应用聚合酶链反应检测各孕期孕妇弓形虫感染

我们通过聚合酶链反应(PcR)、血清学试验及部分动物接种，对367名各孕期孕妇外周静脉血、脐血及死胎组织进行弓形虫检测：结果：PCR DNA阳性7例，循环抗原(CAg)阳性2例．特异性IgM阳性1例。总阳性翠1，9%。对其中1例PCR DNA、CAg阳性的孕妇血进行动物接种，结果阳性，28份死胎组织中，发现一死胎心、肺、肝、肾、眼、脑组织弓形虫DNA均阳性。提示：孕妇弓形虫感染的危害在我国(省)并非少见。开展对孕妇弓形虫感染的检测，将有利于优生优育工作的开展。PCR较其它方法更具特异性及敏感性．且操作简便、快速，适台于孕妇弓形虫感染的监测。     

自然流产妇女弓形虫感染的调查研究

目的　探讨自然流产妇女与弓形虫 (Tox)感染的相关性。方法　采用酶联免疫吸附试验(EL ISA)对自然流产的 4 76例孕妇外周血进行了弓形虫循环抗原 (CAg)和特异性抗体 (Tox- Ig M,Tox- Ig G)的检测 ,并和正常妊娠妇女作比较 ;应用聚合酶链反应 (PCR)技术对经 EL ISA测定为阳性的 1 4例孕妇流产物进行 Tox- DNA检测。结果　流产组 CAg,Tox- Ig M,Tox- Ig G等阳性率分别为 5 .2 5 % ,6 .30 % ,1 1 .76 % ,其中 CAg及 Tox- Ig M阳性率与正常孕妇相比 ,差异有非常显著性 (P<0 .0 1 ) ;1 4例流产物中 Tox- DNA阳性 8例 ,阳性率为 5 7.1 4 %。结论　 Tox可通过胎盘传给胎儿 ,引起流产 ;孕妇急性感染与自然流产有相关性 ,CAg,Tox- Ig M,CAg+Tox- Ig M阳性率与发生流产次数呈正相关     

少数民族地区孕妇弓形虫感染免疫学检测研究

目的:调查少数民族地区弓形虫感染状况及其对胎儿的影响。方法:用酶联免疫吸附法(ELISA)检测孕妇血清弓形虫循环抗原(CAg)、IgM及IgG抗体水平。结果:86例病理妊娠的孕产妇中,3项指标阳性40例,阳性率为46.5%,血清中CAg阳性7例,阳性率为8.13%;IgM阳性12例,阳性率为13.95%;IgG阳性21例,阳性率为24.41%。结论:弓形虫感染对胎儿有较大危害,是引起胎儿流产、死胎及畸形的主要原因之一。少数民族地区不同民族孕产妇弓形虫感染率比较差异无统计学意义,孕产妇弓形虫感染率与猫、犬接触史明显相关。基层地区加大孕妇弓形虫感染检测对民族优生优育有较大帮助。     

贵州省育龄妇女弓形虫感染状况和基因分型

目的了解贵州省育龄妇女弓形虫感染状况并鉴定弓形虫基因型,为贵州省育龄妇女弓形虫感染的防治提供依据。方法采用酶联免疫吸附试验检测729例育龄妇女外周血标本弓形虫循环抗原(CAg)、抗弓形虫抗体IgG、IgM,利用聚合酶链反应扩增弓形虫特异性基因片段(529 bp高重复序列)进行核酸检测,阳性标本则用多重巢式—聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析方法对弓形虫进行基因分型。结果 479例孕妇外周血血浆中CAg、IgG和IgM阳性率分别为0.63%、7.10%和0.84%,总阳性率为8.56%。其中正常妊娠组样本弓形虫CAg、IgG和IgM阳性率分别为0.56%、4.47%和0.56%,有异常妊娠史组样本弓形虫CAg、IgG和IgM阳性率分别为0.83%、14.87%和1.65%,健康对照组中样本IgG阳性率为4.00%,未发现弓形虫CAg及IgM抗体。正常妊娠组1例、异常妊娠史组2例标本弓形虫核酸检测呈阳性,弓形虫基因分型为非典型虫株,即Chinese 1型(Toxo DB#9)。结论有异常妊娠史的孕妇弓形虫感染率明显高于正常妊娠孕妇及健康人群,提示异常妊娠与弓形虫感染密切相关,Chinese 1型弓形虫虫株可能是贵州育龄妇女人群中感染流行的优势虫株。     

先天性弓形虫感染对中学生学习和记忆的影响

目的探讨先天性弓形虫感染对儿童学习和记忆的远期影响,为先天性弓形虫病防治和康复提供指导。方法选建保健册孕妇分娩的、现读中学儿童作为研究对象,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测孕妇外周血弓形虫IgM,CAg,对弓形虫IgM,CAg阳性孕妇,检查新生儿脐血弓形虫IgM,CAg,根据婴儿出生时脐血弓形虫检测结果分感染阳性组(感染组孕妇生小儿IgM或CAg阳性),感染阴性组(感染组孕妇生小儿IgM和CAg阴性)和非感染组(非感染组孕妇生小儿);选择愿意合作感染阳性组60例,分治疗和不治疗各30例,比较干预效果。采用简明精神状况调查量表(MMSE)、汉诺塔测试和威斯康星卡片分类测试进行神经心理学检查。结果在MMSE测试中,阳性未治组在回忆能力、计算力以及总分测试中得分显著低于非感染组(P<0.05)。学习前,在TOH和WCST测试中,阳性未治组与非感染组差异有统计学意义(P<0.05);阳性未治组与治疗组差别有统计学意义,(P<0.05)。学习后,阳性治疗组、阳性未治组TOH得分与学习前差别无统计学意义(P>0.05),阳性未治组WCST测定指标差异有统计学意义(P<0.05)。结论弓形虫感染出生儿童脑部功能受到损害,早期治疗和训练后好转,干预措施有效。     

916名就诊农村育龄妇女弓形虫血清学检测分析报告

目的探讨农村育龄妇女弓形虫感染分布特点和影响。方法用弓形虫抗体IgG、IgM金标诊断试剂和CAg-ELISA试剂,检测916名育龄妇女血清弓形虫IgM、IgG和CAg。结果弓形虫循环抗原(CAg)或抗体阳性156例,其中CAg阳性39例,IgM阳性69例,IgM、IgG均阳性44例,CAg、IgM两项阳性的4例。结论对孕期妇女,应强调在妊娠12周内进行弓形虫血清学检测,加强孕期监测,做好孕期保健和相关健康教育宣传指导,这对于降低不良妊娠结局的发生和优生优育有着重要作用。     

套式聚合酶链反应及限制酶分析对孕妇巨细胞病毒感染及其母婴传播研究

用套式聚合酶链反应(nPCR)及限制酶分析,病毒分离和特异性抗体测定检测孕妇外周血,脐带血及死胎组织巨细胞病毒(HCMV)。结果367名孕妇中,孕早、中、晚期HCMV阳性率分别为8.6％、1.6％及7.0％。nPCR检出率(4.9％)高于病毒分离(3.0％,P<0.025)。6份nPCR阳性母血中,3份配对脐血nPCR也阳性,母—脐传播率为50％(3/6)。28例死胎组织中,发现一死胎肺组织nPCR DNA阳性。提示:nPCR能提高诊断HCMV的特异性与敏感性,对孕妇及胎儿/新生儿HCMV感染的研究有重要意义。     

孕妇弓形虫感染胎盘垂直传播状况调查

目的探讨孕妇弓形虫感染经胎盘垂直传播的情况。方法采用酶联免疫吸附试验三联诊断法对93例孕妇和新生儿血清标本进行弓形虫感染的血清学检测。结果孕妇弓形虫各单项检测阳性率分别为循环抗原（CAg）8．6％。IgM10．8％。IgG36．6％，新生儿组分别为CAg4．3％，IgM2．2％，IgG15．1％；孕妇弓形虫平均感染率为45.2％，新生儿弓形虫平均感染率为19.4％；平均垂直传播率为42．9％，孕妇IgG垂直传播率为41.3％，CAg垂直传播率为50％。结论孕妇是弓形虫感染高危人群，通过胎盘垂直传播感染胎儿的危险性很高，应对孕妇开展血清学监测及时采取措旋．有效地预防先天性弓形虫感染。     

妊娠期妇女弓形虫感染现状及妊娠结局分析

目的:对本地区妊娠期妇女弓形虫感染进行调查,分析影响因素及妊娠结局。方法:研究对象均为慈溪地区主要医院门诊2015年2月-2019年6月接受弓形虫抗体检测的妊娠期妇女4825例,抗体检测阳性为阳性组,从阴性中随机选取440例作为阴性组。对两组孕妇感染情况、危险因素、妊娠结局进行分析。结果:弓形虫抗体阳性率为7.1%(344例),其中抗弓形虫IgG抗体阳性占77.3%(266例),抗弓形虫IgM抗体阳性占比22.7%(78例)。阳性组孕妇不良妊娠结局发生率(21.5%)高于阴性组(2.7%)(P0.05)。经单因素及多因素logistic回归分析表明,动物密切接触史、生肉饮食习惯、火锅/烧烤饮食习惯、工作需要品尝生肉等是妊娠期妇女弓形虫感染的危险因素(P0.05)。结论:妊娠期妇女弓形虫感染可增加自然流产、死胎/早产、出生缺陷等不良妊娠结局。妊娠期妇女应减少与饲养动物的密切接触,养成良好饮食卫生习惯以及勤洗手消毒的工作习惯,同时加强健康教育并在孕期定期弓形虫感染免疫学筛查。     

孕妇感染弓形虫后胎儿生长发育跟踪研究

本文随访了52例感染弓形虫的孕妇(抗弓形虫的IgG、IgM均为阳性)采取新生儿脐动脉血及胎盘分别测定抗弓形虫抗体及其DNA,两项均为阳性24例,发生率为46.15％,3例畸胎的畸形部位组织均测得弓形虫DNA为阳性。提示孕妇感染弓形虫后能通过胎盘垂直感染胎儿,使胎儿发育受损造成不良妊娠结局。     

大连地区新生儿弓形虫感染的免疫学检测

目的探讨大连地区新生儿弓形虫感染的情况。方法采用酶联免疫吸附试验三联诊断法对93例新生儿脐带血清标本进行弓形虫感染的血清学检测。结果新生儿弓形虫各单项检测阳性率分别为循环抗原(CAg)4.3％、IgM2．2％、IgG15．1％，新生儿弓形虫平均感染率为19．4％，其中近期感染率为5．4％。结论新生儿弓形虫感染的危险性很高，应开展孕妇血清学监测及时采取措施，有效地预防先天性弓形虫感染。     

孕期感染弓形虫的妊娠结局及存活儿的随访观察

目的:了解母亲孕期感染弓形虫的妊娠结局及出生活婴的体格、智力发育情况。方法:孕妇按静脉血弓形虫IgM或CAg阳性/阴性分感染组和非感染组,将小儿按脐血弓形虫检测结果分组,观察发育情况。结果:母亲感染组异常妊娠结局高于正常非感染组;孕期感染弓形虫出生子代发育受到明显影响,体重、智力显著降低,但对身高无明显影响。结论:孕期感染弓形虫可以透过胎盘将病原体传给子代,母亲孕期感染弓形虫不仅脐血阳性子代发育指标明显降低,脐血阴性者也低于非感染组。     

大连地区93例孕妇弓形虫感染情况调查

目的 调查大连地区孕妇弓形虫感染情况。方法 用酶联免疫吸附实验（ELISA），检测受试者血清中的特异性抗体IgG、IgM和循环抗原CAg。结果 孕妇弓形虫IgG、IgM和CAg阳性率分别为23．66％、13．98％、9．68％．经X^2检验，IgG和IgM差异显著，CAg无显菩差异，三项指标均高于对照组（P〈0．01），差异极显著；正常分娩与异常妊娠比较，差异显著。结论 孕妇产前应追踪进行弓形虫血清学检测。     

妊娠期巨细胞病毒感染导致胎儿流产畸形的研究

目的 :研究孕妇感染巨细胞病毒后导致胎儿流产、畸形、死胎、死产、新生儿死亡等。方法 :对 1318例 (分成两组 ,观察组和对照组 )妊娠 13～ 4 0周、年龄 2 2～ 38岁孕妇应用 EL ISA法及 PCR技术检测孕妇血清和胎儿脐血 ;对检出巨细胞病毒阳性患者进行 PCR检测。结果 :1318例孕妇中共检出 HCMV- Ig M阳性患者 2 9例 ,两组阳性率分别为 2 .5 6 %和 1.79% ,经统计学处理 ,差异无显著性意义 ( P>0 .0 5 )。在 2 9例阳性孕妇中有 3例自然流产 ,1例孕 2 4周死胎引产 ,1例孕 2 8周 B超提示无脑儿行引产术。在 1318例孕妇中检出 HCMV- Ig G阳性 97例 ,两组阳性率分别为 11.97%和 2 .2 8% ,经统计学处理 ,两组阳性率差异有极显著性意义 ( P<0 .0 1)。对 HCMV- Ig M、HCVM- Ig G阳性患者进行 PCR检测 ,并追踪 HCMV- Ig M、Ig G阳性孕妇在该院分娩的胎儿 4 3例 ,抽取胎儿脐血检测 HCMV- PCR,结果 PCR阳性率分别为 17.2 4 %、 3.0 9%、 9.30 % ,有显著性意义( P<0 .0 5 )。在 5例 HCMV- Ig M阳性孕妇所生新生儿中 ,有 3例畸形 (兔唇、狼咽 1例 ,腹壁缺损 1例 ,足外翻 1例 )。结论 :在优生优育门诊中 ,EL ISA法是检测孕妇宫内感染的筛选方法 ,结合 PCR技术是当前迅速、简便的早期诊断宫内感染的有效方法。     

PCR技术在诊断弓形体感染中的应用研究

先天弓形体病是由于孕妇急性感染弓形虫通过胎盘传播胎儿所致。早孕期感染可导致胎儿宫内死亡或严重的神经系统损伤。应用PCR技术对早孕绒毛、有不良妊娠史的中孕羊水和正常产妇血及新生儿脐血做弓形虫的检测,结果:100例早孕绒毛中有1例阳性,12例羊水中有2例阳性,其中一胎证实为无脑儿。100例产妇血中有2例阳性,100例新生儿脐血中有1例阳性。PCR方法在弓形虫虫血症期的血液低浓度弓形虫检测中显示有独到的优越性。用早孕绒毛行PCR产前诊断对开展优生工作有益。     

妊娠期巨细胞病毒感染导致胎儿流产畸形的研究

目的研究孕妇感染巨细胞病毒后导致胎儿流产、畸形、死胎、死产、新生儿死亡等.方法对1 318例(分成两组,观察组和对照组)妊娠13～40周、年龄22～38岁孕妇应用ELISA法及PCR技术检测孕妇血清和胎儿脐血;对检出巨细胞病毒阳性患者进行PCR检测.结果1 318例孕妇中共检出HCMV-IgM阳性患者29例,两组阳性率分别为2.56%和1.79%,经统计学处理,差异无显著性意义(P>0.05).在29例阳性孕妇中有3例自然流产,1例孕24周死胎引产,1例孕28周B超提示无脑儿行引产术.在1 318例孕妇中检出HCMV-IgG阳性97例,两组阳性率分别为11.97%和2.28%,经统计学处理,两组阳性率差异有极显著性意义(P<0.01).对HCMV-IgM、HCVM-IgG阳性患者进行PCR检测,并追踪HCMV-IgM、IgG阳性孕妇在该院分娩的胎儿43例,抽取胎儿脐血检测HCMV-PCR,结果PCR阳性率分别为17.24%、3.09%、9.30%,有显著性意义(P<0.05).在5例HCMV-IgM阳性孕妇所生新生儿中,有3例畸形(兔唇、狼咽1例,腹壁缺损1例,足外翻1例).结论在优生优育门诊中,ELISA法是检测孕妇宫内感染的筛选方法,结合PCR技术是当前迅速、简便的早期诊断宫内感染的有效方法.     

弓形虫感染与染色体畸变关系的初步探讨

近年来,在系统研究弓形虫感染与妊娠异常结局关系过程中,对16例经弓形虫特异性系列4项检查(组织涂片、病理组织切片、组织混合匀浆小鼠接种盲传、免疫血清学检测)有2项以上阳性的畸胎儿中,14例出生即死亡,2例健在.     

母血HBV DNA含量与新生儿HBV感染关系

目的 探讨HBsAg阳性孕妇外周血乙型肝炎病毒(HBV)DNA含量及细胞转运与新生儿HBV感染的关系.方法 用荧光定量PCR方法定量检测HBsAg阳性孕妇血清HBV DNA;用等位基因特异性PCR及半巢式PCR技术扩增HBsAg阳性孕妇新生儿外周血中母亲DNA,通过检测谷胱甘肽-S-转移酶(GSTM1)、血管紧张素转换酶(ACE)等位基因确定母-胎细胞转运;用巢式PCR检测新生儿血清、外周血单个核细胞(PBMC)中HBV DNA.结果 随着孕妇血清HBV DNA含量的增加,新生儿HBV DNA阳性的危险性呈现增高趋势(X~2=13.16,P<0.05,趋势X~2=12.42,P<0.05),而孕妇血清HBV DNA含量与新生儿PBMC HBV DNA阳性无关(总X~2=2.41,P>0.05,趋势X~2=0.35,P>0.05);孕妇血清HBV DNA含量与母-胎细胞转运无关(总X~2=4.14,P>0.05,趋势X~2=0.001,P>0.05);母-胎细胞转运与新生儿外周血PBMC HBV DNA阳性有关(X~2=10.26,P<0.05),而与新生儿外周血HBV DNA阳性无关(X~2=0.49,P>0.05).结论 HBsAg阳性孕妇血清HBV DNA含量、母-胎细胞转运与新生儿HBV感染有关,分别是新生儿血清、PBMC HBV感染的重要危险因素.     

大连地区93例神经系统疾病患者弓形虫感染情况调查

目的了解大连地区神经系统疾病患者弓形虫感染情况. 方法用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测受试者血清中的特异性抗体IgG、IgM和循环抗原CAg. 结果弓形虫IgG、IgM和CAg的检测结果,患者组阳性率分别为39.8%、11.8%和12.9%,对照组分别为10.3%、3.4%和3.4%,经χ2检验,IgG差异极显著,IgM和CAg差异显著,三项指标均高于对照组;IgG的检出率以脑血管病检出率最高,阳性率为46.5%,与对照组有差异,IgM的检出率以脑肿瘤患者最高,阳性率为40.0%,与对照组有差异;CAg的检出率以脑血管病患者最高,阳性率为14.1%,与对照组有差异;弓形虫感染率在不同性别的神经系统疾病患者中,无显著差异.患者组IgG、IgM和CAg三项指标检测结果的阳性构成比分别为61.7%、18.3%和20%. 结论神经系统疾病患者弓形虫感染大多呈隐性或慢性感染,同时在既往感染的基础上,又呈活动状态,并伴有现症感染.     

弓形虫B1基因实时荧光定量PCR无创检测方法的建立及临床初步应用

目的:建立可用于检测无创标本尿液中弓形虫DNA的TaqMan实时荧光定量聚合酶链反应(Real-Time-FQ-PCR)并初步评价其临床应用价值。方法:根据登录GenBank的弓形虫B1基因序列,设计1对引物和1条TaqMan探针。提取感染弓形虫小鼠尿液总弓形虫DNA,先用普通PCR扩增目的基因片段,将回收产物与PMD-18T载体连接。经测序证实为目的片段后,制备系列浓度参照物,优化FQ-Real-Time-PCR反应体系,并对灵敏度、重复性、特异性、线性、探针稳定性进行评价。检测3份外周血全血中弓形虫DNA阳性者的尿样,再作初步临床应用评价。结果:成功构建尿液中弓形虫DNA参照物,灵敏度为弓形虫DNA 104拷贝/ml。批内变异系数(CV)为2.42%,批间CV为4.18%。线性为103～107拷贝/ml,特异性100%。检测3份外周血弓形虫DNA阳性就诊者的尿样,阳性率为100%(3/3)。结论:用Real-Time-FQ-PCR能检测小鼠尿液弓形虫DNA和人尿液弓形虫DNA,该方法具有方便、灵敏、特异、结果重复性好等优点。