肝素对大鼠肝星状细胞中瘦素与转化生长因子β1水平的影响

目的：研究肝素与大鼠肝星状细胞（HSC）作用后瘦素与转化生长因子β1（TGFβ1）表达的变化和意义。方法：实验分组：肝素Ⅰ（10μg／mL）、Ⅱ（100μg／mL）、Ⅲ（1000μg／mL）组，加生理盐水为对照组，均培养48h。培养终止后吸取上清液-20℃冰冻保存，ELISA法检测其上清液瘦素与TGFβ1水平，MTT法观察细胞增殖情况。结果：肝素Ⅱ、Ⅲ组HSC培养上清液瘦素水平均显著低于对照组（P〈0.01）；肝素各组TGFβ1水平和平均吸光度均显著低于对照组（P〈0．01）。结论：大鼠HSC在肝素作用下瘦素与TGFβ11分泌均受到抑制，且星状细胞的增殖减少。     

华蟾素对转化生长因子-β1诱导肝星状细胞激活的作用及机制研究

目的 研究华蟾素对人肝星状细胞(HSCs)LX-2活化的影响及其可能的分子机制。方法 将LX-2细胞分为空白组,对照组和华蟾素低、中、高实验组。空白组予以完全培养基进行培养,对照组予以含10 ng·mL^-1转化生长因子-β1(TGF-β1)的培养基处理,华蟾素低、中、高实验组在对照组的基础上分别予以0.5,1和2 mg·mL^-1华蟾素处理。以细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测华蟾素对人肝星状细胞系LX-2细胞增殖的影响;以蛋白质印迹(Western blot)法检测各组细胞中α-平滑肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原(Collagen-Ⅰ)蛋白的表达;以实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测α-SMA和Collagen-ⅠmRNA的表达情况;以免疫荧光法检测各组细胞α-SMA蛋白的表达。结果 Western blot和RT-PCR结果显示随着TGF-β1浓度的递增,α-SMA、Collagen-Ⅰ在LX-2细胞中的表达增强,差异有统计学意义(P<0.01);表明TGF-β1可诱导LX-2细胞活化增殖。CCK-8实验测得华蟾素...     

雌二醇对CCl4诱导的肝纤维化大鼠转化生长因子β1及其受体的影响

目的：通过雌二醇对CCl4诱导的肝纤维化大鼠转化生长因子β1（TGF-β1）及其Ⅰ型受体（Tβ3R Ⅰ）影响,探讨雌二醇对肝纤维化的抑制作用机理。方法：应用放免和免疫组化方法。以CCl4诱导大鼠肝纤维化动物模型,观察雌二醇对大鼠肝纤维化形成过程中TGF—β1、TβRⅠ型受体影响。结果：雌二醇可以明显降低TGF—β1的表达（P〈0．05）,对TβRⅠ型受体无明显影响（P〉0．05）。结论：雌二醇通过下调TGF—β1的表达,抑制肝纤维化形成;雌二醇可以作为一种预防肝纤维化的药物。     

白花丹醌对瘦素刺激人肝星状细胞转化生长因子-β_1表达的影响

目的研究白花丹醌对瘦素刺激体外培养人HSC-LX2TGF-β1 mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养HSC-LX2,瘦素(leptin)刺激24h,各药物与细胞共孵育24h后,采用荧光PCR检测各组TGF-β1 mRNA的表达和免疫组织化学方法检测TGF-β1蛋白表达情况。结果与leptin组比较,白花丹醌各剂量组作用24h后,HSC-LX2细胞中TGF-β1 mRNA的水平明显降低,尤以中、高剂量组明显(P<0.01);免疫组化结果显示白花丹醌各剂量组对HSC-LX2细胞TGF-β1蛋白表达有一定的抑制作用,且作用呈剂量依赖性。结论白花丹醌抗肝纤维化作用机制之一是从mRNA和蛋白水平抑制TGF-β1表达,从而抑制HSCECM的合成,发挥抗肝纤维化作用。     

苦参素对肝纤维化大鼠肝脏TGF-β1的调节作用

目的观察苦参素(OM)对肝纤维化大鼠的防治作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型。于实验的第12周末采血,检测ALT、AST、Ⅰ型胶原和TGF-β1。肝脏病理学检测HE染色后观察肝组织改变,Masson胶原纤维染色,每组样本随机观察8个视野的肝纤维化程度,RT-PCR检测TGF-β1mRNA表达。结果苦参素组能明显降低肝纤维化大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、Ⅰ型胶原和TGF-β1水平,同时病理组织学显示苦参素能明显改善CCl4诱导的肝纤维化大鼠的肝组织结构和肝纤维化;TGF-β1基因表达量较模型组明显减少。结论苦参素可明显降低实验大鼠胶原沉积,对CCl4诱导的肝纤维化大鼠有良好的保护作用,对TGF-β1表达的影响可能是其作用机制之一。     

豹皮樟总黄酮调控瘦素、TGF-β1对肝纤维化大鼠的预防作用研究

目的研究豹皮樟总黄酮(TFLC)调控瘦素(leptin)和转化生长因子-β1(TGF-β1)对肝纤维化大鼠的预防作用。方法采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,TFLC灌胃给药第12周末,检测ALT、AST及HA、LN、PⅢNP、CⅣ含量;检测Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、瘦素、TGF-β1的含量;检测Hyp及组织病理变化;检测瘦素受体(OB-Rb)、TGFβ1Ⅰ型受体(TGFβR1)、Smad3 mRNA及蛋白表达。结果 TFLC(200、400 g.L-1)能明显降低肝纤维化大鼠肝纤维化指标及血清Ⅰ型胶原、瘦素、TGF-β1水平;降低Ob-Rb、TGFβR1、Smad3的mRNA及蛋白表达。结论 TFLC能有效预防CCl4诱导的大鼠肝纤维化,可能与下调肝内瘦素及其受体,抑制TGF-β1/Smad通路有关。     

IL-0抑制转化生长因子β1诱导的大鼠肝星状细胞工型胶原合成作用观察

的探讨IL-10抗纤维化的可能机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞系rHSC-99，分别用不同浓度的IL-10、TGFβ1干预和两者共同干预，用ELISA法检测肝星状细胞（HSC）的Ⅰ型胶原合成的影响。结果TGFp1显著增强HSC的Ⅰ型胶原的合成。IL-10单独干预对HSC的Ⅰ型胶原的合成无明显影响，但IL-10可显著抑制TGFβ1促进HSC的Ⅰ型胶原的合成。结论TGFβ1显著促进HSC的Ⅰ型胶原的合成，IL-10对TGFβ1的促HSC Ⅰ型胶原合成有抑制作用，这可能是IL-10发挥抗肝纤维化作用的途径之一。     

IL-10抑制转化生长因子β1诱导的大鼠肝星状细胞Ⅰ型胶原合成作用观察

目的探讨IL-10抗纤维化的可能机制.方法体外培养大鼠肝星状细胞系rHSC-99,分别用不同浓度的IL-10、TGF β1干预和两者共同干预,用ELISA法检测肝星状细胞(HSC)的Ⅰ型胶原合成的影响.结果TGF β1显著增强HSC的Ⅰ型胶原的合成.IL-10单独干预对HSC的I型胶原的合成无明显影响,但IL-10可显著抑制TGF β1促进HSC的Ⅰ型胶原的合成.结论TGFβ1显著促进HSC的Ⅰ型胶原的合成,IL-10对TGF β1的促HSC Ⅰ型胶原合成有抑制作用,这可能是IL-10发挥抗肝纤维化作用的途径之一.     

人工虫草对间质纤维化大鼠转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的影响

目的 探讨人工发酵虫草对肾间质纤维化大鼠肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 雄性SD大鼠30只随机分为3组(正常对照假手术组、造模组及造模灌胃组),每组10只.运用单侧输尿管结扎法(UUO)制造肾间质纤维化模型,于第5周处死大鼠,切片做Masson染色观察肾小管及间质的病理变化;应用免疫组织化学方法检测肾组织中TGF-β1、CTGF的蛋白质表达.结果 与对照组比较,5周时肾小管间质损伤指数升高(P＜0.01);肾组织内TGF-β1、CTGF的蛋白质表达均显著上调(P＜0.05).虫草干预后,上述上调指标均被显著抑制(P＜0.05).结论 虫草可通过抑制TGF-β1和CTGF的过度表达,从而改善间质纤维化.     

瘦素对大鼠关节软骨细胞转化生长因子-β1表达的影响

目的探讨瘦素对大鼠关节软骨细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法培养大鼠关节软骨细胞,按实验方法将瘦素(浓度为10ng/ml)作用条件下培养的软骨细胞作为实验组、将单纯培养的软骨细胞作为对照组;于不同时间(12、24、36、48、72h)检测2组TGF-β1水平。结果 (1)采用细胞体外培养方法成功培养出大鼠关节软骨细胞,并通过形态观察和特殊染色得到证实。(2)实验组TGF-β1基因表达明显高于对照组,最佳时间为作用24～48h;继续瘦素刺激细胞增殖不明显,并有抑制作用的趋势。结论 (1)低浓度瘦素可显著提高软骨细胞的活性;(2)低浓度瘦素能有效维持大鼠关节软骨细胞的表型,抑制软骨细胞"去分化"和退变,并通过上调TGF-β1的mRNA表达促进细胞外基质II型胶原和蛋白多糖的合成分泌;(3)瘦素可加强TGF-β1的mRNA表达,以防止细胞外基质降解,有修复软骨的潜能。     

转化生长因子β1与肝纤维化关系

肝纤维化为诸多慢性肝病发展至肝硬化过程中所共有的组织学变化,是影响慢性肝病预后的重要环节。十多年来,肝纤维化的基础研究在分子生物学和细胞信号传递领域不断取得飞速的发展,细胞因子与肝纤维化的关系成为当前研究的重点内容。业已证明,多种细胞因子参与了肝纤维化的启动和持续发展。其中,转化生长因子β1（transfor-minggrowthfactorβ1,TGF-β1）最为重要,起着关键性的作用。     

雌二醇对大鼠肝星状细胞TGF-β1、CTGF表达的影响

目的 探讨雌二醇对肝星状细胞(HSC)的影响及其可能的作用途径.方法 培养大鼠HSC,初次传代后,HSC随机分为4组,分别加入不同浓度的雌二醇,加药后72小时,噻唑蓝(MTT)法检测雌二醇对HSC增殖的影响;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)分析其对HSC的转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA表达的影响;免疫细胞化学分析其对HSC的α-SMA蛋白的表达的影响.结果 MTT法发现雌二醇抑制HSC的增殖;RT-PCR分析雌二醇干预组HSC TGF-β1mRNA、CTGFmRNA的表达明显下降;免疫细胞化学分析雌二醇干预组HSC α-SMA蛋白表达明显下降;并且都随浓度增加抑制作用增强,差异有显著性(P＜0.05).结论 雌二醇具有抑制肝纤维化作用是因为:①可以抑制HSC的增殖、活化;②抑制了致纤维化生长因子TGF-β1及其下游信号CTGFmRNA表达.     

转化生长因子-β1及其受体表达与白血病病情的相关性研究

目的 探讨急性白血病患者的转化生长因子-β1（TGF-β1）及其受体表达与白血病治疗、预后的相关性。方法 收集42例初诊和经化疗完垒缓解后白血病患者的外周血和骨髓，用ELISA法检测外周血、骨髓及骨髓基质细胞的可溶性TGF-β1含量；用免疫组织化学法检测外周血白血病细胞和骨髓有核细胞上的TGF-β1，及其Ⅱ受体（TGFR2）。结果 急性白血病患者外周血、骨髓、骨髓基质细胞的TGF-β1含量明显低于对照（P〈0.01），尤以血清为甚，经化疗缓解后，TGF-β1含量又升高至接近正常水平。外周血白血病细胞和骨髓有核细胞上的TGF-β1表达与对照弛比较无明显差异（P〉0．05）。初诊患者外周血TGFR2表达明显低下，缓解后，TGFR2表达又升高至接近正常。结论 急性白血病血浆、骨髓、骨髓基质TGF-β1含量与TGFR2与临床病情密切相关，可作为了解病情、观察疗效、判断预后的指标之一。     

转化生长因子-β与器官纤维化的研究进展

<正>主要脏器的慢性纤维化导致功能的进行性下降甚至致患者死亡,是医学领域的主要难题之一。近年来,各种细胞因子如转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-1 (IL-1)等在纤维化发生发展中的作用已被越来越多的人关注。     

紫七软肝片对肝纤维化大鼠转化生长因子β1及内毒素表达干预的研究

目的：研究紫七软肝片对实验性大鼠肝纤维化的干预作用及对其肝组织转化生长因子β1（TGF—β1）和内毒素（ET）表达的影响。方法：用40％CCl4皮下注射和高脂饲料及酒精喂养造成大鼠肝纤维化模型。随机分为空白对照组、模型组、紫七软肝片组、大黄蠊虫丸组和秋水仙碱组,造模同时灌胃给药干预,共6w。实验第4w末及结束以后,各取血清、肝组织,检测肝组织中TGF-β1和血清中ET的含量,观察肝组织炎症活动度和肝纤维化程度。结果：（1）药物干预后炎症活动度及肝纤维化程度均降低．其中紫七软肝片组6w末时炎症活动度计分最低（P〈0．05）,且肝纤维化度计分与模型组有显著差异（P〈0．01）;（2）模型组大鼠肝组织TGF—β1及血清ET表达均较空白对照组升高,应用药物干预后,大鼠肝组织TGF—β1表达均较模型组明显降低（P〈0．01,P〈0．05）,紫七软肝片组6w末时血清ET的表达与模型组有显著差异（P〈0．05）。结论紫七软肝片能够减轻大鼠肝组织炎症活动度及纤维化程度。     

人工虫草对间质纤维化大鼠转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨人工发酵虫草对肾间质纤维化大鼠肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法雄性SD大鼠30只随机分为3组(正常对照假手术组、造模组及造模灌胃组),每组10只。运用单侧输尿管结扎法(UUO)制造肾间质纤维化模型,于第5周处死大鼠,切片做Masson染色观察肾小管及间质的病理变化;应用免疫组织化学方法检测肾组织中TGF-β1、CTGF的蛋白质表达。结果与对照组比较,5周时肾小管间质损伤指数升高(P<0.01);肾组织内TGF-β1、CTGF的蛋白质表达均显著上调(P<0.05)。虫草干预后,上述上调指标均被显著抑制(P<0.05)。结论虫草可通过抑制TGF-β1和CTGF的过度表达,从而改善间质纤维化。     

转化生长因子-β1微血管密度在肝纤维化的表达

目的 研究转化生长因子-β1及MVD在肝纤维化形成过程中的作用及意义.方法 采用免疫组织化学方法检测慢性病毒性肝炎、肝纤维化、肝硬化中TGF-β1及MVD的表达.结果 随着慢性病毒性肝炎、肝纤维化及肝硬化的形成,TGF-β1表达逐渐增强(P<0.01),MVD在肝纤维化组织中表达高于慢性病毒性肝炎及肝硬化组织.结论 肝脏中TGF-β1及MVD的表达与肝纤维化及肝硬化的形成密切相关,可作为诊断治疗肝纤维化的重要指征.     

内毒素诱导致新生大鼠肺损伤中肾病理改变及转录因子-κB和转化生长因子-β1表达的研究

目的研究内毒素(LPS)诱导致新生大鼠肺损伤模型中肾病理改变及转录因子-κB(NF-κB)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的变化。方法用3～5日龄SPF级大鼠尾部静脉注射LPS建立新生大鼠急性肺损伤(ALI)模型。实验分为对照组、6 h模型组和12 h模型组。按实验要求时间杀死大鼠,无菌留取标本。用全自动生化仪检测新生大鼠的肾功能,用试剂盒检测丙二醛(MDA)含量变化和超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)活性,用免疫组化法检测NF-κB和TGF-β1的表达水平。结果对照组、6 h模型组和12 h模型组的大鼠血清肌酸酐的含量分别为(15.02±0.48),(45.96±1.25)和(97.65±1.43)μmol·L^-1,血尿素氮的含量分别为(6.84±0.53),(10.35±0.84)和(14.68±0.25)μmol·L^-1,肾组织中MDA含量分别为(2.02±0.41),(3.21±0.63)和(5.01±0.18)nmol·mg^-1,SOD活性分别为(28.74±0.69),(18.25±...     

TGFβ1刺激肝星状细胞的活化与肝纤维化的研究进展

肝纤维化是各种原因所致的肝损伤的组织学变化,是一种在损害因子持续作用下渐进的病理过程,以细胞外基质(ECM)异常增多过度沉积为病理特征,同时也是进一步向肝硬化,肝癌发展的中间环节.     

转化生长因子-β_1/Smad2/3介导肾小管上皮细胞转分化与幼鼠肾间质纤维化的相关性

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)与Smad2/3信号传导介导肾小管上皮细胞转分化(EMT)与幼鼠慢性肾间质纤维化的相关性,以及血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)的干预作用。方法本研究以80只幼年雌性SD大鼠为实验动物,制备7/8肾切除残肾慢性进展性肾功能衰竭模型。模型成功后随机将动物分为假手术组、7/8肾切除未治疗组和7/8肾切除干预治疗组。以模型制备后第2、4、8、12周为不同时间点。检测各时间点大鼠肾组织常规病理;采用免疫组织化学染色检测残肾组织中TGF-β1、Smad2/3:α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏连蛋白及纤维连接蛋白(FN)在肾组织表达趋势。结果实验第2周时未治疗组肾小管间质大量炎性细胞浸润、肾小管上皮细胞肿胀、肾小管间隙加宽。至第12周未治疗组肾小管广泛扩张、基底膜增厚、皱缩或断裂,间质纤维化明显。而治疗组残肾组织病理变化较未治疗组有明显改善。免疫组织化学半定量分析显示未治疗组TGF-β1阳性细胞或阳性小管染色积分值呈逐渐升高趋势。对照组与未治疗组各时间点相比较差异有统计学意义(P<0.05)。Smad2/3表达趋势与TGF-β1相似。α-SMA蛋白表达趋势同步上调,E-钙黏连蛋白同步下调,未治疗组各时间点FN均呈现逐渐升高趋势(P<0.05)。未治疗组TGF-β1、Smad2/3、α-SMA、FN各指标不同时间点免疫组织化学蛋白染色积分值呈正相关,而与E-钙黏连蛋白表达趋势呈负相关(P<0.01)。干预组不同时间点TGF-β1、Smad2/3、α-SMA和FN蛋白表达趋势明显弱于未治疗组,但强于对照组,而E-钙黏连蛋白表达下调(P<0.01)。结论在幼年期肾损伤过程中,TGF-β1高表达与Smad2/3分子使其高表达,可能通过介导EMT导致肾小管间质区细胞外基质(ECM)异常合成与沉积,最终引起肾小管间质纤维化形成。早期给予ACEI干预可改善这种病理变化。