66例亲属活体肾移植的临床观察

目的：探讨人类白细胞抗原（HLA）配型和抗HLA抗体检测在亲属活体肾移植的应用，及其与移植效果的关系。方法：移植受者及其亲属供体采用PCR—SSP进行HLA配型，移植术前行补体依赖微量细胞毒性试验（CDC）交叉配型，同时采用酶联免疫吸附（ELISA）方法筛查和监测受者的群体反应性抗体（PRA）。分析亲属活体供肾移植的临床效果。结果：够例受者接受了亲属活体供肾移植手术。63例术前抗HLA抗体检测为阴性，其中供受者HLA配型错配（MM）者0-3MM受者57例，3例（5．26％）发生肾功能延迟恢复（DGF），2例（3．51％）发生急性排斥（AR）；HLA4～6MM受者6例中分别有1例（16．67％）和2例（33．33％）发生DGF和AR。HLA0～3MM组AR发生率显著性低于4～6MM组（P〈0．05）。而不同临床免疫抑制方案组之间AR发生率无显著性统计学差异（P〉0．05）。甲基泼尼松龙（MP）和抗人胸腺细胞球蛋白（ATG）冲击等治疗措施后，所有AR得以逆转。3例术前预致敏（PRA35％～87．5％）的受者，HLA2～3MM。1例致敏受者肾功能顺利恢复，PRA维持不变。另2例致敏受者术前自然或经血浆置换后PRA转阴，术后发生AR，ATG冲击治疗后肾功能也恢复正常，抗体有轻度反弹。结论：亲属活体供肾移植的组织配型良好，配合抗HLA抗体监测，使得受者移植的机会增加，排斥反应发生率低，但错配者多，术前致敏受者排斥反应发生率高，应加强围手术期处理。     

上海地区Ⅰ型自身免疫性肝炎与HLA-DRB1等位基因的相关性研究

目的 分析HLA－DRB1等位基因与上海地区I型自身免疫性肝炎（AIH）的相关性，探讨AIH的遗传易感背景。方法 采用序列特异性多聚酶链反应（PCR－SSP），对32例I型AIH患者和48例健康对照者进行HLA－DRB1等位基因及有关基因亚型的分析。结果 HLA－DR4基因频率在I型AIH患者中较健康对照组显著增高[46.9%与20.8%；相对危险度（RR）＝3．35，χ^2=5.99,P=0.014]。其他等位基因在两组间差异无显著性。进一步对HLA－DR4等位基因亚型的分析表明，I型AIH患者组DRB1^*0405的基因频率较健康对照组有增加趋势（21．9％与6．3％，χ^2=4.23,P=0.04，但Pc=0.08)。HLA－DRβ分子的第3等位基因高变区第71位精氨酸残基的频率在I型AHI患者中显著增高（46.9%与18.8%,χ^2=7.14,P=0.008)。结论 上海地区I型AIH的发病与HLA－DR4以及HLA－DRB1第3高变区DR7位精氨酸残基相关。     

人甲状腺过氧化物酶抗原决定簇基因在大肠杆菌的表达及临床测定应用

目的 表达有抗原活性的人甲状腺过氧化物酶（hTPO）片段，并将表达产物用于临床测试。方法 将hTPO抗原决定簇基因连入pGEX-4T-3，然后转入E.coli BL21，异丙基β－D－硫代半乳糖苷诱导表达。表达产物谷胱甘肽巯基转移酶（GST）－hTPO经亲和层析纯化，并鉴定免疫学活性。以GST－hTPO为抗原建立检测血清TPO抗体（Ab）的ELISA方法。用此方法检测一批自身免疫性甲状腺疾病（AITD）患者血清TPOAb，用病理学方法观察同批患者甲状腺组织吕HLA－DR抗原、树突状细胞及淋巴细胞浸润程度。结果 成功地表达了hTPO抗原决定簇基因，纯化产物GST－hTPO纯度高，有良好的免疫学活性，以此抗原建立的ELISA方法有良好的重复性，CV在5．93％－7．59%之间。ELISA方法与RIA方法比较，检测结果显著相关（n=37,r=0.613,P＜0．001）。血清TROAb水平及HLA－DR抗原、树估状细胞分布随甲状腺组织淋巴细胞浸润程度加重呈逐渐增多趋势。结论 原核表达产物GST－hTPO可用于建立TPOAb常规检测方法；AITD患者血清TPOAb水平与甲状腺组织损伤有密切关系。     

糖尿病合并肺部感染患者肺泡巨噬细胞HLA-Ⅱ类抗原的表达

目的：探讨肺局部免疫状况与2型糖尿病好发肺部感染之间的相关关系。方法：纤维支气管镜（纤支镜）肺泡灌洗术收集巨噬细胞，用链霉亲和素－生物素－酶联检测法（SABC法）分别检测2型糖尿病合并肺部感染组（A组）、2型糖尿病无肺部感染组（B组）、单纯肺部感染组（C组）和对照组（D组）肺泡巨噬细胞HLA－DQ、HLA－DR抗原的表达，比较各组间抗原表达的阳性率。结果：A组、B组与C组、D组比较，差异有显著性（P＜0．05）。结论：糖尿病患者存在肺部免疫力低下，糖尿病患者肺泡巨噬细胞HLA－Ⅱ类抗原的表达降低是导致糖尿病患者好发肺部感染的原因之一。     

我国溃疡性结肠炎人类白细胞抗原-DR基因分型的研究

目的：研究溃疡性结肠炎（UC）患者的人类白细胞抗原－DR（HLA－DR）基因分型,并分析其与抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）及疾病分型的关系。方法：用接免疫荧光法分别对80例UC患者和123例健康者进行血清ANCA检测,同时用序列特异性引物－聚合酶链反应法（PCR－SSP）对HLA－DR1到第4个基因位点进行分析。结果：UC患者ANCA的阳性率为55．0％,对照组均为阴性;UC患者HLA－DR2及DR15基因阳性率分别为58．8％和40．0％,较对照组30．1％、17．9％显著增高（P均＜0．05）;与ANCA（－）UC患者比较,ANCA（＋）UC的DR15基因阳性率显著增加,而DR16基因阳性率显著降低;慢性持续型UC DR2和DR15基因性率较其他型显著增加。结论HLA－DR2和ANCA在UC中阳性率均显著增加,在ANCA阳性和阴性的UC中,分别由DR15和DR16基因阳性率增加所致;HLA－DR基因分型与临床分型有关。     

细胞因子基因多态性对肾移植急性排斥的影响

目的：研究肾移植受者的细胞因子和细胞因子受体基因多态性对术后早期发生急性排斥反应的影响。方法：①126名肾移植受者分为急性排斥组和无排斥组(6个月内)，比较两组患者中可能影响肾移植急性排斥发生的可能因素、13种细胞因子及受体的22个位点基因型分布情况；②根据HLA-DR配型情况分成0～1个HLA-DR位点错配组、HLA-DR完全错配组，分别比较阳性基因多态性的各种基因型在排斥和无排斥患者中的分布情况。结果：①急性排斥患者中，HLA—DR错配数明显高于无排斥患者；白介素一1(IL-1)α-889C／C、IL-4Rα 1902A／A、IL-12-1188C／C、IL-10(-1082-819-592)ATA／ATA、IL-10-819T／T、IL-10-592A／A及IL-10纯合子低表达型的频率明显高于无排斥的患者，IL-2 166T／T频率明显低于无排斥患者；②0～1个HLA-DR化点错配时，两组患者中IL-10的基因型频率明显不同，而在HLA-DR完全错配时，IL-4Ra 1902A／G、IL-12．1188C／A、IL-2 166G/T基因型频率明显不同．所有差别均有统计学意义。结论：HLA-DR错配是肾移植术后发生急性排斥的危险因素，肾移植受者的IL-1d-889C／C、IL-4Rα 1902A／A、IL-12-1188C／C、IL-10(-1082～819-692)ATA／ATA、IL-10-819T／T、IL-10-592A／A、IL-10纯合子低表达型是发生排斥的遗传学危险因素，而IL-2 166T／T则是小发生排斥的一个安全指标；HLA-DR位点错配情况干扰这些细胞因子基因多态性对急性排斥的影响作用。     

术前非供者特异性HLA抗体弱阳性的肾移植受者术后早期肾功能、移植排斥反应、移植肾存活情况

目的 观察术前非供者特异性人类白细胞抗原（HLA）抗体弱阳性的肾移植受者术后早期肾功能、移植排斥反应、移植肾存活情况。方法 接受公民逝世后器官捐献供肾移植的肾移植受者57例，依据肾移植术前HLA抗体检测结果分为HLA抗体弱阳性组26例、HLA抗体阴性组31例。观察受者术后早期肾功能，以术后1周移植物功能延迟恢复（DGF）率表示。对术后怀疑发生排斥反应的受者进行移植肾穿刺病理活检和病理诊断，测算移植排斥反应发生率。术后随访满5年，观察并比较两组受者移植肾5年存活率。结果 移植术后1周，HLA抗体弱阳性组受者DGF率为34.62%(9/26),HLA抗体阴性组受者DGF率为9.68%(3/31)，两组相比，P<0.05。HLA抗体弱阳性组受者移植排斥反应发生率为26.92%(7/26),HLA抗体阴性组受者移植排斥反应发生率为6.45%(2/31)，两组相比，P>0.05。HLA抗体弱阳性组受者移植肾5年存活率为73.08%(19/26),HLA抗体阴性组受者移植肾5年存活率为87.1%(27/31)，两组相比，P>0.05。结论 与HLA抗体阴性受者相比，术前非供者特异...     

肾移植急性排斥反应与T细胞胞内抗原-1 表达的关系

目的：研究移植肾组织T细胞细胞内抗原—1(TLA—1)的表达与急性排斥(AR)的关系。方法：采用竞争性逆转录聚合酶链式反应(RT—PCR)技术在mRNA水平上定量检测42例标本中的TLA—1，并将结果与组织学诊断比较分析。结果：AR组全部检测出TLA—1，而慢性排斥组和无排斥组分别只有10／15和3／13；AR组TLA—1mRNA水平明显高于慢性排斥组(P＜0．05)和无排斥组(P＜0．05);AR标本TLA—1表达与病理改变严重程度相关联，病理改变越严重，表达水平越高；竞争性RT—PCR测定TLA—1诊断移植肾AR敏感度和特异度分别为93％和68％。结论：TLA—1的表达与移植肾AR有关，可能成为早期诊断指标之一。     

类风湿关节炎中HLA-DR分子表达量的改变

目的 探讨外周血淋巴细胞表面HLA－DR分子表达量在类风湿关节炎（RA）发病中的作用。方法 选择RA患者活动期34例,静止期40例;正常对照（NC）43例,急性风湿性关节炎（ARA）21例及系统性红斑狼疮（SLE）28例,分别检测外周血淋巴细胞表面的HLA－DR分子表达量。同时在活动期RA治疗3个月前后,分别检测HLA－DR分子表达量、类风湿因子（RF）及对症状计分,进行统计学分析。结果 ①RA活动组HLA－DR分子表达水平最高（P＜0．05）,ARA组及RA静止组较NC组明显增高（P＜0．05）,而SLE组与NC组无明显差别（P＞0．05）;②RA活动组HLA－DR分子表达量及RF的阳性率均在治疗后显著下降,临床症状明显改善。结论 ①检测患者外周血淋巴细胞表面HLA－DR表达量有助于RA的诊断及监测RA活动度;②HLA－DR分子表达量与RF的动态变化相平行;③动态观察HLA－DR分子表达量变化有助于判断RA病情及其预后。     

肾移植高度致敏受者的临床处理

目的：探讨肾移植高度致敏受者的临床处理方案。方法：报告10例高度致敏受者,肾移植术前连续监测群体反应性抗体（PRA）水平和抗体特异性,行供－受者HLA配型,7例患者采用血浆置换（PE）治疗;术后采用他克莫司（FK506）、霉酚酸酯（MMF）和强的松三联免疫抑制治疗,6例患者采用5－7天的抗胸腺细胞球蛋白（ATG）诱导治疗。结果：2例患者（4次）术后发生超急性排斥反应（HAR）;2例未采用ATG诱导治疗的患者术后第1个月发生急性耐激素性排斥反应,6例患者术后第1个月末发生急性排斥。随访3－24个月,1例患者因肺部毛霉菌感染死亡,7例患者移植肾功能正常。结论：对受者HLA抗体特异性的鉴定和良好的HLA配型是高敏受者肾移植成功的基础,PE对降低高度致敏受者的PRA水平,预防超急性排斥反应以及对术后急性体液性排斥反应的治疗均有一定的作用。     

他克莫司治疗移植肾慢性排斥的初步临床观察

目的：探讨他克莫司（FK506）、环孢素A（CsA)治疗移植肾慢性排斥（CR)的可行性及安全性。方法：40例同种异体肾移植患者肾功能减退经病理证实为CR，随机分为CsA切我为FK506组20例、继续使用CsA组20例。观察各组移植肾功能、肾小球滤过率、蛋白尿、血压、血脂变化及急性排斥（AR）发生率，治疗后随访12个月。结果：追踪12个月，FK506组16例移植肾功能稳定（80％）；3例行血液透析治疗，1例死亡，人存活率95％。CsA组15例移植肾功能稳定，3例行血液透析治疗，逆转成功率75％；2例死亡，人存活率90％。结论：FK506可以延缓慢性移植物失功。FK506的使用是安全和有效的。     

Human leukocyte antigen-G (HLA-G) expression in biliary epithelial cells is associated with allograft acceptance in liver-kidney transplantation

BACKGROUND/AIMS: Liver allograft is known to protect simultaneously transplanted organs from acute rejection. We have reported that only 6% of combined liver-kidney recipients, versus 32.5% of kidney recipients, develop kidney graft acute rejection. Release of soluble human leukocyte antigen (HLA) molecules by the liver has been proposed as a possible tolerogenic mechanism involved in the better acceptance of double transplants. The HLA-G molecule is acknowledged to possess tolerogenic properties. METHODS: We investigated the involvement of HLA-G in allogeneic transplant acceptance by analyzing its expression in kidney and liver biopsies of 40 combined transplanted patients. RESULTS: We demonstrate the presence of HLA-G in 14 out of 40 liver and five out of nine kidney transplants biopsies. HLA-G is expressed de novo by cells that are otherwise frequently susceptible target cells of acute rejection, i.e. liver biliary and renal tubular epithelial cells. We show a significant association between HLA-G expression in liver biliary epithelial cells and the absence of liver graft rejection. No acute or chronic rejection of the kidney graft was observed in patients in whom HLA-G was expressed in the liver graft. CONCLUSIONS: HLA-G expression in the liver allograft is associated with a lower frequency of hepatic and renal acute rejection and may be involved in the acceptance of simultaneously transplanted organs.     

血小板T细胞活化抗原1与移植肾急性排斥反应的相关性

目的 :观察肾移植术后血清可溶性血小板T细胞活化抗原 1 (sPTA1 )水平及细胞膜性血小板T细胞活化抗原 1 (mPTA1 )的表达与排斥反应 (AR)的相关性。　 方法 :选取 1 7例围手术期同种尸体肾移植患者以及 2例术后超过 1年的AR的患者 ,根据患者的不同病况每周采取血样 ,采用夹心ELISA法测定血清sPTA1水平 ,流式细胞术检测淋巴细胞mPTA1表达 ,对明确有排斥反应、可疑有排斥反应以及不能区分排斥反应的患者在B超引导下行移植肾活检穿刺病理检查。　 结果 :术前sPTA1水平及mPTA1表达与对照无显著差异 (P >0 0 5)。术后第 1天sPTA1即有高水平的表达 ,与对照组差异显著 (P <0 0 5)。 1 9例尸体肾移植患者中经病理证实的 5例排斥反应患者sPTA1显著升高 ,mPTA1表达增强 ,与对照组差异非常显著 (P <0 0 1 )。经激素冲击治疗后 ,血清sPTA1下降 ,mPTA1表达下降。而且sPTA1水平变化早于AR的临床表现 ,持续时间较长。　 结论 :PTA1可以作为移植物AR的预警和监测指标 ,与病理检查的结果有较好的一致性 ;PTA1水平变化早于临床表现和病理学变化     

肾脏HLA-DR抗原表达在肾移植中的意义

应用免疫酶标技术对47例异体肾移植患者的95例次肾活检标本进行HLA-DR抗原的检测,并同时做光镜、电镜、免疫病理检查及淋巴细胞亚群的研究。结果显示:肾移植后近曲小管上皮细胞的DR抗原表达增加,肾小球的DR抗原表达减少;急、慢性排导反应,急性肾小管坏死时,肾小管及肾间质的DR抗原表达均明显增加;环孢素中毒时,肾单位的DR抗原表达正常,肾间质的DR抗原表达增加。肾脏HLA-DR抗原表达在肾移植后的变化,对于排异反应的诊断、鉴别诊断、判断预后及治疗决策具有重要意义。     

霉酚酸酯预防尸体肾移植急性排斥反应

目的；观察霉酸酯预防尸体肾移植急性排斥反应的疗效及其副反应。方法：共２０例无手术并发症的初次尸肾移植病例，随机分为三组：ＭＭＦ２ｇ／ｄ组１０例，ＭＭＦ１．５ｇ／ｄ组５例，硫唑嘌呤（ＡＺＡ）组５例：各组均同时应用环孢霉素和强的松。定期行相关检查，并常规行移植肾活检。结果：ＭＭＦ治疗组经活检证实的急性排斥发生率较低，ＭＭＦ２ｇ组：无（０／１０），ＭＭＦ１．５ｇ组，１例（１／５）；ＡＺＡ组２例（２／５）     

Regulatory T Cell Subtypes and TGF-β1 Gene Expression in Chronic Allograft Dysfunction

Background: Regulatory T cells have been suggested to have a protective role against acute rejection in allograft recipients. However, there is little information available about their contribution to chronic rejection process. The role of transforming growth factor-beta 1 (TGF- β1) as a profibrogenic and/or immunoregulatory cytokine in renal allografts is also controversial. Objectives: To evaluate the frequency of CD4+CD25+CD127- and CD3+CD8+CD28- regulatory T cells in chronic allograft dysfunction (CAD) and to investigate the expression of TGF- β1 in renal allografts. Methods: Thirty biopsy-proven CAD patients were pair-matched with 30 stable graft function patients and a third group of healthy volunteers. Flowcytometry was performed on PBMCs to determine the frequency of CD3+CD8+CD28- and CD4+CD25+CD127- regulatory T cells in lymphocyt population. TGF- β1 gene expression was assessed by Real Time PCR. Results: The percentage of CD3+CD8+CD28- Tregs among renal allograft recipients was higher than healthy controls (p<0.001) since stable graft patients showed the most rates. The frequency of CD4+CD25+CD127- Tregs was lower in CAD patients than stable recipients (p=0.024) and healthy group (p=0.015). TGF- β1 gene expression was greater in CAD patients compared to healthy group (p=0.03) but there was no significant difference between gene expression of stable graft patients and healthy volunteers. Conclusion: The negative association between the frequency of regulatory T cell subtypes and chronic allograft dysfunction proposes these cells as probable candidates for promoting allograft survival. Moreover, despite the immunoregulatory capacity of TGF- β1, it is likely to be implicated in chronic damages of allograft tissue.     

Calcineurin-inhibitor-free immunosuppression in early renal transplantation

Calcineurin inhibitors are one of the most common drugs used for prevention of acute rejection in recipients of renal allografts. New immunosuppressors have reduced the incidence of acute renal allograft rejection. There have been numerous recent attempts to develop alternative patterns of immunosuppressors for prevention of chronic renal allograft failure, and enhancing its survival. We described a patient who developed numerous complications after the initial postransplant period. He was treated with a calcineurin inhibitors-free immunosuppression in order to avoid nephrotoxicity, but had over 30 ng/ml of sirolimus. Renal function was impaired after cyclosponne withdrawal. Sirolimus was used in association with mycofenolate mofetil and prednisone.     

40-氧-(2-羟乙基)-雷帕霉素预防大鼠移植肾慢性排斥反应实验研究

目的　研究４０氧（２羟乙基）雷帕霉素（ＳＤＺＲＡＤ） 对大鼠移植肾慢性排斥反应的预防作用。方法　应用显微外科技术制作移植肾慢性排斥反应大鼠模型,将受体大鼠随机分为两组。治疗组大鼠接受ＳＤＺＲＡＤ０．５ ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－ １ 灌胃,对照组接受安慰剂。移植后每４ 周行２４ 小时尿蛋白定量测定,第２４ 周处死大鼠,对移植肾组织行组织学、免疫组化及反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ） 检测。结果　治疗组大鼠的蛋白尿、肾小球硬化、血管内膜增厚、单核巨噬细胞和淋巴细胞浸润等病变程度均较对照组为轻,黏附分子ＩＣＡＭ１、ＶＣＡＭ１ 和生长因子ＴＧＦβ１、ＰＤＧＦＡＡ 基因的表达减少。结论　ＳＤＺＲＡＤ可预防同种移植肾慢性排斥反应。黏附分子和生长因子基因表达的减少,可能是ＳＤＺＲＡＤ预防同种移植肾慢性排斥反应机制中的重要环节。     

同种异体移植肾组织中CD40/CD40L的表达及其意义

目的：探讨移植肾急性排斥（AR）时CD40及其配体（CD40L）表达的作用及临床意义。方法：采用SP免疫组织化学染色法对10例正常肾，12例无急性排斥（N-AR）及24例AR移植肾组织中CD40，CD40L表达进行观察，并结合肾间质中CD3，CD68细胞数进行分析，结果：AR组肾间质CD3，CD68细胞数较N-AR组和正常肾明显增高，与此相一致的是间质CD40^ ,CD40L^ 细胞数也较N-AR组明显增高，AR肾组织中CD40/CD40L表达分布不同，间质淋巴细胞以表达CD40为主，CD40L表达以肾实质细胞表达为主，结论：CD40/CD40L在AR移植肾组织中的原位表达及其分布特点可能与其参与AR的病理损伤机制有关。     

Increased expression of interleukin-4 during liver allograft rejection.

BACKGROUND/AIMS: To investigate the respective roles of interleukin-2 (IL-2) and IL-4 during rejection, we evaluated the expression of IL-2, IL-2 receptor and IL-4 in human liver allografts. METHODS: Immunohistochemistry and RT-PCR were performed in liver biopsies. To determine the effects of immunosuppression and cholestasis in IL-4 production, in vitro experiments were also designed. RESULTS: IL-2 protein and its mRNA were absent in the liver, with minimal expression of IL-2 receptor, during rejection. In contrast, IL-4 protein and its mRNA were highly expressed during acute and chronic rejection, whereas this expression was absent in stable liver transplant recipients. In vitro, cyclosporine potently inhibited IL-2 and IL-2 receptor expression of activated mononuclear blood cells, but poorly inhibited IL-4 expression. Chenodeoxycholic acid decreased IL-2 and IL-2 receptor expression, but increased IL-4 expression. CONCLUSIONS: During liver allograft rejection, IL-2 pathway is down-regulated, while IL-4 expression is increased by cholestasis and poorly inhibited by cyclosporine. These data suggest that IL-4 is involved in the mechanisms of liver allograft rejection in patients treated with cyclosporine.