胃多导电刺激及胃液体排空犬动物模型的建立

目的建立胃浆膜多导联电刺激和胃排空动物模型。方法在12条英国比格犬的胃大弯浆膜层包埋四对心内起搏电极,距幽门40cm空肠近端行一造瘘口。结果①造瘘管收集食糜的方法简单易行,通过其排空量,能了解不同的电刺激和不同的电刺激参数对胃动力的作用。②胃浆膜多导联电极记录的胃体、胃窦慢波电信号清晰、稳定,能准确地记录不同时间和不同实验的胃慢波变化。③单导联和多导长脉冲电刺激均能控制胃慢波。结论胃浆膜多导联电极是研究胃电生理、胃电起搏及胃电起搏对胃排空的影响较理想的方法。英国比格犬是此模型的理想材料。     

封闭群比格犬遗传标志微卫星引物的筛选

目的筛选出有效的微卫星引物,利用微卫星遗传标志对封闭群内比格犬的个体遗传情况进行分析。方法从文献中筛选杂合度在0．4～0．8的微卫星引物24对,对本场英系比格犬封闭群中随机筛选出的12只比格犬的混合基因组进行了扩增。结果24对引物中,有7对微卫星引物的扩增结果具有较好的多态性和重复性。利用这7对引物,对8只玛斯公司美系比格犬的混合基因组进行了扩增,结果与本场英系比格犬的扩增结果具有明显的差异。又利用这7对引物对随机筛选出的6只比格犬的个体遗传情况进行了分析,其中3只比格犬表现出明显的差异。结论作者筛选的7对微卫星引物可以对本场比格犬种群的个体遗传情况进行初步分析。     

中药对比格犬慢性实验模型胃肠动力的影响

【目的】观察大腹皮、番泻叶、草果、砂仁、白术、枳壳、枳实等7种中药及乙酸龙脑酯、辛弗林等2种中药活性物质对比格犬慢性实验模型胃肠动力的影响。【方法】应用6只比格犬制备慢性实验模型,在全部犬的胃窦、十二指肠、空肠、回肠和结肠浆膜植入应力传感器,安装胃瘘供中药汤剂灌服,安装颈外静脉置管供静脉给药。造模后,每天观察比格犬空腹状态下胃肠运动特点,连续7 d。造模后第7天开始,记录给药前空腹状态下胃肠运动,作为基础对照,到消化间期移行性复合运动(MMC)I相,依次记录大腹皮、番泻叶、草果、砂仁、白术、枳壳、枳实(均经胃瘘给予煎剂200 m L),生理盐水(给予等体积灌胃),乙酸龙脑酯(为枳实、枳壳的主要活性物质,静脉输注),辛弗林(为砂仁活性物质,静脉输注)作用下的胃肠运动。全部犬1 d只观察1种药物,每种药物重复观察2次。通过植入的应力传感器记录清醒犬胃肠运动,观察MMC周期、收缩波频率、收缩波总数、收缩波振幅、平均振幅、动力指数(MI)。【结果】术后1~6 d,比格犬胃肠动力低下,未出现MMC周期。至术后第7天,在空腹状态下消化间期,胃窦、十二指肠、空肠和回肠均出现典型MMC周期,而结肠出现不规则MMC周期。与给药前及生理盐水组比较,大腹皮、乙酸龙脑酯干预后胃窦、十二指肠、空肠、回肠和结肠收缩波数及MI均升高,番泻叶、草果干预后十二指肠、空肠、回肠和结肠收缩波数及MI升高,砂仁干预后胃窦、十二指肠收缩波数及MI升高(均P0.05)。枳壳干预后空肠MI降低,枳实干预后空肠、结肠MI降低,辛弗林干预后胃窦收缩波数和胃窦、空肠MI降低(均P0.05)。【结论】应用比格犬慢性实验模型可有效进行胃肠动力中药筛选。大腹皮、番泻叶、草果、砂仁和乙酸龙脑酯可增强胃肠运动;枳实、枳壳和辛弗林可抑制胃肠运动;白术则对胃肠运动无影响。     

胃电刺激模拟胃窦异位起搏点引发犬远端胃电紊乱的研究

目的 探讨高频长脉冲逆行胃电刺激(retrograde gastric electrical stimulation,RGES)诱导远端胃电紊乱的最低能量.方法 在7条比格犬的胃大弯前壁浆膜层植入4对心脏起搏电极.通过最远端电极输入不同振幅的高频长脉冲胃电刺激模拟异住起搏,诱导远端胃电紊乱,从而获得最低电刺激能量.现察电刺激前、刺激中和刺激后消化不良症状并进行评分.结果 ①最低能量为(85.71±11.34)(mA·ms)的高额长脉冲RGES可以影响远端胃慢波,而且刺激前后消化不良评分无明显差异;②RGES使远端胃正常胃慢波百分率降低[(92.48±10.57)%vs(25.25±17.08)%,P=0.001],胃电过速百分率升高[(0.61±1.05)%vs(55.37±25.05)%,P=0.001).结论 低能量高频长脉冲RGES可作为人工模拟胃窦异位起搏点的方式之一,其能诱发远端胃快速性胃电紊乱,且无可见的消化不良症状.     

逆行胃电刺激对健康人胃电活动的影响

目的观察逆行胃电刺激(RGES)对健康人胃电活动的影响。方法选择健康志愿者12例。沿胃大弯距幽门5cm处放置一对黏膜电极,进行RGES。观察RGES的长脉冲和串脉冲刺激对多通道胃电图参数的影响,长脉冲对摄食试验中胃电活动的影响,探讨RGES抑制胃动力的电生理学基础。结果所有长脉冲和串脉冲RGES可完全驱动健康人的胃电信号。多通道胃电图分析显示,RGES较大能量的刺激引起ch1和ch4的正常慢波百分比(N%)显著降低,ch1、ch3和ch4的胃电主频(DF)下降,ch1和ch2的主功率(DP)显著降低,胃电慢波耦联率下降。RGES也引起了摄食后ch3的DF显著下降。并且长脉冲对胃电生理的抑制较串脉冲更为明显。结论RGES可抑制胃电活动,尤其以长脉冲作用更明显。这种抑制作用可能是RGES延缓胃排空和减少摄食量的电生理基础。     

胃电刺激对肥胖症治疗的作用机制

近年来胃电刺激备受关注,其原由为电子技术发展迅猛、功能性胃肠疾病缺乏有效治疗手段及胃电刺激对胃轻瘫和肥胖患者治疗巨大进展。本文系统的回顾了胃电刺激对肥胖患者治疗的作用机制。本综述通过对Medline检索,其结构如下:①胃电刺激方法;②胃电刺激肥胖治疗的临床运用;③胃电刺激作用机制;④胃电刺激前景展望。目前研究显示胃电刺激能有效地减少食物摄入和体质量,是因其可抑制胃动力、激活饱食神经元并改变中枢和外周饱食和食欲相关性肽和激素的作用。然而,为进一步证实胃电刺激的临床有效性,需开发新一代的胃电刺激器和进行临床对照试验。     

伏隔核脑深部电刺激对大鼠肥胖症的治疗作用

目的：探索伏隔核（NAc）壳部脑深部电刺激术（DBS）对大鼠肥胖症的治疗作用,阐明DBS治疗肥胖症的可行性。 方法：30只大鼠随机分为DBS组和对照组,每组15只。2组大鼠均给予高脂饲料喂养并分别通过立体定向给予电极固定装置植入、电极植入,DBS组大鼠给予高频电刺激7 d,对照组不给予刺激,电极拔除后继续观察28 d。实验全程（57 d）每日监测大鼠体质量、摄食量和饮水量。综合比较2组大鼠体质量增长率、摄食量和饮水量变化。 结果：NAc壳电刺激第5天开始DBS组大鼠体质量增长率低于对照组（P＜0.05）,至实验结束时DBS组大鼠体质量平均增长幅度为10.2%,对照组为35.7%。电刺激期间DBS组大鼠摄食量低于对照组（P＜0.05）,刺激结束后2组大鼠摄食量差异无统计学意义（P＞0.05）。2组大鼠饮水量在整个实验过程中差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论：NAc壳部可以作为DBS治疗大鼠肥胖症的理想靶点,一方面限制摄食行为,降低摄食量;另一方面可能通过其与能量平衡系统相互作用,增加大鼠能量消耗,减缓体质量增长。     

比格犬腹腔动脉解剖的多层螺旋CT和DSA研究

目的采用多层螺旋CT血管造影（MDCTA）和数字减影血管造影（DSA）评价比格犬腹腔动脉及其主要分支的解剖学特点。方法成年比格犬15只,分别进行多层螺旋CT（MDCT）检查和在直视下行经股动脉浅表分支选择性腹腔动脉插管及DSA造影术,观察腹腔干其主要分支的起源和走行并测量直径和长度。结果15只比格犬15条股动脉插管成功,成功率为100%（15／15）。腹腔动脉、胃左动脉、肝总动脉、脾动脉插管造影成功率均为100％（15／15）。比格犬腹腔动脉解剖与人类很相似。MSCT和DSA检查发现其与人类腹腔动脉解剖的相同点在于：（1）腹腔动脉起始部位在第1腰椎体中上水平;（2）腹腔动脉由腹主动脉前壁发出后向前走行,然后再发出分支;（3）虽然胃左动脉由脾动脉近段发出,但是仍属于腹腔动脉分支,所以腹腔动脉三大分支肝总动脉、脾动脉和胃左动脉与人类相同。不同点在于：（1）胃左动脉发自脾动脉近段;（2）胃十二指肠动脉在肝门部分出,肝同有动脉很短或缺如。3只犬肝右动脉在胃十二指肠动脉之前发出20％。结论比格犬腹腔动脉与人类腹腔动脉解剖的相似性,对肝、脾、胰、胃等脏器的动物介入性研究具有广阔的应用前景。     

脊髓电刺激术研究进展

1965年,国外学者Melzack和Wall报道的脊髓后角细胞传递痛觉的闸门理论,为电刺激治疗疼痛提供了理论基础.起初,由于对病例筛选标准和对慢性疼痛多学科处理方法的认识不足,脊髓电刺激术的治疗效果往往不尽人意.近年来,由于病例筛选标准的改进和对慢性疼痛的多学科处理方法的重视,加之方便易行的可植入电刺激器的出现,脊髓电刺激术治疗慢性疼痛的效果较前大有改善[1].     

比格犬与杂种犬右心室快速起搏至房颤模型比较

目的 比较比格犬和杂种犬制作的右心室快速起搏至房颤模型,选择出表达更加稳定的房颤动物模型.方法 雌性杂种犬与比格犬各8只采用完全随机设计,将8只杂种犬分为2组,每组4只,记为杂种犬对照组与杂种犬实验组;将8只比格犬分为2组,每组4只,记为比格犬对照组与比格犬实验组.各实验组在X线透视下,经颈外静脉将1条心室起搏电极植入右心室心尖.连接心室起搏电极与起搏器,起搏器埋于右侧颈部皮下.以240次/min快速起搏心室,送回动物房饲养.2周后测定血流动力学指标和电生理指标,处死,快速取出心脏,测定心脏重量等相关指标.结果 比格犬在心率,心脏系数,左心室内压这几个指标中与杂种犬比较差异均无统计学意义;比格犬对照组与杂种犬对照组心房不应期无明显差别;杂种犬实验组右心室快速起搏后心房不应期有下降趋势,但差异无统计学意义;比格犬实验组右心室快速起搏后心房不应期下降,差异有统计学意义（P＜0.01）;比格犬对照组与杂种犬对照组比较,房颤诱发率差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 比格犬较杂种犬在右心室快速起搏至房颤模型中表达稳定,效果明显,有一定优势.     

Central opioid peptide-containing neurons mediates therapeutic effect of short-pulse gastric electrical stimulation on dyspepsia-like symptoms in dogs

This study investigated whether the curative effect of short-pulse gastric electrical stimulation （GES） on the vasopressin-induced dyspeptic symptoms was mediated by central opioid peptide-producing neurons. Five female beagle dogs implanted with 1 pair of electrodes in gastric serosa were used in a two-experiment study. In experiment one, the brain was scanned by positron emission tomography in 3 dogs with and without short-pulse GES, and the radioactivity in nuclei of solitary tract （NST） and hypothalamus was detected. Experiment two was composed of 4 sessions. In session one, the dogs were injected with vasopressin in the absence of short-pulse GES. With session two, the short-pulse GES was simultaneously given via the electrodes with the injection of vasopressin. In sessions three and four, naloxone and naloxone methiodide was administered respectively in the presence of short-pulse GES. Motion sickness-like symptoms were scored and compared among the different sessions. The results showed that the short-pulse GES significantly increased the radioactivity in NST and hypothalamic nuclei （P〈0.05, vs control）. The short-pulse GES could ameliorate the vasopressin-induced motion sickness-like symptoms in dogs. Naloxone, but not naloxone methiodide could attenuate the curative effects of short-pulse GES. It is concluded that NST and hypothalamic nuclei may participate in the mediation of the curative effects of short-pulse GES on dyspepsia-like symptoms. Central opioid peptide-containing neurons presumably mediate the therapeutic effect on dyspeptic symptoms of short-pulse GES.     

玉米多糖铁在毕格犬体内的药代动力学研究

目的:采用原子吸收分光光度法对玉米多糖铁在毕格犬体内的药代动力学特征进行研究。方法:毕格犬灌胃(11.0 mg/kg、5.7 mg/kg、2.9 mg/kg)给予玉米多糖铁后,不同时间点测定犬体内铁离子的浓度,所得数据用DAS软件求算药动学参数并分析。结果:当玉米多糖铁中铁离子浓度在0.2⁵μg/ml范围内时其线性关系良好,标准曲线的相关系数r=0.999 65μg/ml范围内时其线性关系良好,标准曲线的相关系数r=0.999 6⁰.999 9,平均回收率达到91%以上、RSD值低于15%。药动学参数表明其在毕格犬体内的药动学模型符合二室模型,其中三个剂量组的t1/2分别为(1.69±0.25)×103、(1.4±0.51)×103和(1.88±1.41)×103min;AUC0-∞分别为(5.87±1.39)×103、(4.53±1.11)×103和(3.91±2.12)×103mg/(L·min)。结论:本研究数据为进一步研究玉米多糖铁的临床应用提供了极具价值的实验参数。     

肝硬化门静脉高压模型犬舌下络脉形态和舌下组织血管内皮生长因子及低氧诱导因子1α的表达

目的：观察肝硬化门静脉高压犬舌下络脉变化及舌下组织血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和低氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor1α,HIF-1α）的表达情况。 方法：将12只Beagle犬随机分为正常组和模型组。用二甲基亚硝胺（dimethylnitrosamine,DMN）诱导肝硬化门静脉高压,观察Beagle犬舌下络脉形态、颜色;生物电记录系统测定其门静脉压力;免疫组织化学EnVision法检测犬舌下组织VEGF及HIF-1α蛋白的表达。 结果：模型组Beagle犬舌下血管形态学和颜色较正常组有明显改变。免疫组织化学结果显示,正常对照组犬舌下血管VEGF、HIF-1α几乎无表达;模型组犬舌下组织VEGF、HIF-1α蛋白表达显著增高,差异有统计学意义（P〈0.01）。 结论：门静脉压力变化可能是肝硬化门静脉高压模型犬异常舌下络脉形成的一个重要因素,舌下血管VEGF和HIF-1α蛋白表达增加可能参与了这一过程。     

CT灌注成像技术对犬肝纤维化模型的实验研究

目的:采用CT灌注成像技术,探讨beagle犬肝纤维化造模过程中各灌注参数的变化规律。材料和方法:实验采用雄性犬14只,实验组10只,对照组4只。利用四氯化碳溶液腹腔注射加饮食控制法制备肝纤维化模型。在双周末分别进行肝脏CT灌注扫描和肝穿刺病理活检,计算各项灌注参数。结果:实验犬于10周末有5只造模成功,死亡两只,其余三只未造模成功的实验数据不纳入统计范围。门脉灌注量HPP在肝纤维化过程中呈降低趋势,S1期与S4期比较,差异有显著性(p<0.05);肝脏灌注指数HPI在肝纤维化过程中呈升高趋势,S1期与S4期比较,差异有显著性(p<0.05)。结论:随着肝纤维化程度的加重,肝脏灌注指数HPI呈增高趋势,门脉灌注量HPP呈下降趋势。     

天冰调督胶囊对激怒模拟肝郁证模型大鼠生长抑素的影响

目的观察天冰调督胶囊对大鼠进食量,血浆、胃窦和下丘脑生长抑素（SS）含量的影响。方法将60只Wistar大鼠随机分为6组,即：正常组、模型组、柴胡疏肝散组、吗丁啉组、天冰调督胶囊低剂量组、天冰调督胶囊高剂量组。以“夹尾激怒法”制作肝郁证模型,记录各组大鼠每日进食量,用放射免疫法测量大鼠血浆、胃窦及下丘脑SS含量。结果（1）大鼠进食量：造模期间,除正常组进食量较稳定外,其余各刺激组进食量均明显下降,与正常组有显著差异（P〈0．05）。治疗后,各治疗组与模型组相比,具有显著差异（P〈O．05）,其中天冰调督胶囊高剂量组与其他治疗组有显著差异（P〈0．05）。（2）SS含量：治疗后,与模型组相比,其他组SS含量均显著降低（P〈O．05）,差异具有统计学意义;其中天冰调督胶囊高刹量组与其他治疗组有显著差异（P〈O．05）,差异有统计学意义。结论天冰调督胶囊能显著改善大鼠进食量,降低大鼠血浆、胃窦及下丘脑SS含量,这可能是其治疗肝郁证的神经内分泌物质基础之一。     

LC—MS／MS法测定微孔型盐酸文拉法辛渗透泵控释片在比格犬体内生物利用度及生物等效性的研究

目的利用LC—MS／MS法对自制微孔型盐酸文拉法辛渗透泵控释片在比格犬体内的生物利用度及生物等效性进行研究。方法8只比格犬随机分成2组,分别单剂量口服受试制剂（自制微孔型盐酸文拉法辛渗透泵控释片）和参比制剂（市售盐酸文拉法辛缓释胶囊）,在相应的时间点采集血样,经1周的清洗期后交叉给药。采用LC—MS／MS法测定比格犬体内文拉法辛血药浓度,使用WinNonlin5．2应用软件计算药代动力学参数。结果受试制剂和参比制剂各药代动力学参数：半衰期（T1/2）分别为2．86、3．15h,达峰时间（Tmax）分别为13．25、7．50h,达峰浓度（Cmax）分别为253．72、127．14ng／ml,曲线下面积（AUC（0-t））分别为3126．14、1552．80ng·ml^-1·h^-1,平均滞留时间（MRT（0-∞））分别为13．79、10．35h。结论该测试方法简便可行,受试制剂与参比制剂在吸收的速度和程度方面有显著性差异,受试制剂生物利用度较高,二者生物不等效。     

针刺下关穴对蛛网膜下腔出血后症状性脑血管痉挛的影响

目的：探讨针刺下关穴对蛛网膜下腔出血性脑血管痉挛的影响。方法：成年Beagle犬20只随机分为下关穴针刺组8只,假针刺组6只,未干预组6只;采用枕大池二次注血法复制蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛模型。下关针刺穴组于模型制作成功后,手术植入同心圆双极电针于左侧下关穴,假针刺组按同样方法植入电针于皮下。于第4日起各组分别给予针刺下关穴、假针刺、不干预处理。观察各组犬进食量、神经功能、DSA、TCD结果变化。结果：治疗后下关穴针刺组进食量、神经功能改善明显（P〈0．05）,大脑中动脉、基底动脉直径明显扩张（P〈0．05）,且大脑中动脉血流速度加快（P〈0．05）。结论：针刺下关穴能改善犬蛛网膜下腔出血性脑血管痉挛。     

原癌基因c—met在胃癌细胞株中的表达

目的：观察原癌基因c—met在不同分化的胃癌细胞株中的表达水平。方法：采用实时荧光定量PCR仪和Westernblotting检测高分化胃癌MKN28、中分化胃癌SGC-7901、低分化胃癌MKN45和正常胃细胞GESl中c—met的表达情况。结果：荧光定量PCR显示原癌基因c—met在三个胃癌细胞株中均有高表达，但以中分化的胃癌细胞SGC-7901的表达（0．064606＋0．0025）显著高于低分化的胃癌细胞株MKN45（0．016657±0．0002）和高分化的胃癌细胞株MKN28（0．002419±0．0002）（P〈0．01）；Westernblotting显示c—met在蛋白水平的结果与前-致。结论：四个胃癌细胞株中，原癌基因c—met均有表达，以SGC-7901表达量最高。