋白在浆液性卵巢癌中高表达率高于正常卵巢（P<0.05）,浆液性卵巢癌中KIF11高表达与淋巴结转移（P=0.001）、FIGO分期（P=0.005）及组织分级（P=0.002）有关。结论：KIF11 mRNA及...     

Nckα基因沉默对上皮性卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨Nckα基因沉默对上皮性卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:选取正常卵巢组织切片、良性卵巢病变组织切片以及卵巢癌组织切片分析Nckα表达特点,通过免疫荧光、细胞侵袭、迁移实验、细胞增殖实验、构建皮下移植瘤动物模型以及Western blot检测等方式检测Nckα沉默对卵巢癌SKOV3细胞株、OVCAR-3细胞株的影响。结果:Nckα基因沉默可降低卵巢癌细胞侵袭、迁移能力; Nckα沉默卵巢癌SKOV3细胞、OVCAR3细胞吸光度值明显低于对照组,Nckα过表达卵巢癌SKOV3细胞、OVCAR3细胞吸光度值明显高于对照组(P <0.05); Nckα沉默组细胞瘤体体积小于对照组(P<0.05); Nckα沉默卵巢癌SKOV3细胞、OVCAR3细胞PI3K p110α、p70S6K、AKT、P-AKT蛋白表达明显低于对照组,Nckα过表达卵巢癌SKOV3细胞、OVCAR3细胞PI3K p110α、p70S6K、AKT、P-AKT蛋白表达明显高于对照组(P<0.05)。结论:Nckα基因沉默可导致上皮性卵巢癌细胞增殖、迁移能力降低,延缓皮下移植瘤生长速度,可能与...     

下调microRNA-214表达对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖及凋亡的影响

目的观察下调microRNA-214(miRNA-214)表达对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法采用脂质体介导方法将miRNA-214抑制剂转染人卵巢癌SKOV-3细胞,分为正常对照组、阴性对照组和miRNA-214下调组,采用实时定量聚合酶链反应方法检测miRNA-214、p21和p53基因mRNA表达,Western blot法检测细胞p21和p53蛋白表达。四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果正常对照组、阴性对照组和miRNA-214下调组人卵巢癌SKOV-3细胞miRNA-214表达分别为11.32±0.47、10.18±0.45和6.52±0.49,细胞增殖率分别为(17.61±1.83)%、(19.14±1.86)%和(11.24±1.89)%,细胞凋亡率分别为(14.47±1.86)%、(13.72±1.89)%和(21.21±1.91)%,p21基因mRNA表达分别为5.96±0.69、5.38±0.74和8.31±0.72,p53基因mRNA表达分别为3.64±0.39、3.17±0.38和5.86±0.37,p21蛋白表达分别为0.47±0.19、0.49±0.21和0.75±0.22,p53蛋白表达分别为0.40±0.14、0.39±0.16和0.66±0.18。与正常对照组和阴性对照组比较,miRNA-214下调组人卵巢癌SKOV-3细胞miRNA-214表达、细胞增殖率降低(P<0.05,P<0.01),细胞凋亡率、p21基因mRNA表达、p53基因mRNA表达、p21蛋白表达、p53蛋白表达均增加(P<0.05,P<0.01);阴性对照组与正常对照组比较,miRNA-214表达、细胞增殖率、细胞凋亡率、p21基因mRNA表达、p53基因mRNA表达、p21蛋白表达、p53蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论下调人卵巢癌SKOV-3细胞miRNA-214表达可抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡,上调p21和p53基因表达可能是其作用机制。     

GDI2通过p75NTR通路调节结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡

目的：探讨GDP解离抑制因子2(GDI2)对结直肠癌（CRC）细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡以及细胞周期的影响及其机制。方法：TCGA数据库分析GDI2 mRNA在CRC肿瘤组织中的表达。将CRC细胞分为sh-NC组和sh-GDI2组，采用CCK-8法检测细胞活力，克隆形成实验检测细胞增殖，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭，流式细胞术检测细胞凋亡和周期，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测GDI2基因表达，western blotting检测GDI2蛋白和神经生长因子受体（p75NTR）通路关键因子（IKK、p-NF-κB和p-IκB）的表达。构建异种移植瘤裸鼠模型，观察GDI2对CRC肿瘤生长的影响。结果：与癌旁正常组织和正常结肠上皮细胞相比，GDI2在CRC患者肿瘤组织和细胞系中的表达上调（P<0.05）。sh-GDI2能抑制CRC细胞增殖、迁移、侵袭，阻滞细胞周期进程，并促进凋亡（均P<0.05）。与sh-NC组相比，sh-GDI2组p75NTR蛋白表达上调，IKK、p-NF-κB、p-IκB蛋白表达下调（均P<0.05）。敲低GDI2可明显抑制裸鼠体内...