羊成骨蛋白诱导成骨的电子显微镜观察

电镜观察到,sBMP 5mg小鼠肌肉内植入后3天,间充质细胞在植入区内聚集并可见由此分化而来的中间型细胞;术后7天,软骨细胞及软骨基质形成;术后14天,软骨细胞变隆,骨母细胞及纤维母细胞功能活跃;基质钙化;术后21天,骨母细胞被钙化基质包埋形成骨细胞。sBMP的诱导作用促发了个一完     

重组人骨形态发生蛋白诱导异位成骨的病理学观察

目的：本文报告了重组人骨形态发生蛋白－２（ｒｈＢＭＰ－２）在小鼠肌肉内诱导异位成骨的生物学作用，方法：将大肠杆功表达的ｒｈＢＭＰ－２成熟肽植入小鼠股部肌肉。结果：植入ｒｈＢＭＰ－２后ｄ１就有间充质细胞向植入区内聚集；ｄ５出现典型的软骨细胞；ｄ７钙化开始；ｄ１０形成雏形的骨髓腔，ｄ１４骨髓腔内出现幼稚的造血细胞；２１ｄ－３０ｄ形成大量网状骨小梁、骨单位、在骨小梁间隙出现骨髓细胞。结论：大肠杆菌中表达     

人骨形态形成蛋白的纯化及其诱导成骨的研究

本实验采用差示沉积、超滤及羟基磷灰石柱层析法,提取和纯化了人骨基质内骨形态形成蛋白,得到纯化的人骨形态形成蛋白,分子量为17000U(约17000道尔顿).以C_3H小鼠147只为实验动物,纯化的骨形态形成蛋白的诱导成骨率为100％。     

骨形成蛋白诱导成骨性分化的实验研究

通过动物实验和细胞培养，观察到骨形成蛋白在体现人诱导异位成骨，在体外诱导人胚骨间质细胞、动脉瘤样骨囊是质主其转化成软骨分化的效应，本实验为解释临床上动脉瘤样骨囊蹲点 骨肉瘤的伴发提供了一定的实验依据。     

骨形态发生蛋白的提取,纯化及诱导成骨的实验报告

目的 提取，纯化牛骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）并验证其异位诱导成骨的活性。方法采用生物化学方法提取并纯化出ＢＭＰ，植入家兔肌肉和豚鼠颅骨进行动物实验研究，结果植入ＢＭＰ组１４ｄ即有成纤维细胞转化为软骨细胞；第２１，２８天形成软骨和骨组织，成年豚鼠颅骨缺损修复过程中，植入ＢＭＰ后第２８天即有骨痂生成，８４ｄ时颅骨缺损修复完整，结论ＢＭＰ有明显的异位诱导骨形成作用。     

骨形态发生蛋白3基因转染成纤维细胞诱导成骨的实验研究

目的 通过基因转染方法，使成纤维细胞NIH－3T3细胞具有合成及分泌骨形态发生蛋白（BMP）、体内诱导新骨生成的能力。方法 定向克隆法将BMP3基因构建于PcDNA3表达载体，脂质体介导法转染NIH－3T3细胞，G418筛选获得稳定转化体，Northern印迹法检测转染细胞有无BMP3基因表达，免疫组织化学检测转染细胞内的BMP3蛋白合成，钙钴法染色不同时相的转染细胞碱性磷酸酶并作图像分析。将转染细胞注入裸鼠肌袋，观察注射后第4周诱导新骨生成情况。结果 转染细胞体外培养6周Northern印迹法检测到有明显的BMP3基因表达，免疫组织化学染色见转染细胞培养筛选5－8周后细胞浆内有染成黄色的BMP3蛋白质颗粒出现，图像分析蛋白质生成在转染后第6周达高峰。钙钴法碱性磷酸酶染色及图像分析示转染细胞内碱性磷酸酶明显高于同期对照组，两组间有显著性差异（P＜0．01）。被转染NIH－3T3细胞裸鼠肌袋诱导成骨实验见注射后4周注射部位有大量软骨细胞出现，并伴有骨小梁生成。结论 通过基因转染方法可以使NIH－3T3细胞具有合成及分泌内源性BMP的能力，合成及分泌的BMP具有良好的生物活性，肌袋实验具有诱导成骨作用。但是，由于基因治疗的某些不可控性因素，其安全性仍有待于进一步研究。     

TGF—α诱导体内成骨效应

目的：β转化生长因子（ＴＧＦ－β）可诱导间充质细胞合成软骨特异性蛋白聚糖和Ⅱ型胶原，刺激成骨细胞的增殖及胶原合成。本实验旨在探讨牛血小板ＴＧＦ－β在体内的成骨活性。方法：以牛血小板为原料，采用酸醇抽提方法，提取血小板蛋白。经柱层析纯化出其中分子质量为２５ｋｕ的ＴＧＦ－β。在小鼠股骨中下段前方骨膜下注射ＴＧＦ－β溶液２０μｌ（含ＴＧＦ－β４００ｎｇ）；每日一次，最长连续注射１０次。结果：骨膜下注射Ｔ     

骨形成蛋白在小白鼠体内诱导成骨的测定方法

目的 探讨一种测定骨形成蛋白(Bone Morphogenetic Protein,BMP)成骨诱导活性的新方法。方法 将自行提取的牛BMP(bBMP)埋入小白鼠后腿肌袋内,分别于术后3、5、7、14、21、28d行B超、X射线照相和组织形态学观察。结果 B超3、5、7d与对照组织同,均为正常组织回声,14、21、28d有软骨和骨组织回声。X射线照相3、5、7、14d无骨组织影象,21、28d有明显的新生骨征象。组织形态学观察3、5、7d有大量间充质细胞在BMP植入部位聚集,14d有新生软骨和新生骨组织组成,21、28d可见大量的新生的成熟骨组织。结论 B超、X射线照相和组织形态学观察结果在时间上有很强的一致性,证明B超作为一种新的BMP成骨诱导活性的检测手段是切实可行的。     

TGF-β诱导体内成骨效应

目的：β转化生长因子（ＴＧＦ┐β）可诱导间充质细胞合成软骨特异性蛋白聚糖和Ⅱ型胶原，刺激成骨细胞的增殖及胶原合成．本实验旨在探讨牛血小板ＴＧＦ┐β在体内的成骨活性．方法：以牛血小板为原料，采用酸醇抽提方法，提取血小板蛋白．经柱层析纯化出其中分子质量为２５ｋｕ的ＴＧＦ┐β．在小鼠股骨中下段前方骨膜下注射ＴＧＦ┐β溶液２０μｌ（含ＴＧＦ┐β４００ｎｇ）；每日一次，最长连续注射１０次．结果：骨膜下注射ＴＧＦ┐β，注射后第３日，骨膜间充质细胞增殖、软骨细胞分化；第７日开始软骨细胞大量增殖，并有软骨内化骨效应；第１４日，大量新生骨痂形成；随后骨改建，出现板层骨．结论：骨膜下注射ＴＧＦ┐β导致局部新生骨质形成过程与正常骨折愈合时相一致，表明外源性的ＴＧＦ┐β可以启动骨生成过程；意味着ＴＧＦ┐β在骨折修复及骨移植方面有潜在性应用前景     

牛骨形态发生蛋白的提取及异位诱导成骨的研究

本研究从1kg牛长骨中提取出部分纯化的牛骨形态发生蛋白(bBMP)160mg.电泳显示其主要区带分子量在33.7～13.4ku(34.0～13.5kd)之间,包括bBMP的生物活性成份18.1ku(18.2kd)蛋白质。将bBMP植入NIH小鼠肌肉内,5天诱导出软骨细胞,10天形成骨组织,14天出现骨髓。软骨或骨的诱发率87.5%。作者观察到bBMP诱导成骨的方式是软骨内成骨,其过程可分为间质细胞增生期、软骨细胞演变期和骨形成期。     

骨形态发生蛋白的研究进展

骨形态发生蛋白家族是诱导骨发生的主要活性因子,它具有独特的异位骨诱导活性,与胚胎组织的发育、功能维持及组织的修复均密切相关.本文就骨形态发生蛋白在成骨作用方面的近期研究做一综述.     

转化生长因子-β1对骨形态发生蛋白诱导成骨的促进作用

目的：我们通过观察转化生长因子β1（transforming growth factorβ,TCF－β1）和骨形态发生蛋白(bone morpho-genetic protein,BMP)共同修复骨缺损,达到进一步阐明BMP诱导成骨机制的目的,方法：实验采用日本大耳白兔左尺骨中段12mm骨缺损实验模型,分为实验组,对照组和空白组,缺损内分别植入BMP／TGF－β1／载体,BMP／载体,载体,通过X线,组织学及电镜对比观察三组骨缺缶修复情况,结果：实验组骨缺损无论是骨痂出现还是骨接发生时间均较对照组明显提前,空白组骨缺损形成骨不连,实验组成骨细胞和软骨细胞无论出现的时间,数量和功能活跃程度均优于对照组,电镜观察见成骨细胞,软骨细胞内线粒体丰富,内质网增多,而对照组则相对较少,软骨细胞内线粒体丰富,内质网络增多,而对照组则相对较少,结论：TGF－β1具有促进BMP诱导成骨的作用,TGF－β1通过促进间充质细胞分裂增殖为BMP提供靶细胞,促进成骨细胞及软骨细胞的分裂增殖,促进骨细胞合成产生I型胶原,促进基质钙化,碱少骨吸收等作用来促进BMP的诱导成骨。     

诱导成骨修复大鼠颅骨缺损

本文定性、定量地考察了骨基质明胶、脱钙骨和深冻骨促进SD大鼠颅骨缺损修复的作用。结果表明它们均有不同程度的诱导成骨作用,其中骨基质明胶的作用最佳,脱钙骨次之。术后12周,骨基质明胶组的骨缺损已完全愈合,脱钙骨组接近愈合。本文还讨论了诱导成骨的机制,认为骨形态形成蛋白(BMP)是促进骨缺损愈合的主要生物活性物质:巨噬细胞可能与整个诱导过程的启动有关。     

牛骨形态发生蛋白异位诱导小鼠成骨的超微结构观察

目的：牛骨形态发生蛋白（ｂＢＭＰ）植入小鼠肌袋后可诱导血管周围的间充质细胞分化形成软骨和骨组织．但ｂＢＭＰ诱导异位成骨过程的超微结构研究报道甚少．本研究的目的是利用透射电子显微镜（ＴＥＭ）观察ｂＢＭＰ植入区间充质细胞向生骨细胞分化及成骨的超微结构变化．方法：将牛骨中提取的ｂＢＭＰ５ｍｇ植入小鼠股部肌间隙内，术后５，９，１４和２１ｄ取材，制备光镜及电镜标本，镜下观察组织超微结构的变化．结果：ｂＢＭＰ植入后５ｄ，植入区内发现大量肥大的间充质细胞及纤维母细胞样细胞聚集；术后９ｄ，成熟的软骨细胞出现并可见丰富的细胞外软骨基质；术后１４ｄ，软骨细胞变性，基质钙化明显，骨母细胞功能活跃；术后２１ｄ，骨母细胞深陷于钙化基质中形成骨细胞，骨髓腔出现，原始骨髓形成．结论：ｂＢＭＰ能诱导具有分化潜能的间充质细胞进行分化，产生一个完整的骨发育过程．     

牛骨形态发生蛋白异位诱导小鼠成央骨的超微结构观察

牛骨形态发生蛋白植入小鼠肌袋后可诱导血管周围的间充质细胞分化形成软骨和骨组织。但ｂＢＭＰ诱导异位成骨过程的超微结构研究报道甚少。本研究的目的是利用透射电子显微镜观察ｂＢＭＰ植入区间充质细胞向生骨细胞分化及成骨的超微结构变化。     

块型重组合异种骨的诱导成骨活性实验研究

块型重组合异种骨的诱导成骨活性实验研究罗卓荆１胡蕴玉１吕荣１杨光１李雪冰１李丹１朱银善１（第四军医大学西京医院骨科西安７１００３３）关键词骨形态发生蛋白块型重组合异种骨诱导成骨中图号Ｒ６８６．３４对于长骨大节段骨缺损的骨修复治疗一直是本学科长期未能解...     

B超在测定不同方法消毒的骨形成蛋白成骨诱导活性中的意义

目的 探讨B超在测定骨形成蛋白（bone morpho-genetic protein，BMP）成骨诱导活性的意义，为BMP成骨诱导活性的测定提供一种新方法。方法 将自行提取的牛BMP（bBP）分别经环氧乙烷熏蒸消毒和10000Gyγ-射线照射消毒后埋入小鼠右、左后腿肌袋内，于术后3，5，7，14，21和28d行B超、X射线照相和组织形态学观察。结果 B超3，5和7d与对照组相同，均为正常组织回声，14，21和28d有软骨和骨组织回声，在此时间段内随时间延长回声增强。X射线照相3，5，7和14d无骨组织影像，21，28d有明显的新生骨征象。组织形态学观察3，5，7d有大量间充质细胞在BMP植入部位聚集，并诱导间充质细胞分化为成软骨细胞，14d有新生软骨和新生骨组织形成，21，28d可见大量的新生的成熟骨组织。环氧乙烷熏蒸和10000Gy γ-射线照射消毒的bBMP均有很强的成骨诱导活性。结论 B超、X射线照射和组织形态学观察结果在时间上有很强的一致性，证明B超作为一种新的BMP成骨诱导活性的检测手段是切实可行的。γ-射线照射消毒BMP更方便、更安全。     

骨形态发生蛋白9、6双表达腺病毒载体的构建及其成骨诱导作用

目的构建双表达骨形态发生蛋白(BMP)9、6重组腺病毒并探讨其对C3H10细胞成骨的影响。方法以单一表达的BMP9或BMP6 AdEasy质粒为模板,PCR自扩增BMP9和BMP6基因序列,先后将其插入穿梭质粒pASG2,获得双表达穿梭质粒pASG2-BMP9、6,然后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183中同源重组,酶切鉴定成功后,转染至HEK293细胞中包装和扩增得到高滴度双表达腺病毒AdBMP9、6,体外转染C3H10细胞,RT-PCR方法检测BMP9、BMP6 mRNA水平的表达,早期成骨指标碱性磷酸酶染色、晚期指标钙茜素红染色检测其成骨作用。结果成功构建双表达重组腺病毒AdBMP9、6,RT-PCR证实双表达腺病毒能成功转染C3H10细胞,并且转染的C3H10细胞早晚期成骨指标碱性磷酸酶染色及钙茜素红染色活性较单一表达BMP9或BMP6的腺病毒组均增强。结论双表达重组腺病毒载体AdBMP9、6具有定向诱导C3H10细胞成骨分化的能力,且较单一表达BMP9或BMP6强。