口腔液在新型冠状病毒核酸和抗体检测中的应用

为探讨新型生物标本口腔液在新型冠状病毒（SARS-CoV-2）核酸和抗体检测中的应用价值,采集2021年10—11月北京两起新型冠状病毒肺炎（简称“新冠肺炎”）聚集性疫情的7例确诊病例的口腔液及配对的呼吸道和血液样本。采用荧光定量PCR和血清抗体检测试剂盒分别检测SARS-CoV-2核酸和IgG抗体,同时采用新建的磁微...     

新型冠状病毒中和抗体检测方法的建立与应用

目的 建立基于微量细胞中和试验（MRNT）的血清抗新型冠状病毒（SARS-CoV-2）中和抗体的检测方法,并应用于检测新型冠状病毒肺炎（COVID-19）病例的血清抗SARS-CoV-2中和抗体水平。方法 用Vero细胞和已知滴度的SARS-CoV-2毒株对待测血清进行基于MRNT的中和抗体检测,对中和反应作用时间、Vero细胞代次等影响试验的关键因素进行验证,并用建立的方法重复4次检测8份血清样品的中和抗体效价,计算变异系数（CV）,验证方法的重复性;用建立的方法检测165份COVID-19病例血清样本的中和抗体水平并进行分析;采用磁微粒化学发光免疫分析法（CMIA）检测其中55份感染3～4周的血清样本,并与建立方法的结果比对,分析两者的分布情况及相关性。结果不同中和反应作用时间（1.0 h、1.5 h、2.0 h）及不同代次（5代、10代、15代）Vero细胞测得血清样本的中和抗体效价相同;8份血清样本重复检测4次结果的CV为0.0%～14.2%,差异无统计学意义（F=0.508,P>0.05）,表明重复性良好;建立的方法测得165份血清阳性率98.18%,中和抗体效价分布范...     

化学发光法与胶体金法检测SARS-CoV-2抗体阳性率比较

目的　探讨化学发光法和胶体金法检测SARS-CoV-2抗体在2019冠状病毒病（coronavirus disease 2019, COVID-19）诊断中的应用价值。方法　收集51例COVID-19确诊患者和41例非COVID-19患者的血清,用化学发光法检测非COVID-19组血清中SARS-CoV-2抗体IgM、IgG及联合检测（IgM或IgG）的阳性率;用化学发光法和胶体金法检测COVID-19组血清中SARS-CoV-2抗体IgM、IgG及联合检测（IgM或IgG）的阳性率,比较2种方法的一致性。结果　COVID-19组平均发病时间为（16.9±5.4）d。其中22例IgM阳性,阳性率为43.1%;47例IgG阳性,阳性率为92.2%;49例联合检测（IgM或IgG）阳性,阳性率为96.1%。非COVID-19组中,1例IgM阳性,阳性率为2.4%;0例IgG阳性,阳性率为0;1例联合检测（IgM或IgG）阳性,阳性率为2.4%。在COVID-19组中,化学发光法与胶体金法检测SARS-CoV-2抗体联合检测（IgM或IgG）的阳性率分别为96.1%和68.6%,化学发光法优于胶体金法（P＜0.05）。结论　SARS-CoV-2抗体的检测对COVID-19诊断有重要的意义,且化学发光法检出率优于胶体金法。     

新型冠状病毒检测技术的研究进展

快速、高灵敏度、高准确度的病毒检测技术对于控制新型冠状病毒（SARS-CoV-2）的传播至关重要。该研究介绍了现有的各种SARS-CoV-2检测技术，以及其他先进技术在SARS-CoV-2诊断中的应用，并通过不同检测技术的比较试图寻找更快、更灵敏、更准确且操作更简单的检测技术，为SARS-CoV-2的快速诊断提供思路。     

核酸快速检测系统在新型冠状病毒检测中的应用评价

目的:探讨核酸快速检测系统在新型冠状病毒（SARS-CoV-2）检测中的性能与应用评价。方法:收集北京市疾病预防控制中心和中日友好医院检验科2020年2至7月的临床样本,评价核酸快速检测系统对SARS-CoV-2检测的敏感度、特异度、抗干扰能力、精密度以及临床样本检测符合率。分析敏感度的评价通过检测浓度梯度稀释的SAR...     

LIAISON索林全自动化学发光免疫分析仪保养与常见故障排除

0 引言 化学发光免疫技术是当前主流的免疫分析技术,该技术集化学发光的高灵敏度与抗体技术的高特异性于一体,提高了实验结果的精确度和准确性,在全自动免疫分析设备上得到广泛应用.LIAISON全自动化学发光免疫分析仪是由德国索林公司所生产的新型仪器,该仪器具有下列优点：（1）检测技术先进.采用最先进的化学免疫分析技术.固相使用超顺磁微粒,发光标记物为异鲁米诺酯衍生物.（2）检测速度快,高达180个测试/h.（3）样本处理量大.可一次设定144个样本和15种不同的测试项目,总量高达1 500个测试.（4）独特的集成式试剂盒.所有分组,包括校准品均集成于试剂盒内,方便用户使用.     

新型冠状病毒实验室检测方法研究进展

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)正在世界范围内暴发流行,导致人类严重呼吸道疾病且致死率高,引起全球的高度关注。该病毒造成的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)尚无特效治疗药物,早期诊断是当前主要的防控措施。依据《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)》,病毒核酸检测阳性、基因测序高度同源或血清学抗体检测阳性均可确诊SARS-CoV-2感染,然而各种检测方法均存在一定的假阴性率和潜在的假阳性结果。本文对目前正在应用和报道的SARS-CoV-2实验室检测方法,如病毒分离、二代测序技术、反转录-聚合酶链式反应、恒温核酸扩增技术、基因芯片和抗体检测等进行综述,并探讨各种方法的优缺点,为优化SARS-CoV-2感染诊断提供参考。     

2022年5—9月新疆、江苏口岸输入性新冠病毒基因型分析

目的 对新疆、江苏口岸输入性新冠病毒（SARS-CoV-2）核酸阳性灭活样本开展全基因组测序，掌握输入性SARS-CoV-2基因型及分子特征，为口岸新冠肺炎疫情防控提供理论指导。方法 采用商品化荧光定量RT-PCR试剂盒检测2020年5—9月新疆、江苏口岸入境人员咽拭子样本的SARS-CoV-2核酸，检测荧光阈值小于等于32(Ct≤32)的阳性样本用华大二代测序仪进行全基因组测序。结果 2020年5—9月，共检测了新疆、江苏口岸入境人员29 917份咽拭子样本，检出输入性新冠病毒阳性人员156例，其中江苏口岸113例，新疆口岸43例。对其中41份阳性样本开展了全基因组测序，均为奥密克戎（Omicron）变异株，共15个基因型，最多的是BA.5.2变异株，有17株；其次是BA.2.75变异株，4株；此外还有BA.2、BA.5.1、BA.4等基因型。结论 及时掌握了新疆、江苏口岸输入性SARS-CoV-2变异特征，为口岸新冠肺炎防控提供了技术支持。     

一种HIV抗体化学发光诊断试剂的临床评价

目的临床评价北京科美东雅生物技术有限公司HIV抗体化学发光诊断试剂。方法用HIV抗体化学发光诊断试剂对既往已知经确证检测结果为HIV-1抗体阳性者标本500份和用酶联免疫吸附（ELISA）试剂检测为HIV-1／2抗体阴性者标本1500份的血清样品进行检测，并对检测结果进行比较。结果HIV抗体化学发光诊断试剂盒的敏感性、特异性和功效率均为100％。结论HIV抗体化学发光诊断试剂盒具有良好的应用价值。     

新型冠状病毒肺炎常态化背景下云南某心血管专科医院核酸检测经验总结

2019年以来，新型冠状病毒肺炎（COVID-19）在世界范围内流行爆发，新型冠状病毒（SARS-CoV-2）持续变异，不仅对国际社会造成了恐慌，还对我国境外输入防控造成了巨大压力。云南地处边陲，大规模核酸筛查已成为常态化疫情防控的重要内容。在此背景下如何结合自身实际情况让SARS-CoV-2核酸检测高质量高效率进行是心血管专科医院面临的重大问题，本文依据云南省阜外心血管病医院3万多人次的SARS-CoV-2核酸检测工作，从两方面进行经验总结，一是在大量的急危重症手术情况下，如何应用快速核酸检测技术及时准确的出具报告；二是面临常规大规模筛查时如何能在保证质量的基础上，尽可能的缩短报告时间。希望可以为急诊实验室管理提供可借鉴之处。     

同时检测4种传染病病原体的蛋白质微阵列研究

[目的]建立1种用蛋白质微阵列法可同时检测血清中艾滋病病毒（HIV）抗体、丙型肝炎病毒（HCV）抗体、梅毒螺旋体（TP）抗体和乙型肝炎病毒表面抗原的方法。[方法]将基因工程HIV、HCV、TP重组抗原和乙肝病毒单克隆抗体共价结合于固相载体玻片上，制成蛋白质微阵列。血清样本经稀释、加样、孵育、洗涤后，加上Cy3荧光标记物，用激光芯片扫描系统对蛋白质微阵列进行扫描成像。将获得的图像用Imagene专用分析软件进行分析，所获数据根据cutoff值自动生成判断结果。用此蛋白微阵列系统检测了100份4个项目皆阴性的血清标本，确定了其cutoff值。检测了经酶联免疫吸附试验（EUSA）筛选出4个项目皆阴性的标本40例；艾滋病病毒抗体阳性标本30例；乙肝表面抗原、丙肝抗体、梅毒特异性抗体阳性血清各100份。[结果]蛋白质微阵列法检测艾滋病病毒抗体、丙肝抗体和乙型肝炎表面抗原的阳性和阴性标本的符合率皆为100％，梅毒特异性抗体阳性符合率为97％，阴性符合率为100％。[结论]蛋白质微阵列法检测HIV、HCV、TP和HBsAg与EUSA法检测结果具有高度的符合率。该法具有高通量、快速、特异性强、操作简便等特点，适用于大规模样本的分析，在卫生检疫传染病检测方面具有应用和推广价值。     

四种新型冠状病毒抗原快速检测试剂比对分析

目的 对4种市售国产SARS-CoV-2抗原检测试剂进行分析比较，为SARS-CoV-2抗原检测提供参考。方法 选择4种市售国产SARS-CoV-2抗原检测试剂盒，分别为试剂A、B、C和D，对54份新型冠状病毒肺炎(COVID-19)病例呼吸道样本进行抗原检测，以实时荧光聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)检测结果为标准。结果 54份COVID-19病例呼吸道样本，48份为阳性样本，1份为ORF1ab单靶标阳性，3份为N单靶标阳性，2份为阴性。4种抗原检测试剂的阳性率分别为试剂A 56.25%、试剂B 58.33%、试剂C 60.42%及试剂D 58.33%，阳性检出率差异无统计学意义(χ²=0.171,P=0.982)。4种抗原检测试剂检测结果一致性从高到低依次为：试剂B和试剂D>试剂A和试剂B=试剂A和试剂D>试剂B和试剂C>试剂A和试剂C。结论 4种抗原检测试剂的一致性较高，对CT值低于25的样本阳性检出率达64.29%～93.33%，而CT值高于30的样本阳性检出率很低，提示试剂厂家需进一步优化性能，提高检测灵敏度。...     

一种灭活型样本保存液在新型冠状病毒核酸快速检测中的应用评价

目的评价含表面活性剂Triton X-100及NP40的灭活型样本保存液对新型冠状病毒（SARS-CoV-2）的灭活效果及其对核酸快速检测的影响。 方法通过测定灭活型样本保存液对SARS-CoV-2灭活前后病毒滴度变化,评价保存液的灭活效果;用灭活型样本保存液洗脱含有SARS-CoV-2模拟病毒的咽拭子样本,评价样本保存液对SARS-CoV-2核酸快速检测最低检测限和精密度的影响,并将SARS-CoV-2在灭活型样本保存液中保存不同时间以评价保存液对SARS-CoV-2核酸检测的影响。 结果灭活型样本保存液在5 min内可使SARS-CoV-2滴度至少下降2.76×10⁵倍;灭活型样本保存液对SARS-CoV-2核酸检测的灵敏度无影响,对SARS-CoV-2核酸检测Ct值的CV小于5%;SARS-CoV-2在灭活型样本保存液中于25 ℃或2 ℃~8 ℃条件下可至少稳定保存4 d。 结论含表面活性剂Triton X-100及NP40的灭活型样本保存液可有效灭活SARS-CoV-2病毒,且灭活后病毒核酸检测不受影响,适用于核酸快速检测。     

新型冠状病毒感染核酸和抗体检测方法比较

目的比较实时荧光RT-PCR法和胶体金法在新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染中的诊断价值。方法本研究采用回顾性研究,收集无锡市各医疗机构及集中隔离点2020年1月25日—2020年2月12日送至无锡市疾病预防控制中心实验室的新型冠状病毒冠肺炎(COVID-19)相关的实验室检测血清标本和鼻咽拭子标本各192份。33份为核酸检测阳性样本,159份为核酸检测阴性样本,包括68例确诊患者的密切接触者和91例门诊发热病例样本。采用胶体金法对所有研究对象的血清进行IgM、IgG抗体检测,比较抗体检测和核酸检测结果,进行统计学差异分析。结果病毒核酸阳性率17.19%(33/192),IgM抗体阳性率7.29%(14/192),IgG抗体阳性率11.46%(22/192),IgM和IgG联合检测阳性率11.46%(22/192)。病毒核酸和IgM、IgG、联合IgM和IgG抗体检测结果分别进行Kappa一致性检验,一致性较好,Kappa值分别为0.502、0.726、0.726,P值均0.001。两种检测方法总符合率93.23%(179/192)。以实时荧光RT-PCR法为金标准,联合IgM和IgG抗体检测灵敏度63.64%,特异度99.37%,阳性预测值95.45%,阴性预测值92.94%,准确度63.01%。结论胶体金法具有方便、快捷、灵敏度和特异度高等优点,实现SARS-CoV-2的快速筛查,可用作实时荧光RT-PCR检测阴性病例的补充检测。两种检测方法联合应用,发挥各自优势,对SARS-CoV-2感染的诊断和防控具有重要的意义。     

不同人群新型冠状病毒核酸检测的临床价值

 目的 探讨新型冠状病毒（SARS-CoV-2）核酸检测在发热门诊、隔离病房、易感人群以及大规模筛查等不同人群中的应用价值,为SARS-CoV-2实验室检测提供参考依据。方法 采集2020年2月1日-3月22日郑州人民医院不同人群的咽拭子,包括发热门诊、隔离病房患者,一线疫情防控医护人员,以及无新型冠状病毒肺炎（COVID-19）症状的住院患者、陪护家属和复工人员。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法,使用A、B两种国产检测试剂盒对发热门诊、隔离病房的患者进行SARS-CoV-2核酸检测。结果 共检测15 497份咽拭子标本,SARS-CoV-2核酸阳性24份,核酸阳性病例均来自发热门诊和隔离病房。24例咽拭子SARS-CoV-2核酸阳性患者同时送检的血标本核酸结果均呈阴性。A、B两种试剂首次咽拭子核酸检测结果一致,2例确诊COVID-19患者治疗后复查咽拭子标本,A组试剂检测为阳性,B组试剂检测为阴性。该院疫情防控一线医护人员、未出现COVID-19症状的住院患者、陪护家属和复工体检人员核酸检测均为阴性。结论 复工人员、住院患者、陪护家属和一线疫情防控人员SARS-CoV-2核酸筛查均未发现阳性,咽拭子标本SARS-CoV-2核酸检测阳性率高于血标本,不同核酸检测试剂检测阳性率稍有差异。     

新型冠状病毒肺炎研究进展

2019年12月底,中国暴发了一场不明微生物引发的病毒性肺炎。经研究确认,该不明微生物为一种新的冠状病毒,即严重急性呼吸综合征冠状病毒2（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2）,2020年2月,WHO将SARS-CoV-2感染的肺炎正式命名为新型冠状病毒肺炎（coronavirus disease-2019, COVID-19）。随着对SARS-CoV-2及其引发肺炎研究的深入,SARS-CoV-2特点、COVID-19临床及流行病学特征、临床诊治技术等研究内容陆续在国内外杂志报道。本文对已开展的COVID-19研究工作梳理总结,围绕溯源分析、检测手段、临床表现、药物研发、病毒传播等5个方面进行综述,以期对临床及科研工作者提供帮助。     

新型冠状病毒双抗体夹心模式免疫胶体金层析方法的建立与评价

目的 建立新型冠状病毒(SARS-CoV-2)双抗体夹心模式免疫胶体金层析方法,以利于SARS-CoV-2感染的快速诊断。方法 采用2株针对重组核蛋白(nucleoprotein, NP)的单克隆抗体WT5(捕获抗体)和WT9(检测抗体),构建双抗体夹心模式免疫胶体金层析方法,并评价该方法的灵敏度、特异性、稳定性。结果 建立以SARS-CoV-2抗原为靶向分子的免疫胶体金层析方法。该方法能在10～15 min内完成对SARS-CoV-2抗原的检测,可检测病毒抗原浓度5 ng/mL以上的SARS-CoV-2阳性样本;制备的免疫胶体金层析试纸条的灵敏度和特异度分别为87.50%、99.36%,阳性预测值和阴性预测值分别为97.67%、96.27%;与鼻病毒、EB病毒、季节性流感(H3N2)无交叉反应,检测结果在1个月内仍保持较高稳定性。结论 SARS-CoV-2双抗体夹心模式免疫胶体金层析方法特异性高、稳定性好,操作简单、快捷,具备较好的快速诊断应用前景。     

火神山医院隔离病区新型冠状病毒污染情况调查

目的评价火神山医院隔离病区新型冠状病毒(SARS-CoV-2)污染情况,为新型冠状病毒肺炎(COVID-19)隔离病区制定合理的环境卫生管理策略提供科学依据。方法 2020年3月9日-3月29日在火神山医院随机选取2个普通隔离病区进行系统的样本采集工作。采集对象包括环境样本、医务人员个人防护用品(PPE)样本以及患者和医务人员手样本。采用棉签擦拭法采集样本,通过实时荧光定量聚合酶链反应检测法对样本进行SARS-CoV-2核酸检测,并对检测结果进行整理和分析。结果共采集244份样本,经SARS-CoV-2核酸检测,171份环境样本中1份阳性,来自患者床栏,阳性率为0.58%;49份医务人员PPE样本均为阴性;患者和医务人员手样本共24份,其中1份患者手样本阳性,阳性率为4.17%。结论合理规划隔离病区的布局和流程、严格落实环境消毒和手卫生制度能够有效降低隔离病区SARS-CoV-2污染程度,切断病毒传播途径,降低医务人员医院感染暴露风险。同时,COVID-19医院感染防控中还应加强患者个人卫生管理。     

新型冠状病毒IgG和IgM抗体检测的诊断价值探索

目的:通过对血清中新型冠状病毒1gM和IgG抗体的定性检测,探索新型冠状病毒1gM/gG抗体检测试剂盒(胶体金法)的临床诊断价值.方法:本研究以2020年1月3日至2020年3月19日于十堰市西苑医院收治的新型冠状病毒肺炎感染确诊患者141例和141名健康体检者为研究对象,采用胶体金免疫层析技术对患者血清中的新型冠状病...