中性粒细胞胞外诱捕网捕杀病原体的作用

中性粒细胞是人体先天免疫系统的重要效应细胞,具有细胞内与细胞外杀灭病原体的途径.活化中性粒细胞能形成胞外诱捕网(NETs)构成细胞外杀灭途径.NETs由染色质与颗粒(源性)蛋白质构成.NETs对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌,以及真菌有捕获与杀灭作用,对利什曼原虫、牛艾美耳球虫等寄生虫也有捕获与杀灭作用.     

中性粒细胞胞外诱捕网在动脉粥样硬化中的研究进展

动脉粥样硬化是由脂质驱动,多种细胞共同参与的血管慢性炎症性疾病。中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular trapping nets, NETs)是中性粒细胞响应炎症和病原体刺激时,释放染色质和颗粒物形成的网状细胞外结构,参与多种疾病的病理生理进程。近些年越来越多的研究表明中性粒细胞和其胞外诱捕网在动脉粥样硬化的进展中发挥重要作用。该文就NETs在动脉粥样硬化中作用的研究进展作一综述。     

中性粒细胞胞外诱捕网在癌症中的作用

中性粒细胞是体内一种主要的免疫细胞,具有趋化、吞噬和杀菌作用.作为体内固有免疫的重要组成部分,它们通常参与感染性疾病的防御和保护过程.然而,最近研究发现,中性粒细胞在体内可通过形成中性粒细胞胞外诱捕网(Neutrophil extracellular traps,NETs)促进癌细胞转移和侵袭.癌症是全球死亡的主要原因...     

中性粒细胞胞外诱捕网介导急性呼吸窘迫综合征患者肺损伤机制及对策

在急性呼吸窘迫综合征（ARDS）发生发展的过程中,中性粒细胞可产生包含多种生物活性物质的中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）。过度产生的NETs可通过水解蛋白及诱导炎症反应、影响肺泡巨噬细胞功能、激活凝血等机制导致肺组织损伤。针对NETs的形成途径及作用机制进行调节,可作为ARDS的治疗靶点。本文对NETs在ARDS中造成...     

中性粒细胞胞外诱补网抗痤疮丙酸杆菌的作用机制

目的:探讨中性粒细胞胞外诱补网(NETs)抗痤疮丙酸杆菌的作用机制.方法:提取正常人外周血多形核中性粒细胞(PMNs),并使其与痤疮丙酸杆菌进行孵育.采用荧光共聚焦倒置显微镜(confocal)观察NETs的形成,使用SYTOX Green对NETs的形成进行定量,菌落计数法检测NETs对痤疮丙酸杆菌的杀伤.结果:痤疮...     

Penicilazaphilone C抑制NETosis诱导哮喘炎症的机制研究

目的 探讨Penicilazaphilone C (PAC)对哮喘小鼠炎症反应的影响,以及中性粒细胞胞外诱捕网的形成(NETosis)介导哮喘发生发展的可能机制。方法 在体外,采用佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(PMA)诱导健康小鼠的中性粒细胞产生中性粒细胞胞外诱网(NETs)。设置四组PAC的不同剂量组及对照组,通过测定dsDNA的产生了解抑制效果。在体内,采用脂多糖(LPS)诱导建立哮喘小鼠模型,将30只小鼠随机分成对照组、哮喘组、地塞米松组、DNaseⅠ组及PAC组。测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞因子和炎性细胞水平;对肺组织采用HE染色、PAS染色及免疫荧光;通过Western blotting检测肺组织中的瓜氨酸化组蛋白;通过荧光镜检验证哮喘小鼠是否产生了NETs。结果 在体外,1.2 mg/mL的PAC可以显著抑制NETs的形成[0.3 mg/mL、0.6 mg/mL、0.9 mg/mL、1.2 mg/mL PAC组结果分别为(0.72±0.17) RFU、(0.35±0.09) RFU、(0.16±0.02) RFU、(0.11±0.03) RFU)],差异有统计...     

尿酸对急性发作期痛风患者外周血中性粒细胞胞外诱捕网形成的影响及其临床意义

目的 比较单钠尿酸盐(monosodium urate,MSU)刺激下外周血中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)水平在痛风急性发作期的作用及其临床意义.方法 收集2017年1月至2018年1月就诊于内蒙古医科大学附属医院风湿免疫科的急性发作期痛风性关节炎患者56...     

体外诱导糖尿病小鼠模型中性粒细胞胞外诱捕网的研究

目的 建立佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导糖尿病小鼠骨髓来源中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)形成的模型,为研究糖尿病足溃疡NETs产生和调节机制奠定基础。方法 提取链脲佐菌素 (streptozocin,STZ)诱导的糖尿病小鼠骨髓来源中性粒细胞,使用100、200、400nmol/L的PMA刺激细胞 3~7h。采用核酸染料Sytox Green染色胞外DNA,通过激光共聚焦显微镜检测各组网状结构的形成、荧光免疫组化法检测瓜氨酸化组蛋白H₃(citrulline histone H₃, Cit-H₃)的表达、荧光探针测定细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平,电子扫描显微镜下观察NETs 形成情况。结果 各组PMA刺激中性粒细胞,刺激5h形成少量NETs,6h时形成大量网状NETs结构,其中100nmol/L PMA处理组有明显NETs生成,7h时各组NETs开始消退;同时100nmol/L PMA刺激中性粒细胞6h时Cit-H₃的表达以及ROS水平显著升高;扫描电子显微镜可见NETs网状结构。结论 100nmol/L PMA刺激STZ诱导的糖尿病小鼠骨髓中性粒细胞6h,可显著促进Cit-H₃表达和ROS生成,诱导NETs生成,可作为研究糖尿病小鼠NETs研究的模型。     

细胞自噬参与中性粒细胞胞外诱捕网形成的机制研究进展

【摘要】自噬是将病原体或受损的细胞器转移至溶酶体进行降解的生物学过程,对机体处理饥饿、氧化应激和防御病原体入侵至关重要。中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）是由DNA和组蛋白等组成的网状结构,通过捕获、杀死、清除病原微生物来发挥其抗炎作用,但过度的NETs也可能使机体免疫系统异常活化,导致组织损伤。NETs的病理作用机制尚不清楚,但大量研究表明自噬参与其中,可能通过mTOR信号轴、PI3K、部分自噬基因及REDD1等调控参与NETs形成。本文就自噬参与NETs形成机制的研究进展做一综述,以期为揭示相关疾病的发病机制以及探索药物作用靶点提供参考依据。     

急性心肌梗死患者血浆NETs水平与冠状动脉病变严重程度的关系

目的 探讨急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血浆中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil ex-tracellular traps,NETs)主要成分瓜氨酸组蛋白3(citrulline histone 3,CitH3)、双链DNA(double-stranded DN...     

中性粒细胞胞外诱捕网在肝细胞癌中的作用

炎症反应参与许多急慢性疾病、肿瘤的病理进程。中性粒细胞是肿瘤中常见的炎症浸润,近年来中性粒细胞在肿瘤发病机制的重要作用逐渐被人们所重视,随着研究深入,中性粒细胞胞外诱捕网的存在引起了研究者的关注。该文就中性粒细胞胞外诱捕网在肝细胞癌中作用的研究进展展开综述。     

肝硬化患者中性粒细胞免疫功能障碍的研究进展

肝硬化患者易并发感染,这与其免疫功能障碍密切相关。中性粒细胞作为固有免疫的主要效应细胞,其数量减少及功能损伤在肝硬化患者免疫功能障碍中起关键作用,损伤的功能包括趋化、吞噬、呼吸爆发、形成和释放中性粒细胞胞外诱捕网等。本文在近年来最新研究进展的基础上就肝硬化患者中性粒细胞功能受损的原因及其机制进行了综述,阐述了改善肝硬化患者中性粒细胞功能的一些措施,以期为肝硬化患者中性粒细胞功能损伤的机制探索及治疗提供新思路。     

蝮蛇咬伤对中性粒细胞NETs和炎症损伤影响的临床研究

目的 探讨蝮蛇咬伤后中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular traps,NETs）标志物嗜中性粒细胞弹性蛋白酶（neutrophil elastase,NE）以及细胞游离DNA（cell free DNA,cf-DNA）变化和与炎症标志物及组织损伤标志物的相关性。方法 选取2021年9月—2022年12月杭州市中医院皮肤科收治的蝮蛇咬伤患者作为研究对象,研究包括36例蝮蛇咬伤患者,20例健康体检者;比较两组中性粒细胞、淋巴细胞计数、嗜中性粒细胞弹性蛋白酶（neutrophil elastase,NE）、细胞游离DNA（cell free DNA,cf-DNA）、血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A,SAA）、C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、中性粒细胞淋巴细胞比值（neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR）、肌酸激酶（creatine kinase,CK）、肌酸肌酶同工酶（creatine kinase-MB,CKMB）、天门冬氨酸转氨酶（aspartic transaminase,AST）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）水平,计算Pearson相关系数并利用Python软件编写代码绘制热力图、箱线图,分析中性粒细胞计数与NETs标志物、炎症标志物和组织损伤标志物之间的相关性。结果 蝮蛇咬伤后中性粒细胞计数升高,NETs标志物NE、cf-DNA升高,CRP、SAA、NLR、AST升高,淋巴细胞计数降低。蝮蛇咬伤后中性粒细胞数值与NE酶、cf-DNA血清含量呈正相关,而与炎标志物CRP和SAA之间没有明显相关性;而CRP与SAA、CKMB与LDH强正相关,CK与NE、SAA与NE之间呈正相关,淋巴细胞数与NLR呈负相关。结论 蝮蛇咬伤可能引起NETs水平上升,促进炎症加重和组织损伤。     

基于中性粒细胞外诱捕网探讨硫化氢对脓毒症心肌病的影响及作用机制

目的：基于中性粒细胞外诱捕网探讨硫化氢(H₂S)对脓毒症心肌病的影响及作用机制。方法：采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备脓毒症心肌病模型,将48只SPF级CLP大鼠随机分为假手术组、脓毒症模型组(模型组)、H₂S给药(NaHS,内源性H₂S供体)组、H₂S抑制剂(PAG,内源性抑制H₂S剂)组。造模完成后,给药组大鼠通过腹腔注射给药,模型组和假手术组大鼠予以注射等剂量的生理盐水,24h后检测各组大鼠H₂S水平,心肌酶指标及病理改变、心肌炎症因子水平、中性粒细胞外诱捕网形成相关因子GSDMD、MPO、CitH3。结果：与假手术组相比,模型组大鼠H₂S水平明显降低,心肌损伤更显著,予以腹腔注射硫氢化钠后,相较于模型组,H₂S给药组大鼠血清H₂S水平增加,且中性粒细胞外诱捕网相关蛋白GSDMD、MPO、CitH3表达减少,炎症因子水平降低,以上改变可被H₂S抑制剂逆转。结论：外...     

三株人肺癌细胞放射敏感性体外研究

目的通过体外实验探讨三株人肺癌细胞的放射敏感性。方法使用^60钻γ射线对人小细胞型肺癌细胞株（NCI-H446）和人肺鳞癌细胞株（SK—MES-1）和人肺腺癌细胞株（Lu-165）进行照射，采用克隆形成实验拟合细胞存活曲线，根据D0、Dq、N及SF2值等放射生物学参数，比较肿瘤细胞的放射敏感性。流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡率，分析3种肿瘤细胞的凋亡率与放射敏感性之间的关系。结果3种肿瘤细胞D0、Dq、N及SF2值大小依次为NCI—H446〈SK—MES-1〈Lu—165，放射敏感性依次为NCI—H446〉SK—MES-1〉Lu—165。流式细胞仪检测到明显的凋亡峰，肿瘤细胞凋亡率随着照射剂量的增加而增加，并且3种肿瘤细胞株凋亡峰值依次为NCI-H446〉SK—MES-1〉Lu-165，与其放射敏感性高低一致。结论肿瘤细胞凋亡率的检测对预测其放射敏感性有一定的价值。     

中性粒细胞胞外诱捕网在脓毒症中的作用机制与靶点

中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是一种新的杀灭病原体的网状染色质结构,它在脓毒症的病理过程中起到了重要的作用。在脓毒症的病理过程中,NETs杀灭病原体的同时也可能会引发炎性级联反应,并对凝血功能造成影响,还可以直接造成血管内皮的损伤与渗漏。文章对NETs在脓毒症中的作用机制、已经过证实的通路及目前的干预手段进行综述,并分析了未来可能的研究方向。希望通过对脓毒症中NETs的讨论,为今后脓毒症的研究与治疗提供新的思路。     

痛风病人周围血中性粒细胞外诱捕网的测定及其意义

目的 比较中性粒细胞外诱捕网(NETs)在痛风病人与健康对照组血清中表达水平的差异,以探讨NETs在痛风中可能存在的作用。 方法 用MPO-DNA ELISA法进行间接定量检测40例痛风病人和24名健康对照者周围血血清中游离NETs水平并分析其差异,同时分析痛风病人周围血NETs水平与血清红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、尿酸、病程等指标的相关性,及使用秋水仙碱组(19例)和未使用秋水仙碱组(21例)痛风病人血清中NETs水平的差异。 结果 痛风组NETs的浓度(2 119.62±1 843.36)pg/mL高于健康对照组(1 894.66±113.52)pg/mL,差异有统计学意义(P < 0.01)。痛风组血清NETs水平与ESR值呈正相关(P < 0.05),与CRP值呈正相关(P < 0.01),与血尿酸、病程等均无相关性(P>0.05)。未服用秋水仙碱组痛风病人血清NETs浓度(2 138.24±173.60)pg/mL高于服用秋水仙碱组(2 099.05±196.23)pg/mL,但差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 中性粒细胞可能通过一种新的死亡方式,即网捕死亡形成NETs,参与痛风性关节炎的发病,血清NETs水平可能与痛风疾病活动度有关。