地塞米松对人牙周膜韧带细胞影响的研究

目的探讨地塞米松(DEX)与牙周膜成纤维细胞(PDL)的生物关系.方法通过分离体外培养PDL细胞,以DEX对细胞增殖能力和生物活性的测定.结果随DEX浓度增加PDL细胞增殖能力逐渐增高.骨桥素mRNA的表达5mg/lDEX组为阴性表达,50mg/L组为阳性表达.结论DEX对PDL细胞的生物学作用是显著的成正比关系.     

牛乳铁蛋白素对Jurkat细胞和HFL-I细胞生物学特性的影响

目的形态学观察牛乳铁蛋白素(LfcinB)对Jurkat细胞与人胚肺成纤维(HFL-I)细胞作用的程度,验证LfcinB诱导Jurkat细胞凋亡信号转导通路。方法用荧光显微镜观察Hoechst33258染色LfcinB处理过的Jurkat细胞和正常成纤维细胞,与阴、阳性对照组比较;用DNA断裂琼脂糖凝胶电泳分析LfcinB对Jurkat和HFL-I细胞作用差异;用流式细胞术分析Jurkat细胞早期凋亡和线粒体电势电位状况;Westernblotting研究Jurkat细胞接触LfcinB4、6和8h细胞内caspase-3、caspase-8、caspase-9和胞浆中细胞色素C含量的变化。结果在LfcinB作用Jurkat细胞DNA断裂琼脂糖凝胶电泳图中显示为阶梯状凋亡DNALadder,而LfcinB作用的HFL-I细胞无此现象;在荧光显微镜可以看到LfcinB作用过的Jurkat细胞经Hoechst33258染色细胞核呈致密浓染和HFL-I细胞的细胞核呈均匀染色;流式术分析结果为LfcinB作用Jurkat细胞2、4h的凋亡率分别为11.5%和17.8%,线粒体膜电位下降;caspase-3、caspase-9和细胞色素C的免疫印记分析显示,LfcinB能使Jurkat细胞胞浆中的细胞色素C含量增加,被激活caspase-3、caspase-9在胞浆中逐渐增多,对caspase-8没有影响。结论LfcinB诱导Jurkat细胞凋亡,对正常成纤维细胞没有作用;Jurkat细胞接触LfcinB2h以后细胞内caspase-3、caspase-9和胞浆中细胞色素C的含量累积增加,验证了LfcinB通过依赖caspase家族的细胞内信号通路诱导Jurkat细胞凋亡。     

低剂量脉冲超声波对培养细胞的生物学效应

目的　研究不同时间的低剂量脉冲超声波刺激对细胞增殖和细胞凋亡的影响。方法　采用MTT法测定成纤维细胞增殖情况 ,AnnexinV法测定成纤维细胞和肿瘤MiaPaCa -2细胞的凋亡情况。结果　 (1)在MTT法测定细胞活性中 ,细胞培养液不含FCS时 ,超声波刺激时间为 6min、 11min和 2 0min的剂量组 ,其吸光光度值较对照组都有显著性增高 ,且差异具有统计学意义 (均P <0 . 0 1) ,其细胞增殖峰值在 11min。细胞培养液含 5 %FCS时 ,超声波刺激不同时间的剂量组的吸光光度值较对照组亦有显著性增高 ,并具统计学意义 (P <0 .0 5 ,P <0 . 0 1)。 (2 )低剂量脉冲超声波刺激人皮肤成纤维细胞及肿瘤细胞超过一定时间后 ,少量细胞开始出现凋亡 ,且随着刺激时间的延长 ,凋亡细胞数增多 ,凋亡程度也逐渐加重。其中超声波刺激时间为 60min、 80min和 10 0min剂量组的细胞凋亡数与对照组比较差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论　短时间低剂量脉冲超声波刺激能促进细胞增殖 ,超过一定时间则会抑制细胞生长 ,甚至引起细胞凋亡。     

白细胞介素-1β对人牙周膜细胞生物活性的影响

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)对体外培养人牙周膜(PDL)细胞生物活性的影响。方法体外培养人PDL细胞,分别与0.1、0.5、1、5和10ng/ml的IL-1β作用3d,或在10ng/ml的IL-1β作用1、2、3、4、5d后,用噻唑盐(MTT)法检测PDL细胞增殖的情况;在10ng/ml的IL-1β作用4d后用ELISA法检测纤维连接蛋白(Fn)的含量,用酶动力学方法检测碱性磷酸酶(ALP)活性。结果IL-1β以浓度依赖的方式抑制PDL细胞的增殖,最小抑制浓度为1ng/nl(P<0.05)。在IL-1β作用下,PDL细胞合成Fn的水平明显下降(P<0.001),并强烈抑制PDL细胞的ALP活性(P<0.001)。结论IL-1β可能通过抑制PDL细胞的增殖以及抑制ALP活性和Fn的合成,影响牙周病的发生和修复。     

psiRNA—hHDEK的构建及其对CasKi细胞生物学特性影响的研究

目的观察DEK基因沉默对宫颈癌CaSki细胞增殖、细胞周期及凋亡、衰老的影响,为探索防治人类宫颈癌的新方法提供依据。方法根据siRNA设计原则和Genebank中DEK核苷酸序列,利用软件设计出针对DEK位点的特异性小干扰RNA,克隆至siRNA真核表达载体psiRNA-hHlneo中,应用脂质体介导重组质粒转染宫颈癌CaSki细胞株,用RT-PCR和Western blot检测转染后DEKmRNA和蛋白表达,转染后48hMTr法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期改变、SA-β-半乳糖苷酶细胞化学染色鉴定细胞衰老。结果转染质粒psiRNA—hHDEK组DEKm RNA及蛋白的表达明显减少（0．28±0．02）,DEK基因沉默后CaSki细胞增殖能力下降,细胞周期阻抑,细胞凋亡率增加,衰老细胞增多。结论成功构建表达DEK siRNA的真核表达质粒psiRNA-hHDEK,并能够有效沉默CaSki细胞中DEK基因表达。DEK基因沉默后能够诱导CaSki细胞凋亡和细胞衰老。DEK基因在宫颈癌发生和演变中发挥重要作用,其既是衰老抑制基因,又是凋亡抑制基因。     

Th22细胞及其生物学特性

Th22细胞是近年来新发现的一类CD4+T细胞功能亚群,其可分泌多种细胞因子,但以分泌高水平的IL-22为特点,故由此命名。其参与多种疾病的发病,但在多种疾病中的作用机制还未阐明。进一步探究Th22多种生物学功能,及其与各种疾病的关系,有望为多种疾病的研究开辟新思路。     

大鼠肝细胞简易培养方法及某些生物学特性的研究

本文介绍一种改良的方法培养大鼠肝细胞,简便易行,可在一般条件的实验室开展,细胞活力良好,形态和超微结构正常,正常二倍体核型,可在体外存活达3个月,并对肝细胞生长过程中某些酶、蛋白质、激素、甘胆酸等作了生化、组化、放射免疫测定及6种微量元素的检测,同时进行了 HBV 感染体外培养肝细胞的试验。     

不同灭活方法对Vero细胞狂犬病疫苗效力的影响

传统的人用浓缩狂犬病疫苗是采用福尔马林进行灭活,而国际上新型疫苗早已采用β-丙内酯做为灭活剂.为了摒弃旧的生产工艺,提高我国生物制品产品质量,使之尽早与国际接轨,我们对两种灭活方法进行了试验研究.现报告如下.材料与方法(1)病毒原液制备:将Vero细胞与CTN-1株狂犬病毒混合接种于10立升转瓶,培养一定时间后,收获病毒液.     

不同的培养方法对金黄色葡萄球菌肠毒素结果的影响

为了解不同的培养方法对金黄色葡萄球菌肠毒素结果的影响 ,我们对 2 2株金黄色葡萄球菌经两种方法培养后 ,采用小型VIDAS全自动荧光酶标免疫测试系统进行了肠毒素的检测 ,现将结果报告如下 :1　材料与方法1.1　菌株来源　 2 2株金黄色葡萄球菌为我室在 2 0 0 2年北京市食品污染物监测工作中分离到的。1.2　仪器与试剂　仪器为小型VIDAS全自动荧光酶标免疫测试系统 ;试剂为葡萄球菌肠毒素 (SET)药盒。小型VIDAS全自动荧光酶标免疫测试系统及葡萄球菌肠毒素 (SET)药盒均购于法国生物梅里埃公司 ,两种方法使用同一批号在有效期内的药…     

谷氨酰胺代谢对卵巢肿瘤细胞生物学行为的影响

谷氨酰胺是可以由细胞自身合成的非必需氨基酸,对体外培养的哺乳动物细胞生长和增殖具有非常重要的意义。在肿瘤细胞增殖过程中谷氨酰胺不仅满足了蛋白质合成的需要,也是嘌呤和嘧啶合成过程中氮元素的主要供体。研究显示谷氨酰胺成瘾的肿瘤细胞依赖谷氨酰胺生存,并通过三羧酸循环对谷氨酰胺利用进行重编程。阻断高侵袭性卵巢癌细胞中谷氨酰胺进入三羧酸循环,或抑制低侵袭性卵巢癌细胞谷氨酰胺合成,可能是卵巢癌潜在的治疗方法。谷氨酰胺代谢与卵巢癌不良预后有关;抑制谷氨酰胺代谢通路和以铂类为基础的联合使用,可能是卵巢癌治疗的新策略,特别是耐药性卵巢癌。综述谷氨酰胺代谢在卵巢癌细胞增殖、侵袭和药物抵抗等生物学行为方面的作用,探讨其作为潜在的卵巢癌诊断、治疗和预后的新靶点或生物标记。     

转化生长因子β1小干扰RNA对肝星状细胞生物学特性的影响

目的 观察转化生长因子β1小干扰RNA（TGFβ1 siRNA）对肝星状细胞增殖、活化、胶原合成的影响.方法 利用脂质体将TGFβ1 siRNA表达质粒转入肝星状细胞中,培养72 h后,收集肝星状细胞和上清液,采用Western blotting和RT-PCR法分别检测细胞TGFβ1和a-SMA蛋白表达、Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达;MTT法检测细胞增殖活性和放射免疫法检测培养上清液中IV型胶原和透明质酸含量.结果 与无关对照siRNA组相比,TGFβ1和a-SMA蛋白表达分别下调（79±5）%和（55±4）%（均P〈0.01）;细胞增殖活性降低（25±4）%（P〈0.01）;Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达分别下调（63±6）%和（57±4）%（均P〈0.01）;培养上清中IV型前胶原和透明质酸含量分别降低（53±8）%和（46±8）%（均P〈0.01）.结论 TGFβ1 siRNA能显著下调TGFβ1的表达,抑制肝星状细胞活化、增殖及细胞外基质的合成和分泌.     

谷氨酰胺代谢对卵巢肿瘤细胞生物学行为的影响

谷氨酰胺是可以由细胞自身合成的非必需氨基酸,对体外培养的哺乳动物细胞生长和增殖具有非常重要的意义。在肿瘤细胞增殖过程中谷氨酰胺不仅满足了蛋白质合成的需要,也是嘌呤和嘧啶合成过程中氮元素的主要供体。研究显示谷氨酰胺成瘾的肿瘤细胞依赖谷氨酰胺生存,并通过三羧酸循环对谷氨酰胺利用进行重编程。阻断高侵袭性卵巢癌细胞中谷氨酰胺进入三羧酸循环,或抑制低侵袭性卵巢癌细胞谷氨酰胺合成,可能是卵巢癌潜在的治疗方法。谷氨酰胺代谢与卵巢癌不良预后有关;抑制谷氨酰胺代谢通路和以铂类为基础的联合使用,可能是卵巢癌治疗的新策略,特别是耐药性卵巢癌。综述谷氨酰胺代谢在卵巢癌细胞增殖、侵袭和药物抵抗等生物学行为方面的作用,探讨其作为潜在的卵巢癌诊断、治疗和预后的新靶点或生物标记。     

冷冻复苏软骨细胞的培养及对其生物学特性研究

目的了解冻存复苏过程对保持软骨细胞生物学特性的影响。方法对冻存1周组、1个月组和新鲜制备组的软骨细胞进行倒置相差显微镜动态观察、生长曲线、HE染色以及Ⅱ型胶原免疫组化等观察,在其形态和功能方面进行比较。结果各组间软骨细胞的生长过程、Ⅱ型胶原免疫组化染色结果差异均无显著性,但随冻存时间的延长,其存活率有所下降。结论冻存软骨细胞与新鲜制备的软骨细胞相比保持了一些相似的生物行为,但冻存时间长短对冻存的软骨细胞存活率有影响。     

镁离子对滋养细胞在不同培养环境中生存能力的影响

目的探讨氧含量变化对滋养细胞生存能力的影响及抗氧化剂镁离子(Mg2+)对滋养细胞的保护作用。方法 2005年4月至2006年4月,获取在本院接受治疗的20例妊娠8～10孕周健康妇女的无菌绒毛组织,通过滋养细胞原代培养后,再进行不同方式的培养。按照不同培养方式,将滋养细胞分为对照组、缺氧组、缺氧后复氧组及Mg2+缺氧后复氧组(Mg2+0.6mmol/L)。以四甲基偶氮唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)盐比色法(MTT法)测定以上4组滋养细胞的生存能力水平(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准)。结果①按照不同培养方式培养(24～48)h时,MTT法测定对照组、缺氧组滋养细胞的生存能力水平,两组比较,差异有显著意义(P0.05),72h时,差异无显著意义(P0.05);②缺氧后复氧组和对照组、缺氧组MTT法测定的滋养细胞的生存能力水平比较,差异有显著意义(P0.05);③Mg2+缺氧后复氧组MTT值高于缺氧后复氧组,差异有显著意义(P0.05)。结论缺氧初期可导致滋养细胞生存能力增强,缺氧后复氧环境下滋养细胞生存能力降低,Mg2+对缺氧后复氧细胞有保护作用。     

体外培养的角膜缘上皮细胞生物学特性

目的　观察体外培养的角膜缘上皮细胞生物学特性。方法　体外组织块培养兔角膜缘上皮细胞，倒置显微镜观察活细胞生长情况，透射电镜观察其超微结构，用流式细胞仪检测细胞的增殖能力，使用MTT方法绘制传代细胞的生长曲线。结果 角膜缘组织块培养第6d培养的角膜缘上皮细胞形成单层，培养的细胞具有代谢旺盛和较高的增殖能力，传代的角膜缘上皮细胞在第4d达生长高峰。结论 体外培养的第1、2代角膜缘上皮细胞既保持角膜上皮特性，又县有强的增殖能力。     

疱疹病毒的生物学特性和检测方法

疱疹类病毒是由一组病毒组成。到目前为止，发现能致病的疱疹类病毒有8种：单纯疱疹病毒1型和2型；水痘—带状疱疹病毒；爱泼斯坦—巴尔病毒；人巨细胞病毒及人疱疹病毒6、7、8型。本文对它们的生物学特性、流行病学和检测方法作了综述。     

过表达GCNF对HeLa细胞生物学行为的影响

目的:将成功构建的人pcDNA3.1-GCNF真核表达载体瞬时转染宫颈癌HeLa细胞,观察GCNF基因对HeLa细胞生物学功能的影响。方法:将重组质粒pcDNA3.1-GCNF转染HeLa细胞,通过MTT比色法、基质胶黏附实验和Transwell侵袭试验对转染后HeLa细胞增殖、黏附和侵袭力进行分析。结果:成功获得瞬时转染的pcDNA3.1-GCNF HeLa细胞,转染目的基因组(0.239±0.014)与转染空质粒组(0.198±0.020)及未转染组(0.204±0.012)相比,细胞增殖最快(P<0.05)。转染目的基因后细胞粘附、侵袭力未见明显改变。结论:GCNF基因促进了体外培养的宫颈癌HeLa细胞增殖,但对HeLa细胞粘附、侵袭力没有明显的影响。     

疱疹病毒的生物学特性和检测方法

疱疹类病毒是由一组病毒组成。到目前为止,发现能致病的疱疹类病毒有8种:单纯疱疹病毒1型和2型;水痘-带状疱疹病毒;爱泼斯坦-巴尔病毒;人巨细胞病毒及人疱疹病毒6、7、8型。本文对它们的生物学特性、流行病学和检测方法作了综述。     

流行性感冒患儿外周血MAIT细胞的免疫生物学特性

目的 探讨流行性感冒患儿外周血黏膜相关恒定T(MAIT)细胞的变化及其临床意义。 方法 选取2023年1—5月就诊于某儿童医院感染科门诊和住院治疗的流行性感冒患儿, 分为普通型组和重症型组, 同时选择该院体检的健康儿童作为健康对照组。患儿入院24 h内抽血送检, 采用流式细胞技术检测MAIT细胞(CD3⁺CD161⁺TCRVα7.2⁺细胞)比例, 表达PD-1、CD69、穿孔素、CD107α的MAIT细胞比例, 比较各组差异。 结果 与对照组相比, 普通型、重症型患儿外周血MAIT细胞比例逐步下降, 表达CD69和穿孔素阳性的MAIT细胞比例逐步升高, 三者间比较, 差异均有统计学意义(均P＜0.05);表达CD107α的MAIT细胞比例比较, 差异无统计学意义(P＞0.05); PD-1阳性的MAIT细胞比例升高(P＜0.05), 但普通型、重症型组间比较, 差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论 外周血MAIT细胞减少伴免疫活化在流行性感冒发病中起一定作用。