高效液相色谱荧光法测定人血浆中顺式阿曲库铵浓度

目的 建立测定人血浆中顺式阿曲库铵质量浓度的高效液相色谱荧光法.方法 采用乙腈沉淀蛋白进行血样处理,色谱柱为Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为0.04 mol/L磷酸二氢钾(pH 3.0)-乙腈(60:40),流速为0.5 mL/min,荧光激发波长为230 nm,发射波长为324 nm.结果 顺式阿曲库铵进样质量浓度在10.0～2 500 ng/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 0.n=7),检测限和定量限分剐为2.5 ng/mL和10 ng/mL,日内RSD小于3.6%,日间RSD小于4.0%,提取回收率为88.91%～91.09%,方法回收率为97.95%～98.70%.结论 该方法简便、灵敏、准确、重现性好,适用于人体内顺式阿曲库铵药物代射动力学的研究.     

顺式阿曲库铵肌松效应的临床观察

目的:观察新型非去极化肌松药顺式阿曲库铵的肌松效应与临床特点.方法:ASA Ⅰ～Ⅱ级择期手术患者57例,随机分为3组,每组19例,分别用3种给药方法:A组顺式阿曲库铵0.1 mg/kg;B组0.2 mg/kg;C组加用激活剂量,即先静脉滴注顺式阿曲库铵0.01mg/kg,5 min后追加顺式阿曲库铵0.1 mg/kg.观察药物起效时间,作用时间,代谢恢复时间的差异.结果:顺式阿曲库铵的肌松起效时间以及作用时间随剂量增加而分别缩短及延长,在相同诱导剂量下加用激活剂量可缩短起效时间,肌松恢复不随给药剂量及方式影响.结论:顺式阿曲库铵具有良好的麻醉操作可控性,肌松残余作用小,安全范围广.临床上可根据患者条件和手术需要,通过调整剂量调控其起效时间和作用时间,从而满足不同手术麻醉的需求.     

七氟醚对顺式阿曲库铵肌松效应影响的性别差异

目的 研究七氟醚对顺式阿曲库铵肌松效应影响的性别差异.方法 30例择期行腹腔镜手术患者,ASA Ⅰ级或Ⅱ级,分为男性组(M组,n=15)和女性组(F组,n=15).所有患者插管后均靶控输注3μg/L瑞芬太尼(血浆靶控浓度)和吸入七氟醚维持麻醉,当呼气末浓度稳定为1.3 MAC后继续维持40min,静脉注射总量为45μg/kg的顺式阿曲库铵,用TOF GUARD(丹麦)加速度仪进行肌松监测.顺式阿曲库铵45μg/kg分为3等份分次静注,记录每次注药(15μg/kg)后的起效时间及最大阻滞效应.在最后一次注药后记录:T1恢复到25%、50%、75%的时间(T125%、T150%、T175%);TOF比值(T4/T1)恢复到70%的时间(TOFR 0.7)以及恢复指数(RI).结果 1.3 MAC七氟醚麻醉下顺式阿曲库铵女性患者ED50和ED95分别为22.2(15.8～27.2)和38.4(32.1～54.4)μg/kg;男性患者分别为25.6(19.7～30.8)和42.8(36.3～58.2)μg/kg,两组差异无统计学意义(P＞0.05);两组之间顺式阿曲库铵恢复至T175%和RI差异无统计学意义(P＞0.05);F组顺式阿曲库铵的起效时间较M组快,恢复至T125%、T150%和TOFR 0.7较M组明显延长(P＜0.05).结论 1.3 MAC七氟醚对顺式阿曲库铵ED5o和ED95的影响无性别差异,但女性患者起效较快,其对顺式阿曲库铵恢复至T125%、T150%及TOFR 0.7所需时间长于男性.     

顺式阿曲库铵肌松作用的临床观察

顺式阿曲库铵是中时效非去极化肌松药,是阿曲库铵的10种同分异构体之一,为顺式旋光异构体,具有与阿曲库铵类似的肌松效应及代谢方式。     

顺式阿曲库铵三种输注方式用于肾移植手术麻醉的效果比较

目的比较静脉间断推注、持续输注、靶控输注顺式阿曲库铵在肾移植麻醉中应用效果,选出适合的方式。方法拟行肾移植手术的患者45例,年龄30~65岁,美国标准协会(american standard assciation,ASA)Ⅱ或Ⅲ级,随机分为间断推注组(A组)、持续输注组(B组),靶控输注组(C组),每组15例。采用全凭静脉全身麻醉。用TOF-Watch肌松监测仪以间隔12 s连续监测4个成串刺激尺神经后拇内收肌的收缩反应。麻醉诱导后,A组及B组静脉注射顺式阿曲库铵0.3 mg/kg,C组采用TCI-I泵靶控输注顺式阿曲库铵,靶浓度为2.0μg/ml,待TOF中T1最低时气管插管。A组45 min间断追加顺式阿曲库铵0.1~0.3 mg/kg,B组则持续输注顺式阿曲库铵1~3μg/kg·min,C组则随时调整顺式阿曲库铵靶控输注浓度,使术中肌松维持T1<10%。三组患者预计手术结束前30 min停用顺式阿曲库铵。记录顺式阿曲库铵起效时间,气管插管评级,恢复指数,TOFr 0.9时间,停药至拔除气管导管时间,丙泊酚、瑞芬太尼、顺式阿曲库铵总用量以及药物相关的不良反应。结果与A组比较,B组及C组恢复指数下降,TOFr恢复至0.9时间短,顺式阿曲库铵用量减少,差异有统计学意义(P<0.05),C组在气管插管条件较好,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C组在气管插管优评分,TOFr恢复至0.9时间,顺式阿曲库铵用量方面差异有统计学意义(P<0.05)。三组患者均无药物相关不良反应。结论靶控输注顺式阿曲库铵比较适合肾移植麻醉。     

顺式阿曲库铵不同给药方式对老年全凭静脉麻醉肌松作用的疗效比较

顺式阿曲库铵作为阿曲库铵的同分异构体的一种,其肌松的效果是阿曲库铵的3倍以上,但是,同等剂量下,阿曲库铵的起效时间要稍短些.麻醉过程中肌松药的给药方式分为两种,间断静脉注射给药或者持续静脉注射给药.间断静脉注射给药有一定不足,血药浓度波动性大,肌松程度不易控制掌握,如果手术时间较长需要反复给药等.持续静脉注射给药方式血药浓度相对较恒定,更容易控制,而在老年患者中研究相对较少.本研究通过观察不同给药方式条件下顺式阿曲库铵对老年全静脉麻醉肌松作用的作用效果,发现预给激活剂量的顺式阿曲库铵可明显缩短老年全静脉麻醉诱导插管患者的起效时间,后期采用持续静脉输注顺式阿曲库铵方式患者肌松效果更好,挺好后肌松恢复情况更佳更快.     

低温体外循环对顺式阿曲库胺和罗库溴胺用药量的影响

目的 观察低温心肺转流(CPB)对顺式阿曲库胺和罗库溴胺用药量的影响.方法 择期心脏瓣膜置换手术32例随机分为顺式阿曲库铵(C组)和罗库溴铵(R组)两组,每组16例.全程肌松监测.全凭静脉麻醉.C组以0.1 mg/kg顺式阿曲库铵,R组以0.6 mg/kg罗库溴铵静脉推注插管,然后持续泵注,适时调整输注速率,维持T1/T0为15%.常规实施CPB,维持血温32℃,记录并计算两组肌松药平均输注速率.结果 C组顺式阿曲库胺CPB中平均输注速率显著低于CPB前[(0.73±0.24)μg·kg-1·min-1vs.(1.11±0.25)μg·kg-1·min-1](P<0.05);R组罗库溴铵CPB前、中的输注速率相仿[(3.99±0.90)μg.kg-1·min-1 vs.(4.31±0.71)μg·kg-1·min-1](P>0.05).结论 32℃低温行CPB时,维持相同肌松水平的顺式阿曲库胺需求量明显减少;但罗库溴铵用量未受到低温的明显影响.     

离子对高效液相色谱荧光法测定人血浆中顺式阿曲库铵的浓度

目的:建立反相离子对高效液相色谱荧光法测定人血浆中顺式阿曲库铵浓度。方法:酸化的血浆样品采用乙腈沉淀蛋白处理,取上清液进样分析。色谱柱为Agilent Eclipse C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为1.5%三氟乙酸-乙腈(55∶45),流速0.5 mL·min-1,荧光的激发波长为280 nm,发射波长为320 nm。结果:顺式阿曲库铵在12.4～4960.0 ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9998),检测限为1.24 ng·mL-1,平均提取收率为85.1%～88.5%,平均方法回收率为98.3%～102.1%,日内、日间RSD均<3.4%。结论:本方法操作简便、灵敏度高、专一性强、结果可靠,可满足临床检测和药代动力学研究的需要。     

顺式阿曲库铵对79例全麻患者肌松效应及血流动力学观察

目的观察3倍95%有效药物剂量的顺式阿曲库铵对全麻患者的肌松效应及血流动力学指标。方法选取79例全麻患者,采用TOF-Guard肌松监测仪监测拇内收肌的肌松程度。经麻醉诱导意识丧失后,静注顺式阿曲库铵0.15mg/kg。经口气管插管,观察肌松作用起效的时间、恢复时相,以及血流动力学指标。结果麻醉效果91.1%的患者达到气管插管1级水平,7.6%的患者达到2级水平,且全部患者均完成气管插管。肌松恢复时相:25%为(39.1±7.9)min,75%为(47.8±8.1)min,100%为(61.9±10.2)min。所有患者均未出现皮肤潮红、支气管痉挛以及肝肾功能损害等不良反应。结论 3倍95%有效药物剂量的顺式阿曲库铵具有肌松效应良好,血流动力学稳定,不良反应发生少等特性,临床价值较高。     

HPLC-荧光法测定人血清中顺式阿曲库铵的浓度

目的:建立测定人血清中顺式阿曲库铵浓度的方法。方法:血清酸化后采用二氯甲烷液-液萃取法处理,以高效液相色谱(HPLC)-荧光法进样测定,色谱柱为Kromasil100-5C18,流动相为1.0%三氟乙酸-乙腈(58∶42),流速为0.8ml/min,柱温为常温,荧光检测波长分别为280 nm(E x)、320 nm(E m)。结果:顺式阿曲库铵血药浓度在15.625² 000ng/ml范围内线性关系良好(r=0.999 3),平均提取回收率为78.78%2 000ng/ml范围内线性关系良好(r=0.999 3),平均提取回收率为78.78%⁸3.59%,平均方法回收率为98.58%83.59%,平均方法回收率为98.58%¹01.23%,日内、日间RSD均小于10%。结论:本方法操作简便、灵敏度高、重现性好、结果可靠,可满足临床上血清中顺式阿曲库铵血药浓度检测和药动学研究的需要。     

氯胺酮及其代谢物去甲氯胺酮在大鼠体液及组织中的检测及分布

目的:建立生物检材中氯胺酮及其代谢物去甲氯胺酮的检测方法,考察氯胺酮和去甲氯胺酮在大鼠体内的分布。方法:用高效液相色谱法(HPLC)检测生物检材中的氯胺酮及去甲氯胺酮;以10 mg·kg-1剂量给大鼠灌胃(ig),分别于给药后10 min,45 min,2 h和8 h处死,测定体液和组织中氯胺酮及去甲氯胺酮的含量。结果:建立起生物检材中氯胺酮及其代谢物去甲氯胺酮的HPLC法。所建方法在0.05-25.0μg.g-1浓度范围内线性关系良好,r2=0.999,萃取回收率大于75%;肝和肾中氯胺酮和去甲氯胺酮含量最高,其次为:脾、尿液、肺、脑、血液、心和肌肉。结论:所建方法准确、灵敏,适用于组织中氯胺酮及其代谢物去甲氯胺酮的分析鉴定;肝和肾可作为毒物分析的组织检材。     

High-performance Liquid Chromatographic Determination of Trazodone and 1-m-Chlorophenylpiperazine with Ultraviolet and Electrochemical Detector

A high-performance liquid chromatographic (HPLC) assay was developed for the determination of trazodone and its metabolite, 1-m-chlorophenylpiperazine (m-CPP), in plasma. The high level of trazodone in plasma was detected by ultraviolet absorbance at 254 nm and the low level of m-CPP in plasma was detected by coulometric electrochemical detection at 840 mV on the series arrangement of two detectors. Pilsicainide as an internal standard for both compounds was monitored by both detectors. Trazodone and m-CPP in plasma were extracted by a rapid and simple procedure based on CN bonded-phase extraction, and C₈ reversed-phase HPLC separation. Determination was possible for trazodone in the concentration range 100–2000 ng mL^?1 and for m-CPP in the concentration range 5–100 ng mL^?1. The recoveries of trazodone and m-CPP added to plasma were 81·0–84·2 and 68·0–73·2%, respectively, with coefficients of variation of less than 7·3 and 8·2%, respectively. The method is applicable to high level monitoring of trazodone and low level monitoring of m-CPP in plasma of healthy volunteers and patients treated with trazodone.     

缓激肽开放血瘤屏障过程中诱发快速耐受性的机制探讨

目的探讨缓激肽(bradykinin,BK)开放血瘤屏障过程中,HSF1和HSP70对BK诱发快速耐受性的影响。方法首先通过立体定向法接种C6细胞制备恶性胶质瘤大鼠模型。模型制备成功后,经颈内动脉缓慢小剂量给予缓激肽(或生理盐水)10μg.kg-1.min-1,动态观察肿瘤组织内热休克因子1(heatshockfactor1,HSF1)蛋白单体和三聚体的活性及热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)的表达(Westernblot法)。免疫组织化学技术检测血瘤屏障上紧密连接蛋白occludin的变化。利用伊文思蓝连续监测缓激肽处理后的C6恶性胶质瘤大鼠血瘤屏障的通透性,同时电镜观察血瘤屏障的病理学改变。结果缓激肽作用于C6大鼠后,紧密连接增宽,血瘤屏障通透性增加,伊文思蓝渗出量分别较对照组增加了5.19μg.g-1(0min),5.06μg.g-1(5min),11.35μg.g-1(10min,P<0.05),21.54μg.g-1(15min,P<0.01),12.81μg.g-1(30min,P<0.05),7.28μg.g-1(60min)。肿瘤组织内HSF1蛋白三聚体活性和HSP70蛋白的表达逐渐增加,且分别于处理后的5min和30min时达高峰(P<0.01,与对照组相比),最大值为对照组的2～3倍。免疫组化检测结果发现,处理后的C6动物,其血瘤屏障的紧密连接蛋白occludin表达减少,15min后逐渐增加。结论缓激肽作用于血瘤屏障后,激活了HSF1并促进了hsp70蛋白的表达。增加的hsp70可能通过发挥分子伴侣作用来修复紧密连接蛋白,进而诱发快速耐受性。     

正交试验法优化半边莲中异阿魏酸的提取工艺

目的优化中药半边莲中主要有效成分异阿魏酸的提取工艺。方法采用甲醇加热回流的提取方法,以料液比、溶剂浓度、提取温度、提取时间为考察因素,以高效液相色谱法测定异阿魏酸的含量为指标,利用正交试验法优化提取工艺。结果最佳的提取工艺为4倍量75%的甲醇,在80℃下,2次回流提取时间分别为2 h和1h,半边莲中异阿魏酸的含量为86.073μg.g-1。结论该法提取率高,方法稳定,工艺简单,适用于半边莲中异阿魏酸的提取。     

兔眼结膜中阿奇霉素的浓度测定及其药动学

目的建立兔眼结膜中阿奇霉素的LC-MS/MS检测方法,研究阿奇霉素滴眼液在兔眼结膜中的药动学特征。方法 184只新西兰白兔进行单次以及多次给阿奇霉素滴眼液后,于不同时间点取眼结膜样本匀浆处理后以沉淀法去除匀浆液中蛋白基质,采用LC-MS/MS法测定兔眼结膜中的阿奇霉素。以克拉霉素为内标,采用Ultimate XB-Phenyl(100 mm×3.0 mm,3μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.01 mol.L-1乙酸铵水溶液(含0.1%乙酸)(75∶25,V/V),电喷雾离子源,正离子SRM扫描分析,内标和阿奇霉素离子对分别为:m/z 748→m/z 590和m/z 749→m/z 591。结果阿奇霉素结膜浓度在10.128～8 102.4μg.L-1范围内线性关系良好(r=0.998 7);最低定量限为10.128μg.L-1;批内和批间RSD均小于10%;方法准确度在85%～115%之间。单次给药后参比制剂和受试制剂的药动学参数tmax分别为2 h和2 h,ρmax分别为22.29μg.g-1和21.80μg.g-1,AUC1-192分别为528.0μg.h.g-1和536.5μg.h.g-1,t1/2分别为25.5 h和24.1 h。多次给药后参比制剂和受试制剂的药动学参数tmax分别为8 h和8 h,ρmax分别为53.10μg.g-1和51.62μg.g-1,AUC1-192分别为1 584.9μg.h.g-1和1 379.4μg.h.g-1,t1/2分别为28.8 h和23.7 h。受试制剂和参比制剂药动学行为基本一致。结论建立的检测方法简便、灵敏。多次给药后在兔眼结膜内存在蓄积现象。     

改良高效液相色谱法测定血浆中顺铂磁性纳米药物的含量

目的建立高效液相色谱技术测定血浆中顺铂浓度的方法来进行药物代谢动力学的研究。方法用Waters色谱系统。色谱条件:2487双通道紫外检测器。C18色谱柱(大连依利特ODS2分析柱,250mm×4.6mm,5μm),外接菲罗门C18(4mm×4 mm保护柱)。恒温35℃,流速1.0ml·min-1,流动相水-甲醇(28∶72),Waters 1525泵,717自动取样器,进样量为20μl,Breeze色谱工作站。血浆中的顺铂经二乙基二硫代氨基甲酸钠衍生化后,用氯仿提取其产物Pt(DDTC)2,离心后直接取氯仿层进样,采用高效液相色谱仪在254 nm处测定药物浓度。结果本法能有效地测定兔血浆中的顺铂浓度。样品各组分分离良好,顺铂线性范围为0.20768-12.468 mg.L-1,相关系数r=0.9999,日间和日内变异系数均小于10%。结论该方法是一种高效、准确的检测方法,适用于顺铂药物动力学的研究。     

RP-HPLC法测定5-Fu磁性微球及小鼠各组织中5-Fu的含量

目的:以反相高效液相色谱法测定5-氟尿嘧啶(5-Fu)磁性微球及小鼠各组织中5-Fu的含量,并评价5-Fu磁性微球在小鼠体内的靶向性。方法:15只小鼠尾静脉注射5-Fu及其磁性微球,采用0.5%胃蛋白酶消解磁性微球后经乙酸乙酯2次萃取后以反相高效液相色谱法测定心、肝、肾、脾、肺、脑和肌肉等组织匀浆中5-Fu含量。结果:组织匀浆中5-Fu检测浓度在0.1～25mg·L-1范围内线性关系良好,最低检测浓度为0.1mg·L-1。与注射单一5-Fu对照品比较,小鼠静脉注射5-Fu磁性微球后在肝脏分布明显增加(P<0.05),加入磁性支架和体表磁场的肌肉组织中可见5-Fu分布。结论:本方法适用于测定磁性微球及小鼠各组织中5-Fu的含量;5-Fu磁性微球具有肝靶向性和磁靶向性。     

止血带下克林霉素在兔肌肉组织中的分布特性

目的建立高效液相色谱法测定兔肌肉组织中的克林霉素,并对止血带下肌肉组织中克林霉素的分布特征进行研究。方法色谱条件为乙腈-四氢呋喃-磷酸盐缓冲液（30∶1∶70,pH=5）为流动相;柱温：40℃;流速：0.8mL·min^-1;替硝唑为内标,LunaC18柱（250mm×4.6mm,5μm）进行分离,检测波长为205nm。测定静脉注射克林霉素30,60,90,120min后上止血带分别阻断血液循环30,60,90min实验组与未止血对照组的肌肉组织中药物含量。结果克林霉素在10.58-264.5μg·mL^-1内线性关系良好,日内RSD≤2.58%,日间RSD≤4.20%。实验组克林霉素含量与对照组比较,P〈0.01;相同止血时机,不同止血时间药物含量比较,P〉0.05;不同止血时机（30,60,90,120min）药物含量比较,P〈0.01;给药后60min上止血带阻断肢体血液循环,克林霉素在肌肉组织的含量最高,为39.30μg·g^-1。结论方法准确可靠、简便、重复性好;实验组克林霉素含量与对照组有显著性差异;围手术期预防感染,上止血带时机是影响克林霉素组织分布的主要因素,给药后60min止血,药物可充分分布到肌肉软组织中,提高预防感染效果。     

丹皮酚对动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究丹皮酚对动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞增殖的影响。方法高脂饮食法复制家兔动脉粥样硬化病理模型;HE染色并光镜观察主动脉病理学改变;MTT法分析体外培养的兔血管平滑肌细胞增殖水平;全自动生化分析仪测定主动脉组织中脂质含量;酶法测定SOD、MDA含量;放射免疫分析法测定IL-1β、TNF-α的含量;免疫组织化学法检测主动脉组织中PCNA的蛋白表达。结果丹皮酚(75、150 mg.kg-1)治疗给药(ig,6 wk)能减轻模型动物主动脉内膜增厚及泡沫细胞数量;使主动脉组织中脂质、脂质过氧化反应以及炎性细胞因子含量等方面得到显著改善;并能显著抑制主动脉组织中PCNA蛋白的表达强度;丹皮酚(100~300 mg.L-1)可明显抑制体外培养的血管平滑肌细胞增殖反应。结论丹皮酚对血管平滑肌细胞增殖有明显抑制作用,可能是其降脂、减轻脂质过氧化反应以及炎性细胞因子含量等协同作用结果,并可能通过抑制PCNA的表达而调控动脉粥样硬化病变中的血管平滑肌细胞增殖周期。