脑微透析与自动采血技术联用研究丹参素的药动学特性

通过微透析法联合自动采血技术研究丹参素在大鼠体内的药动学特性。微透析探针植入大鼠侧脑室,连续收集静脉注射丹参素后的透析液样品及血液样品,采用LC-MS/MS测定丹参素浓度,经回收率校正后,用WinNonlin药动学软件计算主要药动学参数。静脉注射丹参素后,丹参素在血液中、脑内的K_e分别为0.04,0.018 min^-1,t_1/2为16.64,58.76 min,AUC_0-t为812.59,51.19 min·mg·L^-1,MRT为15.28,79.97 min。建立的LC-MS/MS方法简便、高效、无干扰,可进行丹参素生物样品的检测;微透析技术与自动采血技术联用,较好的反映了丹参素在血液及大脑中的动力学特征,为药物药动学研究提供一个新视角。     

小鼠经鼻腔给药醒脑静微乳和mPEG2000-PLA修饰醒脑静微乳后体内栀子苷的动力学比较研究

该实验建立了小鼠体内醒脑静微乳和mPEG2000-PLA修饰醒脑静微乳鼻腔给药后测定血浆栀子苷浓度的高效液相色谱法,探讨2种制剂经鼻腔给药后栀子苷在小鼠体内的药动学过程。将80只小鼠分为2组,分别鼻腔给药醒脑静微乳和mPEG2000-PLA修饰醒脑静微乳后,于不同时间点摘眼球取血,HPLC测定血浆中栀子苷的量,以Kinetica软件非房室模型拟合药动学参数。结果显示小鼠鼻腔给药醒脑静微乳后,血药主要药动学参数为C_max（4.36±2.69）mg·L^-1,t_max1 min,MRT（29.73±4.54）min,AUC（53.63±14.03）mg·L^-1·min;小鼠鼻腔给药共聚物修饰醒脑静微乳后,血药主要药动学参数为C_max（9.75±4.14）mg·L^-1,t_max 1 min,MRT（22.34±2.90）min,AUC（131.87±40.13）mg·L^-1·min。与醒脑静微乳相比,共聚物修饰醒脑静微乳经小鼠鼻腔给药后,栀子苷入血程度更高,可能与其刺激性较小而吸收较多有关。     

微透析技术-同位素示踪法联用进行青藤碱贴剂的皮肤局部药代动力学研究

目的: 进行青藤碱贴剂的皮肤局部药动学研究。 方法: 微透析技术与同位素示踪法联用,以HPLC-UV和液闪计数仪为检测工具,以微透析探针为采样手段,将线性微透析探针植入大鼠皮下组织,采用释放量法测定青藤碱皮肤相对损失率,实时、活体、动态监测青藤碱皮下组织浓度。皮肤微透析样品浓度经相对损失率校正后进行房室和非房室模型拟合。 结果: 房室模型拟合不佳。非房室模型参数显示皮肤药物浓度达峰时间约6.3 h,平均滞留时间MRT约18 h。 结论: 微透析法较好的采集了青藤碱贴剂经皮给药的皮肤局部药动学特征,是局部药动学良好的研究手段。     

RP-HPLC测定盐酸青藤碱不同给药途径的血药浓度及药动学研究

 目的　采用RP HPLC测定盐酸青藤碱灌胃和皮肤给药后不同时间大鼠体内血清浓度 ,计算出灌胃和皮肤给药途径主要药动学参数。方法　采用RP HPLC以乙腈0.01mol·L^-1磷酸二氢钠溶液-四甲基二乙胺 (46∶54∶0.22)为流动相,磷酸调至pH6.9,C₁₈ODS柱(4.6mm×25.0mm,5μm),紫外检测波长为26.3nm。 结果　盐酸青藤碱在 0.25～10.0μg·mL^-1范围内呈良好线性关系(r=0.9995),方法的平均回收率达98.5%,RSD=13%。计算出灌胃给药途径主要药动学参数:Ke0.31h-1,AUC18.07μg·h·mL^-1,t_{1/22.24h,cmax6.26μg·mL^-1,tmax0.75h ;皮肤给药途径主要药动学参数:Ke0.92h^-1,AUC32.4μg·h·mL^-1,t1/2 0.75h,cmax1.17μg·mL-1,tmax1h。结论　本法分离效果好 ,分析速度快 ,方法稳定 ,结果准确。}     

盐酸青藤碱缓释胶囊的家犬体内药动学和相对生物利用度研究

 目的研究口服盐酸青藤碱缓释胶囊在家犬体内药动学和相对生物利用度。方法以随机分组自身对照、间隔1周交叉试验设计法,用高效液相色谱法测定盐酸青藤碱的浓度,在6条健康家犬身上比较单剂量po 120 mg盐酸青藤碱缓释胶囊和正清风痛宁缓释片后的药动学参数和相对生物利用度。结果盐酸青藤碱缓释胶囊和正清风痛宁缓释片的药-时曲线相似,其t_1/2分别为(25.19±10.94)和(20.48±6.55)h,t_max分别为(8.67±1.63)和(5.7±1.51)h,ρ_max分别为(1 012.23±510.82)和(1 031.66±546.15)μg·L^-1,AUC_0-30分别为(13 797.04±4 915.68)和(15 507.17±6 263.07)μg·h·L^-1。结论盐酸青藤碱缓释胶囊和正清风痛宁缓释片具有等效性,盐酸青藤碱缓释胶囊t_max明显延后,t_1/2明显延长。     

盐酸川芎嗪大鼠鼻腔给药脑内药动学研究

 目的研究盐酸川芎嗪(TMPH)经大鼠鼻腔给药后的脑内药动学特性。方法采用脑微透析取样技术,以清醒自由活动大鼠为实验模型,连续收集盐酸川芎嗪鼻腔和静脉注射给药后大鼠脑内纹状体透析液,HPLC测定其浓度,并经回收率校正后,以WinNonlin4.0.1药动学软件处理,计算药动学参数并进行统计学分析。结果TMPH鼻腔给药5 min后脑纹状体中的药物浓度为(1.43±0.29)mg·L^-1,而静脉注射后在相同时间点入脑不显著。鼻腔给药的ρ_max低于静脉注射,分别为(3.43±0.46)和(4.67±0.76)mg·L^-1,但二者的t_max,AUC_0-t,AUC_0-∞MRT,CL_s、近似,无显著性差异(P>0.05)结论TMPH鼻腔给药后可迅速吸收入脑,且吸收量与静脉注射近似,因此有望成为一种新的给药途径。     

LC/MS测定大鼠灌胃黄连提取物后血浆中小檗碱、 巴马汀及其药物动力学研究

目的 :建立LC/MS测定大鼠血浆中小檗碱、巴马汀含量的方法,并探讨其在大鼠体内的药动学过程。 方法 :大鼠ig黄连提取物后不同时间点采血, LC-MS法测定血药浓度,并用Win Nonlin 5.1软件求算其药动学参数。 结果 :小檗碱、巴马汀质量浓度分别在5~1 000 ng ·mL^-1(r=0.998 9),2.5~500 ng ·mL^-1 (r=0.999 4)线性关系良好。平均回收率大于85%,日内、日间RSD均小于15%。大鼠ig黄连提取物1.2,2.4,4.8 g ·kg^-1后,用非房室模型计算药动学参数,小檗碱的AUC平均值为707.91,1 220.32,2 424.62 h ·ng^-1 ·mL^-1;T_1/2平均值为1.89,2.29,4.79 h;C_max平均值为:315.78,501.58,584.57 ng ·mL^-1;T_max均为1 h;巴马汀的AUC平均值为:130.29,348.61,872.76 h ·ng ·mL^-1;T_1/2平均值为1.71,2.64,5.89 h;T_max均为1 h;小檗碱和巴马汀的AUC与给药剂量之间呈现良好的线性关系。 结论 :该法专属性强,灵敏度高,可用于小檗碱、巴马汀的体内定量分析,小檗碱与巴马汀体内过程均符合一级速率过程。     

盐酸戊乙奎醚在小鼠体内的药动学研究

 目的研究盐酸戊乙奎醚在小鼠体内的药动学特性。方法小鼠肌注盐酸戊乙奎醚进行体内药动学实验，采用放射受体和放射性同位素方法测定生物样品中的药物浓度。结果小鼠肌注盐酸戊乙奎醚0.05，0.15和0.45 mg·kg^-13种剂量后的主要动力学参数t_max为0.13，0.10和0.09 h；t_1/2β-为2.35，2.36，2.60 h；c_max和AUC与给药剂量呈线性倍增。小鼠单剂量肌注盐酸戊乙奎醚0.15 mg·kg^-1后，很快分布到全身各组织中，给药后20 min各组织中的药物浓度均达到峰值；药物原形和具有药理活性的代谢产物24 h由尿和粪约排出4%；小鼠肌注同剂量的3H盐酸戊乙奎醚后，24 h由尿和粪中累积排出61.11%和7.31%。盐酸戊乙奎醚与小鼠和人血浆蛋白的结合率分别为60.09% 和41.79%。结论小鼠肌注盐酸戊乙奎醚后吸收和分布均很快，药物主要以无药理活性的代谢产物形式由尿排出体外，与血浆蛋白的结合率中等。     

天钩降压胶囊中丹皮酚在大鼠体内药代动力学

目的: 研究不同剂量天钩降压胶囊对大鼠体内丹皮酚药动学的影响。方法: 大鼠分别灌胃给予低、中、高剂量天钩降压胶囊(相当于丹皮酚6.884,13.77,27.53 mg ·kg^-1),于给药后不同时间采集大鼠血浆。血浆样品用甲醇沉淀蛋白,HPLC测定丹皮酚含量,各给药组平均血药浓度-时间数据采用DAS2.0软件分析。组间药动学参数用 SPSS 16.0 软件进行统计分析。结果: 低剂量组大鼠丹皮酚血药浓度在消除相超出最低检测限,未能测出药时曲线;中、高剂量组丹皮酚均在5 min达最大吸收;t1/2ka,Cmax,AUC_0-∞,AUC_0-360,CLz/F随给药剂量增加而显著性增加;t1/2z, MRT_0-360,Vz/F随给药剂量增加而显著性减小。结论: 大鼠灌胃不同剂量天钩降压胶囊后丹皮酚的药动学参数存在一定差异。     

磷酸川芎嗪鼻用pH敏感型原位凝胶大鼠血液和脑部药动学研究

 目的 研究磷酸川芎嗪（TMPP）鼻用pH敏感型原位凝胶（TMPP凝胶）大鼠血液和脑部药动学。方法 大鼠鼻腔给予TMPP凝胶和TMPP溶液后,利用血液微透析与脑部微透析技术同步进行血液药动学与脑部药动学研究,高效液相色谱法测定并计算透析液中TMPP的浓度,用Kinetica 4.4软件计算药动学参数。结果 两种鼻腔给药制剂在大鼠血液和脑部的药-时曲线均符合二室开放模型,TMPP溶液组和凝胶组血液中的主要药动学参数：t_max分别为（15.0±1.0）,（35.0±1.0）min;ρ_max分别为（5.857±1.3）,（5.848±1.0）μg·mL^-1;AUC_0～∞分别为（529.9±68.6）,（642.7±54.3）μg·min·mL^-1。脑部的主要药动学参数：t_max分别为（15.0±1.0）,（35.0±1.0）min; ρ_max分别为（7.134±0.8）,（6.738±1.1）μg·mL^-1;AUC_0～∞分别为（615.4±71.2）,（801.4±67.5）μg·min·mL^-1。结论 TMPP凝胶易于通过鼻腔吸收进入脑部,并能起到缓释效应。     

醒脑静滴鼻液中栀子苷的家兔体内药动学研究

目的:建立测定家兔血浆中栀子苷浓度的高效液相方法,研究醒脑静滴鼻液鼻腔给药后栀子苷在家兔体内的药动学过程。方法:醒脑静滴鼻液家兔鼻腔给药,给药量为12 mg.kg-1(以栀子提取物计),于给药后1,3,5,10,20,30,45,60,90,120,240 min左颈动脉采血,乙腈沉淀法处理血浆样品,HPLC测定血浆中栀子苷浓度,以Kinetica软件拟合药动学参数。结果:血浆中栀子苷在0.136 5～2.73 mg.L-1线性良好,相关系数为0.999 6,低、中、高浓度回收率分别为(97.14±3.78)%,(95.06±2.95)%,(91.50±1.82)%,其日内、日间精密度RSD均小于4%,符合要求。醒脑静滴鼻液鼻腔给药后,栀子苷家兔血浆药动学过程符合二室开放模型,主要药动学参数(拟合值)为Cmax为(2.013±0.563)mg.L-1,Tmax为(6.405±1.764)min,Ke为(0.032 5±0.013 3)min-1,CL为(0.059 3±0.024 6)L.min-1.kg-1,AUC为(116.89±50.19)mg.min-1.L-1,MRT为(84.447±19.420)min。结论:本实验中建立的血浆处理及HPLC方法适用于家兔体内栀子苷的含量测定和药代动力学研究,醒脑静鼻腔给药后栀子苷吸收迅速,具有较好的应用前景。     

灯盏花素磷脂复合物自微乳在Beagle犬体内药代动力学及生物利用度

目的:建立Beagle犬血浆中灯盏乙素的定量分析方法,测定灯盏乙素在Beagle犬体内血药浓度经时过程,评价灯盏花素磷脂复合物自微乳的药代动力学及相对生物利用度。方法:单剂量分别灌胃给予Beagle犬灯盏花素磷脂复合物自微乳及灯盏花素片,采用HPLC测定血浆中灯盏乙素的浓度,流动相甲醇-0.2%磷酸水(45∶55),检测波长335 nm。运用DAS2.1.1软件程序拟合药物浓度-时间曲线,计算药动学参数和生物利用度。结果:灯盏花素磷脂复合物自微乳、灯盏花素片灌胃Beagle犬后灯盏乙素药-时曲线均符合二室模型,主要药代动力学参数Tmax分别为190 min和160 min,Cmax分别为78.98mg·L-1和33.63 mg·L-1,AUC0-t分别为18 674.619 mg·L-1·min和9 132.475 mg·L-1·min;相对生物利用度204.49%。结论:灯盏花素磷脂复合物自微乳较灯盏花素片能显著提高灯盏乙素在Beagle犬体内的生物利用度,为灯盏花素口服制剂的开发提供新方向。     

微透析结合HPLC-ECD测定头孢他啶在大鼠血中含量及其药动学研究

 目的研究头孢他啶在大鼠血中的药动学。方法采用血液微透析技术结合高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD),以甲醇-0.25mol·L^-1Na₂HPO₄(10:90)(pH7.0)为流动相,检测电压为800mV,在线分析静脉注射头孢他啶(90mg·kg^-1)后大鼠的血药浓度,经过体内回收率校正后,用3P87程序拟合药动学参数。结果头孢他啶在0.1～100.0μg·mL^-1内线性关系良好(r=0.9998),所测血药浓度经3P87程序拟合后药-时曲线符合一室模型,t_1/2为27.82min,c_max为189.40μg·mL^-1,AUC为7603.00μg·min·mL^-1。结论本方法操作简便,结果准确,能满足头孢他啶药动学分析的需要,为药动学研究提供了新的方法学上的参考。     

线性探针微透析研究阿魏酸经皮给药后药动学

目的:建立线性探针测定阿魏酸皮下浓度方法,考察温度、灌流液流速、浓度对线性探针回收率的影响,研究阿魏酸溶液经皮给药后体内药动学.方法:采用减量法测定阿魏酸线性探针的体内外同收率的稳定性,采用增量法测定体外回收率的影响因素,选择CD-1裸鼠作为实验动物,采用经皮微透析法进行体内药动学研究,HPLC测定透析液中阿魏酸的浓度.结果:温度对阿魏酸体外同收率有显著性影响,随着温度的升高,阿魏酸的体外回收率显著提高,随着流速的增加阿魏酸的体外同收率呈指数下降,在测定范围内,浓度对阿魏酸的体内外回收率无影响,在测定时间内阿魏酸体内外同收率稳定性、重复性良好,体外平均回收率为(24.82±1.01)％;体内平均回收率为(16.50±1.92)％;经皮给药后,阿魏酸86 min达到峰值,平均滞留时间为291 min.结论:线性探针可用于阿魏酸经皮给药的研究;阿魏酸可迅速透过角质层,适宜制成经皮给药制剂.     

应用HPLC研究莪术油的药动学

 目的　研究莪术油的大鼠体内药动学。方法　采用高效液相色谱法测定莪术油中标志性成分吉玛酮血浆药物浓度。结果　大鼠尾静脉注射及灌胃给药后莪术油指标性成分吉玛酮药时曲线符合静注和口服的二房室模型,静注给药t_1/2α,t_1/2β分别为9.890,41.53min,灌胃给药K_a为0.479h^-1,t_max为3.284h,c_max为0.501μg·mL^-1。结论　静注给药后吉玛酮在大鼠体内表现为快速分布和消除,口服莪术油吸收较慢。     

Comparative study on brain pharmacokinetics of Buyang Huanwu Decoction in normal and cerebral ischemia rats using brain microdialysis combined with LC-MS/MS

Objective: To conduct a comparative study on the brain pharmacokinetics of seven ingredients (i. e. senkyunolide A, ferulic acid, formononetin, calycosin, ononin, calycosin-O-β-D-glucopyranoside, and paeoniflorin), which were the compounds of Buyang Huanwu Decoction (BHD), in normal and cerebral ischemia rats administrated intragastrically with BHD. Methods: The samples of normal and permanent middle cerebral artery occlusion (pMCAO) rats were collected by using brain microdialysis technique. The concentrations of seven ingredients were determined by the HPLC-MS/MS method. After the BHD were administrated intragastrically to the rats for seven consecutive days, brain microdialysis probes were inserted into the hippocampus of rats, and then the brain microdialysates were collected at 20 min time intervals for 5 h. The separation of the seven ingredients and internal standard (IS) was carried out on an ACQUITY UPLC BEH C18 (2.1 mm × 100 mm, 1.7 μm) chromatographic column, using a mobile phase consisting of acetonitrile (containing 0.1% formic acid) and water (containing 0.1% formic acid) for gradient elution within 13 min. The ionization was conducted using an ESI source in positive ion mode. Multiple reaction monitoring mode was used for quantification of ingredients in BHD. Results: Linearity, accuracy, precision, matrix effect and stability of LC-MS/MS method were all satisfactory, successfully applied to compare the pharmacokinetics of the analytes between normal and model rats after intragastric administration of BHD. Compared with the normal group, the model group after the administration of the BHD showed that T1/2 of formononetin and ononin were longer, and except for calycosin-O-β-D-glucopyranoside (P < 0.01), there was no significant difference between the normal group and the model group. The Cmax of senkyunolide A and calycosin of model group were increased, while the Tmax of senkyunolide A was decreased, and except for the Tmax of PF, the differences between the two groups were statistically significant (P < 0.01). Conclusion: The LC-MS/MS method combined with microdialysis was successfully applied to the comparative study of brain pharmacokinetics of seven ingredients in BHD. After intragastric administration of BHD, there were differences in the pharmacokinetics of seven ingredients in the brain hippocampus between normal rats and model rats, probably related to the characteristics of the ingredients and the effects of cerebral ischemia on the absorption and distribution of the ingredients.