中国人类免疫缺陷病毒-1 vpr基因多态性及其临床意义

目的 分析来自中国不同地区HIV-1感染者的vpr基因序列变异位点及与国外以往研究的异同,为进一步研究HIV-1 vpr基因变异的意义及其与感染者临床病情的关系奠定基础.方法 RT-PCR及套式PCR法对398例HIV-1感染者行HIV-1 vpr基凶扩增,并进行氨基酸序列分析,了解HIV vpr基冈的多念性、离散率和常见变异位点.同时将发现常见变异位点感染者的相应病毒水平、淋巴细胞亚群及临床病程的进展进行对比分析.结果 对398份血标本行HIV-1 vpr基因扩增,分析后可用氨基酸序列为153份.HIV-1 Vpr氨基酸序列分型主要足CRF01_AE 51,63%,C亚型24.84%,B亚型17.65%,CRF03_AB 3.92%,CRF08_BC 1.31%.HIV Vpr序列中第77位氨基酸84.3%为谷氨酸,与以往国外报道的R77Q变异与AIDS长期病情无进展(LTNP)璃彳切卡廿关的观点有明显差异.HIV Vpr第、63、70、85、86、89、94位氨基酸的变异,有可能使感染者的临床进展趋缓.结论 我围HIV Vpr分型仍以M组为主,其中 CRF01_AE占优势.HIV-1 Vpr中氨基酸序列某些位点的变异可能与感染者临床表现相关.     

广西地区人类免疫缺陷病毒-1流行毒株gag基因系统进化和基因变异特征分析北大核心CSCD

目的了解广西壮族自治区HIV-1流行毒株gag基因分子进化及遗传变异特征。方法收集2011年10月至2012年3月广西地区HIV-1感染者血液样本158份,采用反转录／套式PCR对HIV-1gag基因片段进行扩增并测序。运用MEGA5．03构建系统进化树,并计算gag区及各编码区段的基因离散率和选择压力（globleω）。两样本基因离散率的比较采用两独立样本t检验,多个样本的基因离散率比较采用单因素方差分析。结果158份样本中获得140条gag基因序列,存在4种亚型：CRF_01AE80份（57．1％）,CRF08BC46份（32．9％）,CRF07BC10份（7．1％）,B（B’）4份（2．9％）。gag基因离散率在CRF01AE亚型为0．036±0．001,CRF08BC亚型为0．031±0．002,CRF07-BC亚型为0．043±0．003,B（B’）亚型为0．102±0．006,差异有统计学意义（F=220．62,P〈0．01）。p17和p24编码区均受到负向选择压力作用,globlem〈1。各亚型p17编码区的globleω值相近,差异无统计学意义（F-0．761,P=0．469）,p24编码区的globlem值差异也无统计学意义（F=0．037,P=0．964）。结论广西地区HIV-1亚型以CRF_01AE为主,gag基因各编码区段在进化上相对保守,但HIV-1流行特征的变化可能会影响gag基因的遗传变异,应继续追踪检测。     

人类免疫缺陷病毒相关性肾病及其治疗

人类免疫缺陷病毒相关性肾病（human immunodeficiency virus-associatied nephrophath,HIVAN)是人类免疫缺陷病毒（humman immunodeficiency virus,HIV-1)感染导致的一种肾脏疾病,以蛋白尿、氮血症为主要病理改变,预后差,近年来,由于HIV的传播HIVAN的发病率也随之不断增加,已引起临床医师的高度重视,在过去几年中,人们对HIVAN的发病机制,临床过程和病理改变有了更新的认识,药理治疗也取得显著效果。本文将对HIVAN的现状及治疗进展进行综述。     

云南西部人类免疫缺陷病毒与弓形虫双重感染者一氧化氮水平的研究

目的了解人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）与弓形虫双重感染者的一氧化氮（nitric oxide,NO）水平及感染弓形虫与NO之间的关系。方法收集144例HIV阳性者血清,进行弓形虫抗体检测．于9个月后再次取血．前后两次取得的血清应用硝酸还原酶法测定其NO的水平：对HIV阳性者血清进行CD4＋细胞计数．根据CDg细胞计数水平将患者分为免疫功能正常组、免疫功能受损组和免疫功能严重受损组．检测三组患者的NO水平。用SPSS16．0软件对检测结果进行统计学分析。结果HIV与弓形虫双重者感染者的血清NO值为（82．77±5．82）μmol／L。HIV阳性无弓形虫感染者的NO值为（44．56±5．38）μmol／L,二者差异有统计学意义（P〈0．05）;第一次和第二次检测的HIV与弓形虫双重感染者NO水平分别为（81．37±8．22）μmol／L和（84．18±8．28）μmol／g．差异无统计学意义（P〉0．05）;第一次和第二次检测的HIV单一感染者NO值分别为（48．35±9．16）μmol／L和（40．78±5．67）μmol／L差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫功能正常组NO水平与免疫功能受损组、免疫功能严重受损组进行比较,差异均具有统计学意义（P〈0．05）;免疫功能受损组NO水平高于免疫功能严重受损组,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HIV与弓形虫双重感染者血清NO水平比HIV阳性单一阳性者高．随着HIV阳性者CD4＋细胞计数的下降．机体产生NO的能力也在减弱。     

人类免疫缺陷病毒耐药性的研究进展

人类免疫缺陷病毒（HIV）为艾滋病病原体,具有高度变异的特点。抗逆转录病毒药物在控制HIV进一步传播、延长患者寿命及提高生存质量方面有显著作用。目前,经过美国FDA批准的艾滋病抗病毒治疗药物共6大类32种,包括核苷类逆转录酶抑制剂（NRTI,8种）、非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTI,4种）、蛋白酶抑制剂（PI,9种）、融合抑制剂（FI,1种）、CCR5拮抗剂（1种）、整合酶抑制剂（II,1种）;     

抗人类免疫缺陷病毒-1治疗现状及研究进展

获得性免疫缺陷综合征 (ＡＩＤＳ)是由ＨＩＶ感染引起的一种严重的疾病 ,当人类免疫缺陷病毒 (ＨＩＶ)侵入人体后借细胞表面的ＣＤ4分子及某些趋化因子受体侵犯宿主细胞 ,造成机体免疫功能破坏 ,进而引起严重的机会性感染及肿瘤。现就该病治疗的中心环节———抗病毒治疗的临床应用现状及研究进展作一介绍。一、抗ＨＩＶ 1化学药物的临床应用现状抗ＨＩＶ 1的化学药物主要作用于病毒生活周期中不同环节所必需的酶类如逆转录酶及蛋白酶。目前用于临床的药物主要有 :1.核苷类逆转录酶抑制剂 (ＮＲＴＩ) ,包括齐多夫定 (ＡＺＴ)、扎西他滨 (ｄ…     

云南省红河州地区60例人类免疫缺陷病毒-1患者分子流行病学研究

目的 对云南省红河州地区部分HIV-1感染者进行分子流行病学调查,为确定该地区流行的HIV-1分子生物学特征提供监测依据.方法 应用反转录(RT)-PCR扩增HIV-1多聚酶基因,DNA测序后进行进化系统树分析,确定基因亚型,并与国际耐药数据库比对,辨别耐药性突变位点.结果 60例患者中,男39例,女21例,平均年龄35.5岁.静脉注射毒品感染34例,性传播感染12例,采供血和输血感染2例,感染途径不详12例.基因亚型分别为08-BC亚型53例,占88.3%;07-BC亚型6例,占10.0%;01-AE亚型1例,占1.7%.耐药相关基因总突变率为33.3%.与蛋白酶抑制剂(PRI)和反转录酶抑制剂(RTI)耐药相关的基因突变率分别为5.0%和31.7%;蛋白酶基因主突变位点为1541M、V82VFIL、M46MI,各占1例.反转录酶基因突变位点分别为T69D 4例,A62V 6例,D67DE 1例,E44D 1例,V179D 2例,V179E 1例,K238KN 1例,L234T+P236S 1例,V106E 1例.结论 云南省红河州地区HIV-1感染以静脉注射毒品为主.HIV-1基因亚型以08-BC亚型为主;已存在与PRI和RTI耐药相关的基因突变.     

人类免疫缺陷病毒1型相关痴呆的临床研究现状

人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)1型(HIV-1)相关痴呆或HIV相关痴呆(HIV associated dementia,HAD),也称获得性免疫缺陷综合征(AIDS)痴呆复     

人类免疫缺陷病毒阳性冠心病患者的临床特点分析

目的 探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)阳性冠心病患者的临床特点.方法 回顾性分析2015—2018年于广州市第八人民医院行冠状动脉造影确诊的21例HIV阳性冠心病患者的临床资料和冠状动脉造影结果,同期收治的159例HIV阴性的冠心病患者作为对照.结果 HIV阳性冠心病组和HIV阴性冠心病组的冠心病危险因素数目相似,除阴性...     

上海市新诊断114例人类免疫缺陷病毒Ⅰ型感染者的分子生物学研究

目的对上海市2004至2005年新诊断的114例人类免疫缺陷病毒Ⅰ型（H1V-1）感染者进行分子流行病学调查，为确定上海市流行的HIV-1的分子生物学特征提供监测依据。方法应用逆转录聚合酶链反应扩增HIV-1多聚酶基因，DNA测序后进行进化系统树分析确定基因亚型并与国际耐药数据库比对辨别耐药性突变位点。结果1．114例中除1例不详外，本市户口33例，占28．95％，外来人口80例，占70．18％；经性传播感染51例，占44．74％，经静脉注射吸毒感染43例，占37．72％，经采供血和输血感染3例，占2．63％，感染途径不详17例，占14．91％；2．基因亚型分别为B亚型9例，占7．89％，B’亚型15例，占13．16％，C亚型1例，占0．88％，G亚型1例，占0．88％，CRF01_AE38例，占33．33％，CRF07_BC46例，占40．35％和CRF08BC4例，占3．51％；3．耐药分析结果表明本次研究人群的耐药性主突变率为18．42％。与蛋白酶抑制剂（PRIs）和逆转录酶抑制剂（RTIs）耐药相关的基因主突变率分别为2．63％（3／114）和17．54％（20／114）。蛋白酶基因主突变位点突变频率为M46I，占66．67％，M46L，占33．33％。逆转录酶基因主突变位点突变频率分别为M41L，占7．69％、A62V，占7．69％、T69S，占7．69％、V75I／L，占15．38％、K103R，占25．00％、V118I,占23．08％、V179D／E／T，占33．33％、G190R，占8．33％、L210K／M／X，占38．46％、F227L／I，占16．67％、M230R，占8．33％和P236R，占8．33％。结论上海市新诊断的HIV-1感染者依然以静脉吸毒和性传播为主，感染者以外省市流动人口为主。HIV-1基因亚型流行呈多样性，主要以CRF01_AE、CRF07_BC和B／B’为主。在114例新诊断、尚未经抗病毒治疗的HIV-1感染者中，已存在与PRIs和RTIs耐药相关的基因主突变。     

获得性免疫缺陷综合征患儿抗病毒治疗后耐药基因变异分析

目的 观察接受联合抗病毒治疗获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患儿人类免疫缺陷病毒(HIV)的蛋白酶、逆转录酶及蛋白酶切割位点的耐药基因变异。方法 利用套式逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)从7例接受蛋白酶和逆转录酶抑制剂抗病毒治疗的AIDS患儿的血浆中扩增HIV的蛋白酶、逆转录酶、gag和部分pol基因，直接将PCR产物进行核苷酸序列测定或克隆后测序，分析测序结果，确定耐药基因变异。结果 有6例患者发生了多位点蛋白酶和逆转录酶耐药基因变异，其中2例患者在发生多位点蛋白酶和逆转录酶耐药基因变异的基础上出现了gag蛋白酶切割位点的耐药基因变异。结论 大部分长时间(33～106个月)接受蛋白酶和逆转录酶抑制剂联合抗病毒治疗的AIDS患儿体内HIV发生了蛋白酶和逆转录酶耐药基因变异，其中只有少数患儿的HIV发生了gag蛋白酶切割位点的耐药基因变异。     

深圳地区艾滋病患者HIV-1毒株膜蛋白V3环的氨基酸变异分析

目的了解深圳地区艾滋病患者体内不同HIV-1亚型膜蛋白V3环的氨基酸序列特征及变异特点.方法采用逆转录套式聚合酶链反应（RT-nested-PCR）对艾滋病患者血浆HIV RNA进行扩增,对扩增产物直接测序并进行序列对比、翻译和分析.结果深圳地区艾滋病患者感染HIV病毒分属B与CRF01-AE亚型,病毒V3顶端的四肽特征主要为：GPGQ 48%、GPGR 36%、其他形式16%;其中AE亚型GPGQ百分比为76.9%,B亚型GPGR百分比为75%;还发现DQDR、DQGQ等少见V3环顶端四肽组成形式.V3环发生与SI表型有关的氨基酸突变形式高达80%.结论深圳地区艾滋病患者感染病毒V3环顶端四肽主要为GPGQ与GPGR,V3环序列高度变异,出现一些少见的V3环顶端四肽组成形式值得进一步研究.     

在重组痘苗病毒中共表达HIV一1 env与hIL一6基因

本实验以ＨＩＶ－１ｅｎｖ与ｈＩＬ－６基因在重组痘苗病毒中的共表达研究为目的,将痘苗病毒复制非必需区血凝素（ＨＡ）基因作为侧翼,把编码人白细胞介素６的基因片段克隆真核表达质粒ｐＪ３８ｅｎｖ的下游,构建成含有ＨＩＶ－１ｅｎｖ与ｈＩＬ－６两种外源基因因的重组表达质粒ＰＪ３８Ｅ－ＩＬ６,经同源重组和血凝素阴性空斑筛选,获得了重组痘苗病毒ｖＪ３８Ｅ－ＩＬ６、经间接免疫荧光试验,Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅ     

1例早期HIV感染者体内病毒准种的各基因片段分析

目的比较1例早期艾滋病病毒（HIV）感染者体内病毒不同基因片段准种复杂度。方法使用套式聚合酶链反应（Nested-PCR）,扩增HIV感染者外周血淋巴细胞中病毒的gag、pol、vif-vpr和env区的部分基因,通过克隆、测序方法观察该感染者体内病毒准种分布情况,比较不同基因片段检测病毒准种的可靠性。结果不同基因片段检测病毒准种结果显示,该早期感染者体内的病毒不同基因片段显示的准种基因离散率不同,其中gag区显示出的病毒准种复杂度最高,反映为该区段病毒准种的基因离散率最高,为0．008;其他各区基因（pol、vif-vpr、env）的离散率依次为0．006、0．001、0．000。结论该HIV感染者体内病毒准种的基因中,gag区基因的突变率较高,提示Gag在机体感染HIV早期承受的免疫压力较高,因此在病毒准种研究中,gag区应该作为重要的基因区域。     

出入境人群HIVenv基因部分序列特征和亚型研究

目的 对出入境人员中的艾滋病病毒(HIV)感染者进行病毒基因型测定，监测国内外流行的HIV毒株的状况及其变化。方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)或直接套式PCR方法扩增HIVenv基因C2-V3区及其邻近的基因片段，然后直接进行核苷酸序列测定，与国际标准亚型序列比较，确定基因型并进行系统分析。结果 2003年确认的19例HIV阳性样品中，15例扩增出目的基因片段并进行了序列测定，确定为B亚型4例，B’亚型2例，D亚型2例，CRF01-AE重组亚型1例，CRF02-AG重组亚型6例。这些不同亚型的HIV-1感染者来自包括中国在内的6个国家。HIV-1基因型的分布与我国国内有很大不同。结论 出入境人群中HIV-1基因型种类多且复杂，监测出入境人群HIV基因型及其变化对于发现和鉴定新型变异毒株十分重要。     

低水平病毒载量长期不进展人类免疫缺陷病毒-1感染者的人类免疫缺陷病毒-1的遗传分析

目的 分析低水平病毒载量长期不进展(LTNP)HIV-1感染者HIV-1的遗传特征.方法 采用有限稀释套式PCR、终点PCR和序列确证分析等技术对5例低病毒载量LTNP HIV-1感染者不同随访时间点HIV-1前病毒enw基因c2-v3-c3区域和gag基因p17区域进行扩增和序列分析.分别计算不同时间点内以及不同时间点与用于分析的最早时间点之间上述两个基因区域的基因多样性和基因离散率,依据基因离散率计算基因的进化率,统计学分析用GraphPad Prism 5软件.结果 5例患者在21个随访时间点共获得115条c2-v3-c3序列和173条p17序列.进化树分析表明,不同患者的序列分开,同一患者的序列特异地聚集,序列质量可靠.5例患者env基因c2-v3-c3区域不同时间点基因多样性为0～6.38%,平均为2.1%,病例1、3和5基因多样性随感染时间的增加逐渐升高(r=0.7257、0.4954、0.3288),病例2和4基因多样性随感染时间的增加逐渐下降(r=-0.3759、-0.5028);基因离散率为0.1%～6.5%,平均为2.9%,除病例1外,基因离散率均随感染时间间隔的增加逐渐升高,进化率分别为每年每位点-0.13%、0.81%、0.09%、0.14%和0.16%,平均为0.21%.gag基因p17区域基因多样性为0～2.5%,平均为1.2%,基因离散率为0.2%～2.7%,平均为1.4%,除病例3基因多样性和基因离散率随感染时间或时间间隔的增加下降外,其余病例均随感染时间或时间间隔的增加而逐渐升高,进化率分别为每年每位点0.087%、0.064%、-0.014%、0.081%和0.087%,平均为0.061%.结论 低水平病毒载量LTNP HIV-1感染者HIV-1有复制能力,病毒基因维持较低水平的进化;HIV-1 env基因变化的程度大于gag基因.     

湖北地区人类免疫缺陷病毒-1主要流行株外膜蛋白基因V3-V4区序列变异分析

目的 分析湖北地区HIV-1主要流行株外膜蛋白V3-V4区序列特征,了解其流行特点和变异规律.方法 对湖北地区HIV-1主要流行区域进行流行病学调查,应用套式PCR对102例HIv-1感染者的env基因V3-V4区进行扩增,对阳性扩增样本进行基因测序和序列分析.比较基因距离的差异用卡方检验;基因距离的变异性分析使用描述性分析法.结果 湖北地区共发现4种HIV亚型和重组亚型,其中B'亚型占82.69%,B'/C重组毒株、CRF01_AE重组毒株各占7.69%,C亚型占1.92%.湖北地区HIV-1B'亚型与来源于云南和河南等地的HIV-1B'亚型代表株之间的基因距离分别为7.08±2.19和7.88±2.28.其流行时间约为10年;氨基酸序列变异分析显示,HIV-1B'亚型毒株env基因V3、C3、V4区域均发生不同程度变异,其中以V4区的变异程度最大,V3环顶端四肽表现为GPGR、GPGK、GPGQ和GQGR,分别占46.5%、30.2%、13.6%和9.3%;V3环辅助受体预测显示,其中16.28%为CCR5型,13.95%为CXCR4型,69.77%无法预测;糖基化位点分析显示.湖北地区HIV-1主要流行株env V3-V4区9个糖基化位点有8个存在不同程度丢失.结论 B'亚型仍是湖北地区HIV优势流行株,与来源于云南和河南等地的毒株有较高同源性.     

中国艾滋病病毒1型流行毒株V3环序列变异性的研究

目的 研究中国艾滋病病毒1型(HIV-1)毒株V3环序列的变异性。方法 对中国1996～2000年491例HIV-1感染者env基因C2-V3区经聚合酶链反应(PCR)扩增并测序,测得的序列经DNA软件编辑后,用Wisconsin公司GCG软件包进行分析。结果 从核酸序列可以看出,V3环的核苷酸存在着点突变和基因的漂移。各亚型流行株V3顶端的四肽特征主要为:GPGQ 72.6％,GPGR 13％,GPGK 7.6％,其它形式6.7％。在V3环氨基酸序列11、25位点未同时出现带正电荷的氨基酸。基因离散率的分析表明呈现逐年递增趋势。结论 中国V3环顶端四肽序列主要为GPGQ,从1990的10％、1993年的29％上升到2000年的72.6％。而GPGR则从1990年的80％、1993年的57％下降到2000年的13％。更加证明了在中国存在着HIV-1毒株V3区顶端四肽由GPGR向GPGQ漂移的现象。从V3环序列的高度变异性分析表明中国正处于HIV快速流行期。