人胚嗅鞘细胞与鼠胚胎脊髓组织联合移植对大鼠脊髓损伤的治疗

背景：脊髓损伤高发且后果严重，至今尚无有效措施挽救丧失的神经功能，哺乳动物嗅觉系统的一类特殊胶质细胞的移植引起关注。 目的：观察人胚嗅鞘细胞和大鼠胚胎脊髓共同移植在促进大鼠横断脊髓轴索再生方面是否产生协同作用。 设计：开放性实验。 单位：无锡第三人民医院细胞室，苏州大学附属第一医院神经外科，东南大学附属中大医院神经外科。 材料：实验于2002—09／2004—10在无锡市第三人民医院细胞实验室完成。①选取清洁级成年雌性SD大鼠36只，随机数字表法分成4组：人胚嗅鞘细胞组10只、鼠胚胎脊髓组10只、联合移植组10只，模型组6只。②取12周左右的流产新鲜人胚胎（产妇知情同意）用于嗅鞘细胞的培养纯化。③取孕14d的SD大鼠1只，施行剖腹手术将胎鼠连同胎膜一同取出，用于新鲜胚胎脊髓的制备。 方法：①4组大鼠均建立脊髓半切洞模型。模型组在损伤洞腔内填塞明胶海绵加全培养基8μL，在损伤上下各1mm处注射相同培养基2μL；人胚嗅鞘细胞组明胶上给予嗅鞘细胞悬液8μL，损伤上下各1mm处注射细胞悬液2μL；鼠胚胎脊髓组将组织碎块直接填塞在洞腔内，外覆明胶；联合移植组将同样大小的胚胎脊髓填塞在洞腔内，然后用微量加样器将8μL的嗅鞘细胞悬液注入洞腔，外覆明胶，在洞腔上下各1mm处注射细胞悬液2μL，按层缝合肌层皮肤。②定期对各组大鼠进行行为学评定，结合病理学观察，并通过辣根过氧化物酶-四甲基联苯胺逆行示踪技术，评价嗅鞘细胞和胚胎脊髓对神经元存活、纤维再生的影响。 主要观察指标：①人胚嗅鞘细胞体外培养及纯化。②体外免疫细胞化学分析。③大鼠后肢运动功能BBB评分测定结果。④移植物及受损脊髓修复的免疫组化检测结果。⑤辣根过氧化物酶-四甲基联苯胺示踪对各组被     

嗅鞘细胞联合移植干预脊髓损伤的新思考

目的：针对嗅鞘细胞及外周嗅神经系统相关细胞的基础生物学特征进行综述，并对可能导致最佳细胞移植干预脊髓损伤效果的特定因素进行深入探讨。资料来源：应用计算机检索Medline 1994-01／2004-10关于嗅鞘细胞移植与脊髓损伤的文章，检索词“olfactory ensheathing cell，spinal cord injury”，并限定语言种类为English。同时计算机检索万方数据资源系统与中国期刊全文数据库1994-01／2004-10关于嗅鞘细胞移植与脊髓损伤的文章，限定文章语言种类为中文，检索词“嗅鞘细胞，脊髓损伤”。资料选择：对资料进行初审，选取实验包括实验组和对照组的文献，筛除非随机实验的研究，对剩余的文献开始查找全文，进一步判断为随机对照实验。纳入标准为①随机对照实验，采用单盲，双盲或非盲法。②实验包含平行对照组。排除标准：重复性实验研究及综述类文章。资料提炼：共收集到32篇关于嗅鞘细胞干预脊髓损伤的随机实验文章，21个实验符合纳入标准。排除的11篇实验为重复的同一研究和综述。资料综合：21个实验包括脑膜细胞、成纤维细胞、嗅黏膜细胞、胞外基质等联合嗅鞘细胞治疗脊髓损伤的方法，并对各方法给予评价。以上各种联合治疗方法各有特色，但所有的实验结果主要以啮齿类动物一大鼠的脊髓损伤模型为基础而获得的，选择的模型包括脊髓完全横断模型、挫裂伤模型、脱髓鞘模型等，目前还不能获得完全模拟人的脊髓损伤的动物模型。结论：尚无充分证据证明目前的嗅鞘细胞联合干预策略对人类脊髓损伤后的功能恢复有十分确切的作用，但单一、纯化的嗅鞘细胞移植可能不是干预脊髓损伤的最佳选择。如何选择适当的细胞的类型联合应用，并使之实现从实验室走向应用研究是不同细胞移植策略中应重点考虑的问题。     

嗅鞘细胞联合移植干预脊髓损伤的新思考

目的:针对嗅鞘细胞及外周嗅神经系统相关细胞的基础生物学特征进行综述,并对可能导致最佳细胞移植干预脊髓损伤效果的特定因素进行深入探讨。资料来源:应用计算机检索Medline1994-01/2004-10关于嗅鞘细胞移植与脊髓损伤的文章,检索词“olfactoryensheathingcell,spinalcordin-jury”,并限定语言种类为English。同时计算机检索万方数据资源系统与中国期刊全文数据库1994-01/2004-10关于嗅鞘细胞移植与脊髓损伤的文章,限定文章语言种类为中文,检索词“嗅鞘细胞,脊髓损伤”。资料选择:对资料进行初审,选取实验包括实验组和对照组的文献,筛除非随机实验的研究,对剩余的文献开始查找全文,进一步判断为随机对照实验。纳入标准为①随机对照实验,采用单盲,双盲或非盲法。②实验包含平行对照组。排除标准:重复性实验研究及综述类文章。资料提炼:共收集到32篇关于嗅鞘细胞干预脊髓损伤的随机实验文章,21个实验符合纳入标准。排除的11篇实验为重复的同一研究和综述。资料综合:21个实验包括脑膜细胞、成纤维细胞、嗅黏膜细胞、胞外基质等联合嗅鞘细胞治疗脊髓损伤的方法,并对各方法给予评价。以上各种联合治疗方法各有特色,但所有的实验结果主要以啮齿类动物-大鼠的脊髓损伤模型为基础而获得的,选择的模型包括脊髓完     

移植脊髓中嗅鞘细胞的生物学特性

背景：嗅鞘细胞被证明有修复损伤脊髓的作用,但对其移植后的生物学特性了解不多.目的：观察移植的嗅鞘细胞在损伤脊髓中的迁移方式.设计：随机对照实验.材料：2个月雄性SD大鼠38只,体质量（350&;#177;20）g.方法：实验于2004-02/05在中山大学北校区动物实验中心进行.①取SD大鼠2只用于嗅鞘细胞提取,将嗅鞘细胞用双苯亚甲胺染色.②取SD大鼠36只,随机分为3组,近端组,远端组和对照组,每组12只.近端、远端组建立大鼠胸髓损伤模型.分别于脊髓损伤近端、远端注入嗅鞘细胞悬液;对照组不损伤胸髓,仅注射嗅鞘细胞悬液.主要观察指标：术后1,2,4,6周荧光显微镜下观察脊髓中嗅鞘细胞的分布.结果：36只大鼠,分为3组,术后近端组死亡1只;远端、对照组各死亡2只.进入结果分析29只.各组大鼠脊髓中嗅鞘细胞分布：术后2,4,6周,近端组和远端组的嗅鞘细胞进一步沿着脊髓长轴纵向迁移,最远达8 mm,能够穿过瘢痕,到达断端对侧的细胞数量很少;对照组嗅鞘细胞只是局部的扩散,没有迁移.结论：嗅鞘细胞的迁移主要沿着轴突进行,向头端和尾端迁移的数量和速度都没有明显区别,嗅鞘细胞只在损伤的脊髓中进行迁移.     

嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤的新思考

目的:针对嗅鞘细胞移植在脊髓损伤修复中的作用进行综述,并对可能导致最佳细胞移植干预脊髓损伤效果的特定因素进行深入探讨。资料来源:应用计算机检索Medline 1994-01/2007-03期间关于嗅鞘细胞移植与脊髓损伤的文章,检索词“olfactory ensheathing cells,spinal cord injury”,并限定语言种类为English。同时计算机检索万方数据资源系统与中国期刊全文数据库1994-01/2007-03关于嗅鞘细胞移植与脊髓损伤的文章,限定文章语言种类为中文,检索词“嗅鞘细胞,脊髓损伤”。资料选择:对资料进行初审,选取包括实验组和对照组的文献,筛除非随机实验,对剩余的文献开始查找全文,进一步判断为随机对照实验。纳入标准:①随机对照实验,采用单盲,双盲或非盲法。②实验包含平行对照组。排除标准:重复性实验研究及综述类文章。资料提炼:共收集到45篇关于嗅鞘细胞干预脊髓损伤的随机实验文章,30篇符合纳入标准,排除的13篇为重复的同一研究和综述。资料综合:综述神经干细胞、胚胎干细胞移植以及基因修饰的嗅鞘细胞治疗脊髓损伤的方法,并对各方法给予评价。细胞联合移植治疗各有特色,但所有的实验结果主要以啮齿类动物-大鼠的脊髓损伤模型为基础而获得的,选择的模型包括脊髓完全横断模型、挫裂伤模型、脱髓鞘模型等,目前还不能获得完全模拟人的脊髓损伤的动物模型。如何选择适当的细胞类型联合应用,并使之实现从实验室走向应用研究是不同细胞移植策略中应重点考虑的问题。结论:尚无充分证据证明目前的嗅鞘细胞联合干预策略对人类脊髓损伤后的功能恢复有十分确切的作用,但单一、纯化的嗅鞘细胞移植可能不是干预脊髓损伤的最佳选择。     

人胚胎嗅鞘细胞植入鼠半横断脊髓对脊髓轴突再生的影响

目的：嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)植入脊髓后可促进再生的轴突长人远段脊髓，观察人胚胎嗅鞘细胞移植对成鼠脊髓轴突再生的影响。方法：实验于2003-04／2004-10在中山大学第二附属医院实验中心脐血库完成。20只清洁级雌性SD大鼠被随机分为两组，实验组10只，将分离、纯化、培养2周的人胚胎OECs，移植于大鼠半横断胸髓(T10)的两端；对照组10只同样方法给予等量的DMEM。6周后组织切片，行苏木精一伊红染色、嗜银染色以及髓鞘碱性蛋白(MBP)和抗神经生长因子受体抗体(NGFR)免疫组化检查。结果：OECs移植组6周后脊髓大体标本显示初步愈合现象；组织学观察，OECs呈NGFR阳性表达，显示OECs仍然存活，且与宿主组织整合良好；部分再生轴突长入断端间组织，呈MBP阳性表达。结论：入胚胎OECs对成鼠胸髓损伤后的轴突再生有促进作用。     

嗅鞘细胞移植对脊髓损伤大鼠诱发电位的影响

目的:观察嗅鞘细胞移植对脊髓损伤大鼠感觉及运动诱发电位的影响,尝试用嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤后受损的传导通路。方法:实验于2004-09/2006-07在西安交通大学口腔医学实验中心完成。①选取成年健康SD大鼠40只,取16只大鼠用于嗅鞘细胞的培养与纯化,剩余24只随机数字表法分为4组:假手术组、模型对照组、嗅鞘细胞移植组、DF12培养液组,6只/组。②模型对照组、嗅鞘细胞移植组、DF12培养液组采用脊髓横切法制作脊髓损伤模型,以T10为中心的后正中切口入路,切除T10全椎板及T9,T11的部分椎板,显露脊髓,以特制探针横预置3-0丝线于待损伤脊髓腹侧硬膜外,以剃须刀片于预置线头侧0.5mm(T10水平)将脊髓横断。假手术组仅切开T10全椎板及T9,T11的部分椎板,对脊髓未作横断处理。③造模后,嗅鞘细胞移植组以距脊髓断端1mm的平面与正中线交点为进针点,每一进针点按1.75mm,1.25mm,1.00mm,0.50mm4个不同深度分别注射嗅鞘细胞培养液0.5μL,注射速度0.1μL/min,每注射位点留针5min。DF12培养液组同法注射0.5μL无血清的D/F12培养液。假手术组、模型对照组未作处理。④术后8周,各组大鼠麻醉后使用DantecKeypoint型四导诱发电位肌电图仪测定感觉及运动诱发电位的潜伏期及波幅变化。结果:24只大鼠全部进入结果分析。①嗅鞘细胞移植术后大体观察:术后6周,嗅鞘细胞移植组双后肢拖步爬行、双侧膝踝关节处溃疡和压疮等失神经支配征象逐渐好转,股四头肌肌力明显恢复,拖步爬行现象改善;而模型对照组、DF12培养液组大鼠失神经支配征象无改善,假手术组未见异常。②术后8周感觉诱发电位检测结果:模型对照组、DF12培养液组均未引出感觉诱发电位波形。与假手术组比较,嗅鞘细胞移植组感觉诱发电位潜伏期明显延长[(2.640±0.294),(14.575±2.117)ms,P<0.01],波幅显著降低[(3.797±0.140),(0.403±0.078)μV,P<0.01]。③模型对照组、DF12培养液组均未引出运动诱发电位波形。与假手术组比较,嗅鞘细胞移植组运动诱发电位潜伏期明显延长[(5.825±0.350),(10.750±1.184)ms,P<0.01],波幅显著降低[(5.200±0.432),(0.10±0.001)μV,P<0.01]。结论:嗅鞘细胞移植治疗可以调节损伤脊髓的内在微环境,加强体感诱发电位和运动诱发电位的恢复表达,改善神经功能。     

移植脊髓中嗅鞘细胞的生物学特性

背景嗅鞘细胞被证明有修复损伤脊髓的作用,但对其移植后的生物学特性了解不多.目的观察移植的嗅鞘细胞在损伤脊髓中的迁移方式.设计随机对照实验.材料2个月雄性SD大鼠38只,体质量(350±20)g.方法实验于2004-02/05在中山大学北校区动物实验中心进行.①取SD大鼠2只用于嗅鞘细胞提取,将嗅鞘细胞用双苯亚甲胺染色.②取SD大鼠36只,随机分为3组,近端组,远端组和对照组,每组12只.近端、远端组建立大鼠胸髓损伤模型.分别于脊髓损伤近端、远端注入嗅鞘细胞悬液;对照组不损伤胸髓,仅注射嗅鞘细胞悬液.主要观察指标术后1,2,4,6周荧光显微镜下观察脊髓中嗅鞘细胞的分布.结果36只大鼠,分为3组,术后近端组死亡1只;远端、对照组各死亡2只.进入结果分析29只.各组大鼠脊髓中嗅鞘细胞分布术后2,4,6周,近端组和远端组的嗅鞘细胞进一步沿着脊髓长轴纵向迁移,最远达8 mm,能够穿过瘢痕,到达断端对侧的细胞数量很少;对照组嗅鞘细胞只是局部的扩散,没有迁移.结论嗅鞘细胞的迁移主要沿着轴突进行,向头端和尾端迁移的数量和速度都没有明显区别,嗅鞘细胞只在损伤的脊髓中进行迁移.     

嗅鞘细胞移植结合针灸康复疗法治疗脊髓损伤1例报告

应用嗅鞘细胞移植结合针灸康复等疗法治疗脊髓损伤患者1例,以“外伤后致双下肢运动障碍21年”入院,根据专科查体及胸椎MRI辅助检查,诊断为缺血性脊髓损伤(T11以下)。以T11脊突为中心作纵切口,长约3cm,选择萎缩脊髓与正常脊髓之间无血管区分别注射嗅鞘细胞0.5×109L-1。止血,缝合,切口包扎固定,给予常规抗生素治疗。术后14d,皮温稍有升高,给予针灸及康复治疗。针灸选穴为:百会,印堂,合谷,中极,关元,髀关,风市,伏兔,犊鼻,足三里,血海,阴陵泉,三阴交,解溪,太溪,复溜,太冲,申脉。平补平泻,留针30min。康复治疗:给予点按穴位,推拿肌肉萎缩肢体部位,蹬自行车,强制站立等康复训练。治疗2周后,患者皮温升高,以右腿升高明显。下肢排汗量减少,体力增强,行走3000m无疲劳感。表明嗅鞘细胞移植后,结合针灸、按摩及各种康复训练,对晚期脊髓损伤神经进一步的症状恢复和改善肌肉萎缩状态有一定意义。     

人胚胎嗅鞘细胞植入鼠半横断脊髓对脊髓轴突再生的影响

目的:嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs)植入脊髓后可促进再生的轴突长入远段脊髓,观察人胚胎嗅鞘细胞移植对成鼠脊髓轴突再生的影响。方法:实验于2003-04/2004-10在中山大学第二附属医院实验中心脐血库完成。20只清洁级雌性SD大鼠被随机分为两组,实验组10只,将分离、纯化、培养2周的人胚胎OECs,移植于大鼠半横断胸髓(T10)的两端;对照组10只同样方法给予等量的DMEM。6周后组织切片,行苏木精-伊红染色、嗜银染色以及髓鞘碱性蛋白(MBP)和抗神经生长因子受体抗体(NGFR)免疫组化检查。结果:OECs移植组6周后脊髓大体标本显示初步愈合现象;组织学观察,OECs呈NGFR阳性表达,显示OECs仍然存活,且与宿主组织整合良好;部分再生轴突长入断端间组织,呈MBP阳性表达。结论:人胚胎OECs对成鼠胸髓损伤后的轴突再生有促进作用。     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的临床研究现状

目的:对嗅鞘细胞生物学特性、培养纯化、嗅鞘细胞移植的可能机制及嗅鞘细胞移植在临床的应用等方面进行分析,介绍嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究现状.资料来源:以olfactory ensheathing cells,spinal cord injury,嗅鞘细胞,脊髓损伤为检索词检索PubMed数据库(2000/2009),中国期刊全文数据库(2000/2009).资料选择:纳入标准:①文章所述内容应与嗅鞘细胞及脊髓损伤密切相关.②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章.排除标准:①重复性研究.②Meta分析.结局评价指标:嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展.结果:嗅鞘细胞具有与许旺细胞和星形胶质细胞相似的特征.目前嗅鞘细胞移植的动物实验主要致力于提高轴突再生能力、替代细胞成分、阻止脱髓鞘病变和促进髓鞘再生等方面,移植的嗅鞘细胞具有促进感觉及运动功能恢复的客观结果,有些移植研究甚至已经进入了临床试验阶段.不过嗅鞘细胞移植由动物实验转化到临床应用还受到很多因素的影响,诸如移植剂量、细胞生长因子的活力,细胞移植的风险等,尤其是嗅鞘细胞移植后的近期及远期效果还需要进一步深入研究、评价,并且需要长时间的随访.有研究已经把用基因转染的嗅鞘细胞用于移植,在动物试验身上已经取得了满意的效果.结论:随着基因工程技术发展以及嗅鞘细胞移植修复神经机制的深入研究,嗅鞘细胞移植必将为临床治疗脊髓损伤的患者带来康复的希望.     

嗅鞘细胞静脉移植治疗脊髓损伤

背景：嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤在众多疗法中效果较佳,成为最有前景的治疗方法之一。目前移植方法为局部移植,存在操作复杂、创伤大、重复移植治疗困难等缺点。寻找一种简单易行且疗效好的移植方法成为各国学者研究的热点。目的：分析嗅鞘细胞静脉移植治疗脊髓损伤的可行性和疗效。方法：制备Wistar大鼠脊髓半切模型,随机分4组：嗅鞘细胞髓内局部移植组、嗅鞘细胞静脉移植组、D/F12静脉移植组和空白对照组。定期行CBS功能评分及组织学检查,评价脊髓修复情况。结果与结论：嗅鞘细胞髓内局部移植组、嗅鞘细胞静脉移植组的功能恢复和组织学改变优于D/F12静脉移植组和空白对照组,嗅鞘细胞髓内局部移植组、嗅鞘细胞静脉移植组间无显著差别。说明嗅鞘细胞静脉移植可向脊髓损伤部位迁移并修复脊髓损伤,其疗效与嗅鞘细胞髓内局部移植相当。     

嗅鞘细胞静脉移植治疗脊髓损伤(英文)

背景:嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤在众多疗法中效果较佳,成为最有前景的治疗方法之一。目前移植方法为局部移植,存在操作复杂、创伤大、重复移植治疗困难等缺点。寻找一种简单易行且疗效好的移植方法成为各国学者研究的热点。目的:分析嗅鞘细胞静脉移植治疗脊髓损伤的可行性和疗效。方法:制备Wistar大鼠脊髓半切模型,随机分4组:嗅鞘细胞髓内局部移植组、嗅鞘细胞静脉移植组、D/F12静脉移植组和空白对照组。定期行CBS功能评分及组织学检查,评价脊髓修复情况。结果与结论:嗅鞘细胞髓内局部移植组、嗅鞘细胞静脉移植组的功能恢复和组织学改变优于D/F12静脉移植组和空白对照组,嗅鞘细胞髓内局部移植组、嗅鞘细胞静脉移植组间无显著差别。说明嗅鞘细胞静脉移植可向脊髓损伤部位迁移并修复脊髓损伤,其疗效与嗅鞘细胞髓内局部移植相当。     

人胚胎嗅鞘细胞与神经干细胞联合移植修复大鼠脊髓全横断损伤的研究

目的：探索人胚胎嗅鞘细胞（hOECs）与神经干细胞（hNSCs）联合移植修复大鼠脊髓全横断损伤的可行性。方法：制作Wismr大鼠脊髓全横断模型，9-10d后，分别将取材自人胎脑的hOECs和hNSCs移植到脊髓损伤处（联合移植组），并设hOECs移植组、hNSCs移植组和对照组，移植术后第1、2、4、6、8、10周进行BBB运动功能评分．取材行荧光化学（Hoechst33342）和免疫组织化学染色（P75、NF-200、GFAP、Synaptophysin）观察。结果：术后4-10周．hNSCs组、hOECs组和联合移植组的BBB评分较对照组明显提高（P〈0．05），其中，联合移植组的运动功能改善更显著。免疫组化染色显示，hNSCs可以在损伤脊髓内存活10周以上。并分化为神经元或星形胶质细胞．联合移植组和hOECs组P75染色呈阳性反应。hOECs与hNSCs联合移植可促进神经突触的形成，恢复神经元之间的联系。结论：hOECs和hNSCs联合移植可促进脊髓全横断损伤大鼠神经突触的再生．改善其肢体运动功能。     

嗅鞘细胞移植脊髓损伤大鼠NG2的表达

背景: 对于脊髓损伤,目前临床尚无有效的治疗对策,近年来嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤修复取得了一定的进展.NG2是主要的硫酸软骨素蛋白多糖分子,对轴突有抑制作用.目的: 观察嗅鞘细胞移植对脊髓损伤大鼠NG2表达的影响,进一步分析嗅鞘细胞移植在修复脊髓损伤中的作用途径.方法: 将112只大鼠随机分为4组,空白组、模型组、嗅鞘细胞移植组及DF12组各28只.空白组仅切开T10全椎板及T9,T11部分椎板,对脊髓未作其他处理;其他3组应用脊髓横切法制作脊髓损伤动物模型.嗅鞘细胞移植组进行嗅鞘细胞移植,每侧断端植入20 000 cells;DF12组于相同部位注射DF12培养液.在大鼠脊髓损伤后1,3,7,14,28,42和56 d时,取材按照SP试剂盒的操作步骤检测NG2的表达.结果与结论: 空白组NG2呈低表达,在模型组、DF12组脊髓损伤24 h后损伤部位的NG2的表达开始升高,7 d时达到顶点,4周时NG2表达明显降低,6,8周时仅在局部有所表达.嗅鞘细胞移植组脊髓损伤1 d时NG2表达开始增加,主要在损伤部位,在各时间点与模型组、DF12组相比NG2表达水平明显降低,但高于空白组NG2各时间点的表达.提示嗅鞘细胞移植后NG2的表达水平降低,嗅鞘细胞具有抑制NG2表达的作用,可消除或减轻细胞外基质中对轴突有抑制作用的化学屏障,这可能是其治疗脊髓损伤促进轴突再生的机制之一.     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的临床验证

背景:一系列基础研究证实在动物脊髓损伤的模型中,嗅鞘细胞移植能够促进脊髓损伤的再生和恢复脊髓的部分神经功能.部分临床实验证明嗅鞘细胞的移植的确能改善脊髓损伤患者的神经功能,从而改善其生活质量.目的:验证嗅鞘细胞移植对脊髓损伤患者神经功能修复的作用及安全性.方法:取流产胚胎嗅球并消化成为单个嗅鞘细胞,培养纯化2周左右,制成嗅鞘细胞悬液.选择脊髓损伤患者213例,全麻下将制备好的嗅鞘细胞悬液采用区域性多靶点注射方法移植于损伤脊髓的周围.采用ASIA量表对患者移植前1d及移植后3周～2个月进行评分,评价患者脊髓恢复状况.结果与结论:所有患者的脊髓神经功能于术后3周均有不同程度的改变,脊髓功能评分及感觉与运动功能均较移植前明显提高(P<0.001),且随时间延长呈不断改善趋势;最长患者随访5年,未见已恢复的神经功能减退及移植不良反应.证实嗅鞘细胞移植对脊髓损伤患者的神经功能恢复有促进作用,可以部分恢复及改善其部分脊髓神经功能,且治疗方法安全.     

胚胎嗅鞘细胞再移植治疗晚期脊髓损伤1例

目的:对晚期脊髓损伤患者开展嗅鞘细胞再移植治疗,探讨其对神经功能的继续改善效果。方法:①患者男性,27岁,哈萨克斯坦籍,2001年9月20日遭霰弹枪击急诊手术后,双下肢不能运动及感觉消失,尿便失禁,右下肢阵发性钝痛。诊断为陈旧性完全性脊髓损伤(T12),美国脊髓损伤协会标准脊髓功能分级为A级。2002年9月30日第1次行脊髓胚胎嗅鞘细胞移植术,2007年2月5日行第2次脊髓胚胎嗅鞘细胞移植术。治疗方案患者知情同意。②取4个月流产胚胎(孕妇及其家属均知情同意)的嗅球,消化成单个嗅鞘细胞后培养2周,细胞浓度约2×1010L-1。于患者相应脊髓损伤上端(平T11椎体)做1个锁孔,直径约3cm,在脊髓损伤部位与正常脊髓交界处沿中线于无血管区,分两点用4.5号细针共注入100μL(第1次手术)、50μL(第2次手术)嗅鞘细胞悬液,细胞数均为1×106个。第2次移植术前进行供、受体细胞HLA配型,术后口服FK506胶囊2mg,2次/d,共42d。结果:①第1次术后3个月,排尿能控制6h,双足运动功能改善,性功能改善,阴茎勃起功能改善,疼痛减轻。②第2次术后10d,双下肢双足皮肤泌汗功能改善,右下肢疼痛减轻,腹部皮肤感觉稍有好转,针刺觉左侧由术前T10皮节消失好转至T10减退。较第2次移植前椎旁躯体感觉诱发电位有所改善,双侧椎旁电位从T10下降到T12。结论:胚胎嗅鞘细胞二次移植能继续改善晚期脊髓损伤患者的神经功能。但移植的细胞数量、容积、注射点位置等需深入探讨。     

嗅鞘细胞移植对脊髓损伤后神经元凋亡的影响

目的:了解嗅鞘细胞移植对脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响,探讨嗅鞘细胞治疗脊髓损伤的机制。方法:成年动物脊髓半切损伤模型,进行嗅鞘细胞和培养液移植,在伤后1～14d,应用苏木精-伊红和TUNEL法观测神经细胞存活和细胞凋亡变化。结果:脊髓半切后,神经元数目随时间下降。伤侧和对侧分别在伤后1d和2d,出现以神经元为主的凋亡高峰。7d出现以胶质细胞为主的凋亡高峰,14d凋亡下降。嗅鞘细胞移植可明显降低脊髓损伤后神经细胞凋亡,促进神经细胞存活。结论:脊髓损伤后嗅鞘细胞移植有对抗神经细胞凋亡作用。