自体树突细胞联合细胞因子诱导杀伤细胞过继治疗复发难治性骨髓瘤26例

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的主要治疗手段为化疗,但其完全缓解率低,毒副反应大。目前,以树突细胞(DC)和细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)为基础的过继免疫已成为MM治疗的研究热点。本课题组尝试将负载自体抗原(Ag)的DC联合CIK治疗复发难治性MM,取得了较为理想的效果,现报告如下。     

细胞因子诱导的杀伤细胞在早期肾癌术后治疗中的应用

目的观察早期肾癌根治术后行自体细胞因子诱导的杀伤（cytokine induced killer,CIK）细胞治疗的临床疗效。方法选取解放军总医院2009年期间Ⅰ、Ⅱ期肾癌术后患者40例,治疗组20例采自体外周CIK细胞血进行CIK细胞扩增,采取静脉回输方法治疗;对照组20例术后未行其他治疗。观察CIK细胞培养前后细胞表型情况, 对比治疗前及治疗后4周、24个月外周血T淋巴细胞亚群变化,记录不良反应情况、疗效和生活质量评定。结果CIK细胞培养后可见CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞较培养前显著增加（P＜001）;治疗后外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+较治疗前升高（P＜001）。治疗组20例：19例完全缓解,1例进展, 患者治疗后生活质量提高,均无明显不良反应出现,疾病控制率95%;对照组20例:13例完全缓解,7例进展,疾病控制率65%（P＜005）。结论自体CIK细胞治疗可以提高患者的免疫功能,延缓和阻止早期肾癌术后患者肿瘤的复发或转移,延长无病生存期,提高生活质量。     

自体树突细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞治疗转移性肾癌的疗效分析及随访观察

目的 评价自体树突细胞(DC)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)治疗转移性肾癌的临床疗效、免疫功能变化及随访结果.方法 采集27例转移性肾癌患者的外周血单个核细胞(PBMC),经实验室体外培养诱导产生DC和CIK细胞,经无菌检测、流式细胞术表型鉴定及细胞计数后回输给患者.于第7、9、11、13天皮下注射DC,第11、13天静脉回输CIK,每疗程间隔3个月,直至疾病进展,观察临床疗效及免疫功能的变化.结果 27例转移性肾癌患者经DC-CIK治疗后的客观反应率为37％,疾病控制率为85％,2年总生存率为81.5％.与治疗前比较,治疗后患者外周血CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+、CD3+CD19-、CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+、CD3+CD 16+CD56+、CD3+HLA-DR、CD3+HLA-DR+、CD3+CD28+CD8+细胞亚群及Th2细胞无显著变化(P＞0.05),Th1细胞有升高趋势(P＜0.05),多次治疗后CD3+CD4+CD25+T细胞(即调节性T细胞,Treg细胞)有降低的趋势(P＜0.05).治疗过程中27例患者均未出现明显不良反应.结论 DC-CIK细胞免疫治疗为转移性肾癌患者提供了一种新的安全有效的治疗方法,可改善转移性肾癌患者的免疫抑制状态,提高患者的抗肿瘤免疫反应,无明显不良反应.     

树突状细胞和细胞因子诱导杀伤细胞联合白介素2治疗肾癌临床观察

目的 观察树突状细胞(dendritic cells,DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)联合白介素-2(interleukin-2,IL-2)治疗肾癌的疗效.方法 回顾性分析2005年7月至2011年6月间60例肾癌术后患者,分离外周血单核细胞,体外诱导生成DC细胞;T淋巴细胞体外诱导生成CIK细胞.患者在切除原发病灶后,接受DC+CIK细胞免疫治疗,并给予IL-2静滴21 d.免疫学反应和临床疗效分别通过淋巴细胞亚群分析、影像学检查进行评估.结果 治疗后患者外周血细胞毒T细胞、NK细胞、NKT细胞百分比较治疗前增高,差异有统计学意义.42例Ⅰ～Ⅲ期行根治性肾切除术患者,2例失访,1例复发,余未见复发、转移,随访时间7～67个月,中位随访时间16个月;18例Ⅳ期行姑息性肾切除患者中1例失访,随访的17例中1例CR,3例PR,8例SD,5例PD,随访时间6～66个月,中位随访时间15个月,无显著不良反应出现.结论 DC+CIK联合IL-2治疗能够增强肾癌术后患者的免疫功能,降低根治性切除术后肿瘤的复发率,并且对于转移性肾癌的治疗也显现一定的疗效,耐受性良好.     

树突状细胞联合细胞因子诱导杀伤细胞治疗晚期恶性肿瘤的护理

近年来,生物学方法应用于临床治疗恶性肿瘤逐渐显现出较好的疗效。树突状细胞（dendriticcell,DC）是体内免疫系统最强大的抗原递呈细胞,在抗原摄取、加工和提呈中起关键作用;抗原刺激后的DC在体内既可以诱发免疫记忆,还可增强机体的非特异性免疫应答。细胞因子诱导杀伤细胞（cytokine—inducedkiller,CIK）是一种杀瘤活性高、广谱的非主要组织相容性复合体（majorhisto-compatibilitycomplex,MHC）限制性免疫效应细胞。两者的联合能有效地抑制和杀死肿瘤细胞,     

CIK细胞对人原发性胃恶性淋巴瘤生长及肝转移的抑制作用

目的 建立人原发性胃恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植肝转移模型,探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对胃恶性淋巴瘤生长及其肝转移的抑制作用.方法 取原发性胃恶性淋巴瘤患者手术切除的新鲜组织标本,采用外科原位移植技术移植到裸小鼠胃壁黏膜下层,建立人原发性胃恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植肝转移模型.应用采血机分离出健康人、胃恶性淋巴瘤患者外周血单个核细胞(PBMC),进行体外培养,通过加入重组人干扰素-γ(rhIFN-γ)、重组人白细胞介素-2(rhIL-2)和抗CD3单克隆抗体(anti-CD3 McAb)刺激,分别制备出CIK细胞和淋巴因子活化的杀伤细胞(LAK).用CIK和LAK细胞实验治疗胃恶性淋巴瘤,对比观察不同来源的两种免疫效应细胞抑制其生长及肝转移的疗效.结果 成功建立了人原发性胃恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植肝转移模型.在连续给药20天(0.3ml/d)后,健康人LAK细胞组(2×1010/ml)、健康人CIK细胞组(2×1010/ml)、胃淋巴瘤患者CIK细胞组(1×1010/ml)和胃淋巴瘤患者CIK细胞组(2×1010/ml)的抑瘤率分别为39.28%、53.57%、40.38%、56.42%.生理盐水对照组、健康人LAK细胞组、健康人CIK细胞组、胃淋巴瘤患者CIK细胞组(1×1010/ml)和胃淋巴瘤患者CIK细胞组(2×1010/ml)的肝转移率分别为100.0%、62.5%、50.0%、62.5%、37.5%.结论 人原发性胃恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植肝转移模型可用于胃恶性淋巴瘤的发病机制、侵袭、转移及实验治疗的研究.健康人LAK细胞、健康人CIK细胞和胃恶性淋巴瘤患者CIK细胞均具有抑制胃恶性淋巴瘤生长和抗肝转移的作用,且患者来源的CIK细胞抗瘤作用最强.     

树突状细胞联合细胞因子介导杀伤细胞免疫治疗肾癌临床研究

目的:探讨以树突状细胞(dendritic cells,DC)联合细胞因子介导杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)为基础的免疫途径治疗恶性实体肿瘤的临床疗效.方法:将60例临床确诊的肾透明细胞癌患者随机分为两组:治疗组给予手术联合细胞免疫治疗,对照组给予手术及细胞因子治疗.采集肿瘤患者的外周血单核细胞,体外诱导培养成熟DC及CIK细胞,最后再回输给患者.观察疗效和治疗前后细胞免疫指标变化(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、NK细胞)、外周血象、肝肾功能变化(白细胞、转氨酶、尿素氮、肌酐)及不良反应.结果:治疗组有效率43.33%,对照组有效率26.67%,治疗组与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+免疫学指标治疗前后比较,差异有统计学意义(P值分别为0.010,0.026,0.021),治疗组细胞免疫学指标(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)在治疗前后变化与对照组相比,结果差异有统计学意义(P值分别为0.001,0.023,0.012).两组患者外周血象及肝肾功能检测无异常,免疫治疗过程中未出现明显的毒副作用.结论:以DC、CIK细胞为基础的细胞免疫治疗可以明显改善肾癌术后患者临床疗效,提高外周血淋巴细胞亚群及NK细胞水平,临床应用无明显不良反应,是肾癌术后重要的辅助治疗手段.     

细胞因子诱导杀伤细胞在动物体内的分布

目的 观察细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞在动物体内分布的特点.方法 99Tcm标记CIK细胞采用亚锡还原法.昆明种小白鼠40只,按随机数字表法分为8组,每组5只,进行小鼠体内分布实验,计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g).新西兰家兔3只行动态显像,连续观察99Tcm-CIK细胞体内分布图像特点.结果 分离纯化后99Tcm-CIK细胞的放化纯＞95%,室温下6 h内保持稳定.小白鼠体内99Tcm-CIK细胞血液清除较快,观察到血液中1和24 h的再分布现象.99Tcm-CIK细胞主要分布于肺、肝、脾和肾,心脏、脑、骨骼和肌肉等其他脏器组织均分布较少.家兔动态显像示99Tcm-CIK细胞早期分布以肺为主,随时间延长肺内放射性逐渐减少,肝放射性逐渐增多,并超过肺部放射性,2 d后仍可见肝放射性浓聚.心脏、脑、骨骼和肌肉等其他脏器组织均未见明显放射性分布.结论 99Tcm-CIK细胞在血循环中滞留时间较短,注射后1 h内主要聚集于肺,随后肺的摄取逐渐减少,其主要浓聚于肝和脾,尤以肝为甚.     

细胞因子激活的杀伤细胞联合放化疗治疗直肠癌术后1例

直肠癌是常见的恶性肿瘤,常规治疗是手术后结合放疗和化疗。本例患者在手术后放化疗基础上早期接受了细胞因子激活的杀伤细胞输注治疗,不仅减轻了放化疗的不良反应,而且提高了生活质量,随访5年依然状况良好。     

旋转式生物反应器培养细胞因子诱导的杀伤细胞研究

目的采用旋转式生物反应器（rotating wall-vessel bioreactor,RWV）与传统的T-Flask培养瓶培养人外周血细胞因子诱导的杀伤（cytokine-induced killer,CIK）细胞,比较CIK细胞的增殖能力、细胞因子分泌情况、细胞杀伤力。方法提取健康志愿者的外周血,分离出外周单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,体外诱导成CIK细胞,分别接种到T-Flask培养瓶及RWV中培养。采用台酚蓝染色法检测细胞活率并绘制其生长曲线;ELISA法检测各组CIK细胞的IL-2,IFN-γ,TNF-α分泌情况;乳酸脱氢酶测定法检测CIK细胞对靶细胞的杀伤力。结果与传统的T-Flask培养瓶培养CIK细胞比较,RWV培养CIK细胞增殖数量明显多且生长力旺盛;使用RWV培养CIK细胞能使其分泌更多的IL-2,IFN-γ,TNF-α细胞因子;RWV组培养的CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤力更强。结论RWV培养CIK细胞更能提高其增殖能力、细胞因子分泌能力及肿瘤杀伤活力,同时可解决传统细胞培养数量少、稳定性差、易污染、工作量大及周期长等问题,有效地降低临床治疗成本。     

内皮抑素对裸鼠肺癌生长和转移的抑制作用

目的:观察内皮抑素(Endostatin,ES)对裸鼠肺癌生长和转移的抑制作用.方法:将胸腔内接种了H460大细胞肺癌的裸鼠随机分成实验组和对照组.分别给予ES和等体积PBS皮下注射,共20 d.测量瘤重,计算动物生存率,测定动物血液中基质金属蛋白酶2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达情况.结果:对照组瘤重均高于实验组(P＜0.05);对照组裸鼠死亡时间均较实验组早;实验组动物血液中MMP-2的表达明显低于对照组.结论:ES可抑制肺肿瘤生长和转移,其作用机制之一与抑制MMP-2的表达活性有关.     

DC-CIK联合替吉奥治疗老年晚期胃癌的临床观察

目的观察DC-CIK联合替吉奥治疗老年晚期胃癌的近期疗效和不良反应。方法将49例老年晚期胃癌患者随机分为两组。联合组(n=25):采用替吉奥胶囊联合DC-CIK治疗。单药组(n=24):采用单药替吉奥治疗。根据EORTC QLQ-C30生活质量问卷分析两组患者生活质量上的差异,并观察两组疗效。结果两组疗效相似,无统计学差异(P>0.05),联合组患者的躯体功能和总生活质量得到了改善,包括食欲、睡眠、疲乏、恶心、呕吐,且CEA、CA242较单药组下降更为明显(P<0.05)。结论 DC-CIK联合替吉奥治疗老年晚期胃癌疗效确切,且能改善患者的生活质量,使症状和体征改善,显著降低血清中系列肿瘤标记物的水平。     

乙型肝炎病毒表面抗原对实体肿瘤患者CIK细胞诱导培养及表型分析的影响

目的探讨乙型肝炎病毒表面抗原阳性患者与阴性患者细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine induced killer cells,CIK）体外培养过程中个细胞增殖情况和淋巴细胞亚群的变化。方法选取海军总医院2012年10月-2013年6月住院的肿瘤患者,共50例,根据乙型肝炎病毒表面抗原表达情况分为阴性组和阳性组。分别抽取患者外周血进行CIK细胞诱导培养,在第1、5、7、9、11、13、15天进行细胞活力检测并计数,第5、7、10、13、15天进行各细胞亚群的表达分析。结果两组患者CIK增殖情况单个时间点比较无显著性差异,但是在第15天的增殖倍数阳性组显著高于阴性组（280倍比180倍）;细胞亚群分析中CD3+T细胞、CD8+T细胞、CD3+CD8+T细胞、CD3+CD56+T细胞比例均随培养时间延长而升高,CD4+T细胞、CD3+CD4+T细胞随培养时间延长而降低,阳性组更显著;其中CD8+T细胞和CD3+CD4+T细胞在两组间比较差异有统计学意义（P<005）。结论乙型肝炎病毒表面抗原阳性患者CIK细胞较阴性患者扩增能力更强,效应细胞表型表达更有利于杀伤作用的发挥。     

CT of primary lymphoma of the liver

Primary lymphoma of the liver is a rare disease. In each of six cases, a large, often poorly defined mass of low attenuation was present within the liver. Four lesions originated in the right lobe and two originated in the left lobe. Satellite nodules were seen at presentation in one case and developed after presentation in two others. Other features, such as enhancement after contrast administration, necrosis, and calcification, were variable. Three of six lesions had areas of very low density, suggestive of necrosis. One mass had calcifications. After IV contrast administration, no enhancement occurred in three tumors, patchy enhancement occurred in two, and an enhancing ring was seen in the remaining tumor. The radiologic presentation of primary lymphoma of the liver differs from that of secondary involvement of the liver in systemic lymphoma. Whereas secondary lymphoma is often diffusely infiltrative and difficult to detect on CT, the lesions of primary lymphoma of the liver are easily identified on CT scans even before the administration of IV contrast material. Although rare, primary lymphoma of the liver should be included in the differential diagnosis of a large, hypodense liver mass on CT.     

Imaging of primary non-Hodgkin's lymphoma of the liver

AIM: To describe the radiological findings in primary liver lymphoma, which is a rare entity, presenting usually as a localized liver mass. MATERIALS AND METHODS: We reviewed retrospectively the imaging findings at presentation, of patients in whom a diagnosis of primary liver lymphoma was finally made histologically. The study period covered a 10-year period between January 1990 and December 1999. There were seven patients, all men, with a mean age of 49.6 years. Each patient presented with hepatobiliary disease without peripheral adenopathy. Imaging prior to diagnosis included ultrasonography (seven patients), computed tomography (seven patients) and magnetic resonance imaging (MRI) (two patients). Appearances during and after aggressive chemotherapy were reviewed. RESULTS: Imaging appearances were of either single or multiple liver lesions simulating liver metastases. On ultrasound all foci of primary hepatic lymphoma (PHL) were hypoechoic relative to normal liver. Computed tomography (CT) showed hypoattenuating lesions in all cases, and two cases showed rim enhancement following contrast administration. The MRI appearances were variable, and no pathognomonic feature of PHL was identified, so that histology was required in all patients to establish the diagnosis. CONCLUSIONS: This paper demonstrates the spectrum of findings encountered on various imaging modalities in PHL. We conclude that although PHL is a rare condition, it should always be considered in the differential diagnosis of liver metastases when no primary tumour is apparent.     

微小核糖核酸-7调控表皮细胞生长因子受体对肝癌细胞增殖和转移的影响

目的 探讨微小核糖核酸(miR)-7是否通过靶向调控表皮细胞生长因子受体(EGFR)对人肝癌细胞侵袭和增殖产生影响.方法 传代培养HepG2人肝癌细胞,脂质体转染miR-7后使其表达上调或下调.荧光定量聚合酶链反应检测转染效率.蛋白印迹法检测miR-7上调或下调后肝癌细胞EGFR表达变化.溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)法检...