重组Tβ4②分离纯化条件的优化及实验室研究工艺的确定

优化重组蛋白Tβ4②的纯化条件,最终获得纯度大于98％的具有生物活性的Tβ4②,为后续研究奠定基础.采用单因素试验,研究裂解液体积、裂菌方法、超声功率、硫酸铵饱和度等对重组蛋白纯化的影响,确定最佳的裂解方法和硫酸铵饱和度;通过对Tβ4②蛋白理化性质的预测,确定最佳的层析方案.采用1:7的菌体与裂解液体积比,45％的超声...     

高效液相色谱法在合成多肽分离与纯化中的应用

近年来，多肽药物化学形成并迅速发展成为药物化学的重要分支。而随着分离纯化技术的进展，又大大加快了新活性多肽的发现和合成速度。在多肽合成中．许多杂质显示与产物类似的性质，随着肽链的增长，分离的难度也增大，因此纯化的方法和工艺显得异常重要。本文综述了凝胶过滤色谱、离子交换色谱和反相色谱等高效液相色谱技术在合成多肽分离与纯化中的设计和应用。     

红景天提取物不同纯化工艺的比较

摘 要 目的：比较不同纯化工艺对红景天提取物中红景天苷含量的影响,为其规模化生产提供参考。方法: 分别采用乙醇沉淀法、澄清剂沉淀法、AB 8型大孔树脂分离法纯化红景天水提液,并用HPLC法测定纯化后溶液中红景天苷含量,筛选最佳纯化工艺。结果:AB 8型大孔树脂纯化后得到的溶液中红景天苷含量最高达到0.272 5 mg·ml^-1,乙醇沉淀法次之,其中以70%浓度醇沉效果较好,澄清剂沉淀法红景天苷损失较多。结论:采用AB 8型大孔树脂分离法纯化红景天苷具有得率高,选择性好,可再生等特点,适合红景天苷规模化生产应用。     

HPLC测定合成胸腺肽α1原料药和有关物质含量

目的研究胸腺肽α1原料含量测定和有关物质考察方法。方法采用反相高效液相色谱法测定,VydacC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:0.02mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH7.00)-异丙醇(95∶5);柱温:25℃,检测波长:215nm。结果胸腺肽α1线性范围为0.01～0.83mg·mL-1(r=0.9998)。最低检出量为10ng。有关物质含量为2.5%～2.6%。结论该方法简便、可靠、准确,可用于胸腺肽α1含量测定和有关物质考察。     

反相高效液相色谱法测定胸腺肽中胸腺素α1

采用反相高效液相色谱法测定胸腺肽中胸腺素α１,色谱柱为Ｎｏｖａ－ＰａｋＣ１８柱,以乙腈－三氟乙酸－水（２０：０．０２：８０）为流动相,检测波长２０６ｎｍ。测定组分与其它组分的色谱峰达到基线分离。加样回收率平均值为９８．７％,ＲＳＤ为１．２％,为控制胸腺肽质量提供了新的测定指标和可靠的方法。     

胸腺肽β_4对哮喘小鼠气道炎症的作用

目的观察胸腺肽β_4对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 60只健康C57BL/6小鼠,随机分为正常对照组,哮喘模型组,地塞米松(25 mg·kg~(-1))组,胸腺肽β_4高剂量(5 mg·kg~(-1))组、中剂量(2.5 mg·kg~(-1))组和低剂量(1.25 mg·kg~(-1))组,每组10只。用卵白蛋白致敏法建立小鼠哮喘模型。正常对照组及哮喘模型组腹腔注射生理盐水,其他组注射相应药物,每日1次,共7 d。Medlab生理信号采集系统测定各组小鼠的肺功能,收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞分类计数并检测小鼠血清中白细胞介素5(IL-5)的含量。结果哮喘模型组呼吸频率高于正常对照组,潮气量和肺每分钟通气量低于正常对照组,血清中IL-5浓度和BALF中嗜酸粒细胞百分比高于正常对照组(P<0.05)。胸腺肽β_4高剂量组和地塞米松组潮气量和肺每分钟通气量高于哮喘模型组,血清IL-5浓度低于哮喘模型组(P<0.05)。胸腺肽β_4各剂量组和地塞米松组呼吸频率均低于哮喘模型组,BALF中嗜酸粒细胞百分比也均低于哮喘模型组(P<0.05)。结论胸腺肽β_4能抑制哮喘小鼠嗜酸粒细胞、调节IL-5的水平,改善小鼠的肺通气功能。     

川芎中阿魏酸的提取纯化工艺

目的建立提取川芎中高纯度阿魏酸的方法。方法以阿魏酸为指标,用HPLC法对川芎中阿魏酸提取方法进行系统研究,以阿魏酸的洗脱率和精制度为考察指标,研究大孔树脂吸附法纯化川芎提取物的工艺条件及参数。结果用体积分数为95%的乙醇回流提取的阿魏酸获得较高提取效率,通过大孔树脂纯化后,阿魏酸洗脱率的质量分数达80%以上,体积分数为50%乙醇洗脱液总固物中阿魏酸的质量分数可达25%以上。结论采用此种提取及精制方法,可较好的提取纯化川芎中阿魏酸。     

黄连中生物碱有效部位纯化工艺研究

目的：用大孔吸附树脂对黄连总生物碱有效部位进行纯化工艺研究。方法：以总生物碱吸附量、含量和解吸率为考察指标,采用高效液相色谱法检测黄连中总生物碱的含量。结果：HPD722型大孔吸附树脂对黄连总生物碱有良好吸附分离性能,适宜的工艺条件为：黄连药材上样液质量浓度为100mg·ml^-1（相当于原生药）,上样体积为3BV湿树脂体积,洗脱方法为先以5BV湿树脂体积蒸馏水除去杂质,再以7BV湿树脂体积50％乙醇洗脱,收集50％乙醇洗脱部分。结论：该法简单可行,适合工业生产。     

乌拉立肽的纯化工艺优化

本研究采用制备高效液相色谱法,对含有较多结构相似的多肽混合物的乌拉立肽粗品进行二步纯化。通过单因素试验与响应面法优化一步纯化工艺,结果表明,使用Daiso-SP-ODS(30 nm,10μm)填料,在70 mmol/L磷酸二氢铵水溶液,pH 4.0和柱温30℃条件下,一步纯化后样品纯度98.65%,收率70%。再经过转盐二步纯化后,产品纯度由文献中的98%提高至99.91%,总收率由29%提高至56%。该二步纯化工艺可为多肽分离纯化方法的建立提供参考。     

促黄体生成激素释放激素拮抗类似物的分离纯化研究

目的 采用高效液相色谱(HPLC)法分离纯化促黄体生成激素释放激素(LHRH)拮抗类似物.方法 制备型色谱柱为Dynamax-300A型C18柱(250 mm×4.14 mm,5 μm),分析型色谱柱为Nucleosil型C18柱(250 mm×5 mm,5 μm);流动相A为含0.1%三氟醋酸和3%乙腈的水溶液(pH=2),流动相B为含70%乙腈的水溶液;流速为40 mL/min(用于分离)和1.2 mL/min(用于分析);检测波长为220 nm.结果 LHRH拮抗类似物纯品的产率可达22%～52%,纯度高达97%～99%,分离度大于1.5.结论 HPLC法分离纯化的LHRH拮抗类似物纯品产率大,纯度高,且该法操作简便、快捷.     

盐酸环丙沙星纯化中微量有机杂质的分离与结构研究

用液相色谱法检测盐酸环丙沙星原药，发现一杂质峰。该杂质经分离，确证其结构为７－氯－１－环丙基－６－（１－哌嗪基）－１，４－二氢－４－氧代喹啉－３－羧酸盐酸盐（３）。     

固相合成胸腺五肽的制备高效液相纯化工艺研究

目的研究F-moc法固相合成胸腺五肽的纯化方法。方法采用制备高效液相色谱法对固相合成胸腺五肽进行纯化。结果与结论建立了适用于工业化生产的纯化工艺条件,纯化后精肽收率达到62.42%,纯度达到99.25%,并采用质谱法对纯化所得精肽进行了结构鉴定。     

合成胸腺肽α1的分离与纯化

胸腺肽a1(Ta1)的合成粗肽,经DEAE-SephadexA50离子交换层析和PepMapC18介质纯化后,使合成的Ta1经HPLC鉴定纯度达到98.5%以上.电泳呈一条带,总收率为20%,该工艺操作简便、容易放大,适应产业化生产.     

高效液相色谱法测定育发凝胶中胸腺素β_4(17~23)片段的含量

目的建立育发凝胶中胸腺素β4(17~23)七肽片段的含量测定方法。方法采用反相C-12色谱柱,以三氟乙酸-乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,检测波长为215 nm,用高效液相色谱法测定育发凝胶中胸腺素β4七肽片段的含量。结果胸腺素β4七肽片段含量的线性范围在0.02~0.18 mg/mL,r=0.999 8(n=5),平均回收率为100.06%,RSD为0.59%(n=9)。结论此法操作简便、快捷、准确、专属性高,可用于育发凝胶中胸腺素β4七肽片段的含量测定。     

聚酰胺柱色谱分离纯化野菊花中黄酮苷研究

目的:研究聚酰胺柱色谱分离纯化野菊花中黄酮苷类-蒙花苷的工艺条件.方法:以野菊花中蒙花苷的解析率与纯度为指标,通过考察静态、动态吸附试验,优化聚酰胺分离纯化野菊花中蒙花苷的工艺条件.结果:聚酰胺对黄酮苷有良好的分离效果,其优化工艺为:最佳上柱样品溶液质量浓度2.0 mg· ml-1,吸附流速2 BV· h-1,10%乙醇除杂液和50%乙醇洗脱液分别以1 BV· h-1速度洗脱.蒙花苷动态饱和吸附量7.582 mg·g-1,蒙花苷动态解析率为91.27%,纯度达到12.63%.结论:聚酰胺对野菊花中蒙花苷分离纯化性能较高,纯度提高了5.2倍.可用于野菊花中黄酮苷类-蒙花苷的进一步分离与纯化.     

祖师麻提取纯化工艺考察

目的 优化祖师麻提取和纯化工艺。方法 以瑞香素为指标,采用正交实验设计对提取时间、溶剂用量、提取次数进行优化研究,并用乙酸乙酯、D101大孔吸附树脂对提取液进行纯化。结果 提取次数对瑞香素的提取率有显著影响（P＜0.01）,溶剂用量及时间均无明显影响,以5倍量80%乙醇提取3次,每次2 h为最优提取工艺;提取液经乙酸乙酯萃取4次可基本使瑞香素提取完全,D101大孔吸附树脂纯化效果不理想。结论 采用方差分析对提取工艺进行优化,采用乙酸乙酯进行纯化的工艺稳定、可行。     

HPLC测定合成胸腺肽α1原料药和有关物质含量

目的　研究胸腺肽α1原料含量测定和有关物质考察方法。方法 采用反相高效液相色谱法测定,Vydac C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 mm);流动相：0.02 mol·L^-1磷酸盐缓冲液(pH 7.00)-异丙醇(95∶5);柱温：25 ℃,检测波长：215 nm。结果 胸腺肽α₁线性范围为0.01~0.83 mg·mL^-1 (r=0.999 8)。最低检出量为10 ng。有关物质含量为2.5%~2.6%。结论 该方法简便、可靠、准确,可用于胸腺肽α1含量测定和有关物质考察。     

胸腺肽的提取与性质研究

目的：从冷冻的小牛胸腺中提取出来一种具有高活力的多肽类激素-胸腺肽。方法：通过水提取、部分热变性、醇沉、过Sephadex柱纯化而得。结果：据SDS-PAGE电泳和HPLC分析表明,胸腺肽中主要是分子量10000以下的肽类。结论：通过此法能获得小分子的胸腺肽。     

高效液相排阻色谱法对胸腺肽原料及制剂中多肽组分的分析

用高效液相色谱法分析了胸腺肽原料及制剂中的多态组分，该方法能够高效、快速地分析胸腺肽原料及制剂中的多态组分，采用磷酸盐缓冲剂，选取２１４ｎｍ作为检测波长，试验结果胸腺肽原料及制剂的分子量各厂均在１万以下，ＲＳＤ为０．７２￣１．５０，从而使该药的内在质量得到了控制。