可溶性DLL1检测在结核性脑膜炎早期诊断中的价值探讨

目的 探讨脑脊液(CSF)及血清中可溶性Delta-Like-Ligand 1 (DLL1)的检测对结核性脑膜炎(结脑)早期诊断的临床意义. 方法 选取郑州大学第一附属医院神经内科自2008年12月至2011年3月收治的CNS感染性疾病患者110例,其中结脑患者50例、病毒性脑(膜)炎(病脑)患者30例、化脓性脑膜炎(化脑)20例、隐球菌脑膜炎(隐脑)10例,另正常对照组30例.ELISA法测定各组受试者入院后CSF、血清中可溶性DLL1的含量,动态观察结脑组患者治疗后不同时间CSF中DLL1的含量并分析DLL1含量与CSF蛋白、细胞数的相关性. 结果 与病脑组、化脑组、隐脑组、正常对照组比较,结脑组患者CSF、血清中DLL1的含量增高,差异有统计学意义(P＜0.05),而病脑组、化脑组、隐脑组与正常对照组之间相比差异无统计学意义(P＞0.05).治疗好转的14例结脑患者CSF中DLL1含量在第2、4、6周逐渐降低,而治疗加重的4例患者CSF中可溶性DLL1含量第1、2(4)、6周逐渐升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).结脑患者CSF中DLL1的含量与CSF蛋白、细胞数均无明显相关关系. 结论 CNS感染时结脑患者的CSF和血清中可溶性DLL1的含量显著增高,对于结脑的早期鉴别诊断具有重要参考意义.     

结核性脑膜炎脑脊液免疫学诊断

结核性脑膜炎（tuberculous meningitis,TBM）是一种病死率和致残率很高的中枢神经系统感染性疾病,临床表现缺乏特异性,病情变化迅速,早期诊断困难。近年来,TBM的脑脊液（CSF）免疫学诊断以其极高的敏感性和特异性得到迅速发展,临床应用前景广阔。现就TBM的CSF免疫学诊断做一综述。     

脑脊液腺苷脱氨酶检测对结核性脑膜炎诊断的价值

目的探讨脑脊液腺苷脱氨酶（ADA）检测对结核性脑膜炎诊断的价值。方法对27例结核性脑膜炎患者及68例非结核性脑膜炎患者进行脑脊液ADA活性检测及分析。结果结核性脑膜炎组ADA活性范围明显高于非结核性脑膜炎组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论脑脊液腺苷脱氨酶活性升高可作为结核性脑膜炎诊断的一个重要辅助指标。     

结核性脑膜炎脑脊液检测项目研究的进展

结核性脑膜炎 (ＴＢＭ)是中枢神经系统常见的感染性疾病 ,其预后取决于早期诊断和及时治疗。ＴＢＭ的诊断 ,除临床症状、体征外 ,脑脊液 (ＣＳＦ)的实验室检测极其重要。现将近年来有关ＣＳＦ检测项目在ＴＢＭ诊断的进展综述如下。1　细胞学检查ＴＢＭ的ＣＳＦ细胞学改变具有一定的规律性特征 ,许多学者主张将其细胞学列为ＴＢＭ的常规检查项目。ＴＢＭ的ＣＳＦ细胞学的特点是以嗜中性粒细胞为主伴一定数量的免疫活性细胞 (小淋巴细胞、淋巴样细胞和浆细胞 )和单核吞噬细胞的混合细胞反应 ,亦可见到嗜酸性粒细胞。尽管持续抗结核治疗 ,ＣＳ…     

脑脊液单核细胞内ESAT-6检测对结核性脑膜炎的诊断意义

目的评价检测脑脊液中单核细胞内的早期分泌性抗原靶6(ESAT-6)对结核性脑膜炎诊断的意义,为结核性脑膜炎的诊断提供有效的方法。方法将20例结核性脑膜炎患者与20例对照组患者进行脑脊液常规、生化、细胞学检查,同时用免疫组化的方法检测脑脊液单核细胞内的ESAT-6及PPD。结果结核性脑膜炎患者单核细胞内存在ESAT-6,在20例结核性脑膜炎患者中14例显示阳性,对照组中1例阳性,结核性脑膜炎组单核细胞内ESAT-6阳性检出率显著高于对照组,(P<0.05),该方法诊断结核性脑膜炎敏感性为70%,特异性为95%,约登指数0.65。结核性脑膜炎组单核细胞内PPD阳性检出率显著高于对照组,(P<0.05),敏感性为0.65,特异性为0.90,约登指数为0.55。结论检测脑脊液单核细胞中ESAT-6是诊断结核性脑膜炎的一种简便、特异的方法 。     

结核性脑膜炎治疗前后脑脊液动态变化的研究

目的探讨结核性脑膜炎（TBM）治疗前后脑脊液（CSF）的变化及其对临床诊断的意义。方法回顾性分析2009-2011年南京脑科医院确诊的42例TBM患者治疗前、治疗后1周及治疗后2周CSF各指标的动态变化。结果与治疗前比较,治疗后第二周CSF各指标大部分有显著变化（P〈0.05）。治疗后第2周CSF各指标较治疗后第1周虽有变化,但大部分无明显差异,仅中性粒细胞百分比、免疫白蛋白及免疫球蛋白两项指标差异明显（P〈0.05）。结论TBM治疗前后CSF各指标变化明显,对于诊断有重要参考意义。     

结核蛋白芯片检测脑脊液中抗体对结核性脑膜炎诊断价值

目的探讨结核分枝杆菌蛋白芯片检测脑脊液中结核抗体诊断结核性脑膜炎的应用价值。方法应用结核蛋白芯片检测30例临床诊断结核性脑膜炎患者脑脊液及血清标本,30例非结核性脑膜炎患者脑脊液标本,并对实验结果进行分析评价。结果结核芯片法检测脑脊液敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为63.33%、96.67%、95.00%、72.50%、60.00%,结核芯片法检测血清性为66.67%。比较结脑组脑脊液及血清阳性率,差异无统计学意义(χ2=0.073,P=0.787,P>0.05)。结论结核蛋白芯片检测脑脊液可以成为结核性脑膜炎诊断的辅助检查,且具有快速、简便、经济等优点。     

结核性脑膜炎358例脑脊液分析

目的探讨结核性脑膜炎(TM)患者的脑脊液(CSF)变化特点及诊断价值。方法收集河南省传染病医院2005-06—2012-06收治的358例TM患者的临床资料,同时包括CSF检查结果,对CSF的变化特点进行分析和评估。结果 358例TM患者中,颅内压升高226例,蛋白升高308例,核细胞数升高40例,葡萄糖含量降低297例,氯化物降低283例。结论 CSF检测有助于TM的确诊及预后判断。     

脑脊液淋巴样细胞检出对结核性脑膜炎早期诊断价值

目的：为了使脑脊液细胞学检查能对结核性脑膜炎提供早期诊断依据。方法：用侯氏法收集脑脊液细胞,对７８例结核性脑膜炎与８５例其它中枢神经系统感染患者脑脊液细胞学结果经分析。结果：结核性脑膜炎脊液中淋巴样细胞和浆检出阳性率分别为９５％和６２％,而毒性脑膜炎则为７３％和４９％、隐球菌性脑膜炎为５０％和３３％、寄生虫性脑膜炎为５６％和３１％、化脓性脑膜炎为２５％和１３％,均明显低于结核性脑膜炎、结论：脑脊液     

脑脊液中检测结核分枝杆菌特异性抗原对结核性脑膜炎的诊断意义

目的 应用改进的斑点酶联免疫吸附法(Dot ELISA)检测脑脊液中结核分枝杆菌特异性抗原培养滤液蛋白10(CFP10)和6000早期分泌性抗原靶(ESAT-6),评价其在结核性脑膜炎(TBM)中的诊断价值.方法 收集111例患者的脑脊液,其中58例临床诊断为TBM,53例非TBM,应用Dot ELISA法分别检测脑脊液中CFP10和ESAT-6并进行分析.结果 检测CFP10抗原的敏感度为93.1%,特异度为92.5%;检测ESAT-6抗原的敏感度为91.4%,特异度为94.3%.两项检测的敏感度和特异度均普遍高于针对结核分枝杆菌菌体或菌体物质进行检测的同类研究,如抗酸染色、结核分枝杆菌培养、聚合酶链反应等.结论 应用改进的Dot ELISA法检测脑脊液中CFP10和ESAT-6对诊断TBM有很高的敏感度和特异度,为结核分枝杆菌特异度抗原用于临床结核病诊断提供了依据.

Abstract：

Objective To evaluate the detection of culture filtrate protein 10 (CFP10) and 6000 early secretory antigenic target (ESAT-6) in cerebrospinal fluid to be used in diagnosing tuberculous meningitis. Methods Dot enzyme linked immunosorbent assay ( Dot ELISA) method that was improved by applying concentrated cerebrospinal fluid was used to detect CFP10 and ESAT-6 in cerebrospinal fluid to analyze small protein antigen secreted by M. tuberculosis. Cerebrospinal fluid of 111 subjects were collected,in which 58 specimens were clinically diagnosed as tuberculous meningitis and 53 as non-tuberculous.CFP10 and ESAT-6 were detected in cerebrospinal fluid using Dot ELISA method and the results were analyzed. Results The sensitivities of detecting CFP10 and ESAT-6 antigen were 93.1% and 91.4% respectively, and the specificities were 92. 5% and 94. 3% respectively. The sensitivities and specificities are generally higher compared with the other methods of detecting M. tuberculosis or materials of M. tuberculosis by acid-fast staining or mycobacterium tuberculosis culture and polymerase chain reaction.Conclusions Using Dot ELISA method to detect CFP10 and ESAT-6 in cerebrospinal fluid to diagnose tuberculous meningitis has a high sensitivity and specificity. Our study provided the evidence of detecting the specific antigen of M. tuberculosis to be used in diagnosing tuberculosis.     

Levels of soluble delta-like ligand 1 in the serum and cerebrospinal fluid of tuberculous meningitis patients

In this study,the levels of soluble delta-like ligand 1 in cerebrospinal fluid and serum of 50 patients with tuberculous meningitis,30 patients with viral meningitis,20 patients with purulent meningitis and 40 subjects without central nervous system disease were determined using an enzyme-linked immunosorbent assay.The mean levels of soluble delta-like ligand 1 in both cerebrospinal fluid and serum from patients with tuberculous meningitis were significantly higher compared with those from patients with viral meningitis or purulent meningitis or from subjects without central nervous system disease.Meanwhile,the level of soluble delta-like ligand 1 gradually decreased as tuberculous meningitis patients recovered.If patients deteriorated after treatment,the level of soluble delta-like ligand 1 in cerebrospinal fluid gradually increased.There was no correlation between the level of soluble delta-like ligand 1 and the protein level/cell number in cerebrospinal fluid.Our findings indicate that the levels of soluble delta-like ligand 1 in cerebrospinal fluid and serum are reliable markers for the diagnosis of tuberculous meningitis and for monitoring treatment progress.At the same time,this index is not influenced by protein levels or cell numbers in cerebrospinal fluid.     

结核性脑膜炎脑脊液细胞学的特征性表现

目的探讨脑脊液细胞学检查对结核性脑膜炎早期临床诊断的价值。方法采用玻片离心沉淀法制片收集脑脊液细胞,瑞-姬姆萨染色(MGG),光学显微镜分类计数。结果37例临床诊断为结核性脑膜炎患者的脑脊液细胞学呈以下改变:细胞学形态以斑片状聚集分布的激活型单核细胞、单核吞细胞和巨噬细胞,周围伴中性粒细胞和淋巴细胞,中性粒细胞比例为35.57±22.95%,类似于无反应性肉芽肿样改变。结论形似无反应性肉芽肿样的脑脊液细胞学改变以及中性粒细胞特征性的比率,可能是结核性脑膜炎早期诊断的特征性改变。     

儿童结核性脑膜炎脑脊液细胞学变化

研究背景结核性脑膜炎是严重威胁生命健康的中枢神经系统感染性疾病,由于临床表现多样化尤其是婴幼儿症状多不典型,故疾病早期容易误诊,并导致较高的病残率和病死率。目前脑脊液细胞学检查对中枢神经系统感染性疾病的病因学诊断仍具有重要价值,本文通过观察结核性脑膜炎患儿脑脊液细胞学变化,进一步深入了解其表现及演变特点,以提高对其早期识别能力及对诊断治疗效果的判断。方法采集新鲜脑脊液以细胞玻片离心法制片,经迈格姬染色进行形态学分类。结果所有入组病例脑脊液细胞学均有异常。其中结核性脑膜炎组患儿脑脊液白细胞计数平均(310.19±156.26)×106/L,高于化脓性脑膜炎组(P=0.000);淋巴细胞比例为(66.56±14.08)%,低于病毒性脑膜炎组(P=0.037),但高于化脓性脑膜炎组(P=0.000)。与化脓性脑膜炎组比较,结核性脑膜炎组和病毒性脑膜炎组单核细胞(P=0.000,0.020)和浆细胞(P=0.001,0.004)比例升高,而且结核性脑膜炎组浆细胞阳性检出率显著升高(P=0.001)。结论儿童结核性脑膜炎患儿脑脊液细胞学演变特点为:早期以淋巴细胞比例占优势,随病程进展出现程度不同的混合细胞反应,治疗有效者中性粒细胞比例下降较快,逐渐转化为淋巴细胞反应,伴有单核细胞和浆细胞,并持续较长时间;无效者则长期呈混合细胞反应。脑脊液细胞学演变特点对儿童结核性脑膜炎的诊断和鉴别诊断具有重要临床意义。     

儿童结核性脑膜炎脑脊液蛋白质组学初步研究

目的 结核性脑膜炎是致残、致死率较高的儿童时期常见中枢神经系统感染性疾病。本实验拟通过建立正常中国儿童及结核性脑膜炎患儿脑脊液蛋白质双向凝胶电泳图谱,筛选结核性脑膜炎特异性蛋白,为结核性脑膜炎的早期诊断提供线索,同时也为进一步探讨结核性脑膜炎的发病机制提供新思路。方法 收集结核性脑膜炎患儿和同年龄正常儿童脑脊液各4 ml,固相PH梯度二维聚丙烯酰胺凝胶电泳（2-DE）技术分离蛋白质,考马斯亮蓝染色,Imagescanner扫描仪以及LabScan扫描软件对凝胶进行扫描获取图像,利用图像分析软件PDQuest 7.0进行强度校正、点检测、背景消减、均一化和匹配等分析,以正常儿童脑脊液的2-DE凝胶为参考胶,将结核性脑膜炎患儿脑脊液的凝胶与之进行比较分析,寻找两组患儿脑脊液蛋白质谱的差异表达斑点。结果 正常儿童脑脊液分离获得蛋白质斑点546个,结核性脑膜炎患儿脑脊液分离获得蛋白质斑点533个,发现有64个蛋白质点存在质或量的差别,其中有14个蛋白质点仅在正常儿童CSF表达,有27个点仅在结脑患儿CSF中表达,与正常儿童CSF蛋白质点表达量比较发现,结脑患儿CSF有15个蛋白质点表达量有2倍以上上调,8个蛋白质点表达量有2倍以上下调。共选出20个差异蛋白质点进行MALDI-TOF-MS分析,获得了20张肽质量指纹图谱。进入数据库进行搜索后有15个差异蛋白质已经通过MALDI-TOF-MS鉴定。结论 本实验成功建立了正常儿童和结核性脑膜炎患儿脑脊液蛋白质2-DE图谱,通过凝胶图像分析和计算机信息处理,发现了一些与结核性脑膜炎相关的蛋白质差异位点。经质谱分析及生物信息学技术初步鉴定了部分差异蛋白质,发现载脂蛋白A-I、抗肿瘤坏死因子α抗体、HLA-II 类抗原DRB1-4、MRP14蛋白可能与结核性脑膜炎的发生发展密切相关,这些蛋白能否成为结核性脑膜炎诊断的标记物,值得进一步的研究。     

Persistent increase of matrix metalloproteinases in cerebrospinal fluid of tuberculous meningitis

Matrix metalloproteinase (MMP)-2 and MMP-9 were analyzed by gelatin zymography and an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in a cerebrospinal fluid (CSF) from patients with tuberculous meningitis (n=24), acute aseptic meningitis (n=23) and the control (n=10). The MMP-2 and MMP-9 levels were significantly higher in the samples from the tuberculous meningitis patients than those from either the aseptic meningitis patients or the controls. In tuberculous meningitis, the patients with late neurologic complications had higher MMP-2 and MMP-9 levels than those without. The persistent increase in the MMP-2 and MMP-9 levels was associated with the development of complications following tuberculous meningitis. Inhibiting the MMPs may be an effective strategy for preventing or reducing the complications in tuberculous meningitis.     

结核性脑膜炎临床及脑脊液细胞学分析

目的分析结核性脑膜炎患者临床表现、早期脑脊液细胞学改变及演变过程,提高对其早期识别能力及诊疗效果的判断。方法回顾分析60例结核性脑膜炎患者的临床特征、病原学检查及脑脊液生化尤其是细胞学动态变化资料。结果 60例患者中58例(96.67%)以发热、头痛发病,1周内并发意识障碍者9例(15.00%),伴抽搐5例(8.33%)、眼动障碍8例(13.33%)、偏瘫7例(11.67%),44例(73.33%)既往有肺结核病史。实验室检查脑脊液浓缩集菌抗酸染色阳性8例(13.33%)、结核分枝杆菌培养阳性5例(8.62%)、脑脊液结核分枝杆菌DNA阳性5例(8.77%)。脑脊液改变以颅内压、蛋白定量升高、葡萄糖降低为主;细胞学变化呈现以淋巴细胞增多为主的混合细胞学反应,发病早期脑脊液中性粒细胞比例<0.40,经抗结核药物治疗后细胞总数及中性粒细胞比例短期内(最长随访2个月)可无明显改变。经正规抗结核药物治疗,44例患者好转、11例迁延不愈并出院或转院、5例死亡;发病3周内接受抗结核药物治疗的患者预后明显优于发病3周后接受治疗者。结论结核性脑膜炎患者临床表现无特异性,病原学阳性检出率极低,早期诊断困难。肺结核病变对明确诊断具有辅助价值,脑脊液混合细胞学反应可高度提示诊断。经抗结核药物治疗后脑脊液细胞学演变缓慢,可长期呈混合细胞学反应,不能以此为据推翻结核性脑膜炎的诊断。治疗时机很大程度上决定治疗效果。