D-甲硫氨酸对庆大霉素耳毒性保护作用的研究

目的探讨D-甲硫氨酸对庆大霉素耳毒性的保护作用.方法30只豚鼠分为生理盐水对照组、庆大霉素组及D-甲硫氨酸加庆大霉素联合用药组.采用听觉脑干诱发电位(ABR)及耳蜗铺片技术,观察研究耳毒性及D-甲硫氨酸的保护作用.结果联合用药组动物各频率阈移均比单独使用庆大霉素组显著降低,且耳蜗组织学检查显示其毛细胞缺失明显轻于庆大霉素组.结论使用庆大霉素的同时联合应用D-甲硫氨酸可有效减少庆大霉素的耳毒性.     

葛根素注射液抗庆大霉素耳蜗毒性的实验研究

庆大霉素是一种耳毒性药物,能够导致感音神经性聋。耳毒性药物中毒性聋与氧自由基增多密切相关,且氧自由基参与了耳蜗组织损伤及耳蜗细胞凋亡的过程。豆科植物葛根中分离出的葛根素是异黄酮类有效成分,其可直接清除氧自由基。用药物有效拮抗庆大霉素的耳毒性越来越为人们所重视。因此,用庆大霉素制作耳毒性动物模型,来探讨葛根素注射液对庆大霉素引起的耳蜗毒性的防护作用。     

来比林对抗庆大霉素耳毒性的实验

目的 :观察来比林对抗庆大霉素耳毒性的作用 .方法 :将豚鼠随机分为庆大霉素 (gentamicin ,GM )组、来比林组 (lysisinaspirin ,LAP)、GM +LAP组及对照组 ,采用听性脑干反应 (ABR)、耳蜗铺片及透射电镜技术、观察用药前后听阈及耳蜗毛细胞形态学改变 ,并检测血清尿素氮、肌苷以及庆大霉素血药浓度 .结果 :GM组 8kHzABR 4wk平均阈移达 5 0dB ,GM +LAP组平均阈移为 30dB ,差异显著 (P <0 .0 5 ) .形态学改变与听力变化一致 .GM +LAP组血液中丙二醛较GM组明显减少 (P <0 .0 5 ) .GM +LAP组超氧化物歧化酶活性明显高于GM组 (P <0 .0 5 ) .LAP对庆大霉素血药浓度没有影响 .结论 :LAP能有效减轻GM的耳毒性作用 ,水杨酸盐连接有其他基团并不影响拮抗耳毒性的作用 .并且更加安全 ,有效 ,方便临床使用     

脑活素对豚鼠庆大霉素耳毒性保护作用的研究

目的：旨在观察脑活性能否拮抗庆大霉素素蜗毒性。方法：取听力正常豚鼠50只，随机分为脑活素组10只[肌注脑活素360mg/(kg.d),10ds]；大庆霉素组15只[肌注庆大霉素120mg/(kg.d)10d]；庆大霉素＋脑活素组15只（肌注等量庆大霉素＋脑活素10d)；生理盐水组10只（肌注等量生理盐水10d)。用药前及用药10d并饲养一周测试听性脑干反应（ABR），第17d处死，行左耳耳蜗铺片、右耳石蜡包埋切片，并在光镜下观察内耳病理形态变化，对损失毛细胞进行计数。结果：庆大霉素＋脑活素组ABR阈值明显低于庆大霉素组，耳蜗各回毛细胞平均失率明显低于庆大霉素组。结论：脑活素对庆大霉素所致毒性有明显保护作用。     

丹参注射液拮抗庆大霉素耳蜗毒性的实验研究

目的：探讨丹参注射液对庆大霉素（GM）耳蜗毒性的防护作用。方法：选择白色豚鼠40只，随机分成4组（n=10）：正常对照组、GM组、GM＋丹参组和丹参组。GM组腹腔注射硫酸庆大霉素100mg/kg/d，丹参组腹腔注射丹参注射液6g/kg/d，GM＋丹参组同时注射硫酸庆大霉素和丹参注射液，正常对照组注射等量生理盐水，连续用药10d后观察耳蜗的功能与形态。结果：GM＋丹参组豚鼠听功能受损明显轻于GM组，听脑干反应ABR阈值两组比较有显著性差异（P＜0．01），且形态学改变与听阈变化相一致。结论：丹参注射液可有效拮抗GM对豚鼠的耳蜗毒性，这种拮抗作用可能是通过对耳蜗血管纹边缘细胞和毛细胞内线体的保护来实现的。     

银杏叶提取物对庆大霉素耳毒性保护作用的实验研究

目的:研究银杏叶提取物(Egb)对庆大霉素(GM)所致耳毒性的拮抗作用,探讨庆大霉素耳毒性作用机制。方法:健康豚鼠15只,随机分为3组,I组为生理盐水组;II组为庆大霉素(GM)组,造成损伤模型;III组为银杏叶提取物(Egb)和庆大霉素(Egb GM)组,观测3组豚鼠不同时期畸变产物耳声发射(DPOAE)的改变,TUNEL法检测3组豚鼠毛细胞凋亡。结果:Egb可以减轻耳蜗外毛细胞的损伤率(P<0.05),较少凋亡,降低庆大霉素所致的耳毒性。结论:Egh对庆大霉素所致的耳毒性具有拮抗作用。     

木樨草素拮抗庆大霉素耳毒性实验观察

目的：初步了解木樨草素对庆大霉素耳毒性的影响。方法：设庆大霉素组与庆大霉素加不同剂量木樨草素（10mg、20mg）两组，并进行组问比较，观察听性脑干反应（ABR）阈值、眼震电图（ENG）的频率，了解其听功能及前庭功能的变化。结合耳蜗基底膜铺片琥珀酸脱氢酶（SDH）染色方法观察耳蜗形态学变化。结果：听功能检查结果显示．庆大霉素加不同剂量木樨草素组的ABR阈值明显低于庆大霉素组，经统计学处理，差异有显著性。形态学检查结果与听功能检查结果一致。前庭功能检查结果亦发现木樨草素对庆大霉素引起的前庭功能变化有拮抗作用。结论：本实验发现木樨草素对庆大霉素引起的耳蜗和前庭损伤有拮抗作用。     

葡萄糖酸钙防治庆大霉素耳蜗中毒的实验研究

用原子吸收光谱计测定使用钙剂（葡萄糖酸钙）后豚鼠血清和外淋巴中的钙离子浓度。然后用耳蜗铺片的方法对耳蜗动作电位和血清、外淋巴中的钙离子浓度进行观察比较。结果显示：静脉注射钙剂后外淋巴中的钙离子浓度随着血清中的钙离子浓度升高而升高，并能维持８ｈ左右。研究结果表明钙剂有保护耳蜗免受庆大霉素耳毒性的作用。作者认为钙剂对庆大霉素耳蜗毒性的防治作用机理如下：在细胞膜上的钙离子是以蛋白质磷酸肌醇脂相结合的状态存在的，属于磷脂之一。大部分磷脂是两性离子，在生理ＰＨ情况下呈阴离子性，并能分布在细胞膜上带负电，有…     

金匮肾气丸对庆大霉素肾和耳损害保护作用组织病理学研究

目的：观察金匮肾气丸对庆大霉素所致豚鼠肾和耳损害的影响。方法：应用血浆尿素氮、血浆肌苷、脑干诱发电位、肾脏组织病理和耳蜗铺片观察金匮肾气丸对庆大霉素所致豚鼠肾和耳损害的影响。结果：金匮肾气丸不仅可以保护听功能和减轻耳蜗听毛细胞损害作用，而且还可以保护肾功能和减轻肾脏肾小管细胞损害作用。结论：金匮肾气丸可能是通过减轻庆大霉素肾毒作用，达到降低耳毒作用的     

盐酸椒苯酮胺通过降低caspase-3表达减轻庆大霉素豚鼠耳蜗损伤

目的研究盐酸椒苯酮胺（PPTA）对庆大霉素耳蜗损伤的保护作用及抗凋亡机制。方法听力正常豚鼠分3组：正常组、GM
组和PPTA组。采用庆大霉素致豚鼠耳蜗损伤模型,PPTA腹腔注射,ABR 分析听力变化,Western blot 检测耳蜗组织中
caspase-3蛋白表达,TUNEL染色、扫描电镜和透射电镜观察形态学改变。结果ABR反应阈：GM组、PPTA组显著高于正常对
照组（P<0.05）,PPTA组显著低于GM组;Western blot测caspase-3的表达：结果表明用药后GM组豚鼠caspase-3表达显著增加
（P<0.001）,PPTA组显著高于正常组但显著低于GM组（P<0.001）;TUNEL、扫描和透射电镜观察见：GM组毛细胞损伤严重,耳
蜗螺旋器、血管纹和螺旋神经节存在大量凋亡细胞形态;而PPTA组耳蜗组织损伤较GM组明显减轻。结论PPTA可以通过降
低caspase-3蛋白表达抑制凋亡,对庆大霉素豚鼠耳蜗损伤起到保护作用。
     

木樨草素拮抗庆大霉素耳毒性实验观察

目的:初步了解木樨草素对庆大霉素耳毒性的影响。方法:设庆大霉素组与庆大霉素加不同剂量木樨草素(10mg、20 mg)两组,并进行组间比较,观察听性脑干反应(ABR)阈值、眼震电图(ENG)的频率,了解其听功能及前庭功能的变化。结合耳蜗基底膜铺片琥珀酸脱氢酶(SDH)染色方法观察耳蜗形态学变化。结果:听功能检查结果显示,庆大霉素加不同剂量木樨草素组的ABR阈值明显低于庆大霉素组,经统计学处理,差异有显著性。形态学检查结果与听功能检查结果一致。前庭功能检查结果亦发现木樨草素对庆大霉素引起的前庭功能变化有拮抗作用。结论:本实验发现木樨草素对庆大霉素引起的耳蜗和前庭损伤有拮抗作用。     

前庭诱发电位监测庆大霉素前庭毒性

目的 利用听学脑干诱发电位（ＡＢＲ）和前庭诱发电位（ＶｓＥＰｓ）监测庆大霉素耳毒性。方法 将４０只杂色豚鼠随机分成４组,每组１０只。４组动物分别为肌肉注射庆大霉素组、肌肉注射生理盐水对照组、连续鼓室内滴注庆大霉素组和鼓室内滴注生理盐水对照组。用药前后连续监测ＡＢＲ及ＶｓＥＰｓ,待其有明显变化时,将动物全麻处死取听泡,火棉胶包埋切片,光镜观察病理变化。结果 肌注组１０只动物在２１ｄ时,ＶｓＥＰｓ消失     

水杨酸钠对庆大霉素耳毒性拮抗作用的机制研究

目的：探讨水杨酸钠（sodium salicylate,NaSA）对庆大酶素（gentamicin,GM）耳毒性作用的影响及其机制。方法：豚鼠随机分为对照组、GM组、NaSA组和GM＋NaSA组,每组9只。采用听性脑干反应（acoustic brainstem response,ABR）、耳蜗铺片及透射电镜技术,观察用药前后听反应阈及形态变化,检测血清尿素氮、肌苷以及GM浓度,同时测定组8kHzABR平均阈移达55dB,GM NaSA组平均阈移为23dB,差异显（P＜0．05）。形态学改变与听力变化一致。GM＋NaSA组耳蜗组织丙二醛和秩离子较GM组明显减少（P＜0．05）,GM＋NaSA组和GM组超氧化物岐化酶活性明显高于另两组（P＜0．05）,GM＋NaSA组和NaSA组前列环素水平显低于另两组（P＜0．05）。NaSA对GM血药浓度没有影响。结论：自由基和铁离子在GM的耳毒性中起重要作用,NaSA能有效减轻GM耳毒性,有望成为临床庆大霉素耳毒性的预防药物。     

腺伴随病毒携带神经营养因子-3对庆大霉素致聋豚鼠耳蜗的保护作用

目的 探讨采用腺伴随病毒(AAV)携带神经营养因子-3(NT-3)对庆大霉素(GM)致聋豚鼠的局部基因治疗及其对耳蜗功能及形态的保护作用.方法 选用18只杂色健康豚鼠,用GM按80 mg/kg·d连续肌肉注射4 d后随机分为3组:AAV-NT-3治疗组(A组)7只,AAV对照组(B组)7只,GM对照组(C组)4只.A、B组动物在埋植微量渗透泵后继续肌肉注射GM 10 d,C组动物继续注射GM 10 d.AAV-NT-3及空白AAV载体滴度均为1.1×1010pfu/ml.对A、B两组注射GM前及术后10 d、C组注射GM后14 d进行听性脑干反应测听(ABR)及畸变产物耳声发射(DPOAE)测定.而后将动物麻醉处死取听泡,行基底膜铺片和毛细胞计数,计算外毛细胞损失率.结果 实验组与对照组相比听功能(ABR及DPOAE)及耳蜗毛细胞生存率均有显著性差异(P＜0.05).结论 腺伴随病毒介导NT-3转基因治疗可用于保护受氨基甙类药物损害的豚鼠听功能和耳蜗毛细胞;在行局部耳蜗转基因治疗中应严格遵循无菌原则.     

Aminoglycoside ototoxicity in three murine strains and effects on NKCC1 of stria vascularis

Background After establishing a murine model of aminoglycoside antibiotic （AmAn） induced ototoxicity, the sensitivity of AmAn induced ototoxicity in three murine strains and the effect of kanamycin on the expression of Na-K-2Cl cotransporter-1 （NKCC1） in stria vascularis were investigated. Methods C57BL/6J, CBA/CaJ, NKCC1^＋/- mice （24 of each strain） were randomly divided into four experimental groups： A： kanamycin alone; B： kanamycin plus 2,3-dihydroxybenzoate; C： 2,3-dihydroxybenzoate alone; and D： control group. Mice were injected with kanamycin or/and 2,3-dihydroxybenzoate twice daily for 14 days. Auditory brainstem response （ABR） was measured and morphology of cochlea delineated with succinate dehydrogenase staining. Expression of NKCC1 in stria vascularis was detected immunohistochemically. Results All three strains in groups A and B developed significant ABR threshold shifts （P〈0.01）, which were accompanied by outer hair cell loss. NKCC 1 expression in stria vascularis was the weakest in group A （A cf D, P〈0.01） and the strongest in groups C and D （P〈0.05）. CBA/CaJ mice had the highest sensitivity to AmAn. Conclusions Administration of kanamycin established AmAn induced ototoxicity. Kanamycin inhibited the expression of NKCC1 in stria vascularis. 2, 3-dihydroxybenzoate attenuated AmAn induced ototoxicity-possibly by enhancing the expression of NKCC 1. Age related hearing loss did not show additional sensitivity to AmAn induced ototoxicity in murine model.     

碱性成纤维细胞生长因子/绿色荧光蛋白基因对药物性耳蜗损害的防治作用

目的　探讨阳离子脂质体 (天然碱性脂SA)携带碱性成纤维细胞生长因子 /绿色荧光蛋白 (bFGF/GFP)基因在豚鼠耳蜗中的表达 ,以及对庆大霉素所致耳蜗损害的防治作用。方法　将 36只豚鼠分为 3组 ,预防组右耳圆窗注入SA bFGF/GFP复合物后次日肌肉注射庆大霉素 15 0mg·kg-1·d-18天 ,治疗组先用庆大霉素 8d后次日右耳给药 ,对照组单用庆大霉素 8d。分别于实验前后及处死前行听觉脑干诱发电位 (ABR)测试。荧光显微镜下观察耳蜗GFP的表达 ;用耳蜗琥珀酸脱氢酶染色铺片 ,扫描电镜观察毛细胞的缺失情况。结果　荧光显微镜下见双侧耳蜗均有GFP表达。预防和治疗组处死前的双耳ABR阈值与对照组比较差异有显著意义 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,耳蜗内外毛细胞缺失数与对照组比较差异有显著意义 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。结论　SA脂质体介导的bFGF/GFP基因单耳给药双侧耳蜗均有高效表达 ,并对庆大霉素所致的耳蜗损害有防治作用。     

丹参干预Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎大鼠血清D-二聚体的变化

目的观察丹参对Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎（CIA）大鼠血清D二聚体（D-D）的影响，探讨丹参干预类风湿性关节炎易栓状态的实验研究。方法将48只SD大鼠随机分为5个实验组，皮下注射Ⅱ型胶原诱导类风湿性关节炎大鼠模型，应用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测各组大鼠血清D-D水平。结果所有实验组D-D水平均高于空白组（P〈0．01）。模型组的D-D水平高于丹参组：MTX组和丹参＋MTX组；丹参组D—D水平高于MTX组及丹参＋MTX组；MTX组D-D水平高于丹参＋MTX组（P〈0．05）。结论联合使用丹参和MTX治疗的明显效果有利于改善类风湿性关节炎的易栓状态。     

庆大霉素给药方案与其毒性关系的病理学研究

本文应用光镜及扫描电子显微镜对庆大霉素给药方案与其耳、肾毒性关系进行研究,显示庆大霉素所致耳蜗病变具有一定的特点及规律,其程度主要取决于用药剂量的大小,在剂量相同条件下与给药方案无关。其肾脏损害在剂量一定条件下,1日分次给药较1日1次给药程度明显加重,即血中长时期维持一定的药物浓度较1次高峰浓度的肾毒性更为明显。