胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后运动诱发电位的影响

目的探讨胶质源性神经营养因子（ GDNF）对大鼠脊髓损伤后运动诱发电位（ MEP）的影响。方法改良 Allen方法致 T13脊髓不完全损伤,蛛网膜下腔分别给予生理盐水（ NS）或 GDNF 20μ l,伤后 1h、 5h、 1d、 3d及 5d测定 MEP。结果脊髓损伤后, MEP波幅降低、潜伏期延长。 GDNF组波幅恢复在伤后 5h,1d,3d明显优于 NS组,潜伏期伤后 3d恢复超过 NS组（ P< 0.05）。结论 GDNF在脊髓损伤后能够早期促进 MEP波形的恢复,是脊髓功能恢复的必要条件。     

脊髓损伤后运动功能恢复过程中酪氨酸硝基化蛋白表达的变化

目的：观察大鼠脊髓损伤后运动功能恢复过程中酪氨酸硝基化蛋白的表达变化情况。 方法：实验于2004—07／2005—09在解放军第二军医大学神经生物实验室完成。选择SD雄性大鼠44只，采用随机数字表法分成3组：正常对照组8只，假手术组12只，脊髓损伤组24只。改良Allen法致大鼠脊髓中等程度损伤。①进行改良Tarlov评分，分为0～6级，级别越高下肢运动功能越佳。②进行改良Rivlin斜板实验，将大鼠身体轴线与斜板纵轴垂直放置，斜板每次升高5&;#176;，以大鼠能够停留5s的最大角度为其功能值。③免疫荧光染色：术后分别于1，3，7，14d取假手术组（每次2只）和脊髓损伤组（每次5只）大鼠损伤区脊髓进行免疫荧光染色测定酪氨酸硝基化蛋白的表达。④Westernblot印迹：假手术组和脊髓损伤1d组分别取4只大鼠损伤区脊髓进行Western blot印迹进一步验证。 结果：纳入动物44只，均进入结果分析。①Tarlov评分比较：正常对照组为6级，假手术组伤后1，3，7，14d分别为5．2，5．4，5．8，6．0级，与正常对照组相比差异无显著性（P〉0．05）；脊髓损伤组伤后1，3d降至最低点（1．4，2．0级），第7天时明显上升（3．1级），至伤后14d开始缓慢上升（3．5级），但仍未达到正常水平。②Rivlin斜板实验比较：假手术组伤后1，3，7，14d爬坡角度分别为73．5&;#176;，73．8&;#176;，74．4&;#176;，75．8&;#176;，差异无显著性（P〉0．05），每一时相点与正常对照组比较差异无显著性（P〉0．05）；脊髓损伤组损伤后即刻出现明显障碍，爬坡角度减小（伤后1，3，7，14d分别为35．4&;#176;，36．2&;#176;，38A&;#176;，414&;#176;），与假手术组各时相点比较差异显著（P〈0．01），随时间延续均有不同程度恢复，14d功能恢复较损伤后1d有明显提高（P〈0．01）。③免疫荧光染色：显示硝基化酪氨酸蛋白位于脊髓前角运动神经元，胶质细胞以及脊髓中央管的室管膜细胞中。正常脊髓中无酪氨酸硝基化蛋白阳性细胞。脊髓损伤组中酪氨酸硝基化蛋白呈阳性反应的脊髓细胞随着脊髓损伤后时程的延长而逐渐减少。在脊髓损伤后1，3d时最高，脊髓损伤后7d时明显减少，14d后降至更低，但仍有少量表达。脊髓损伤各组与相应时相点的假手术组相比差异显著（P〈0．05）。④Western blot印迹：假手术组脊髓组织中酪氨酸硝基化蛋白的表达极低，而脊髓损伤1d组酪氨酸硝基化蛋白表达量很高，与免疫荧光染色的结果相一致。 结论：脊髓损伤导致运动功能障碍，可能与脊髓支配运动相关的神经细胞蛋白质的酪氨酸残基发生硝基化有关。     

胰岛样生长因子1对大鼠慢性压迫性脊髓损伤后神经功能恢复的影响

目的：观察胰岛样生长因子1（IGF－1）对慢性压迫性脊髓损伤后神经功能恢复的影响。方法：50只Wistar雌作大鼠，随机分为正常组，慢性重度（60％），压迫组、减压组、生理盐水、（NS）组及IGF－1组。正常级不做任何处理，其余各组置入平头塑料螺钉对大鼠脊髓进行后路渐进性压迫，于2个月后达到60％左右重度压迫程度，然后减压组、NS组和IGF－1组彻底减压，NS组和IGF－1组分别于减压后1、3、5、7、9d在蛛网膜下腔给予NS和IGF－1（25μl），并于减压后2、4、6、8、10d后肢运动功能评分和检测运动诱发电位（MEP）。结果：压迫组大鼠后肢运动功能障碍，MEP波幅（P1－N1峰峰值）降低，潜伏期延长，IGF－1组大鼠后肢运动功能及MEP波幅及潜伏期有明显的恢复（P＜0．05），且于4－6d后显优于单纯减压组和NS组（P＜0．05）。结论：IGF－1可明显促进慢性压迫性脊髓损伤后大鼠后肢运动功能及MEP波形的恢复。     

脊髓全横断模型大鼠损伤区白细胞介素17的表达

背景：现阶段,针对已知的炎性递质的干预措施对于减轻脊髓继发损伤的效果局限。白细胞介素17是重要的促炎性细胞因子,在中枢神经系统疾病发病机制中的作用正逐渐受到关注。 目的：观察急性脊髓损伤模型大鼠白细胞介素17 mRNA和蛋白表达的变化规律。 方法：健康雄性SD大鼠随机分为2组：模型组制作大鼠脊髓完全横断模型,假手术组仅剪开硬脊膜而不伤及脊髓实质。开放后测定肢运动功能评分观察急性脊髓损伤对大鼠运动功能的影响,苏木精-伊红染色观察脊髓损伤后不同时间点组织病理学改变,实时荧光定量PCR、Western blot分别检测各组大鼠脊髓损伤后不同时间点白细胞介素17 mRNA和蛋白水平表达变化。 结果与结论：开放后肢运动功能评分结果：假手术组大鼠BBB评分均为20-21分,脊髓损伤1,2 d大鼠BBB评分均为0分,损伤后7 d BBB评分为0-3分（P＜0.05）。苏木精-伊红染色结果：与假手术组相比,脊髓损伤6 h后,炎性细胞浸润,神经元和胶质细胞肿胀,神经元突起减少;脊髓损伤12 h后,灰质、白质组织结构疏松、空泡化;脊髓损伤后7 d,胶质细胞增生,组织纤维化明显。RT-qPCR结果显示：白细胞介素17 mNA于脊髓损伤后3 h出现,并于6 h表达出现高峰（P ＜0.01）,随后表达减少,7 d后表达接近假手术组水平。Western blot结果显示：脊髓损伤6 h后,白细胞介素17表达开始升高,并于损伤后12 h出现高峰（P＜0.05）,随后表达减少,至伤后7 d表达接近假手术组水平。结果可见脊髓损伤12 h后组织损伤表现最严重,并与白细胞介素17表达改变存在时间的一致性,推断白细胞介素17可能参与了脊髓继发性炎症反应过程。     

聚集素在大鼠急性脊髓损伤后神经功能康复过程中的表达

背景：聚集素具有许多重要的生物学功能，特别是病理条件下对组织细胞具有显著的保护作用。观察聚集素在脊髓损伤中的表达变化将有助于明确继发性脊髓损伤的作用途径并提供可能的治疗手段。 目的：观察急性脊髓损伤组织中聚集素的表达变化。 设计：随机对照动物实验。 单位：中国医科大学附属第一医院骨科。 材料：实验于2003-01／2006-01在中国医科大学实验动物部完成。选择成年健康SD大鼠65只，体质量250-300g，由中国医科大学实验动物部提供。 方法：65只大鼠随机分为3组，即脊髓损伤组、假手术组及正常对照组，各组分别为30，30及5只。采用改良Allen重物打击法制备大鼠脊髓背侧损伤模型，损伤部位为T10节段；假手术组仅行T10全椎板切除；正常对照组未手术。脊髓损伤组和假手术组分别分为伤后及术后12h，1，3，7，14，21d共6个时间点，每个时间点麻醉处死5只。分别在伤后不同时间点对各组大鼠脊髓损伤组织取材制成冰冻切片，进行苏木精-伊红染色观察脊髓损伤组织变性坏死情况，进行聚集素免疫组化染色观察聚集素阳性反应物的沉积、分布情况，应用半定量图像分析法测定聚集素阳性反应物的平均灰度值（与聚集素免疫反应强度呈反比）。 主要观察指标：①各组大鼠脊髓损伤组织变性坏死情况及聚集素阳性表达情况。②各组大鼠脊髓损伤组织聚集素阳性反应物平均灰度值。 结果：65只大鼠全部进入结果分析，无脱失。①脊髓损伤组大鼠损伤后1d聚集素阳性表达增加；伤后7d达到高峰；伤后14d逐渐减少；伤后21d趋于稳定，随时间延长存在动态变化过程。假手术组及正常对照组伤后各时间点均有聚集素阳性表达，但均表达稳定，随时间延长无动态变化过程。②脊髓损伤组在伤后1，3，7，14，21d时聚集素阳性反应物的平均灰度值显著低于假手术组相应时间点及正常对照组（t=6．33-15．57，P〈0．01）；而假手术组伤后各时间点聚集素阳性反应物的平均灰度值与正常对照组比较差异无显著性意义（P〉0．05）。 结论：聚集素在急性脊髓损伤组织中表达明显增加，并且存在动态变化过程。     

脊髓损伤后运动功能恢复过程中酪氨酸硝基化蛋白表达的变化

目的:观察大鼠脊髓损伤后运动功能恢复过程中酪氨酸硝基化蛋白的表达变化情况。方法:实验于2004-07/2005-09在解放军第二军医大学神经生物实验室完成。选择SD雄性大鼠44只,采用随机数字表法分成3组:正常对照组8只,假手术组12只,脊髓损伤组24只。改良Allen法致大鼠脊髓中等程度损伤。①进行改良Tarlov评分,分为0～6级,级别越高下肢运动功能越佳。②进行改良Rivlin斜板实验,将大鼠身体轴线与斜板纵轴垂直放置,斜板每次升高5°,以大鼠能够停留5s的最大角度为其功能值。③免疫荧光染色:术后分别于1,3,7,14d取假手术组(每次2只)和脊髓损伤组(每次5只)大鼠损伤区脊髓进行免疫荧光染色测定酪氨酸硝基化蛋白的表达。④Westernblot印迹:假手术组和脊髓损伤1d组分别取4只大鼠损伤区脊髓进行Westernblot印迹进一步验证。结果:纳入动物44只,均进入结果分析。①Tarlov评分比较:正常对照组为6级,假手术组伤后1,3,7,14d分别为5.2,5.4,5.8,6.0级,与正常对照组相比差异无显著性(P>0.05);脊髓损伤组伤后1,3d降至最低点(1.4,2.0级),第7天时明显上升(3.1级),至伤后14d开始缓慢上升(3.5级),但仍未达到正常水平。②Rivlin斜板实验比较:假手术组伤后1,3,7,14d爬坡角度分别为73.5°,73.8°,74.4°,75.8°,差异无显著性(P>0.05),每一时相点与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05);脊髓损伤组损伤后即刻出现明显障碍,爬坡角度减小(伤后1,3,7,14d分别为35.4°,36.2°,38.4°,41.4°),与假手术组各时相点比较差异显著(P<0.01),随时间延续均有不同程度恢复,14d功能恢复较损伤后1d有明显提高(P<0.01)。③免疫荧光染色:显示硝基化酪氨酸蛋白位于脊髓前角运动神经元,胶质细胞以及脊髓中央管的室管膜细胞中。正常脊髓中无酪氨酸硝基化蛋白阳性细胞。脊髓损伤组中酪氨酸硝基化蛋白呈阳性反应的脊髓细胞随着脊髓损伤后时程的延长而逐渐减少。在脊髓损伤后1,3d时最高,脊髓损伤后7d时明显减少,14d后降至更低,但仍有少量表达。脊髓损伤各组与相应时相点的假手术组相比差异显著(P<0.05)。④Westernblot印迹:假手术组脊髓组织中酪氨酸硝基化蛋白的表达极低,而脊髓损伤1d组酪氨酸硝基化蛋白表达量很高,与免疫荧光染色的结果相一致。结论:脊髓损伤导致运动功能障碍,可能与脊髓支配运动相关的神经细胞蛋白质的酪氨酸残基发生硝基化有关。     

高血糖对急性脊髓损伤大鼠神经功能恢复的影响

目的：了解高血糖对急性脊髓损伤大鼠运动功能恢复的影响.方法：26只成年雄性SD大鼠,随机分为假手术组、对照组和高血糖组.Allen法制作急性脊髓损伤模型,在伤后1-10d内对各组大鼠进行斜板试验和改良Tarlov评分,评价高血糖对脊髓运动功能恢复的影响.结果：高血糖组和对照组大鼠脊髓损伤后1-10d斜板试验临界角度和Tarlov评分均下降.高血糖组大鼠脊髓伤后1-10d的斜板试验临界角度和Tarlov评分明显不如对照组.结论：创伤后诱发的高血糖可能加重脊髓继发性损害,不利于神经功能的恢复.     

骨髓间充质干细胞移植脊髓损伤小鼠运动功能的恢复

背景：研究证实,移植的骨髓间充质干细胞可被定向诱导分化为神经细胞,重建神经环路,促进轴突再生,恢复脊髓功能。目的：进一步验证骨髓间充质千细胞在脊髓损伤修复中的作用。方法：C57BL／6小鼠40只随机分为4组,假手术组不打击脊髓;其余小鼠采用重物撞击法建立脊髓损伤模型。损伤后的第7天,治疗组用微最注射器,经眶静脉丛注入骨髓间充质干细胞悬液;对照组注入等量DMEM培养基：模型组不做处理。通过苏木精一伊红染色法判断脊髓损伤程度。通过免疫细胞化学法签定骨’髓间充质干细胞分化形成的神经细胞。通过荧光显微镜观察移植细胞生长状态：通过改良Tarlov评分法评价小鼠运动功能恢复程度。结果与结论：骨髓间充质千细胞诱导分化7d后的细胞呈NF和神经胶质纤维酸性蛋白阳性表达。模型组小鼠双下肢呈瘫痪状态,假手术组行动正常（P〈0．01）。细胞移植后2周,治疗组小鼠运动功能缺失症状逐渐恢复,对照组小鼠恢复不明硅（P〈0．05）：细胞移植4周后,细胞移植组小鼠Tarlov评分与假手术组相比差异无显著性意义（P〉0．05）。说明骨髓间充质干细胞移植叫捉商脊髓损伤小鼠的运动能力。     

益生菌对重型颅脑损伤大鼠肠绒毛高度及表面积的影响

[目的]探讨益生茵对重型颅脑损伤大鼠肠绒毛高度及表面积的影响．为益生菌用于改善重型颅脑损伤后肠吸收功能提供依据。[方法]建立重型颅脑损伤大鼠模型。将SD大鼠随机分为肠内营养组（三九全营素）、益生茵组（三九全营素＋益生茵）、假手术组（正常饮食）．于创伤后第3天、第7天、第14天取肠黏膜进行检测。通过IMAGE—PRO—PLUS彩色图像分析系统确定肠绒毛的高度和表面积。[结果]与假手术组比较,肠内营养组和益生菌组在创伤后14d内肠绒毛高度显著下降（P〈0．01）。益生菌组在创伤后3d、7d绒毛高度比肠内营养组平均增加了12．6％（P〈0．05）．创伤后14d后．肠内营养组与益生菌组肠绒毛高度差异无统计学意义（P〉0．05）。伤后7d。肠内营养组和益生菌组的肠绒毛表面积较假手术组迅速降低（P〈0．01）;创伤后14d肠内营养组肠绒毛面积为假手术组的76．2％（P〈0．01）．而益生菌组表面积达到假手术组的93．0％（P〉0．05）。益生菌组与肠内营养组比较,肠绒毛表面积在伤后3d、7d、14d分别提高了40．0％、32．0％、21．9％（P〈0．05或P〈0．01）。[结论]益生菌可能通过促进小肠绒毛增生加快肠黏膜的恢复,从而改善重型颅脑损伤后小肠吸收功能。     

电针结合减重步行训练对急性脊髓损伤大鼠巢蛋白和神经生长因子表达的影响

摘要 目的：通过检测脊髓损伤后运动功能恢复情况和巢蛋白（nestin）、神经生长因子（NGF）的蛋白表达来探讨电针（EA）结合减重步行训练疗法（BWSTT）干预脊髓损伤（SCI）的作用。 方法：选用健康成年清洁级雄性SD大鼠72只,随机分为假手术对照组（假手术组）、模型对照组(模型组)、电针治疗组(电针组)、电针结合减重步行训练治疗组（电针+训练组）。用美国NYU脊椎冲击损伤仪致大鼠T9—T10段脊髓急性中度损伤模型。BBB运动功能评分对大鼠后肢运动功能的恢复情况进行评估;免疫组织化学技术检测各时间点损伤段脊髓NGF和nestin的表达。 结果：与模型组相比,两治疗组BBB评分显著增加,电针结合减重步行训练组在术后第14天和第28天显著增加,与电针组比较具有显著性差异（P＜0.05）。两治疗组脊髓损伤术后第14天和第28天NGF和Nestin的表达显著增加,但二者没有显著性差异（P＞0.05）。 结论：①电针能够促进脊髓损伤大鼠内源性NGF和nestin的大量表达来促进神经再生。②电针结合减重步行训练对大鼠运动功能的恢复更为有效。     

Exogenous administration of glial cell line-derived neurotrophic factor improves recovery after spinal cord injury

The aim of present study was to examine whether systemically delivered glial cell-derived neurotrophic factor (GDNF) was beneficial in reversing the spinal cord injury (SCI) in a spinal cord compression model. Rats were divided into three major groups: (1) sham operation (laminectomy only); (2) laminectomy+SCI+normal saline (1ml/kg, i.v.); (3) laminectomy+SCI+GDNF (50ng/kg, i.v.). Spinal cord injury was induced by compressing the spinal cord for 1min with an aneurysm clip calibrated to a closing pressure of 55g. GDNF or saline was administered immediately after SCI via the tail vein. Behavioral tests of motor function measured by maximal angle an animal could hold to the inclined plane were conducted at days 1-7 after SCI. The triphenyltetrazolium chloride staining and terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate-biotin nick end labeling assay were also conducted after SCI to evaluate spinal cord infarction and apoptosis, respectively. Both GDNF and vascular endothelial growth factor (VEGF) in the injured spinal cord were assayed by immunofluorescence. It was found that systemically delivered GDNF, but not vehicle solution, significantly attenuated the SCI-induced hind limb dysfunction and spinal cord infarction and apoptosis. Both GDNF and VEGF could be detected in the injury spinal cord after GDNF, but not vehicle solution, therapy. The results indicate that GDNF treatment may be beneficial in reversing hind limb dysfunction by reducing spinal cord infarction and apoptosis in a spinal cord compression model.     

补阳还五汤对实验性脊髓损伤大鼠水通道蛋白-4表达的影响

目的:观察补阳还五汤对大鼠脊髓损伤后AQP-4表达和后肢恢复功能的影响.方法:100只SD大鼠分为损伤组和中药组,均手术致脊髓不完全性损伤.中药组术后即给予补阳还五汤口服液灌胃;损伤组给予等量蒸馏水灌胃.术后1、3、7、14及21 d分别对大鼠进行BBB评分和斜板实验检查后肢功能,然后处死,应用免疫组织化学技术检测脊髓组织AQP-4的表达.结果:脊髓损伤后第1天,2组受损伤脊髓灰质、白质中可见到AQP-4的表达明显增加;第3天时达到高峰,损伤组更明显(P<0.05);第7、14及21天,中药组AQP-4表达的减少几乎与神经功能的改善平行,与损伤组比较差异有非常显著性(P<0.01).结论:补阳还五汤可能通过抑制脊髓损伤后AQP-4表达,消除脊髓水肿,减轻脊髓继发性损伤,从而使残存脊髓组织保存并促进脊髓功能恢复.     

胰岛素样生长因子1对大鼠慢性压迫性脊髓损伤后神经功能恢复的影响

目的观察胰岛素样生长因子1(IGF-1)对慢性压迫性脊髓损伤后神经功能恢复的影响。方法50只Wistar雌性大鼠,随机分为正常组、慢性重度(60%)压迫组、减压组、生理盐水(NS)组及IGF-1组。正常组不做任何处理,其余各组置入平头塑料螺钉对大鼠脊髓进行后路渐进性压迫,于2个月后达到60%左右重度压迫程度,然后减压组、NS组和IGF-1组彻底减压,NS组和IGF-1组分别于减压后1、3、5、7、9d在蛛网膜下腔给予NS和IGF-1(25μl),并于减压后2、4、6、8、10d后肢运动功能评分和检测运动诱发电位(MEP)。结果压迫组大鼠后肢运动功能障碍,MEP波幅(P1～N1峰峰值)降低、潜伏期延长;IGF-1组大鼠后肢运动功能及MEP波幅及潜伏期有明显的恢复(P<0.05),且于4～6d后显著优于单纯减压组和NS组(P<0.05)。结论IGF-1可明显促进慢性压迫性脊髓损伤后大鼠后肢运动功能及MEP波形的恢复。     

超短波对急性脊髓损伤大鼠神经功能及BDNF-TrkB表达的影响

目的:观察无热量超短波对急性脊髓损伤大鼠神经功能恢复和BDNF-TrkB表达的影响,并探讨其可能作用机制。方法:成年雌性SD大鼠72只,随机分为Sham组(24只)、SCI组(24只)和USW组(24只)。应用改良Allen法制备大鼠脊髓损伤模型。Sham组仅行椎板切除术暴露硬脊膜,不予打击,直接缝合,术后不给予任何治疗。USW组在脊髓损伤造模后24h给予受损部位无热量超短波治疗(最大输出功率40W,实际输出功率11.58W),10min/次,1次/d,至取材前。SCI组造模后不给予任何治疗。在造模后1d、7d、14d和21d用BBB评分、体感诱发电位(SEPs)和运动诱发电位(MEPs)评定脊髓损伤后后肢功能恢复情况并获取损伤段脊髓标本,术后4周取材,用免疫组织化学方法检测SCI组和USW组脊髓在损伤后不同时段BDNF及TrkB的表达,并行阳性细胞计数。结果:BBB评分结果提示,USW组大鼠7d、14d、21d时的运动功能恢复较SCI组明显提高(P0.01);SEPs和MEPs结果显示,USW组大鼠7d、14d、21d时的神经功能较SCI组明显改善(P0.05);免疫组织化学方法提示,与SCI组相比,USW组在一定时间段能上调损伤脊髓区BDNF-TrkB的表达(P0.05)。结论:无热量超短波能在一定程度上促进损伤脊髓的神经功能恢复,其机制可能与超短波上调损伤区脊髓BDNF-TrkB的表达有关。     

神经营养因子对成年大鼠脊髓损伤后皮质脊髓束再生的影响

背景胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对脊髓运动神经元的存活有明显的保护作用,但GDNF对成年大鼠脊髓损伤后皮质脊髓束再生是否有促进作用仍不清楚.目的研究胶质细胞源性神经营养因子对脊髓损伤后皮质脊髓束再生的保护作用.设计随机对照实验.地点和材料本实验在第二军医大学神经生物实验室完成.实验动物采用雄性成年SD大鼠64只,体质量250～300 g.干预采用Nystrom法制备大鼠胸髓后路压迫损伤模型,压迫质量为50 g,时间为5 min,造成大鼠胸段脊髓急性重度损伤.脊髓损伤后24 h,对照组注射6μL阳离子脂质体DC-Chol和2μg pCDNA3的混合物,实验组将6μL DC-Chol和2μg重组质粒pEGFP-GDNF cDNA混合后注入大鼠损伤脊髓.主要观察指标应用RT-PCR技术和荧光显微镜检测GDNF体内转基因后在局部的表达,通过辣根过氧化物酶(HRP)顺行追踪技术和神经微丝(NF)免疫组化活性的变化来评价GDNF基因体内转染对大鼠皮质脊髓束再生的影响.结果GDNF基因体内转染1周后发现在基因注射局部有转录和蛋白水平表达,4周后在脊髓损伤周围仍检测到GDNF蛋白表达.脊髓损伤后4周,实验组脊髓损伤区皮质脊髓束HRP标记明显多于对照组,仅在实验组可见部分神经纤维穿过损伤区至远端5～9 mm.损伤区NF阳性轴突数(524.33±80.55/低倍视野)较对照组(309.84±56.65/低倍视野)明显增多(P＜0.01),GFAP阳性细胞数(186.68±16.25)明显少于对照组(239.78±21.44)(P＜0.01).结论阳离子脂质体介导GDNF体内转基因能促进近端皮质脊髓束再生和神经骨架蛋白的修复,提示神经营养因子基因治疗可用来治疗创伤性脊髓损伤.     

纳米粒子基因复合体应用于脊髓损伤治疗的实验研究

目的:观察壳聚糖纳米粒子胶质细胞源性神经营养因子基因复合体(CS-nano/pcD-NA3.1/GDNF)对脊髓损伤(SCI)的治疗作用.方法:Wistar大鼠170只,随机分为5组:A组(椎板切除+SCI-CS-nano/pcDNA3.1/GDNF,n=40),B组(椎板切除+SCI+GDNF基因治疗,n=40),C...     

间充质干细胞移植治疗脊髓损伤患者的疗效分析

目的:探讨间充质干细胞(MSCs)移植治疗脊髓损伤的临床疗效。方法:对23例脊髓损伤患者在腰椎穿刺方式下分别行骨髓MSCs或脐血MSCs移植术,术前和术后均进行安全性指标评价,干细胞移植前和移植3个月后分别进行美国脊髓损伤学会损伤分级评分。结果:所有患者干细胞治疗前后安全性指标评价差异无显著性意义(P>0.05),未出现严重的不良反应,同时不完全脊髓损伤患者行干细胞移植3个月后在运动功能、轻触觉及针刺觉方面均有明显改善(P<0.05),而完全性脊髓损伤患者则在轻触觉及针刺觉方面有改善(P<0.05),运动功能未见明显进步(P>0.05),同时骨髓MSCs移植的患者3个月后运动功能的改善优于脐血MSCs移植的患者。结论:MSCs移植治疗可以改善脊髓损伤患者的感觉功能,但不完全脊髓损伤患者运动功能的恢复优于完全性脊髓损伤患者,同时骨髓MSCs移植的患者运动功能的改善优于脐血MSCs移植的患者。     

积雪草苷对脊髓损伤大鼠神经元的保护作用的研究

目的探讨积雪草苷（asiaticoside,AS）对急性脊髓损伤（spinalcordinjury,SCI）大鼠神经元的保护作用及对诱导型一氧化氮合酶（induciblenitricoxidesynthase,iNOS）表达的影响。方法成年sD大鼠以Allen’s打击法制备脊髓损伤模型。分别给予不同剂量As治疗,术后24h、72h、7d、14d、28d采用BassoBeasttieandBresnahan（BBB）评分评价大鼠双后肢神经功能恢复情况,并通过HE和尼氏染色观察损伤脊髓组织病理变化,同步检测损伤部位脊髓的丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）值、iNOS蛋白表达及其活度值。结果与脊髓损伤模型组相比,低、中、高三剂量（15、30和45mg／kg）AS给药组在脊髓损伤后各时间点BBB评分分值明显提高（P〈0．05）,HE染色镜检脊髓组织病理损伤明显减轻,神经元尼氏体表达明显（P〈0．05）,MDA生成显著减少（P〈0．05）,SOD活性提高（P〈0．05）。各剂量AS均可下调SCI大鼠第7天受损脊髓组织iNOS蛋白表达和iNOS酶活度值。结论AS可减轻大鼠脊髓组织的损伤,保护脊髓神经元,此作用可能与抑制iNOS蛋白表达有关。     

Human umbilical cord blood-derived CD34+ cells may attenuate spinal cord injury by stimulating vascular endothelial and neurotrophic factors

Human umbilical cord blood-derived CD34(+) cells were used to elucidate the mechanisms underlying the beneficial effects exerted by cord blood cells in spinal cord injury (SCI). Rats were divided into four groups: (1) sham operation (laminectomy only); (2) laminectomy + SCI + CD34(-) cells (5 x 10(5) human cord blood lymphocytes and monocytes that contained <0.2% CD34(+) cells); (3) laminectomy + SCI + CD34(+) cells (5 x 10(5) human cord blood lymphocytes and monocytes that contained approximately 95% CD34(+) cells); and (4) laminectomy + SCI + saline (0.3 mL). Spinal cord injury was induced by compressing the spinal cord for 1 min with an aneurysm clip calibrated to a closing pressure of 55 g. CD34 cells or saline was administered immediately after SCI via the tail vein. Behavioral tests of motor function measured by maximal angle an animal could hold to the inclined plane were conducted at days 1 to 7 after SCI. The triphenyltetrazolium chloride staining and terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate-biotin nick end labeling assay were also conducted after SCI to evaluate spinal cord infarction and apoptosis, respectively. To elucidate whether glial cell line-derived neurotrophic factor (GDNF) or vascular endothelial growth factor (VEGF) can be secreted in spinal cord-injured area by the i.v. transplanted CD34(+) cells, analysis of spinal cord homogenate supernatants by specific enzyme-linked immunosorbent assay for GDNF or immunofluorescence for VEGF was conducted. It was found that systemic administration of CD34(+), but not CD34(-), cells significantly attenuated the SCI-induced hind limb dysfunction and spinal cord infarction and apoptosis. Both GDNF and VEGF could be detected in the injured spinal cord after transplantation of CD34(+), but not CD34(-), cells. The results indicate that CD34(+) cell therapy may be beneficial in reversing the SCI-induced spinal cord infarction and apoptosis and hindlimb dysfunction by stimulating the production of both VEGF and GDNF in a spinal cord compression model.     

雪旺细胞-海藻酸钠凝胶移植大鼠脊髓损伤修复实验研究

目的观察雪旺细胞-海藻酸钠凝胶移植对大鼠脊髓损伤后脊髓细胞凋亡、Bcl-2、及功能恢复的影响，探讨其对脊髓损伤修复的促进作用机制。方法选择SD大鼠120只，随机分为4组：正常对照组、单纯损伤组、雪旺细胞组、雪旺细胞一海藻酸钠凝胶组，每组30只大鼠。制作T10节段脊髓全横断损伤模型。分别于1、7、15、30、60d5个时间段对动物取损伤区1cm范围脊髓节段，常规石蜡包埋，水平切片进行TUNEL、Bcl-2染色，观察脊髓内凋亡细胞、Bcl-2细胞的数量及分布变化。结果正常对照组仅有少量淡染Bcl-2阳性细胞；单纯损伤组神经元Bcl-2免疫反应阳性细胞表达的高峰在第15、45天时Bcl-2免疫反应阳性细胞表达接近正常水平。雪旺细胞-海藻酸钠凝胶移植后损伤脊髓细胞Bcl-2免疫反应阳性细胞表达具有显著性增高（P〈0．05），30d高度表达并持续1个月。单纯损伤组脊髓内细胞凋亡最多，并于损伤后7、30d形成两个高峰，多分布于白质中。雪旺细胞-海藻酸钠凝胶组细胞凋亡数量较单纯损伤组，具有显著性差异（P〈0．05）。结论雪旺细胞-海藻酸钠凝胶移植能抑制大鼠脊髓损伤后脊髓细胞凋亡、促进Bcl-2的表达。